六堡茶鮮葉中擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，具體地說(shuō)，是一種六堡茶鮮葉中擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，屬于化學(xué)檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]六堡茶屬于黑茶類(lèi)，主產(chǎn)于廣西梧州六堡鎮(zhèn)，該品種茶葉具有紅、濃、陳、醇的特點(diǎn)，具有消暑祛濕、明目清心、幫助消化的功效，因?yàn)榱げ杷痉纸饨退馗哂谄渌桀?lèi)，因此具有健胃養(yǎng)神、減肥健身的功效，是一種廣受歡迎的茶類(lèi)。影響六堡茶質(zhì)量的主要是農(nóng)藥殘留，國(guó)際上一些茶葉進(jìn)口國(guó)制定了嚴(yán)格的農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)于農(nóng)藥超標(biāo)的茶葉進(jìn)行就地封存、銷(xiāo)毀或退回原產(chǎn)地過(guò)的政策，對(duì)于茶葉貿(mào)易具有很大的影響。擬除蟲(chóng)菊酯農(nóng)藥用量少，殺蟲(chóng)效果好，是當(dāng)前廣泛應(yīng)用的茶葉農(nóng)藥(茶葉除蟲(chóng)劑)，為了從源頭上控制(茶葉產(chǎn)品)農(nóng)藥殘留，需要直接對(duì)鮮葉進(jìn)行檢測(cè)，以實(shí)現(xiàn)農(nóng)藥源頭控制，對(duì)于茶園用藥進(jìn)行有效管理，以此減少農(nóng)藥違規(guī)造成的環(huán)境污染，提升飲茶安全性。因?yàn)轷r葉中含有較多的干擾物，因此采用有機(jī)溶劑提取，層析凈化后進(jìn)行氣相色譜檢驗(yàn)，能夠依此建立有效的六堡茶鮮葉的農(nóng)藥檢測(cè)方法，為提升飲茶安全性提供保障。
[0003]擬除蟲(chóng)菊酯的殺蟲(chóng)機(jī)理
[0004]擬除蟲(chóng)菊酯是一種仿生藥物，該藥物具有悠久的使用歷史。擬除蟲(chóng)菊酯通過(guò)接觸昆蟲(chóng)后迅速滲入蟲(chóng)體，與昆蟲(chóng)神經(jīng)系統(tǒng)作用從而改變神經(jīng)突觸膜對(duì)離子的通透性，引發(fā)昆蟲(chóng)持續(xù)興奮，最后麻痹而死。相比于常用的殺蟲(chóng)劑，擬除蟲(chóng)菊酯的殺蟲(chóng)力能夠高出1-2個(gè)數(shù)量級(jí)，擊倒力強(qiáng)，對(duì)于農(nóng)林、園藝、畜牧等地方的開(kāi)沖均由良好的防治效果，而且該藥物的毒性遠(yuǎn)低于有機(jī)磷的危害，在自然界易分解，在動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)化迅速，對(duì)于環(huán)境影響較小。因?yàn)樵撍幬餁⑾x(chóng)作用快、廣譜性、易降解，因此廣泛的應(yīng)用于茶園、果園、農(nóng)田等害蟲(chóng)的防治，是廣泛應(yīng)用的農(nóng)藥，但是因?yàn)槠淇剐院铜h(huán)境安全性，因此被列為多種農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留的重點(diǎn)檢測(cè)對(duì)象。
[0005]擬除蟲(chóng)菊酯的危害與殘留
[0006]擬除蟲(chóng)菊酯是一種神經(jīng)毒劑，對(duì)于神經(jīng)系統(tǒng)的毒害作用是多環(huán)節(jié)的，可能會(huì)引發(fā)神經(jīng)損傷，導(dǎo)致淋巴和脾臟受損，甚至誘發(fā)癌變。當(dāng)前該藥物已經(jīng)占全世界化學(xué)農(nóng)藥總產(chǎn)量的25%左右。因?yàn)橘Q(mào)易壁皇的原因，各國(guó)對(duì)于擬除蟲(chóng)菊酯的殘留量規(guī)定不一致，因此對(duì)茶葉貿(mào)易造成影響。
[0007]擬除蟲(chóng)菊酯檢測(cè)技術(shù)
[0008]因?yàn)閿M除蟲(chóng)菊酯殘留量微少，需要高靈敏性的檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行殘留量的檢測(cè)，當(dāng)前常用的方法包括氣相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜法、高效液相色譜法、免疫分析法等多種方法。為了確保檢測(cè)的準(zhǔn)確性，所選擇的方法具有較強(qiáng)的重復(fù)性與準(zhǔn)確度，確保檢測(cè)方式滿(mǎn)足大批量樣品多組分快速測(cè)定要求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明提供的目的是提供一種檢測(cè)靈敏度高、對(duì)于茶葉質(zhì)量具有重要的意義的六堡茶鮮葉中擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法。
