一種杜氏鹽藻海水高密度培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種杜氏鹽藻海水高密度培養(yǎng)基，其特征在于：在培養(yǎng)基中加入硼砂，所述硼砂的濃度為0.03-0.2g/L。本發(fā)明通過實驗證實：在硼砂添加量為0.06g/L時，類胡蘿卜素的積累量高達304.4mg/L，而硼砂添加量為0g/L時，鹽藻積累的類胡蘿卜素的積累量只有93.3mg/L，由此證明添加硼砂對鹽藻積累類胡蘿卜素有明顯的促進作用。
【專利說明】一種杜氏鹽藻海水高密度培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及藻類植物的培養(yǎng)方法，特別是涉及一種杜氏鹽藻海水高密度培養(yǎng)基及 培養(yǎng)方法。

【背景技術】
[0002] 杜氏鹽藻，又稱鹽藻，是一種無細胞壁、有鞭毛的單細胞藻類，并且是最能耐受高 鹽的真核生物之一。鹽藻在中國有很長的培養(yǎng)歷史，其具有生長速度快、有益代謝產物積累 量大等特點。鹽藻在脅迫環(huán)境中（高溫、高鹽和/或高光）可積累大量的β-胡蘿卜素，最 多高達藻細胞干重的14%，是自然界中β-胡蘿卜素含量最高的生物之一。研究表明，類胡 蘿卜素不僅是維生素 A的前體和食品加工業(yè)的天然色素,還能防治癌癥、腫瘤和心血管疾 病以及老年癡呆和白內障等與年齡有關的退化性疾??；以海水為培養(yǎng)基進行培養(yǎng)時，還可 以大量積累蛋白質，含量高達細胞干重的50-60%，其中，包括人類必需的氨基酸在內的18 種氨基酸，是一種優(yōu)良的蛋白飼料和人類食品加工原料；此外，鹽藻在脅迫環(huán)境中還可積累 大量的甘油，含量高達80%。天然甘油是優(yōu)質的化妝品原料，同時也是化工、輕工和醫(yī)藥工 業(yè)的重要原料。現(xiàn)代藥理學研究表明，鹽藻和類胡蘿卜素還具有潛在的免疫調節(jié)、抗腫瘤、 抗動脈粥樣硬化以及預防脂肪肝等多種藥理活性?；陬惡}卜素所具有的潛在藥用價 值，使其具有了更高的商業(yè)價值。目前，鹽藻的大量和高密度培養(yǎng)已經引起了研究人員的極 大關注。
[0003] 目前，已經知道的是影響鹽藻生長的因素相當復雜，可能包括溶解氧量、碳源、礦 質營養(yǎng)源、光照和溫度等，并且鹽藻在生長過程中不斷分泌胞外多糖，從而使培養(yǎng)液的粘度 較大，影響營養(yǎng)物質的吸收利用，雖然很多研究人員在促進鹽藻生長方面做了很多工作，但 是目前很少有培養(yǎng)基在鹽藻高密生長、類胡蘿卜素積累和雜菌污染等方面同時得到非常顯 著的效果。
[0004] 根據檢索，發(fā)現(xiàn)有以下幾篇專利文獻與本發(fā)明相關，具體公開內容如下：
[0005] 1、專利（200610113359. 5) "鹽藻的培養(yǎng)方法"，該方法提供了一種鹽藻的培養(yǎng)方 法，其特點是將鹽藻在接種了芽孢桿菌的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，為鹽藻的液體培養(yǎng)提供了一 種新的方法和途徑。但是該方法并沒有很好地考慮鹽藻培養(yǎng)基對芽孢桿菌生長的影響和芽 孢桿菌對鹽藻品質的影響。
[0006] 2、專利（200610113360. 8) "鹽藻的一種培養(yǎng)方法"，該方法提供了一種培養(yǎng)鹽藻的 方法，其特點將鹽藻培養(yǎng)過程分成兩類：一、無纖毛蟲污染，二、受到纖毛蟲污染，分別添加 青蒿的水提取物和/或乙醇提取物，或添加青蒿的乙醇提取物，有效解決了開放式養(yǎng)殖鹽 藻中纖毛蟲污染問題。但是該方法增加了操作的復雜性，增加了處理青蒿的成本。
[0007] 3、專利（201210479686. 8) "鹽藻培養(yǎng)基、半連續(xù)培養(yǎng)方式及藻液中原生動物殺滅 方法"，該方法提供了一種鹽藻半連續(xù)培養(yǎng)方式及藻液中原生動物污染的消除方法，其特點 是利用塑料薄膜懸浮培養(yǎng)代替?zhèn)鹘y(tǒng)的開放水泥池培養(yǎng)鹽藻，并在培養(yǎng)基中加入（NH 4)2CO3, 來殺死藻液中的尖鼻蟲、游仆蟲、纖毛蟲、變形蟲等原生動物。但是該方法沒有充分考慮外 加 NH4+對鹽藻生長的影響，很多研究表明NH4+對鹽藻是有一定殺傷作用的，尤其是在受到長 期作用的情況下，鹽藻的生長出現(xiàn)明顯的不良反應。
[0008] 目前文獻報道的培養(yǎng)方法多是采用f/2培養(yǎng)基或Modified Johnson' s培養(yǎng)基，或 是在此基礎上進行略微的優(yōu)化，沒有很好地解決鹽藻生長速度慢、易受雜菌污染和害蟲侵 害、成本1?等缺點。


