專利名稱：一種茅膏菜無菌播種繁殖方法
技術領域：
本發(fā)明涉及植物組培快繁技術領域，尤其涉及一種茅膏菜無菌播種繁殖方法。
背景技術：
茅膏菜(Droserapeltata)又稱捕蟲草，茅膏菜科茅膏菜屬植物，是食蟲植物種類最多分 布最廣的一個大族，也是株形奇特、人工栽培較為麻煩的一類。茅膏菜為多年生草本，10 20厘米，根莖短，圓球形，葉互生，葉片半圓形，邊緣密生能分泌粘液的腺毛，當小蟲停落 葉面時，即被粘液膠著，逐漸被腺毛分泌的蛋白質分解酶所消化。茅膏菜喜溫暖、濕潤和充 足陽光，栽培土壤以透氣性好的泥炭土和苔蘚的混和基質較好。生長適溫為20 3(TC，冬季 不低于5'C。茅膏菜是一種觀賞性較強的植物，可作為一種環(huán)保型的家庭小盆栽之一，也是 我國市場上近幾年來剛剛流行的奇特花卉之一。茅膏菜還可以藥用。茅膏菜市場主要依靠進 口，國內進行工廠化生產茅膏菜的企業(yè)很少，而且不能滿足國內市場的需要。茅膏菜的自然 繁殖以球莖行營養(yǎng)繁殖，雖然種子產量較大，但實生苗更新能力較低；生產上主要以分株和 扦插繁殖，但栽培要求技術很高，成活率不高。因此，在一定程度上制約了茅膏菜的工廠化 生產。

發(fā)明內容
本發(fā)明要解決上述現(xiàn)有技術的缺陷，提供一種茅膏菜無菌播種繁殖方法。
本發(fā)明目的通過以下技術方案來實現(xiàn)這種茅膏菜無菌播種繁殖方法，按如下步驟進行
1) 、培養(yǎng)基的配制，包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的各組分與每升所含重量為-
(1) 基本培養(yǎng)基選用1/5MS 1/2MS培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20 30g/L，瓊脂7 9g/L， pH5.6 5.8;
(2) 種子萌發(fā)培養(yǎng)基1/5MS 1/2MS;
(3) 增殖培養(yǎng)基1/5MS l/2MS+BA0.1 1.0mg/L+NAA0.0 0.1mg/L;
(4) 壯苗培養(yǎng)基1/5MS l/2MS+BA0.1 0.5mg/L+NAA0.0 0.1mg/L;
(5) 生根培養(yǎng)基1/5MS 1/2MS或1/5MS+NAA0.01 0.5mg/L;
2) 、種子采集與滅菌在茅膏菜果實成熟高峰期，采集種子，經表面滅菌處理后備用；
3) 、種子萌發(fā)培養(yǎng)將滅菌處理后的種子在無菌條件下，接種在種子萌發(fā)培養(yǎng)基上，在 培養(yǎng)條件下培養(yǎng)30 45天后，從種子萌發(fā)成實生苗；
4) 、增殖培養(yǎng)將實生苗接種到增殖培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)條件下培養(yǎng)30 45天增殖出叢生芽；根據(jù)對幼苗數(shù)量的需求，每隔30 45天按同樣方法進行幼苗再增殖培養(yǎng)；
5) 、壯苗培養(yǎng)將增殖出的叢生芽分割成單芽，接種到壯苗培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)條件下培
養(yǎng)20 30天后，幼苗冠徑生長達2 3厘米；
6) 、生根培養(yǎng)將培養(yǎng)的壯苗接種在生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，在培養(yǎng)條件下培養(yǎng)20
30天后，幼苗冠徑生長達約3 5cm、苗基部長出5 10根細根；
7) 、移栽將生根組培苗移栽于苔蘚基質中，培育1 2個月至成苗。 所述的培養(yǎng)基，包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的各組分與每升所含重量為
(1) 基本培養(yǎng)基選用1/5MS 1/2MS培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20 30g/L，瓊脂7 9 g/L， pH5.6 5.8;
(2) 種子萌發(fā)培養(yǎng)基1/2MS;
(3) 增殖培養(yǎng)基1/3MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L;
(4) 壯苗培養(yǎng)基1/4MS+BA0.1 mg/L;
(5) 生根培養(yǎng)基1/5MS或1/5MS+NAA0.05 mg/L。 所述的滅菌處理是種子進行預處理，種子釆集后先在4'C的冰箱中冷藏7天，取出種子
用體積比為75%酒精表面消毒30 45s，無菌水沖洗3遍，然后用次氯酸鈉溶液浸泡振蕩滅 菌20 30min，無菌水沖洗3~5遍。
所述的種子萌發(fā)培養(yǎng)階段的培養(yǎng)條件是，培養(yǎng)溫度為25i2'C，暗培養(yǎng)10天 15天，種 子萌發(fā)后轉為光照培養(yǎng)，光照光強為1000 2000Lx，光照時間為12h/d。
