用于治療或預(yù)防高尿酸血癥或痛風(fēng)的化合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了用于治療或預(yù)防高尿酸血癥或痛風(fēng)的化合物，其為式(I)或式(II)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽可應(yīng)用于促尿酸排泄以治療或預(yù)防高尿酸血癥或痛風(fēng)。
【專利說(shuō)明】
用于治療或預(yù)防高尿酸血癥或痛風(fēng)的化合物
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體設(shè)及用于治療或預(yù)防高尿酸血癥或痛風(fēng)的化合物 及其組合物和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 痛風(fēng)是由于機(jī)體長(zhǎng)期嚷嶺代謝素亂和(或)尿酸排泄減少，造成尿酸鹽結(jié)晶在機(jī)體 組織內(nèi)沉積而引起的代謝性疾病，其最重要的生化基礎(chǔ)是高尿酸血癥。痛風(fēng)患者易患急性 尿酸結(jié)晶關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)石性慢性關(guān)節(jié)炎、尿酸鹽腎病和尿酸性尿路結(jié)石等高尿酸血癥相關(guān) 疾病。目前我國(guó)痛風(fēng)發(fā)病率逐年增加，到2008年我國(guó)痛風(fēng)患病率在一般人群中達(dá)1.1 % (Robert G,Beth Noe.Intra-Osseous Gout in a Diabetic Patient[J].The Journal of Foot and Ankle Surgery，2009,48(l):70-73)。發(fā)達(dá)國(guó)家發(fā)病率較高，其中美國(guó)大約有3-5 百萬(wàn)人罹患痛風(fēng)，且男性的發(fā)作率通常是女性的6-9倍。（Terkeltaub，R.A.Gout[J].The New England Journal of Medicine.2003,349:1647-1655)
[0003] 引發(fā)高尿酸血癥的一個(gè)十分重要的原因是尿酸排泄減少。尿酸的排泄過(guò)程較為復(fù) 雜，須經(jīng)過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)、腎近曲小管重吸收、分泌及分泌后再吸收四個(gè)過(guò)程。腎近曲小管重 吸收增加或分泌障礙將引起尿酸滯留，導(dǎo)致血尿酸升高。因此，腎近曲小管對(duì)機(jī)體內(nèi)血尿酸 濃度的平衡調(diào)節(jié)起著非常重要的作用。腎近曲小管細(xì)胞的刷狀緣側(cè)膜和基底外側(cè)膜上存在 著多種尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白，人尿酸陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Uhuman urate anion transporter 1， hURATl)在腎近曲小管細(xì)胞刷狀緣上表達(dá)，為有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族(OATS)成員。hURATl 負(fù)責(zé)尿酸的重吸收，通過(guò)有機(jī)陰離子交換，將尿酸鹽特異性的由腎管腔轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞，從而起 到了調(diào)控血尿酸濃度的作用。因此，WJRATl是痛風(fēng)與高尿酸血癥藥物治療的重要祀點(diǎn)。
[0004] WJRATl基因首先是由化omoto從人腎臟克隆出來(lái)的，由化C22A12基因編碼，位于染 色體llql3,其CDNA全長(zhǎng)2642bp，編碼區(qū)長(zhǎng)1659bp，編碼含有555個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。 化C22A12基因存在多種突變，易引起尿酸代謝異常，一項(xiàng)Meta分析表明化C22A12基因?qū)ρ?尿酸水平有0.13%的變量貢獻(xiàn)。（So A,Thorens B.Uric acid hansport and disease
[J] .J.Clin. Invest. ,2010,120(6): 1791-1799)另?yè)?jù)研究表明，SLC22A12基因單核巧酸的 多態(tài)性rs893006位點(diǎn)GG、GT基因型與男性患者高血尿酸水平密切相關(guān)，提示該序列的多態(tài) 性可能是高尿酸血癥的基因風(fēng)險(xiǎn)因素。（王琪.男性高尿酸血癥與URATl基因多態(tài)性的關(guān)系 [J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012,27(1) :30-33)
[0005] Makoto化soyamada等發(fā)現(xiàn)了hURATl的鼠源同系物小鼠腎臟特異性轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 (Mouse Renal-specific transpo;rte;r，RST)，該蛋白固定在小鼠腎小管上皮細(xì)胞刷狀緣 偵U，其cDNA和氨基酸水平上均與WJRATl有較高的同源性化osoyamada MJchida K，Enomoto A，et al.Function and Localizationof Urate Transporter Iin Mouse Kidney[J] .Am. Soc.化P虹01.2004,15(2) :261-8. KRST的發(fā)現(xiàn)，為WURATl為祀點(diǎn)的高尿酸血癥治療 藥物的研究，提供了取材方便的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛠?lái)源。
[0006] 在痛風(fēng)與高尿酸血癥的治療中，促尿酸排泄藥占有十分重要的地位。此類藥物作 用機(jī)理為抑制尿酸在近曲小管的重吸收，增加尿酸的排泄而降低血尿酸濃度，促進(jìn)尿酸鹽 溶解。主要包括苯漠馬?。˙enzbromarone)、丙橫舒（Probenecid)、橫[I比酬 (Sulfinpyrazone)等。
[0007]苯漠馬隆為一種苯并巧喃衍生物，化學(xué)名稱為3,5-二漠-4-徑苯基-2-乙基-3-苯 并巧喃基-甲酬，可用于治療痛風(fēng)。
[0008；
[0009] 舉俱與隆是t^UKATl刃視點(diǎn)治療高尿酸血癥的典型促尿酸排泄藥物，它不僅能抑 審IJURAT1對(duì)于尿酸鹽的轉(zhuǎn)運(yùn)，還能夠降低URATl的基因表達(dá)。據(jù)國(guó)家藥品不良反應(yīng)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù) 庫(kù)分析顯示，苯漠馬隆的嚴(yán)重不良反應(yīng)中肝損害問(wèn)題比較突出，肝功能異常及谷草轉(zhuǎn)氨酶、 谷丙轉(zhuǎn)氨酶及堿性憐酸酶升高。研究發(fā)現(xiàn)，苯漠馬隆經(jīng)肝臟CYP2C9氧化代謝成6-徑基苯漠 馬隆，再進(jìn)一步被P450S酶系代謝成兩種鄰苯二釀?lì)惍a(chǎn)物。此類物質(zhì)化學(xué)性質(zhì)活潑，可通過(guò) 與蛋白質(zhì)的半脫氨酸殘基上的琉基共輛加成，使蛋白質(zhì)變性失活，運(yùn)是導(dǎo)致其肝毒性的直 接原因 （Matthew G.McDonald,Allan E.Rettie. Sequential Metabolism and Bioactivation of the Hepatotoxin Benzbromarone:Formation of Glutathione Adducts from a Catechol Intermediate[J].Chemical Research in Toxicology.2007, 20(12): 1833-1842)。