本發(fā)明涉及天然藥物化學(xué)及醫(yī)藥，具體涉及一種三萜鞣花單寧類化合物、組合物及制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、鏈球菌是一種革蘭氏陽性細(xì)菌，呈成對或鏈狀排列，主要通過發(fā)酵代謝獲取能量。它們可以根據(jù)溶血能力和血清學(xué)抗原分類。其中，乙型溶血鏈球菌是醫(yī)學(xué)上重要的致病菌之一，尤其在兒科。它們引起的疾病范圍廣泛，輕微者如咽炎、傷口感染，嚴(yán)重者包括猩紅熱、腦膜炎等，還可能導(dǎo)致風(fēng)濕熱、心臟病等后發(fā)病表現(xiàn)。乙型溶血鏈球菌引發(fā)的疾病廣泛且對患者健康造成嚴(yán)重威脅，所以開發(fā)針對該菌株的抑制劑具有重要意義。金黃色葡萄球菌也是一種革蘭氏陽性細(xì)菌，可引發(fā)肺炎和皮膚感染。它是常見的院內(nèi)感染和社區(qū)獲得性病原體，可在人和動物的皮膚和黏膜上寄生，常無癥狀攜帶。它是皮膚感染的主要原因之一，在傷口和潰瘍處尤為常見，且可進(jìn)入血液引發(fā)全身感染，甚至影響骨骼和心臟瓣膜，引發(fā)的肺炎更是全球主要的死亡原因之一。近年來，根據(jù)世界衛(wèi)生組織的報告，金黃色葡萄球菌對當(dāng)前可用抗生素產(chǎn)生了耐藥性，這一現(xiàn)象不僅增加了治療難度，也加重了醫(yī)療系統(tǒng)的負(fù)擔(dān)。因此，針對金黃色葡萄球菌感染，迫切需要尋求新的治療藥物和方法，以解決當(dāng)前醫(yī)學(xué)領(lǐng)域面臨的重要挑戰(zhàn)。

2、枹絲錐(castanopsis?calathiformis)又稱枹絲栗、黃栗，為殼斗科(fagaceae)錐屬植物，在我國主要分布于云南南部、西藏東南部，其生于海拔700-2200米山地常綠闊葉或針葉闊葉混交林中，陽坡較常見，是森林砍伐后的萌生林先鋒樹種之一。目前，國內(nèi)外研究學(xué)者對枹絲錐的化學(xué)成分及生物活性尚未進(jìn)行過相關(guān)研究，因此開展枹絲錐化學(xué)成分及生物活性研究，以期為枹絲錐的合理開發(fā)與可持續(xù)利用奠定基礎(chǔ)。

3、在植物中，廣泛存在的三萜類化合物與鞣花單寧化合物展現(xiàn)了廣泛的生物活性，包括抗炎、降糖、抗腫瘤等。其中，三萜鞣花單寧類化合物由五環(huán)三萜與多元酚結(jié)構(gòu)的鞣花單寧酸通過酯化反應(yīng)生成，其獨特結(jié)構(gòu)可能導(dǎo)致其具有獨特的生物活性。目前的研究表明，三萜鞣花單寧類成分僅從少數(shù)錐屬植物中分離得到，并被視為這些植物中的重要化學(xué)成分。為了進(jìn)一步豐富三萜鞣花單寧類化合物的多樣性并探索其更廣泛的生物活性，需要進(jìn)行更進(jìn)一步的研究。鑒于此，本發(fā)明提供一種三萜鞣花單寧類化合物、組合物及制備方法與應(yīng)用。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是如何提供具有抑菌、殺菌的天然的三萜鞣花單寧類化合物。

2、本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下：

3、第一方面，一種三萜鞣花單寧類化合物，所述三萜鞣花單寧類化合物包括如式(ⅰ)所示化合物或式(ⅰ)的藥用鹽或藥用酯化衍生物：

4、

5、本發(fā)明所提供的三萜鞣花單寧類化合物首次從枹絲錐(castanopsiscalathiformis)植物葉子中分離得到。該新的三萜鞣花單寧類化合物命名為calathiformisin?c，其分子式為c51h58o18，為淺黃色無定形粉末。