所述的增殖培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、生根培養(yǎng)階段的培養(yǎng)條件是，培養(yǎng)溫度為25i2X:，光照光 強為2500 3000 Lx，光照時間為12h/d。
本發(fā)明的有益效果是
本發(fā)時所提供的茅膏菜無菌播種繁殖方法，繁殖速度快，生產健壯均勻，移栽成活率高， 在短期內形成大量的優(yōu)良組培苗，進行規(guī)?；⑸a化生產。
具體實施例方式
通過以下實施例對本發(fā)明作進一步的詳細說明，但本發(fā)明的內容并不局限于此。 實施例l
這種茅膏菜無菌播種繁殖方法，按如下步驟進行-
1)、培養(yǎng)基的配制，包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的各組分與每升所含重量為-
(l)基本培養(yǎng)基選用1/5MS 1/2MS培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20 30g/L，瓊脂7 9g/L， pH5.6 5.8;(2) 種子萌發(fā)培養(yǎng)基1/2MS;
(3) 增殖培養(yǎng)基l/3MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L;
(4) 壯苗培養(yǎng)基1/4MS+BA0.1 mg/L;
(5) 生根培養(yǎng)基1/5MS或1/5MS+NAA0.05 mg/L;
2) 、種子采集與滅菌在茅膏菜果實成熟高峰期，采集種子，經表面滅菌處理后備用；
3) 、種子萌發(fā)培養(yǎng)將滅菌處理后的種子在無菌條件下，接種在種子萌發(fā)培養(yǎng)基上，在 培養(yǎng)條件下培養(yǎng)30 45天后，從種子萌發(fā)成實生苗；
4) 、增殖培養(yǎng)將實生苗接種到增殖培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)條件下培養(yǎng)30 45天增殖出叢生 芽；根據(jù)對幼苗數(shù)量的需求，每隔30 45天按同樣方法進行幼苗再增殖培養(yǎng)；
5) 、壯苗培養(yǎng)將增殖出的叢生芽分割成單芽，接種到壯苗培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)條件下培 養(yǎng)20 30天后，幼苗冠徑生長達2 3厘米；
6) 、生根培養(yǎng)將培養(yǎng)的壯苗接種在生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，在培養(yǎng)條件下培養(yǎng)20 30天后，幼苗冠徑生長達約3 5cm、苗基部長出5 10根細根；
7) 、移栽將生根組培苗移栽于苔蘚基質中，培育1 2個月至成苗。 所述的滅菌處理是種子進行預處理，種子采集后先在4'C的冰箱中冷藏7d，取出種子用
75%酒精表面消毒30 45s，無菌水沖洗3遍，然后用次氯酸鈉溶液浸泡振蕩滅菌20 30min， 無菌水沖洗3 5遍。
所述的種子萌發(fā)培養(yǎng)階段的培養(yǎng)條件是，培養(yǎng)溫度為25i2'C，暗培養(yǎng)10天 15天，種 子萌發(fā)后轉為光照培養(yǎng)，光照光強為1000 2000Lx,光照時間為12h/d。
所述的增殖培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、生根培養(yǎng)階段的培養(yǎng)條件是，培養(yǎng)溫度為25±2卩，光照光 強為2500 3000 Lx，光照時間為12h/d。
實施例2:
本例中，基本培養(yǎng)基選用1/5MS 1/2MS培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20 30g/L,瓊脂7 9 g/L， pH5.6 5.8;誘導培養(yǎng)基1/2MS; 增殖培養(yǎng)基1/3MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L;壯苗 培養(yǎng)基1/4MS+BA0.1 mg/L;生根培養(yǎng)基1/5MS或1/5MS+NAA0.05 mg/L。
其余步驟，條件均同于實施例1。
除上述實施例外，本發(fā)明還可以有其他實施方式。凡釆用等同替換或等效變換形成的技 術方案，均落在本發(fā)明要求的保護范圍。
權利要求