苯漠馬隆目前已發(fā)現(xiàn)的多種不良反應(yīng)還包括:腹瀉、胃部不適、惡屯、等 消化系統(tǒng)癥狀;斑疹、潮紅、痊癢等皮膚過(guò)敏癥。偶然會(huì)呈現(xiàn)腸胃不適感，極少呈現(xiàn)等麻疹 (風(fēng)疹）。在個(gè)別環(huán)境下還會(huì)呈現(xiàn)眼結(jié)膜發(fā)炎(結(jié)膜炎），短時(shí)候的陽(yáng)瘦，反常性的部分皮膚濕 疹(皮疹），頭疼和尿意頻增感。據(jù)報(bào)道，服用苯漠馬隆也有痊癢感，顏面發(fā)紅，紅斑，光過(guò)敏 癥，浮腫，屯、窩部不適感等不良反應(yīng)的產(chǎn)生。苯漠馬隆因其毒副作用，尤其是肝臟毒性已被 歐洲一些國(guó)家限制使用，但國(guó)內(nèi)由于其突出的療效，仍作為主要的促尿酸排泄藥物用于臨 床。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 本發(fā)明的目的是提供新的能抑制URATl轉(zhuǎn)運(yùn)尿酸的(4-徑基-3-臘基苯基)-3-苯并 巧喃基-甲酬或(4-徑基-3-S氣甲基苯基)-3-苯并巧喃基-甲酬類衍生物，它們是WURATl 為祀點(diǎn)的用于治療或預(yù)防高尿酸血癥或痛風(fēng)的新型高效促尿酸排泄藥物。通過(guò)對(duì)(4-徑基- 3-臘基苯基)-3-苯并巧喃基-甲酬或(4-徑基-3-S氣甲基苯基)-3-苯并巧喃基-甲酬類化 合物進(jìn)行合理的結(jié)構(gòu)修飾，改變其理化性質(zhì)，影響該類化合物在哺乳動(dòng)物(包括人)體內(nèi)的 代謝途徑，在保持或增強(qiáng)其促尿酸排泄活性的同時(shí)，降低它們的毒副作用，提高其在高尿酸 血癥或痛風(fēng)等相關(guān)疾病的臨床治療或預(yù)防方面的應(yīng)用安全性。
[0011] 本發(fā)明的目的可W通過(guò)W下措施達(dá)到：
[0012] 本發(fā)明提供了式(I)或式(II)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，
[0013]
[0014] 其中，
[0015] Ri選自氨、気、面素、徑基、臘基、取代或非取代的Ci-4烷基、取代或非取代的Ci-4燒 氧基中的一種，其取代基選自氣、徑基、Cl-4烷氧基或氨基中的一種或幾種；
[00W R2選自氨、気、面素、Cl-3烷基、面代Cl-3烷基、臘基中的一種；
[0017] R3 選自 Ci-4 烷基；
[001引 n或m分別獨(dú)立地為1或2;
[0019] R4選自氨、気、面素、徑基、臘基、取代或非取代的Ci-4烷基、取代或非取代的Ci-4燒 氧基中的一種，其取代基選自氣、徑基、Cl-4烷氧基或氨基中的一種或幾種；
[0020 ] R5選自氨、気、面素、Ci-3烷基、面代Ci-3烷基、臘基中的一種；
[002U 護(hù)選自Ci-4烷基；
[0022] X或y分別獨(dú)立地為1或2。
[0023] 在一種優(yōu)選方案中，r1選自氨、気、面素、徑基、臘基、Ci-3烷基、取代的Ci-3烷基、Ci-3 烷氧基、氣代Cl-3烷氧基中的一種，其取代基選自氣、徑基、Cl-3烷氧基或氨基中的一種或幾 種。
[0024] 在另一種優(yōu)選方案中，Ri選自氨、気、氣、氯、徑基、臘基、甲基、乙基、氣代甲基、氣 代乙基、甲氧基甲基、乙氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基乙基、徑甲基、徑乙基、氨基甲基、氨 基乙基、甲氧基、乙氧基、氣代甲氧基、氣代乙氧基中的一種。
[0025] 在一種方案中，當(dāng)Ri為一個(gè)或兩個(gè)基團(tuán)時(shí)，Ri優(yōu)選在苯并巧喃的5位或/和6位。
[0026] 在一種優(yōu)選方案中，R2選自氨、気、氣、氯、漠、艦、甲基、乙基、氣代甲基、氣代乙基、 臘基中的一種。
[0027] 在一種優(yōu)選方案中，R3選自Ci-3烷基，更優(yōu)選為乙基。
[00%]在一種優(yōu)選方案中，n或m分別獨(dú)立地為1或2,更優(yōu)選的，n或m分別為1。
[0029] 在一種優(yōu)選方案中，R4選自氨、気、面素、徑基、臘基、Ci-3烷基、取代的Ci-3烷基、Ci-3 烷氧基、氣代Cl-3烷氧基中的一種，其取代基選自氣、徑基、Cl-3烷氧基或氨基中的一種或幾 種。
[0030] 在另一種優(yōu)選方案中，R4選自氨、気、氣、氯、徑基、臘基、甲基、乙基、氣代甲基、氣 代乙基、甲氧基甲基、乙氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基乙基、徑甲基、徑乙基、氨基甲基、氨 基乙基、甲氧基、乙氧基、氣代甲氧基、氣代乙氧基中的一種。
[0031] 在一種優(yōu)選方案中，R5選自氨、気、氣、氯、漠、艦、甲基、乙基、氣代甲基、氣代乙基 中的一種。
[0032] 在一種優(yōu)選方案中，R6選自Ci-3烷基，更優(yōu)選為乙基。
[0033] 在一種優(yōu)選方案中，X或y分別獨(dú)立地為1或2,更優(yōu)選的，X或y分別為1。
[0034] -些具體的式(I)或式(II)化合物，例如：
[00；
[0036]本發(fā)明的式(I)化合物可通過(guò)如下方法制得：
[0037]
[0038] 取代水楊醒跟氯丙酬在一定條件下反應(yīng)生成取代的苯并巧喃，然后跟取代的苯甲 酷氯反應(yīng)，所得化合物再依次脫去甲基，艦化和臘化反應(yīng)得到目標(biāo)化合物。
[0039] 苯并巧喃2位其它烷基取代基類似化合物可通過(guò)其它方法制備。具體的制備方法 參見(jiàn)實(shí)施例。
[0040] 本發(fā)明的式(II)化合物可通過(guò)如下方法制得：
[0041]
[0042] 通過(guò)化合物E的合成方法可制備化合物G，按上述方法得到目標(biāo)化合物。
[0043] 除非另外說(shuō)明，在說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求中使用的W下術(shù)語(yǔ)具有下面討論的含義：
[0044] "烷基"用于表示飽和控基，Ci-4烷基是指含有1~4個(gè)碳原子的飽和控基，其包括甲 基、乙基、正丙基、異丙基、正下基、異下基和新下基。本發(fā)明中的烷基優(yōu)選為Cl-4烷基，進(jìn)一 步優(yōu)選Ci-3烷基。取代烷基是指具有一個(gè)或大于一個(gè)取代基的烷基，當(dāng)取代基的數(shù)目為2個(gè) W上(包含2個(gè))時(shí)，各取代基可W相同，也可W不同。取代的Ci-4烷基是指具有一個(gè)或多個(gè)(2 個(gè)或2個(gè)W上)取代基的含有1~4個(gè)碳原子的飽和控基;例如"氣代甲基"是指具有一個(gè)、兩 個(gè)或=個(gè)氣取代基的甲基，"氣代乙基"是指具有1~5個(gè)氣取代基的乙基。
[0045] "面代Ci-4烷基"是指具有一個(gè)或多個(gè)（即2個(gè)或2個(gè)W上）面素取代基的含有1~4個(gè) 碳原子的飽和控基，其中各面素取代基可W相同，也可W不同。"氣代Cl-3烷氧基"是指具有 一個(gè)或多個(gè)(即2個(gè)或2個(gè)W上)氣取代基的含有1~3個(gè)碳原子的飽和控基。本發(fā)明中的面代 Cl-4烷基包括但不限于面代甲基、面代乙基、面代正丙基、面代異丙基、面代正下基、面代異 下基、面代新下基等，更具體的基團(tuán)包括但不限于=氣甲基、二氣甲基、一氣甲基、=氯甲 基、二氯甲基、一氯甲基、四氣乙基、=氣乙基、二氣乙基、一氣乙基、=氯乙基、=氯乙基、二 氯乙基、一氯乙基等。
[0046] "面素'包括氣(F)、氯(Cl)、漠他)和艦(I)。
[0047] "烷氧基"是指烷基"基團(tuán)，其碳原子數(shù)一般為1~10個(gè)。Ci-4烷氧基是指該燒氧 基中含有1~4個(gè)碳原子。本發(fā)明中的烷氧基優(yōu)選為Cl-4烷氧基，進(jìn)一步優(yōu)選Cl-3烷氧基。取代 烷氧基是指具有一個(gè)或大于一個(gè)取代基的烷氧基，當(dāng)取代基的數(shù)目為2個(gè)W上（包含2個(gè)） 時(shí)，各取代基可W相同，也可W不同。取代的Cl-4烷氧基是指具有一個(gè)或多個(gè)（即2個(gè)或2個(gè)W 上）取代基的含有1~4個(gè)碳原子的烷氧基。本發(fā)明中的烷氧基包括但不限于甲氧基、乙氧 基、正丙氧基、異丙氧基、正下氧基、異下氧基和新下氧基等。
