專利名稱：三聚氰胺免疫層析檢測技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物領(lǐng)域中用于快速檢測的三聚氰胺免疫層析檢測技術(shù)。
背景技術(shù)：
免疫分析技術(shù)經(jīng)過近100年的發(fā)展，目前已經(jīng)成為檢驗、檢疫方面的核心技術(shù)之一，并
不斷向自動化和件變化兩個方面發(fā)展，其中免疫層析試條極適合臨床試驗室、野外檢驗和家 庭檢驗，在新世紀開始后得到了廣泛地的應(yīng)用，其檢測對象已經(jīng)涉及到腫瘤系列、心梗系列、 微生物、毒品系列和激素系列等。
目前企業(yè)和個人在蛋白質(zhì)產(chǎn)品尤其是乳制品中添加三聚氰胺，對食用者尤其是嬰幼兒造
成了極大的傷害。2007年12月13日楊曙明和于洪俠發(fā)明了ELISA檢測技術(shù)(一種檢測三 聚氰胺的酶聯(lián)免疫試劑盒，CN101183105 )，但是該技術(shù)仍然需要特殊的檢測設(shè)備和特定監(jiān) 測人員。目前國內(nèi)外尚發(fā)現(xiàn)關(guān)于本發(fā)明所涉及相關(guān)改造的報道和專利文獻，因此我們進行了 相關(guān)的研究，希望找到一種普及型檢測技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及一種三聚氰胺免疫層析檢測技術(shù)，由樣品采集單元，層析單元和免疫捕獲單 元構(gòu)成。其特征是樣品中的三聚氰胺利用毛細吸收作用依次通過樣品采集單元、層析單元 到達捕獲單元，在層析單元和成色標記親和體結(jié)合并阻止標記親和體在捕獲單元被固定化三 聚氰胺純品濃集呈色。
其中，檢驗系統(tǒng)的介質(zhì)由親水性介質(zhì)構(gòu)成，可選擇纖維素、纖維素衍生物、有機高分子 材料和玻璃纖維；樣品采集單元，層析單元和免疫捕獲單元可在同一個介質(zhì)上依次排布，也 可以選用獨立的介質(zhì)首尾相接；樣品采集單元，層析單元和免疫捕獲單元可以選擇同一材質(zhì) 也可以選擇不同材質(zhì)。
其中，層析單元含有針對三聚氰胺的特異性呈色標記親和體，水化后可隨流動相泳動； 親和體可以是抗原、抗體、酶或者經(jīng)過基因文庫篩選獲得的特異性親和分子；呈色標記方式
3可以是金屬標記、酶標記、熒光標記和常規(guī)染料標記，其中優(yōu)選但不限于膠體金標記。
其中免疫捕獲單元含有固定化三聚氰胺，可以將流經(jīng)捕獲區(qū)的未與檢測樣品中三聚氰胺結(jié)合的標記親和體截留，濃集呈色。
其中，捕獲單元可含有一條捕獲區(qū)帶，用于定量分析；也可以含有多個捕獲區(qū)帶，分別固定相應(yīng)數(shù)量的三聚氰胺，對樣品中檢測對象的三聚氰胺含量進行半定量分析。
實施方案
本發(fā)明所涉及的聯(lián)合免疫層析技術(shù)，由樣品采集單元，層析單元和免疫捕獲單元構(gòu)成。待檢測樣品滴加或者浸沒樣品采集單元，液體在毛細吸收效應(yīng)下，自樣品采集單元經(jīng)過層系單元到達免疫捕獲單元。待檢測的三聚氰胺在層析單元和相應(yīng)的呈色親和體特異性結(jié)合，并在捕獲區(qū)阻止該親和體和固定化三聚氰胺結(jié)合，使相應(yīng)的區(qū)帶不顯色。如果樣品中不含有三聚氰胺，則相應(yīng)捕獲區(qū)帶呈色；如果樣品中含有三聚氰胺，則相應(yīng)區(qū)帶呈色條不呈色，從而實現(xiàn)對樣品中相應(yīng)分子實現(xiàn)定性檢驗。
在半定量系統(tǒng)中，捕獲單元針對特定目標分子含有多條捕獲區(qū)帶，每條區(qū)帶固定有一定數(shù)量的三聚氰胺，并且層析單元含有一定數(shù)量的標記親和體。當三聚氰胺分子的數(shù)量超過親和體數(shù)量時，則所有區(qū)帶不呈色；當三聚氰胺分子的數(shù)量低于標記親和體數(shù)量時，未結(jié)合三聚氰胺的標記親和體在第一捕獲區(qū)帶濃集呈色，未結(jié)合三聚氰胺的標記親和體超過第一區(qū)帶捕獲數(shù)量時，依次使后續(xù)捕獲區(qū)帶呈色。根據(jù)捕獲區(qū)帶未呈色的數(shù)量，可對三聚氰胺的含量進行半定量分析。


圖1三聚氰胺免疫檢驗條示意圖實施實例