1、一種茅膏菜無菌播種繁殖方法，其特征在于該方法按以下步驟進行1)、培養(yǎng)基的配制，包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的各組分與每升所含重量為(1)基本培養(yǎng)基選用1/5MS～1/2MS培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20～30g/L，瓊脂7～9g/L，pH5.6～5.8；(2)種子萌發(fā)培養(yǎng)基1/5MS～1/2MS；(3)增殖培養(yǎng)基1/5MS～1/2MS+BA0.1～1.0mg/L+NAA0.0～0.1mg/L；(4)壯苗培養(yǎng)基1/5MS～1/2MS+BA0.1～0.5mg/L+NAA0.0～0.1mg/L；(5)生根培養(yǎng)基1/5MS～1/2MS或1/5MS+NAA0.01～0.5mg/L；2)、種子采集與滅菌在茅膏菜果實成熟高峰期，采集種子，經表面滅菌處理后備用；3)、種子萌發(fā)培養(yǎng)將滅菌處理后的種子在無菌條件下，接種在種子萌發(fā)培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)條件下培養(yǎng)30～45天后，從種子萌發(fā)成實生苗；4)、增殖培養(yǎng)將實生苗接種到增殖培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)條件下培養(yǎng)30～45天增殖出叢生芽；根據(jù)對幼苗數(shù)量的需求，每隔30～45天按同樣方法進行幼苗再增殖培養(yǎng)；5)、壯苗培養(yǎng)將增殖出的叢生芽分割成單芽，接種到壯苗培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)條件下培養(yǎng)20～30天后，幼苗冠徑生長達2～3厘米；6)、生根培養(yǎng)將培養(yǎng)的壯苗接種在生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，在培養(yǎng)條件下培養(yǎng)20～30天后，幼苗冠徑生長達約3～5cm、苗基部長出5～10根細根；7)、移栽將生根組培苗移栽于苔蘚基質中，培育1～2個月至成苗。
2、 根據(jù)權利要求1所述的茅膏菜無菌播種繁殖方法，其特征在于所述的培養(yǎng)基，包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的各組分與每升所含重量為(1) 基本培養(yǎng)基選用1/5MS 1/2MS培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20 30g/L，瓊脂7 9g/L， pH5.6 5.8;(2) 種子萌發(fā)培養(yǎng)基1/2MS;(3) 增殖培養(yǎng)基1/3MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L;(4) 壯苗培養(yǎng)基1/4MS+BA0.1 mg/L;(5) 生根培養(yǎng)基1/5MS或1/5MS+NAA0.05 mg/L。
3、 根據(jù)權利要求1所述的茅膏菜無菌播種繁殖方法，其特征在于所述的滅菌處理是種 子進行預處理，種子采集后先在4'C的冰箱中冷藏7d，取出種子用75%酒精表面消毒30 45s， 無菌水沖洗3遍，然后用次氯酸鈉溶液浸泡振蕩滅菌20 30min，無菌水沖洗3 5遍。
4、 根據(jù)權利要求1所述的茅膏菜無菌播種繁殖方法，其特征在于，所述的種子萌發(fā)培養(yǎng) 階段的培養(yǎng)條件是，培養(yǎng)溫度為25i2'C，暗培養(yǎng)10天 15天，種子萌發(fā)后轉為光照培養(yǎng)， 光照光強為1000 2000Lx，光照時間為12h/d。
5、 根據(jù)權利要求1所述的茅膏菜無菌播種繁殖方法，其特征在于，所述的增殖培養(yǎng)、壯 苗培養(yǎng)、生根培養(yǎng)階段的培養(yǎng)條件是，培養(yǎng)溫度為25士2'C，光照光強為2500 3000 Lx，光 照時間為12h/d。
全文摘要
本發(fā)明主要涉及一種茅膏菜無菌播種繁殖方法，包括如下步驟培養(yǎng)基的配制、種子采集與滅菌、種子萌發(fā)、增殖培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、移栽。基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的各組分與每升所含重量為基本培養(yǎng)基選用1/5MS～1/2MS培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20～30g/L，瓊脂7～9g/L，pH5.6～5.8；種子萌發(fā)培養(yǎng)基1/5MS～1/2MS；增殖培養(yǎng)基1/5MS～1/2MS+BA 0.1～1.0mg/L+NAA 0.0～0.1mg/L；壯苗培養(yǎng)基1/5MS～1/2MS+BA 0.1～0.5mg/L+NAA 0.0～0.1mg/L；生根培養(yǎng)基1/5MS～1/2MS或1/5MS+NAA0.01～0.5mg/L。本發(fā)明的優(yōu)點是繁殖速度快，生產健壯均勻，移栽成活率高，在短期內形成大量的優(yōu)良組培苗，進行規(guī)?；a。
文檔編號A01H4/00GK101518205SQ20091009721
公開日2009年9月2日 申請日期2009年3月26日 優(yōu)先權日2009年3月26日
發(fā)明者呂永平, 剛 徐, 汪一婷, 牟豪杰, 陳劍平 申請人:浙江省農業(yè)科學院