[004引"徑堂'是指"-OH"基團(tuán)。
[0049]"臘基"是指"-CN"基團(tuán)。
[0050]"氨堂'是指"-N出"基團(tuán)。
[0051] 。気"尉旨。-護(hù)基團(tuán)。
[0052] "藥學(xué)上可接受的鹽"表示保留母體化合物的生物有效性和性質(zhì)的那些鹽。運(yùn)類鹽 包括：
[0053] (1)與酸成鹽，通過(guò)母體化合物的游離堿與無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸的反應(yīng)而得，無(wú)機(jī)酸例 如(但不限于)鹽酸、氨漠酸、硝酸、憐酸、偏憐酸、硫酸、亞硫酸和高氯酸等，有機(jī)酸例如(但 不限于）乙酸、丙酸、丙締酸、草酸、（D)或化)蘋(píng)果酸、富馬酸、馬來(lái)酸、徑基苯甲酸、丫-徑基 下酸、甲氧基苯甲酸、鄰苯二甲酸、甲橫酸、乙橫酸、糞-1-橫酸、糞-2-橫酸、對(duì)甲苯橫酸、水 楊酸、酒石酸、巧樣酸、乳酸、扁桃酸、班巧酸或丙二酸等，優(yōu)選鹽酸或化)蘋(píng)果酸
[0054] (2)存在于母體化合物中的酸性質(zhì)子被金屬離子代替或者與有機(jī)堿配位化合所生 成的鹽，金屬離子例如堿金屬離子、堿±金屬離子或侶離子，有機(jī)堿例如乙醇胺、二乙醇胺、 S乙醇胺、氨下S醇、N-甲基葡糖胺等。
[0055] 本發(fā)明的式(I)或式(II)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽可應(yīng)用于制備促尿酸排泄 藥物方面，特別是應(yīng)用于治療或預(yù)防高尿酸血癥或痛風(fēng)藥物的制備。
[0056] 本發(fā)明還包括一種藥物組合物，其W本發(fā)明所指出的化合物為活性成分或主要活 性成分，輔W藥學(xué)上可接受的輔料。該藥物組合物中的其他活性成分可W為具有促尿酸排 泄的藥物化合物，也可W為具有其他治療效果的藥物化合物。本藥物組合物可W依據(jù)現(xiàn)有 方法制成多種制劑，例如口服制劑、液體制劑等，更具體的制劑包括但不限于散劑、顆粒劑、 片劑、膠囊劑、滴丸劑、膜劑等。
[0057] 本發(fā)明通過(guò)對(duì)(4-徑基-3-臘基苯基)-3-苯并巧喃基-甲酬或(4-徑基-3-=氣甲基 苯基)-3-苯并巧喃基-甲酬類衍生物進(jìn)行合理的結(jié)構(gòu)修飾，改變其理化性質(zhì)，影響該類化合 物在哺乳動(dòng)物(包括人)體內(nèi)的代謝途徑，在保持或增強(qiáng)其促尿酸排泄活性的同時(shí)，降低它 們的毒副作用，提高其在高尿酸血癥或痛風(fēng)等相關(guān)疾病的臨床治療或預(yù)防方面的應(yīng)用安全 性。
【具體實(shí)施方式】
[0058] 給出下列制備實(shí)施例和生物學(xué)實(shí)施例，使本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠更清楚地理解和實(shí) 施本發(fā)明。它們不應(yīng)被解釋為限制本發(fā)明的范圍，僅僅是其例證和代表。
[0059] 制備實(shí)施例
[0060] 實(shí)施例1:5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-3-艦苯甲臘(5)和5-(2-乙基苯并 巧喃-3-幾基)-2-徑基間苯二甲臘(6)的合成
[00
[0062] 步驟A:在室溫下向氨氧化鐘（6.13g，109mmo 1)的乙醇（SOmL)溶液中加入水楊醒 (12.2g，IOOmmol )，升溫到回流并繼續(xù)攬拌2小時(shí)。然后在該溫度下滴加氯丙酬（10 . Og， IOSmmol)，滴加完畢，保溫繼續(xù)攬拌2小時(shí)。冷卻到室溫，過(guò)濾除去不溶物，收集濾液。減壓蒸 除溶劑，然后向剩余物中加入乙二醇(40mL)和85%水合阱(6.7g，178mmo 1)，回流攬拌10分 鐘。冷卻到80~100°C，分批加入氨氧化鐘（13.Og，232mmol)，有大量氣體產(chǎn)生，然后緩慢升 溫到回流，直到?jīng)]有氣體放出為止。冷卻到室溫，加入水(400mL)，用甲基叔下基酸（120血X 3)萃取，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純化(200~300目硅膠，石油酸洗 脫），得2-乙基苯并巧喃（1) (13. Og)。收率為78.7 %。
[0063] 步驟B:在冰水浴下將4-甲氧基苯甲酯氯(2.3g，13.5mmol)加入到化合物1 (2. Og， 13.6mmo 1)的氯仿(50血)溶液中，然后向該混合物中滴加四氯化錫(3.56g，13.6mmo 1)，滴加 完畢，自然升溫到室溫?cái)埌柽^(guò)夜。將反應(yīng)物倒入適量冰水中，用二氯甲燒(40mLX2)萃取，無(wú) 水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純化(200~300目硅膠，乙酸乙醋:石油酸=1: 30~1:15洗脫），得（2-乙基苯并巧喃-3-基）（4-甲氧基苯基）甲酬（2)(3. Og)。收率為 78.7%。
[0064] 步驟C:在冰水浴下將乙硫醇（SmL)滴加到氨化鋼（640mg，16 . Ommol)的無(wú)水THF (15mL)懸濁液中，攬拌5分鐘，有大量固體析出。減壓蒸除溶劑，然后向剩余物中加入DMF (20mL)，得反應(yīng)液A。再將化合物2(3.Og, 10.7mmol)的DMF(20mL)溶液滴加到反應(yīng)液A中，然 后在110°C攬拌3小時(shí)。冷卻到室溫，加入水（120mL)，用乙酸乙醋(60mLX3)萃取，合并的有 機(jī)相用飽和食鹽水（30mL X 2)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純化 (200~300目硅膠，乙酸乙醋巧油酸=1:50~1:6洗脫），得(2-乙基苯并巧喃-3-基）（4-? 基苯基）甲酬(3)(2.2g)。收率為77.2%。
[0065] 步驟D :將化合物3 (1. Og，3.76mmol)溶解于甲醇（30mL)，加入硝酸銀（1.4g， 8.28mmol)和艦(2. Ig，8.27mmol)，所得混合物在室溫下攬拌3小時(shí)。減壓蒸除溶劑，向產(chǎn)物 中加入乙酸乙醋(60mL )，過(guò)濾除去不溶物，用水（1 OmL X 2)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除 溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純化(200~300目硅膠，乙酸乙醋:石油酸=1:20~1:10洗脫），得(2-乙 基苯并巧喃-3-基）（4-徑基-3，5-二艦苯基）甲酬(4) (900mg)。收率為46.2 %。
[0066] Ih NMR(DMS0-d6,400MHz)S8.12(s，2H)，7.66(d，J = 8.4Hz，lH)，7.45-7.43(m，lH)， 7.38-7.：M(m，lH)，7.31-7.27(m，lH)，2.79(q，J = 7.Wz，2H)，1.26(t，J = 7.6Hz，3H)〇MS 化I，m/z):517.0[M-扣-。
[0067] 步驟E:將含有化合物4(700mg，1.35mmol)、氯化亞銅（360mg，4.02mmol)和DMF (5mL)的混合物在100°C攬拌5小時(shí)。冷卻到室溫，加入水（30mL)，用乙酸乙醋（20mLX 3)萃 取，合并的有機(jī)相用飽和食鹽水（IOmL)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層 析純化(200~300目硅膠，乙酸乙醋：石油酸= 1:1~30:1洗脫），得5-(2-乙基苯并巧喃-3- 幾基)-2-徑基-3-艦苯甲臘(5)和5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基間苯二甲臘(6)。
[006引 化合物5:4 NMR(DMS0-d6,400MHz)S8.21(s，lH)，7.74(d，J = 2.4Hz，lH)，7.62(d，J =8. OHz，1H) ,7.43-7.41 (m，lH) ,7.35-7.25(m，2H)，2.81 (q，J = 7.細(xì)Z，2H) ,1.25( t，J = 7.細(xì)z，3H)eMS化I，m/z):416.1[M-H]-。