下面我們將參照附圖對本發(fā)明所涉及的三聚氰胺免疫層析檢測技術(shù)作進一步說明，實例和附圖內(nèi)容不構(gòu)成對本發(fā)明所所要求權(quán)力的限制。檢測系統(tǒng)由樣品采集區(qū)[7]、免疫層析區(qū)[6]和免疫捕獲區(qū)[5]構(gòu)成，其中樣品捕獲區(qū)含有 質(zhì)控帶U]。其中圖1以所示為半定量待測目標分子檢測條。免疫捕獲區(qū)含有一到三條免疫捕 獲帶[1-3]，用于對三聚氰胺進行定性或者半定量監(jiān)測，每條捕獲區(qū)帶固定一定數(shù)量的三聚氰 胺純品。捕獲區(qū)帶呈色數(shù)量和樣品中相應(yīng)分子的含量成反比。
具體實施實例
下面我們將參照附圖1對本發(fā)明所涉及的三聚氰胺免疫層析檢測技術(shù)操作方法進一步說 明，實例和附圖內(nèi)容不構(gòu)成對本發(fā)明所所要求權(quán)力的限制。
在如圖1所描述的檢測系統(tǒng)中，捕獲單元[5]選擇硝酸纖維素膜制成，捕獲單元中三條檢 測條帶分別固定一定數(shù)量的三聚氰胺；層析單元[6]選擇玻璃纖維膜制成，其中附著有分別針 對三聚氰胺的膠體金標記抗體，水化以后可隨水流動；樣品采集單元[7]由玻璃纖維膜制成， 用于采集樣品。另外在捕獲單元上不可含有吸水濾紙，以促進樣品由采集單元向捕獲單元的 流動。
應(yīng)用時將樣品采集區(qū)進入待測溶液5到10秒鐘，平置到質(zhì)控帶顯色，然后根據(jù)顯色條帶 數(shù)量判斷樣品中三聚氰胺分子含量。
權(quán)利要求
1本發(fā)明涉及一種三聚氰胺免疫層析檢測技術(shù)，由樣品采集單元，層析單元和免疫捕獲單元構(gòu)成。其特征是樣品中的三聚氰胺利用毛細吸收作用依次通過樣品采集單元、層析單元到達捕獲單元，在層析單元和成色標記親和體結(jié)合并阻止標記親和體在捕獲單元被固定化三聚氰胺純品濃集呈色，根據(jù)呈色條帶數(shù)量可以判斷樣品中三聚氰胺含量。
2 根據(jù)權(quán)利要求1所述的三聚氰胺免疫層析檢測技術(shù)，其特征是檢驗系統(tǒng)的介質(zhì)由親水 性介質(zhì)構(gòu)成，可選擇纖維素、纖維素衍生物、有機高分子材料和玻璃纖維；樣品采集單元， 層析單元和免疫捕獲單元可在同一個介質(zhì)上依次排布，也可以選用獨立的介質(zhì)首尾相接；樣品采集單元，層析單元和免疫捕獲單元可以選擇同一材質(zhì)也可以選擇不同材質(zhì)。
3 根據(jù)權(quán)力要求1所述的三聚氰胺免疫層析檢測技術(shù)，其特征是層析單元含有針對三聚 氰胺的特異性呈色標記親和體，水化后可隨流動相泳動；親和體可以是抗原、抗體、酶或者 經(jīng)過基因文庫篩選獲得的特異性親和分子；呈色標記方式可以是金屬標記、酶標記、熒光標 記和常規(guī)染料標記，其中優(yōu)選但不限于膠體金標記。
4 根據(jù)權(quán)利要求1所述的三聚氰胺免疫層析檢測技術(shù)，其特征是免疫捕獲單元含有固定 化三聚氰胺，可以將流經(jīng)捕獲區(qū)的未與檢測樣品中三聚氰胺結(jié)合的標記親和體截留，濃集呈 色。
5 根據(jù)權(quán)利要求1所述的三聚氰胺免疫層析檢測技術(shù)，其特征是捕獲單元可含有一條捕 獲區(qū)帶，用于定量分析；也可以含有多個捕獲區(qū)帶，分別固定相應(yīng)數(shù)量的三聚氰胺，對樣品 中檢測對象的三聚氰胺含量進行半定量分析。
全文摘要
本發(fā)明所涉及一種三聚氰胺免疫層析檢測技術(shù)，由樣品采集單元[7]，層析單元[6]和免疫捕獲單元[5]構(gòu)成。其中樣品捕獲區(qū)含有質(zhì)控帶[4]和1到3條免疫捕獲帶[1-3]，樣品中的三聚氰胺利用毛細吸收作用依次通過樣品采集單元、層析單元到達捕獲單元，在層析單元和成色標記親和體結(jié)合并阻止其在捕獲單元被固定化三聚氰胺結(jié)合濃集呈色。該系統(tǒng)具有操作簡單，快捷，靈敏等特征，食品和其他生活用品檢驗等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。
文檔編號G01N21/77GK101685096SQ200810223010
公開日2010年3月31日 申請日期2008年9月26日 優(yōu)先權(quán)日2008年9月26日
發(fā)明者張永鋼 申請人:張永鋼