6、其中，藥用鹽為由所述三萜鞣花單寧類化合物與有機(jī)酸和\或無機(jī)酸合成的鹽。藥用酯化衍生物為由所述三萜鞣花單寧類化合物通過酯化反應(yīng)制成。

7、本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明的三萜鞣花單寧類化合物(命名為calathiformisinc)性質(zhì)穩(wěn)定、易存放；經(jīng)體外藥理實驗證實，其對乙型溶血鏈球菌(β-hemolyticstreptococci、編號：cmcc(b)32210)的mic和mbc均為128μg/ml，對金黃色葡萄球菌(staphylococcus?aureus、編號：atcc6538p)的mic為256μg/ml和mbc為512μg/ml，表明該三萜鞣花單寧類化合物具有良好的抗乙型溶血鏈球菌和金黃色葡萄球菌活性，用于制備乙型溶血鏈球菌和\或金黃色葡萄球菌的藥物的研發(fā)具有重要意義。

8、第二方面，一種藥物組合物，其包括所述的三萜鞣花單寧類化合物。

9、進(jìn)一步，還包括藥學(xué)上可接受的藥物賦形劑或/和載體。進(jìn)一步，所述的藥物組合物的劑型為片劑、顆粒、膠囊、納米制劑、控釋制劑、緩釋制劑中的任一種。

10、第三方面，一種三萜鞣花單寧類化合物的制備方法，包括如下步驟：

11、(1)取枹絲錐，粉碎后加入含有醇類化合物的水溶液進(jìn)行浸提，將浸提得到的提取液進(jìn)行減壓濃縮，得到粗提物；

12、(2)將所述粗提物進(jìn)行脫脂，脫脂后進(jìn)行減壓濃縮，得到脫脂后的水提取液；

13、(3)將所述脫脂后的水提取液依次用sephadex?lh-20凝膠柱ⅰ和diaion?hp20ss柱層析分離，采用甲醇-水混合溶液進(jìn)行梯度洗脫，利用tlc監(jiān)測，合并含有三萜鞣花單寧類化合物的組分，減壓濃縮得到洗脫液；

14、(4)所述洗脫液依次用mci?gel?chp?20p柱和sephadex?lh-20凝膠柱ⅱ層析分離，采用乙醇-水混合溶液等度洗脫，得到三萜鞣花單寧類化合物。

15、本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明利用枹絲錐葉為原料提取分離得到的天然抗菌活性成分，其工藝簡單、易操作、對環(huán)境友好，利用葉子為原料進(jìn)行提取，資源豐富，具有很好的潛在經(jīng)濟(jì)效益。

16、進(jìn)一步，步驟(1)中，浸提包括如下具體步驟：采用體積含量為70％～90％的所述醇類化合物的水溶液浸提粉碎后的所述枹絲錐2～3次，每次浸提的時間為6～8天，所述醇類化合物的水溶液與粉碎后的所述枹絲錐的用量比為(40～80)l：(5.5～10)kg；將浸提得到的提取液進(jìn)行合并，后減壓濃縮，得到粗提物；

17、所述醇類化合物的水溶液中的醇類包括乙醇、甲醇、丙醇中的至少一種。

18、所述浸提采用室溫下浸提或回流提取或超聲提取等方法。

19、其中枹絲錐采用枹絲錐的葉。枹絲錐其他的部位只要含有三萜鞣花單寧類化合物也可行。

20、進(jìn)一步，步驟(2)中，脫脂包括如下具體步驟：將所述粗提物采用石油醚進(jìn)行脫脂；所述粗提物與所述石油醚的體積比為0.5～1，脫脂的次數(shù)為2～4次，脫脂后在30℃～80℃下進(jìn)行減壓濃縮，得到脫脂后的水提取液。