【發(fā)明內容】

[0009] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術的不足之處，提供一種杜氏鹽藻海水高密度培養(yǎng) 基及培養(yǎng)方法，本方法具有成本低廉，操作簡單的特點，能顯著提高鹽藻生長速率、生物量 和類胡蘿卜素的積累量，還能抑制開放培養(yǎng)中雜菌、纖毛蟲、鹵蟲和變形蟲的繁殖，保證鹽 藻的質量和產量。
[0010] 本發(fā)明實現(xiàn)目的的技術方案如下：
[0011] 一種杜氏鹽藻海水高密度培養(yǎng)基，在培養(yǎng)基中加入硼砂。
[0012] 而且，所述硼砂的濃度為0· 03-0. 2g/L。
[0013] 而且，所述培養(yǎng)基的成分為：
[0014]

【權利要求】
1. 一種杜氏鹽藻海水高密度培養(yǎng)基，其特征在于：在培養(yǎng)基中加入硼砂。
2. 根據權利要求1所述的杜氏鹽藻海水高密度培養(yǎng)基，其特征在于：所述硼砂的濃度 為 0·03-0. 2g/L。
3. 根據權利要求1或2所述的杜氏鹽藻海水高密度培養(yǎng)基，其特征在于：所述培養(yǎng)基 的成分為：
4. 根據權利要求3所述的杜氏鹽藻海水高密度培養(yǎng)基，其特征在于：所述鐵鹽母液的 成分及含量為：Na2EDTA · 2H20 0· 209g/L ;FeCl3 · 6H20 0· 244g/L。
5. -種杜氏鹽藻海水高密度培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于：培養(yǎng)基為：
培養(yǎng)的條件為25-35°C，光照強度為3000?90000Lux，光照時間為16h/天， 培養(yǎng)方法為：種子罐靜置培養(yǎng)，定期震蕩2-3次/天；生產培養(yǎng)為鼓泡與螺旋槳推動培 養(yǎng)，鼓泡通氣量為l_2L/min，螺旋槳速度150-300cm/min。
6. 根據權利要求5所述的杜氏鹽藻海水高密度培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于：培養(yǎng) 采用補充營養(yǎng)的方法，步驟為：根據鹽藻的生長速率間斷補充營養(yǎng)物質，其中NO 3' PO43' NaHCO3 的補加量分別為 0· 2-0. 35mg/106 個、0· 8-1. 2mg/106 個、0· 6-1. Og/L/ 天。
【文檔編號】C12R1/89GK104388316SQ201410679681
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年11月24日 優(yōu)先權日:2014年11月24日
【發(fā)明者】呂和鑫, 崔相敢, 賈士儒, 夏鋒 申請人:天津科技大學