[0069] 化合物6:1h Mffi(DMS0-d6,400MHz)S7.86(s，2H)，7.62(d，J = 8.0Hz，lH)，7.42- 7.39(m，lH)，7.35-7.25(m，2H)，2.83(q，J = 7.細(xì)z，2H)，1.25(t，J = 7.6Hz，3H)。MS(EI，m/ z):315.2[M-H]-。
[0070] 實(shí)施例2:5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基苯甲臘(7)
[0071：
[0072] 將化合物5 (SOmg，0.192mmo 1)溶解在乙酸乙醋（15mL)中，加入5 %鈕碳（20mg)，所 得混合物在常溫常壓下氨化攬拌反應(yīng)過(guò)夜。過(guò)濾除去鈕碳，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純 化（200~300目硅膠，乙酸乙醋：石油酸=1:10~1: 5洗脫），得5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾 基)-2-徑基苯甲臘(7)。
[007；3] Ih NMR(DMS0-d6,400MHz)Sl2.16(s，lH)，8.06(d，J = 2.0Hz，lH)，7.94(dd，J = 2.0， 8.4Hz，lH)，7.66(d，J = 8.0Hz，1H) ,7.40-7. ：34(m，2H) ,7.30-7.26 (m，lH)，7.15(d，J = 8.4Hz，lH)，2.81(q，J = 7.細(xì)z，2H)，1.26(t，J = 7.6Hz，3H)。MS(EI，m/z):290.2[M-H]-。
[0074] 實(shí)施例3:3-漠-5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基苯甲臘(8)的合成
[0075：
[0076] 將化合物7 (170mg，0.584mmoI)溶解于DMF(5mL)，加入NBS(135mg，0.758mmoI)，所 得混合物在室溫下攬拌過(guò)夜。加入水(25mL)，用乙酸乙醋（20mLX3)萃取，合并的有機(jī)相用 飽和食鹽水（IOmL)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純化(200~300目 硅膠，乙酸乙醋:石油酸=1:1洗脫），得3-漠-5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基苯甲臘 (8)。
[0077] Ih NMR(DMS0-d6,300MHz)S8.13(d，J=l.細(xì)z，lH)，7.86(d，J=l.細(xì)z，lH)，7.52(d， J = 7.細(xì)z，lH)，7.41(dJ = 7.細(xì)z，lH)，7.：M-7.22(m，2H)，2.88(qJ = 7.5Hz，2H)，1.33(t，J =7.甜Z，3H) eMS化I，m/z): 368.0[M-H]-。
[007引實(shí)施例4: (2-乙基苯并巧喃-3-基）[4-徑基-3-艦-5-(S氣甲基)苯基]甲酬（11)和 5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-3-(=氣甲基)苯甲臘(12)的合成
[0079
[0080]步驟A:將化合物4(848111旨，1.64111111〇1)溶解于醋酸?。?1111^)，加入014?(2〇111邑， 0.164mmol)和化晚(3mL)，所得混合物在室溫下攬拌2小時(shí)。向反應(yīng)液中加入水(50mL)，用二 氯甲燒(25血X 3)萃取，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純化(200~300目娃 膠，乙酸乙醋：石油酸= 1:5洗脫），得乙酸[4-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2,6-二艦]苯醋 (9)(930mg)。收率為 100%。
[0081 ] 步驟B:將化合物9(780mg，1.39mmol)溶解于DMF( 15mL)，加入氣橫酷基二氣乙酸甲 醋（1.95血)和艦化亞銅(663mg，3.48mmol)，所得混合物在90°C及氮?dú)庀聰埌?小時(shí)。冷卻到 室溫，加入水(60mL)，用乙酸乙醋(30mLX3)萃取，合并的有機(jī)相用飽和食鹽水(20mL)洗涂， 無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純化(200~300目硅膠，石油酸洗脫），得乙 酸[4-( 2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-艦-6-( S氣甲基）]苯醋（10) (150mg)。收率為23.5 %。
[0082] 步驟C:將化合物10 (140mg，0.279mmo 1)溶解于甲醇（5mL)，加入碳酸鐘（115mg， 0.833mmo 1)，所得混合物在室溫下攬拌2小時(shí)。加入水(25血），用石油酸（10血)洗涂，收集水 相。水相用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5~6，用乙酸乙醋（15mL X 3)萃取，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除 溶劑，產(chǎn)物用石油酸重結(jié)晶，得(2-乙基苯并巧喃-3-基）[4-?基-3-艦-5-(S氣甲基)苯基] 甲酬（11)(12〇111邑）。收率為93.5%。
[0083] Ih NMR(DMS0-d6，300MHz)S8.36(S，1H)，7.93(S，1H)，7.68-7.65(m，1H)，7.44-7.42 (m，lH)，7.38-7.33(m，lH)，7.31-7.26(m，lH)，2.80(q，J = 7.5Hz，2H)，1.27(t，J = 7.5Hz， 3H)dMS化I，m/z):459.0[M-H]-。
[0084] 步驟D:將含有化合物11 (I IOmg，0.239mmoI)、氯化亞銅（32mg，0.357mmoI)和DMF (5血)的混合物在100°C攬拌過(guò)夜。冷卻到室溫，加入水(25血），用乙酸乙醋（20血X 3)萃取， 合并的有機(jī)相用飽和食鹽水(IOmL)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純 化(200~300目硅膠，乙酸乙醋巧油酸= 1:5~1:1洗脫），得5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)- 2- 徑基-3-(=氣甲基)苯甲臘（12)。
[0085] Ih 匪R(DMS0-d6,500MHz)S7.95(s，lH)，7.82-7.81(m，lH)，7.62-7.61(m，lH)， 7.42-7.40(m，lH)，7.33-7.30(m，lH)，7.27-7.24(m，lH)，2.81(q，J=7.5Hz，2H)，1.26(t，J =7.甜z，3H)dMS 化I，m/z):360.2[M+扣+。
[0086] 實(shí)施例5:5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-3-甲基苯甲臘(16)的合成 [0087；
[0088] 步驟A和B的實(shí)驗(yàn)操作分別參見(jiàn)實(shí)施例1步驟B和C，其中實(shí)施例1步驟B中的氯仿用 二氯甲燒替代。
[0089] 化合物 13 Ih NMR(DMS0-d6，，300MHz)S7.68-7.62(m，3H)，7.41(d，J = 7.5Hz，lH)， 7.36-7.31(m，lH)，7.28-7.23(m，lH)，7.08(d，J = 9.0Hz，lH)，3.91(s，3H)，2.81(q，J = 7.5Hz，2H)，2.21(s，3H)，1.25(t J = 7.5Hz，3H)〇MS(EI，m/z):317.1[M+Na] +。