[0010]為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是這樣的:
[0011 ] —種六堡茶鮮葉中擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，其特征在于，包括下
[0012]述步驟:
[0013]I)標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備
[0014]準(zhǔn)確稱(chēng)取聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、S-氰戊菊酯，采用氯仿溶解配制成為500yg/mL的儲(chǔ)備液待用；
[00?5] 3)樣品制備與提取
[0016]從茶園取未使用任何農(nóng)藥的鮮葉樣品10g，置于組織搗碎機(jī)中搗碎，稱(chēng)取搗碎的樣品1.0 m g，加入5 O m L體積比1:1的乙醚和乙酸乙酯于搗碎機(jī)中勾楽提取，真空抽濾并用1mL混合液洗滌濾渣，采用過(guò)飽和硫酸鈉加入分液漏斗中萃取，分出有機(jī)相后濃縮至2mL上氣相色譜凈化柱，在1.5cmX 20cm的玻璃層析柱中加入無(wú)水硫酸鈉與中性氧化招，上層再加入Icm無(wú)水硫酸鈉，加無(wú)水預(yù)洗后將提取液移取ImL入柱，并且采用體積比98: 2乙醚和乙酸乙酯的混合液進(jìn)行淋洗，濃縮至500mL待測(cè)；
[0017]進(jìn)一步的，上述的六堡茶鮮葉中擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，所述的氣相色譜采用481161^氣相色譜儀采用的載氣為氮?dú)?，，柱前壓?5?81，尾吹氣50111171^11，柱溫在 80°C保持 2min，再以 20°C/min 升至 280°C，保持 20min。
[0018]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的技術(shù)方案，檢測(cè)結(jié)果線性良好、操作簡(jiǎn)便、抗基質(zhì)干擾、結(jié)果可靠，為食品的質(zhì)量監(jiān)管提供了有力的技術(shù)支撐。
【附圖說(shuō)明】
[0019]圖1是本發(fā)明提供的氣相色譜曲線圖；
[0020]其中:I為聯(lián)苯菊酯，2為甲氰菊酯，3為三氟氯氰菊酯，4、5、6為氯氰菊酯，7為氰戊菊酯，8為S-氰戊菊酯
【具體實(shí)施方式】
[0021]下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的權(quán)利要求做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，但不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制，任何在本發(fā)明權(quán)利要求保護(hù)范圍內(nèi)所做的有限次的修改，仍在本發(fā)明的權(quán)利要求保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0022]實(shí)施例1
[0023]本文所采用的六堡茶鮮葉為蒼梧縣六堡鎮(zhèn)某茶業(yè)有限公司茶園現(xiàn)摘鮮葉作為試驗(yàn)，采用氣相色譜法對(duì)六堡茶鮮葉的擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)，該方法具有靈敏度高、假陽(yáng)性少的特點(diǎn)，是國(guó)際上公認(rèn)的定量確認(rèn)的方法。
[0024]儀器與試劑
[°°25] 采用Agi lent氣相色譜儀，79型多用高速組織搗碎機(jī)，美國(guó)Sigma公司娃土，無(wú)水硫酸鈉、活性炭均經(jīng)過(guò)脫水處理，試劑均為分析純?cè)噭?，所有試劑?jīng)過(guò)重蒸餾后使用，采用雙蒸餾水作為試驗(yàn)用水。
[0026]方法
[0027]3.2.1標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備
[0028]聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、S-氰戊菊酯均為德國(guó)Augsburg產(chǎn)品，準(zhǔn)確稱(chēng)取上述標(biāo)準(zhǔn)品，采用氯仿溶解配制成為500yg/mL的儲(chǔ)備液待用。
[0029]3.2.2樣品制備與提取
