本發(fā)明涉及生物醫(yī)用材料領域,具體涉及一種ipsc體外制備富血小板材料在美容中的應用。
背景技術:
1、血小板在美容中的應用一般以富血小板血漿(platelet-richplasma,prp)形式來實現(xiàn),prp的作用是通過生長因子的相互作用和相互調(diào)節(jié)下完成的,生長因子分泌后立即黏附至靶細胞膜表面,激活細胞膜受體,激發(fā)細胞正常的基因序列表達。當血小板被凝血酶激活后,可釋放出大量的生長因子如tgf-β、pdgf,fgf、hgf和vegf等。pdgf可刺激內(nèi)皮細胞生長,促進毛細血管生成,刺激單核巨噬細胞趨化,增加膠原蛋白的合成能力;tgf-β和pdgf均可激發(fā)使創(chuàng)傷局部各種參與修復的細胞成倍增殖,激發(fā)膠原的合成,激活巨噬細胞和其他細胞因子的作用;vegf是一種強烈的血管生長因子,在傷口愈合和血管化方面發(fā)揮重要作用,是血管生成初期關鍵的促進因子。除生長因子外,prp中還含有纖維蛋白,纖維結合蛋白和玻連蛋白等,它們形成纖維網(wǎng)絡,可以承接組織修復細胞、促進細胞黏附、防止細胞流失的支架作用。
2、然而,現(xiàn)有技術在美容方面,仍較為缺乏可大量制備、穩(wěn)固每批次質(zhì)量、可標準化進行生產(chǎn)的功能型富血小板制劑。
3、prp的美容功效
4、(1)強力除皺。prp富含多種生長因子,在注入真皮淺層后,可刺激大量膠原蛋白、彈性纖維、膠質(zhì)等的產(chǎn)生,促進皮膚多個組織的生長及重新排列,從而全面提升肌膚狀態(tài),延緩衰老,達到強力祛皺的目的。臨床常用于抬頭紋、額紋、川字紋、魚尾紋、眼周細紋、鼻背紋、法令紋、嘴角皺紋、頸紋等皺紋的逐漸緩解,直至祛除。
5、(2)優(yōu)化膚質(zhì)。prp產(chǎn)生的活性因子促進肌膚微循環(huán)的建立,加速新陳代謝,全面改善膚質(zhì)和膚色,使肌膚更加白皙、細膩、有光澤,臨床可用于改善眼袋和黑眼圈問題。
6、(3)深層抗衰。prp可促進皮膚多個組織的生長及重新排列,從而達到全面提升肌膚狀態(tài),持續(xù)延緩衰老。
7、(4)淡化色斑。面部微循環(huán)的建立和肌膚代謝的加速,能夠促使肌膚自行排出大量毒素,有效改善色素沉著、皮膚色暗等多種色斑。
8、(5)淡化色斑。面部微循環(huán)的建立和肌膚代謝的加速,能夠促使肌膚自行排出大量毒素,有效改善色素沉著、日曬斑、黃褐斑等多種色斑。
9、(6)安全抗敏。持續(xù)使用prp進行治療,將改變肌膚原有應激系統(tǒng),讓肌膚更健康,更有活力,有效改善過敏肌膚。臨床可用于面部皮炎等其他過敏性疾病。
10、(7)防脫生發(fā)。prp中富含高濃度的血小板,其促進細胞增殖、分化及血管增生的作用主要通過血小板被激活后α顆粒的脫顆粒作用,這一過程可促進毛發(fā)生長的細胞因子釋放,促進毛囊周圍血管的生成,增加毛囊的血供和營養(yǎng)。臨床多用于雄激素源性脫發(fā)、斑禿等。
技術實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明提供一種由人多能誘導干細胞(ipsc,inducedpluripotent?stem?cell)體外分化并利用反應器產(chǎn)生血小板并體外激活的方法,最終提供一種血小板組合物用于美容應用。
2、為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供如下技術方案:
3、本發(fā)明提供一種用于美容的組合物,包括以下成分:
4、(1)由多能誘導干細胞分化制備的血小板濃縮液;
5、(2)添加物:0.9%nacl的生理鹽水和5%人重組血清白蛋白;其中,前述組合物可以直接注射(真皮層、皮下淺層)、涂抹,以及注射和涂抹聯(lián)合使用。
6、優(yōu)選地,上述添加物還包含100u/ml凝血酶凍干粉、1%葡萄糖酸鈣和0.05%i型膠原酶。
7、本發(fā)明還提供一種用于美容的組合物,包括以下成分:
8、(1)由多能誘導干細胞分化制備的血小板濃縮液;
9、(2)添加物:10μm?adp、10-100μg/ml纖維蛋白原、2mmcacl2和0.05~0.5%i型膠原酶;其中,上述組合物可以直接注射(真皮層、皮下淺層)、涂抹,以及注射和涂抹聯(lián)合使用。
10、優(yōu)選地,上述血小板濃縮液濃度為5~20×1011/l。
11、優(yōu)選地,上述組合物每1~2個月施用1次,每3~4次為一個療程。
12、更優(yōu)選地,上述組合物在制備用于美容的藥物中的應用。
13、與現(xiàn)有技術相比,本發(fā)明的有益效果在于:
14、(1)將ipsc分化為造血前體干細胞的過程分為三個階段,每個階段有自己對應的培養(yǎng)基配方,有助于提高cd34+細胞純度。
15、(2)將造血前體干細胞分化為巨核細胞的過程中,在培養(yǎng)基中加入50ng/ml?il-21、5nm?tazemetostat、200nm
16、eltrombopag和200nm?ibet151,可以促進巨核細胞的分化和增殖。
17、(3)在巨核細胞凍存復蘇后,且在使用反應器之前,添加
18、0.5ng/ml膠原蛋白、5nm?fingolimod?hcl,有助于促進血小板成熟。
19、(4)產(chǎn)生血小板的反應器具有高密度網(wǎng)格結構,網(wǎng)格結構的作用為切割液流,可產(chǎn)生劇烈的巨核細胞碎片化和助于釋放血小板。
20、(5)相較血液分離的prp,ipsc血小板制劑在成分上較為穩(wěn)定,緩釋生長因子有助于組織修復。
21、(6)制劑方法(懸液配方、激活型懸液制備配方、凝膠制備配方及制備方法)在ipsc-血小板的應用場景下,是從未使用過的。
1.一種用于美容的組合物,其特征在于,包括以下成分:
2.根據(jù)權利要求1的用于美容的組合物,其特征在于,所述添加物還包含100u/ml凝血酶凍干粉、1%葡萄糖酸鈣和0.05%i型膠原酶。
3.一種用于美容的組合物,其特征在于,包括以下成分:
4.根據(jù)權利要求1~3的用于美容的組合物,其特征在于,所述血小板濃縮液濃度為5~20×1011/l。
5.根據(jù)權利要求1~3用于美容的組合物,其特征在于,所述組合物每1~2個月施用1次,每3~4次為一個療程。
6.權利要求1~3所述的組合物在制備用于美容的藥物中的應用。