[0090] 步驟C:將化合物14(650mg，2.44mmol)溶解于DMF(15mL)，加入NIS(678mg， 3.0ImmoI)，所得混合物在室溫下攬拌30分鐘。加入水(75mL)，用乙酸乙醋（30mL X 3)萃取， 合并的有機(jī)相用飽和食鹽水(20mL)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純 化(200~300目硅膠，乙酸乙醋巧油酸=1: 30洗脫），得(2-乙基苯并巧喃-3-基）（4-徑基- 3- 艦-5-甲基苯基）甲酬（15) (420mg)。收率為42.4%。
[0091] Ih 醒R(DMS0-d6,，500MHz)Sl0.03(s，lH)，7.96(s，lH)，7.63(d，J = 8.0Hz，lH)， 7.59(s，lH)，7.42(d，J = 8.0Hz，lH)，7.36-7.33(m，lH)，7.28-7.25(m，lH)，2.78(q，J = 7.5Hz，2H)，2.28(s，3H)，1.25(t，J = 7.甜z，3H)。MS化I，m/z):405.0[M-H]-。
[0092] 步驟D:將含有化合物15 (360mg，0.886mmoI)、氯化亞銅（119mg，1.329mmoI)和DMF (1 OmL)的混合物在11 (TC攬拌3小時(shí)。冷卻到室溫，加入水(50mL)，用乙酸乙醋（20mL X 3)萃 取，合并的有機(jī)相用飽和食鹽水（IOmL)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層 析純化(200~300目硅膠，二氯甲燒:石油酸= 1:1洗脫），得5-(2-乙基苯并巧喃-3-幾基)- 2-徑基-3-甲基苯甲臘(16)。
[0093] Ih 醒R(DMS0-d6,，300MHz)Sll.24(s，lH)，7.88-7.86(m，2H)，7.65(d，J = 7.8Hz， lH)，7.42-7.25(m，3H)，2.80(q，J = 7.5Hz，2H)，2.29(s，3H)，1.25(t，J = 7.甜z，3H)。MS巧I， m/z):304.1[M-扣-。
[0094] 實(shí)施例6:5-(2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-3-甲基苯甲臘(21)的合成
[0095]
[0096] 步驟A :在室溫下將氨氧化鐘（1 . 22g，21 . 74mmol)加入5-氣水楊醒（2.5g， 17.84mmo 1)的乙醇（50mL)溶液，然后升溫到回流，再在回流下滴加氯丙酬（1 . 82g， 19.67mmol)，所得混合物在回流下攬拌過(guò)夜。冷卻到室溫，過(guò)濾除去不溶物，收集濾液。減壓 蒸除溶劑，然后向剩余物中加入乙二醇(20mL)和85%水合阱（1.22g，32.36mmol)，回流攬拌 20分鐘。冷卻到室溫，加入氨氧化鐘(2.23肖，39.74皿〇1)，有大量氣體產(chǎn)生，然后緩慢升溫到 回流，直到?jīng)]有氣體放出為止。冷卻到室溫，加入水(200mL)，用二氯甲燒（1 OOmL X 3)萃取， 無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純化(200~300目硅膠，二氯甲燒:石油酸= 1:5洗脫），得2-乙基-5-氣苯并巧喃（17) (1.84g)。收率為62.8 %。
[0097] 步驟B:將3-甲基-4-甲氧基-苯甲酸（500mg，3 . Ommo 1)懸浮在氯化亞諷（1 OmL)中， 加入DMF(2滴），所得混合物在回流下攬拌2小時(shí)。減壓蒸除溶劑，加入化合物17(500mg， 3.OSmmol)和無(wú)水二氯甲燒（15mL)，再在水浴下滴加四氯化錫（1.59g，6. IOmmol)，加完后， 室溫下攬拌過(guò)夜。將反應(yīng)物倒入適量冰水中，用乙酸乙醋(25mLX3)萃取，無(wú)水硫酸鋼干燥。 減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純化（200~300目硅膠，乙酸乙醋：石油酸=1:40~1: 20洗 脫），得（2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）（4-甲氧基-3-甲基苯基）甲酬（18)(909mg)。收率為 97.0%。
[009引步驟C:在水浴下將4MS漠化棚(0.83mL)滴加到化合物18(690mg，2.21mmol)的無(wú) 水二氯甲燒（15mL)溶液中，所得混合物在室溫下攬拌2小時(shí)。將反應(yīng)物倒入適量冰水中，用 乙酸乙醋(40mL X 2)萃取，合并的有機(jī)相用飽和食鹽水(20mL)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓 蒸除溶劑，得(2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）（4-徑基-3-甲基苯基）甲酬（19)(730mg)粗品。 該化合物不經(jīng)純化直接用于下一步反應(yīng)。
[0099] 步驟D:將化合物19粗品（730mg)溶解于DMF(IOmL)，然后分批加入NIS(645mg， 2.87mmoI)，加完后，所得混合物在室溫下攬拌30分鐘。加入水(50mL)，用乙酸乙醋（25mL X 3)萃取，合并的有機(jī)相依次用硫代硫酸鋼水溶液（IOmL)和飽和食鹽水（IOmL)洗涂，無(wú)水硫 酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純化(200~300目硅膠，乙酸乙醋:石油酸=1:20洗 脫），得(2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）（4-徑基-3-艦-5-甲基苯基）甲酬(20)(640mg)。步驟C 和D兩步反應(yīng)總收率為68.3%。
[0100] Ih NMR(DMS0-d6，，500MHz)Sl0.06(s，lH)，7.96(s，lH)，7.70-7.67(m，lH)，7.59(s， lH)，7.22-7.16(m，2H)，2.76(q，J = 7.5Hz，2H)，2.29(s，3H)，1.24(t，J = 7.甜z，3H)。MS巧I， m/z):423.0[M-扣-。
[OW]步驟 E:將含有化合物 20 (590mg，1.39mmol)、氯化亞銅（187mg，2.09mmol)和 DMF (1 OmL)的混合物在115 °C攬拌2.5小時(shí)。冷卻到室溫，加入水(50mL)，用乙酸乙醋（20mL X 3) 萃取，合并的有機(jī)相用飽和食鹽水（IOmL)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱 層析純化(200~300目硅膠，乙酸乙醋巧油酸=1:10~3:5洗脫），得5-(2-乙基-5-氣苯并 巧喃-3-幾基)-2-徑基-3-甲基苯甲臘(21)。
[0102] Ih NMR(DMS0-d6，，500MHz)Sll.l9(s，lH)，7.89(s，lH)，7.85(s，lH)，7.71-7.68(s， lH)，7.22-7.16(m，2H)，2.76(q，J = 7.5Hz，2H)，2.29(s，3H)，1.23(t，J = 7.甜z，3H)。MS巧I， m/z):322.1[M-扣-。
[0103] 實(shí)施例7:5-(2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-3-艦苯甲臘(25)的合成
[0105] 步驟A:在室溫下將4-甲氧基苯甲酯氯(680mg，3.99mmol)加入到化合物17(600mg， 3.65mmo 1)的二氯甲燒（15mL)溶液中，然后加入四氯化錫（1.90g，7.29mmo 1)，所得混合物在 室溫下攬拌過(guò)夜。將反應(yīng)物倒入適量冰水中，用二氯甲燒(30mLX2)萃取，無(wú)水硫酸鋼干燥。 減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純化（200~300目硅膠，乙酸乙醋：石油酸=1: 30~1: 20洗 脫），得(2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基K4-甲氧基苯基）甲酬(22)(1.05g)。收率為96.4%。