[0030]從茶園取未使用任何農(nóng)藥的鮮葉樣品200g，置于組織搗碎機(jī)中搗碎。稱(chēng)取搗碎的樣品1.0mg，加入I OOmL V (乙醚):V (乙酸乙酯)=1:1于搗碎機(jī)中勾楽提取，真空抽濾并用1mL混合液洗滌濾渣，采用過(guò)飽和硫酸鈉加入分液漏斗中萃取，分出有機(jī)相后濃縮至2mL上凈化柱。在1.5cm X 20cm的玻璃層析柱中加入無(wú)水硫酸鈉與中性氧化招，上層再加入I cm無(wú)水硫酸鈉，加無(wú)水預(yù)洗后將提取液移取ImL入柱，并且采用V(乙醚):V(乙酸乙酯)=98: 2的混合液進(jìn)行淋洗，濃縮至10mL待測(cè)。
[0031 ] 色譜條件
[0032]氣相色譜所采用的載氣為氮?dú)?，柱前壓?5psi，尾吹氣60mL/min，柱溫在60°C保持 2min，再以 30°C/min 升至 280°C，保持 20min。
[0033]平均回收率在94.5%以上，50mL洗脫劑用量6種農(nóng)藥均取得90%以上的回收率。
[0034]添加回收實(shí)驗(yàn)
[0035]采用空白茶葉鮮葉樣品進(jìn)行回收率試驗(yàn)，研究表明六種農(nóng)藥的平均添加回收率為96.6%-102.5%，表明鮮葉中的擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)檢測(cè)滿(mǎn)足要求，氣相色譜曲線如圖1所示，其中:I為聯(lián)苯菊酯，2為甲氰菊酯，3為三氟氯氰菊酯，4、5、6為氯氰菊酯，7為氰戊菊酯，8SS-氰戊菊酯。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種六堡茶鮮葉中擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，其特征在于，包括下述步驟: I)標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備 準(zhǔn)確稱(chēng)取聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、S-氰戊菊酯，采用氯仿溶解配制成為500yg/mL的儲(chǔ)備液待用； 3)樣品制備與提取 從茶園取未使用任何農(nóng)藥的鮮葉樣品100g，置于組織搗碎機(jī)中搗碎，稱(chēng)取搗碎的樣品1.0mg，加入50mL體積比1:1的乙醚和乙酸乙酯于搗碎機(jī)中勾楽提取，真空抽濾并用I OmL混合液洗滌濾渣，采用過(guò)飽和硫酸鈉加入分液漏斗中萃取，分出有機(jī)相后濃縮至2mL上氣相色譜凈化柱，在1.5cmX 20cm的玻璃層析柱中加入無(wú)水硫酸鈉與中性氧化招，上層再加入Icm無(wú)水硫酸鈉，加無(wú)水預(yù)洗后將提取液移取ImL入柱，并且采用體積比98:2乙醚和乙酸乙酯的混合液進(jìn)行淋洗，濃縮至500mL待測(cè)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的六堡茶鮮葉中擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，其特征在于，所述的氣相色譜采用Agilent氣相色譜儀采用的載氣為氮?dú)?，，柱前壓?5psi，尾吹氣50mL/min，柱溫在 80°C保持 2min，再以 20°C/min 升至 280°C，保持 20min。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種六堡茶鮮葉中擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，旨在提供一種檢測(cè)靈敏度高、對(duì)于茶葉質(zhì)量具有重要的意義；其技術(shù)方法：1)標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備；2)樣品制備與提取，稱(chēng)取搗碎的樣品10.0mg，加入50mL體積比1:1的乙醚和乙酸乙酯于搗碎機(jī)中勻漿提取，真空抽濾并用10mL混合液洗滌濾渣，采用過(guò)飽和硫酸鈉加入分液漏斗中萃取，分出有機(jī)相后濃縮至2mL上氣相色譜凈化柱，在1.5cm×20cm的玻璃層析柱中加入無(wú)水硫酸鈉與中性氧化鋁，上層再加入1cm無(wú)水硫酸鈉，加無(wú)水預(yù)洗后將提取液移取1mL入柱，并且采用體積比98:2乙醚和乙酸乙酯的混合液進(jìn)行淋洗，濃縮至500mL待測(cè)；屬于化學(xué)檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
【IPC分類(lèi)】G01N30/02
【公開(kāi)號(hào)】CN105651902
【申請(qǐng)?zhí)枴?br>【發(fā)明人】李德光, 呂立盈, 李春燕, 聶少姬, 唐嘉慧, 陳東紅, 麥豐, 黃敏
【申請(qǐng)人】梧州市產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)所
【公開(kāi)日】2016年6月8日
【申請(qǐng)日】2016年4月14日