21、進(jìn)一步，步驟(3)中，所述sephadex?lh-20凝膠柱ⅰ層析分離采用的甲醇-水混合溶液中甲醇的體積含量依次為0％、20％、40％、60％、80％、100％；

22、步驟(3)中，所述diaion?hp20ss柱層析分離采用的甲醇-水混合溶液中甲醇的體積含量依次為0％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％；

23、步驟(4)中，所述mci?gel?chp?20p柱和所述sephadex?lh-20凝膠柱ⅱ層析分離采用的乙醇-水混合溶液中乙醇的體積含量為65％。

24、第四方面，一種三萜鞣花單寧類化合物的應(yīng)用，將所述的三萜鞣花單寧類化合物用于制備抑菌藥物中。

25、進(jìn)一步，將所述的三萜鞣花單寧類化合物用于制備抑乙型溶血鏈球菌和/或金黃色葡萄球菌的藥物中。

技術(shù)特征：

1.一種三萜鞣花單寧類化合物，其特征在于，所述三萜鞣花單寧類化合物包括如式(ⅰ)所示化合物或式(ⅰ)的藥用鹽或藥用酯化衍生物：

2.一種藥物組合物，其特征在于，其包括如權(quán)利要求1所述的三萜鞣花單寧類化合物。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述一種藥物組合物，其特征在于，還包括藥學(xué)上可接受的藥物賦形劑或/和載體。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述一種藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物的劑型為片劑、顆粒、膠囊、納米制劑、控釋制劑、緩釋制劑中的任一種。

5.基于權(quán)利要求1所述一種三萜鞣花單寧類化合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述一種三萜鞣花單寧類化合物的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，浸提包括如下具體步驟：采用體積含量為70％～90％的所述醇類化合物的水溶液浸提粉碎后的所述枹絲錐2～3次，每次浸提的時間為6～8天，所述醇類化合物的水溶液與粉碎后的所述枹絲錐的用量比為(40～80)l：(5.5～10)kg；將浸提得到的提取液進(jìn)行合并后減壓濃縮，得到粗提物；

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述一種三萜鞣花單寧類化合物的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，脫脂包括如下具體步驟：將所述粗提物采用石油醚進(jìn)行脫脂；所述粗提物與所述石油醚的體積比為0.5～1，脫脂的次數(shù)為2～4次，脫脂后在30℃～80℃下進(jìn)行減壓濃縮，得到脫脂后的水提取液。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述一種三萜鞣花單寧類化合物的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，所述sephadex?lh-20凝膠柱ⅰ層析分離采用的甲醇-水混合溶液中甲醇的體積含量依次為0％、20％、40％、60％、80％、100％；

9.一種三萜鞣花單寧類化合物的應(yīng)用，其特征在于，將權(quán)利要求1所述的三萜鞣花單寧類化合物用于制備抑菌藥物中。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述一種三萜鞣花單寧類化合物的應(yīng)用，其特征在于，將所述的三萜鞣花單寧類化合物用于制備抑乙型溶血鏈球菌和/或金黃色葡萄球菌的藥物中。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種三萜鞣花單寧類化合物、組合物及制備方法與應(yīng)用，所述三萜鞣花單寧類化合物包括如式(Ⅰ)所示化合物或式(Ⅰ)的藥用鹽或藥用酯化衍生物：本發(fā)明的三萜鞣花單寧類化合物性質(zhì)穩(wěn)定、易存放；該三萜鞣花單寧類化合物具有良好的抗乙型溶血鏈球菌和金黃色葡萄球菌活性，用于制備乙型溶血鏈球菌和\或金黃色葡萄球菌的藥物的研發(fā)，具有重要意義。

技術(shù)研發(fā)人員：李桂勤,黃永林,包穎蓉,王亞鳳,何瑞杰,龐鬧,陽丙媛,劉章彬
受保護(hù)的技術(shù)使用者：廣西壯族自治區(qū)中國科學(xué)院廣西植物研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/21