[0106] 步驟B:在水浴下將IMS漠化棚(6.7mL)滴加到化合物22( 1.0g，3.35mmol)的無(wú)水 二氯甲燒（15mL)溶液中，所得混合物在室溫下攬拌2小時(shí)。將反應(yīng)物倒入適量冰水中，用乙 酸乙醋（30mLX3)萃取，合并的有機(jī)相用飽和食鹽水(20mL)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸 除溶劑，得灰白色固體(2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）(4-徑基苯基）甲酬(23)粗品（1.03g)。 該化合物不經(jīng)純化直接用于下一步反應(yīng)
[0107] 步驟C:將化合物23粗品（1.03g)溶解于甲醇（30mL)，加入無(wú)水乙酸鋼（660mg， 8. OSmmol)和艦(2.04g，8.20mmol)，所得混合物在回流下攬拌1.5小時(shí)。然后加入含有氨氧 化鋼（28Omg，7mmo 1)的水（40mL)溶液，繼續(xù)回流0.5小時(shí)。冷卻到室溫，加入飽和食鹽水 (40mL)，用乙酸乙醋(30mLX3)萃取，合并的有機(jī)相依次用稀硫代硫酸鋼溶液（15mL)和飽和 食鹽水（IOmL)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)石油酸/乙酸乙醋重結(jié)晶，得 (2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）（4-徑基-3，5-二艦苯基）甲酬(24) (1.30g)。步驟B和C兩步反 應(yīng)總收率為72.4%。
[010 引步驟 D:將含有化合物 24(1.26g，2.35mmol)、氯化亞銅（115mg，2.34mmol)和DMF (20mL)的混合物在100°C攬拌4小時(shí)。冷卻到室溫，加入水(50mL)，用乙酸乙醋（30mLX 3)萃 取，合并的有機(jī)相用飽和食鹽水(20mL)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層 析純化（200~300目硅膠，乙酸乙醋：石油酸=2 : 5~3 :1洗脫），得5-(2-乙基-5-氣苯并巧 喃-3-幾基)-2-徑基-3-艦苯甲臘(25)。
[0109] Ih NMR(DMS0-d6,300MHz)S8.15(s，lH)，7.95(s，lH)，7.64(s，lH)，7.16-7.13(m， 2H)，2.79(q，J = 7.細(xì)z，2H)，1.25(t，J = 7.細(xì)z，3H)。MS化I，m/z):434.0[M-H]-。
[0110] 實(shí)施例8:5-(5-氯2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-3-甲基苯甲臘(26)的合成
[0111
[0112」化合物26的制備方法參見(jiàn)實(shí)施例6。
[0113] Ih NMR(DMS0-d6,300MHz)S7.89-7.85(m，2H)，7.71(d，J = 8.7Hz，lH)，7.45(d，J = 2.1Hz，lH)，7.39(dd，J = 2.1，8.7Hz，lH)，2.75(q J = 7.5Hz，2H)，2.28(s，3H)，1.23(t J = 7.5Hz，3H)〇MS(EI，m/z):338.1[M-H]-。
[0114] 實(shí)施例9:5-( 5-氯-2-乙基苯并巧喃-3-幾基)-2-哲基-3-艦苯甲臘(27)的合成
[0115
[0116] 化合物27的制備方法參見(jiàn)實(shí)施例7。
[0117] Ih NMR(DMS0-d6,300MHz)S8.15(d，J = 2.4Hz，lH)，7.67-7.64(m，2H)，7.41(d，J = 2.1Hz，lH)，7.34(dd J = 2.1，8.7Hz，lH)，2.78(q J = 7.甜z，2H)，1.25(tJ = 7.甜z，3H)。MS (El，m/z):450.0[M-H]-。
[011引實(shí)施例10:(2-乙基-苯并巧喃-3-基）-[4-徑基-3,5-二（^氣甲基）-苯基]-甲酬 (29)的合成
[0119]
[0120]化合物29的制備方法參見(jiàn)實(shí)施例4中的步驟B和C。
[01 別]Ih 匪R(DMS0-d6,300MHz)S8.15(s，2H)，7.68-7.65(m，lH)，7.44-7.42(m，lH)， 7.38-7.33(m，lH)，7.31-7.26(m，lH)，2.81(q，J = 7.5Hz，2H)，1.26(t，J = 7.5Hz，3H)〇MS 化I，m/z):401.1[M-扣-。
[0122] 實(shí)施例11:5-( 2-乙基-5-氣-苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-3-S氣甲基-苯甲臘(30) 的合成
[0123]
[0124] I 實(shí)施例4〇MS(EI，m/z): 376.0[M-H]-。
[0125] 基-5-氣-苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-苯甲臘(31)的合成
[0126]
[0127] 化合物31的制備方法參見(jiàn)實(shí)施例巧日實(shí)施例3eMS化I，m/z):386.1[M-W-。
[012引實(shí)施例13: (2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）[4-徑基-3,5-二(S氣甲基）苯基]甲酬 (35)和(2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）[4-徑基-3-艦-5-(S氣甲基)苯基]甲酬(36)的合成
[0
[0130] 化合物35和36的制備方法參見(jiàn)實(shí)施例4中的步驟A、B和C。
[0131] 化合物35:1h NMR(DMS0-d6,300MHz)S8.12(s，2H)，7.73-7.68(m，lH) ,7.23-7.18 (m，2H)，2.77(q，J = 7.甜z，2H)，1.25(t，J = 7.甜z，3H)。MS化I，m/z):419.1[M-H]-。
[0132] 化合物 36: Ih 醒 R(DMS0-d6,300MHz )58.37( S，1H)，7.93(s，lH) ,7.73-7.69(m， lH)，7.24-7.19(m，2H)，2.77(q J = 7.5Hz，2H)，I. 25(t，J = 7.5Hz，3H)〇MS(EI，m/z) :477.0 [M-扣 _。
[0133] 實(shí)施例14:5-(2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基苯甲臘(41)的合成 LOUS」步驟A:將3-鵬-4-輝基苯甲酸甲鵬（4
. Ig，14.75mmol)溶解于DMF(25mL)，加入碳酸 鐘(2.65g，19.20mmo 1)和艦甲燒(3.14g，22.12mmo 1)，所得混合物在60°C攬拌2小時(shí)。冷卻到 室溫，加入水(SOmL)，用乙酸乙醋(40mL X 3)萃取，合并的有機(jī)相依次用水(30mL X 2)和飽和 食鹽水(20mL)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用石油酸重結(jié)晶，得3-艦-4-甲氧 基苯甲酸甲醋(37)(3.81g)。收率為88.4%。
[0136] 步驟B:將化合物37(3.Og, 10.27mmol)溶解在THF(IOmL)和乙醇（IOmL)中，加入2M 氨氧化鋼溶液(20mL)，所得混合物在55°C攬拌1小時(shí)。減壓蒸除約一半溶劑，加入水(60mL)， 用稀鹽酸調(diào)pH值至1~2，乙酸乙醋（40mL X 3)萃取，合并的有機(jī)相用飽和食鹽水（20mL)洗 涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，得3-艦-4-甲氧基苯甲酸(38)(2.76g)。收率為96.7%。
[0137] 步驟C:將化合物38(2.74g，9.85mmol)懸浮在氯化亞諷（IOmL)中，加入DMF(3滴）， 所得混合物在65 °C攬拌5小時(shí)。減壓蒸除溶劑，加入化合物17 (1.62g，9.86mmol)和無(wú)水二氯 甲燒(54mL)，再在水浴下加入四氯化錫(5.14g，19.73mmo 1)。加完后，所得混合物在室溫下 攬拌過(guò)夜。將反應(yīng)物倒入適量冰水中，用乙酸乙醋(50mLX3)萃取，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸 除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純化（200~300目硅膠，乙酸乙醋：石油酸=1:100~1:20洗脫），得 (2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）（3-艦-4-甲氧基苯基）甲酬(39) (2.96g)。收率為70.8 %。
[0138] 步驟D:將含有化合物39 (2.48g，5.85mmo 1)、氯化亞銅（785mg，8.77mmo 1)和DMF (30mL)的混合物在130°C攬拌過(guò)夜。冷卻到室溫，加入乙酸乙醋(40mL)，經(jīng)過(guò)娃藻±過(guò)濾除 去不溶物。加入水(90mL)，分層，收集有機(jī)層。水層用乙酸乙醋(40mLX2)萃取，合并的有機(jī) 相依次用水(30mLX2)和飽和食鹽水(20mL)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng) 柱層析純化(200~300目硅膠，乙酸乙醋巧油酸=1: 20~1:10洗脫），得5-(2-乙基-5-氣苯 并巧喃-3-幾基）-2-甲氧基苯甲臘(40)(1.62g)。收率為85.6% c/H NMR(CDCl3,300MHz)S 8.06-8.03(m，2H)，7.45-7.41(m，lH)，7.09-7.05(m，lH)，7.02-6.98(m，2H)，4.05(s，3H)， 2.90(q J = 7.甜z，2H)，l.：M(tJ = 7.5Hz，3H)〇MS(EI，m/z):322.1[M-H] -。
[0139] 步驟E:在水浴下將IMS漠化棚(7.5mL)加入到化合物40(830mg，2.57mmol)的無(wú)水 二氯甲燒（15mL)溶液中，所得混合物在室溫下攬拌72小時(shí)。將反應(yīng)物倒入適量冰水中，用乙 酸乙醋(40mLX2)萃取，合并的有機(jī)相用飽和食鹽水(20mL)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸 除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純化（200~300目硅膠，乙酸乙醋：石油酸=1:10~1:5洗脫），得5- (2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-幾基)-2-?基苯甲臘(41)。Ih NMR(DMS0-d6，500MHz) S12.17 (S， lH)，8.08(s，lH)，7.93(d，J = 8.甜z，lH)，7.72-7.70(m，lH)，7.23-7.15(m，3H)，2.77(q，J = 7.5Hz，2H)，1.24( t，J = 7.5Hz，3H) 〇MS(EI，m/z): 308.1 [M-H]-。
[0140] 實(shí)施例15: [3-気-4-?基-5-(S氣甲基)苯基](2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）甲酬 (43) 的合成
L0142J 步徽A:將化合物％(340mg，0.654mmo 1)浴解在乙酸乙鵬（20血）中，加入童水（1血） 和5%鈕碳(20mg)，所得混合物在気氣下攬拌過(guò)夜。過(guò)濾除去鈕碳，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱 層析純化(200~300目硅膠，乙酸乙醋巧油酸=1:30洗脫），得[2-気-4-(2-乙基-5-氣苯并 巧喃-3-幾基)-6-( S氣甲基）]乙酸苯醋(42) (90mg)。收率為34.8 %。
[0143] 步驟B:將化合物42(90111旨，0.228111111〇1)溶解于甲醇（51111^)，加入碳酸鐘（95111邑， 0.688mmol)，所得混合物在室溫下攬拌0.5小時(shí)。加入水(25mL)，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3~4， 乙酸乙醋（25mL X 2)萃取，合并的有機(jī)相用飽和食鹽水（15mL)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓 蒸除溶劑，產(chǎn)物用石油酸重結(jié)晶，得[3-気-4-徑基-5-(=氣甲基)苯基](2-乙基-5-氣苯并 巧喃-3-基）甲酬（43)。lHNMR(DMS0-d6,500MHz)Sll.68(s，lH)，7.95-7.93(m，2H)，7.71- 7.69(m，lH)，7.22-7.15(m，2H)，2.78(q，J = 7.5Hz，2H)，1.24(t，J = 7.5Hz，3H)〇MS(EI，m/ z):352.0[M-扣-。
[0144] 實(shí)施例16: [3-漠-4-徑基-5-(S氣甲基)苯基](2-乙基-5-氣苯并巧喃-3-基）甲酬 (44) 的合成
[0145
[0146] 將漠(41mg，0.257mmol)的醋酸（1血)溶液滴加到化合物43(60mg，0.170mmol)的醋 酸巧mU溶液中，所得混和物在室溫下攬拌2小時(shí)。向混和物中滴加稀亞硫酸氨鋼水溶液，直 到顏色稱去。然后加入適量水，用乙酸乙醋（20mLX 2)萃取，合并的有機(jī)相用飽和食鹽水 (IOmL)洗涂，無(wú)水硫酸鋼干燥。減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物經(jīng)柱層析純化(200~300目硅膠，乙酸乙 醋：石油酸=1:5~3:5洗脫），得[3-漠-4-?基-5-(S氣甲基）苯基](2-乙基-5-氣苯并巧 喃-3-基）甲酬（44)。lH匪R(DMS0-d6,300MHz)S8.10(s，lH)，7.84(s，lH)，7.71-7.66(m， lH)，7.20-7.17(m，2H)，2.76(q J = 7.5Hz，2H)，1.25(t，J = 7.5Hz，3H)〇MS(EI，m/z):429.0 [M-扣-。
[0147]實(shí)施例17:3-氯-5-(2-乙基-5-氣-苯并巧喃-3-幾基)-2-徑基-苯甲臘(45)的合成 [014 引
[0149] 化合物45的制備方法參見(jiàn)實(shí)施例6中的步驟B、C、D和E。其中實(shí)施例6步驟B中的3- 甲基-4-甲氧基苯甲酸用3-氯-4-甲氧基苯甲酸替代。Ih NMR化MS0-d6，500MHz)S8.04-8.02 (m，2H)，7.71-7.68(m，lH)，7.20-7.19(m，2H)，2.80(q，J = 7.5Hz，2H)，1.24(t，J = 7.5Hz， 3H)〇MS(EI，m/z):342.0[M-H]-。
[0150] 生物學(xué)實(shí)施例
[0151] 實(shí)施例17:實(shí)施例化合物對(duì)HEK293轉(zhuǎn)染細(xì)胞株中hURATl轉(zhuǎn)運(yùn)尿酸的抑制試驗(yàn)：
[0152] 1.包被24孔板:按20化L/孔加入0.1 mg/mL多聚賴氨酸(poly-D-Lysin),放置過(guò)夜。 移去多聚賴氨酸，用無(wú)菌水清洗并徹底驚干，待用。
[0153] 2.將肥K293-WJRAT1穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞按2X 1〇5個(gè)/孔接入包被過(guò)的24孔板中，37°C，5%C02 解箱培養(yǎng)3天。
[0154] 3.實(shí)驗(yàn)當(dāng)天，用溫浴過(guò)的皿SS( 125mM葡萄糖酸鋼、4. SmM葡萄糖酸鐘、1.3mM葡萄糖 酸巧、1.2mMK出P04、1.2mMMgS04、5.6mM葡萄糖、25mM肥陽(yáng)S，pH7.4)清洗2遍細(xì)胞并吸凈， 再按16化L/孔加入皿SS，并按20化/孔加入終濃度為SOOnM待測(cè)化合物，做為試驗(yàn)化合物孔 (CPM(試驗(yàn)化合物））；按18化L/孔加入皿SS但不加試驗(yàn)化合物，做為空白對(duì)照孔(CPM(空白 對(duì)照））。放置室溫下1 Omin。
[01對(duì) 4.按20化/孔加入終濃度為SOiiM的I4C尿酸，放置室溫下20min。
[0156] 5.吸凈每孔溶液，用預(yù)冷的皿SS清洗細(xì)胞并吸凈。最后加入0.2M化OH溶解細(xì)胞， 收集細(xì)胞碎片并加入適量閃爍液，在化rkin Elmer MicroBe化Trilux 1450型液體閃爍分 析儀上檢測(cè)同位素1化的放射強(qiáng)度(CPM值）。
[0157] 6.通過(guò)對(duì)1化標(biāo)記尿酸的測(cè)定，按W下公式可計(jì)算出試驗(yàn)化合物對(duì)WJRATl轉(zhuǎn)運(yùn)尿酸 的抑制效果。試驗(yàn)化合物均設(shè)=次重復(fù)，試驗(yàn)結(jié)果取平均值，并計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)偏差sd。
[015 引
[0159] 7.實(shí)施例化合物對(duì)皿K293轉(zhuǎn)染細(xì)胞株中WJRATl轉(zhuǎn)運(yùn)巧酸抑制率的試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表 Io
[0160] 表1.試驗(yàn)化合物對(duì)HEK293轉(zhuǎn)染細(xì)胞株中WJRATl轉(zhuǎn)運(yùn)尿酸的抑制率
[0161]
[0162] 試驗(yàn)結(jié)果顯示，在5(K)nM濃度下，運(yùn)些化合物對(duì)肥K293轉(zhuǎn)染細(xì)胞中hURATl轉(zhuǎn)運(yùn)尿酸 均有較好的抑制效果，其中，化合物5，11，25,29,44和45的抑制效果優(yōu)于苯漠馬隆。
[0163] 實(shí)施例18:化合物25對(duì)人正常肝細(xì)胞心02和WRk68生長(zhǎng)的抑制作用
[0164] 1.人正常肝細(xì)胞k02(購(gòu)自武漢普諾賽生物科技有限公司）和WRL-68(由南京大學(xué) 生命科學(xué)研究院惠贈(zèng)），均用DMEM培養(yǎng)液(含10%胎牛血清，lOOU/mL青霉素，0.1 mg/mL鏈霉 素)在37°C、5 %C〇2解箱培養(yǎng)至細(xì)胞匯合度達(dá)90 %左右。按1 X IO^孔的細(xì)胞數(shù)接種于96孔板 中，置37 °C、5 % C〇2解箱培養(yǎng)2地。
[0165] 2.用DMEM培養(yǎng)液配制不同濃度梯度的試驗(yàn)化合物25和對(duì)照藥物苯漠馬隆，并按 10化L/孔加入，作為試驗(yàn)化合物孔和對(duì)照藥物孔;按10化L/孔加入DMEM培養(yǎng)液，做為陰性對(duì) 照孔。置37°C、5%C02解箱中，L-02細(xì)胞和WRL-68細(xì)胞各培養(yǎng)96h。
[0166] 3.將 Resazu;rin(15mg/50mL) 'Methylene Blue(25mg/10mL) 'Potassium fGiricyanide(C). 329g/1OOmL) 'Potassium fGirocyanide(C). 422g/1OOmL)溶于PBS(0.1 M、 抑=7.4)中，配制成Alamar Blue溶液，待用。
[0167] 4.細(xì)胞用PBS(0.1M、抑=7.4)清洗2次，按100化/孔加入Alamar Blue溶液;在無(wú)細(xì) 胞的孔中加入100化/孔Alamar Blue溶液，做為空白對(duì)照孔。將96孔板置37 °C、5 % C〇2解箱 中培養(yǎng)化。
[0168] 5.用酶標(biāo)儀Victor X4(I^rkin Elmer)在530/590nm處檢測(cè)細(xì)胞巧光值。每個(gè)濃度 重復(fù)測(cè)定3次，得出平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差。按W下公式計(jì)算細(xì)胞存活率：
[0169]
[0170] 6.根據(jù)細(xì)胞存活率，利用Prism Graph軟件計(jì)算得出藥物對(duì)細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度 (ICsq)。結(jié)果顯示，化合物25對(duì)正常肝細(xì)胞k02和WRk68的ICsq值分別為153.20測(cè)和145.82 yM，苯漠馬隆對(duì)應(yīng)肝細(xì)胞的ICso值為70.95iiM和56.03測(cè)。
[0171] 上述實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明化合物25對(duì)正常肝細(xì)胞的毒性顯著低于苯漠馬隆。部分實(shí)施例 化合物也具有類似效果。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 式(I)或式(II)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中， R1選自氫、氖、鹵素、羥基、腈基、取代或非取代的Cl-4烷基、取代或非取代的Cl-4烷氧基中 的一種，其取代基選自氟、羥基、Cl-4烷氧基或氨基中的一種或幾種； R2選自氛、気、?'素、Cl-3烷基、?'代Cl-3烷基、臆基中的一種； R3選自烷基； η或m分別獨(dú)立地為1或2; R4選自氫、氖、鹵素、羥基、腈基、取代或非取代的Cl-4烷基、取代或非取代的Cl-4烷氧基中 的一種，其取代基選自氟、羥基、Cl-4烷氧基或氨基中的一種或幾種； R5選自氛、気、?'素、Cl-3烷基、?'代Cl-3烷基、臆基中的一種； R6選自烷基； X或y分別獨(dú)立地為1或2。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1選自氫、氘、鹵素、羥基、 臆基、Cl-3烷基、取代的Cl-3烷基、Cl-3烷氧基、氣代Cl-3烷氧基中的一種，其取代基選自氣、輕 基、&-3烷氧基或氨基中的一種或幾種。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1選自氫、氘、氟、氯、羥 基、腈基、甲基、乙基、氟代甲基、氟代乙基、甲氧基甲基、乙氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基乙 基、羥甲基、羥乙基、氨基甲基、氨基乙基、甲氧基、乙氧基、氟代甲氧基、氟代乙氧基中的一 種。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R2選自氫、氘、氟、氯、溴、 碘、甲基、乙基、正丙基、異丙基、氟代甲基、氟代乙基、腈基中的一種;R 3選自Cn烷基;η或m 分別獨(dú)立地為1。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R4選自氫、氘、鹵素、羥基、 臆基、Cl-3烷基、取代的Cl-3烷基、Cl-3烷氧基、氣代Cl-3烷氧基中的一種，其取代基選自氣、輕 基、&-3烷氧基或氨基中的一種或幾種。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R5選自氫、氘、氟、氯、溴、 碘、甲基、乙基、正丙基、異丙基、氟代甲基、氟代乙基中的一種;R 6選自Cn烷基;X或y分別獨(dú) 立地為1。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中化合物選自：8. 權(quán)利要求1~7中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備促尿酸排泄藥 物方面的應(yīng)用。9. 權(quán)利要求1~7中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備治療或預(yù)防高 尿酸血癥或痛風(fēng)藥物方面的應(yīng)用。10. -種藥物組合物，其以權(quán)利要求1~8中任一項(xiàng)所述的化合物或其藥學(xué)上可接受的 鹽為活性成分或主要活性成分，輔以藥學(xué)上可接受的輔料。
【文檔編號(hào)】C07D307/80GK106065010SQ201610258184
【公開(kāi)日】2016年11月2日
【申請(qǐng)日】2016年4月22日 公開(kāi)號(hào)201610258184.0, CN 106065010 A, CN 106065010A, CN 201610258184, CN-A-106065010, CN106065010 A, CN106065010A, CN201610258184, CN201610258184.0
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