一種提高紫甘藍花青素含量的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及農(nóng)作物培育，具體地說，涉及一種提高紫甘藍花青素含量的方法。
【背景技術】
[0002]花青素是一種水溶性植物色素，屬于類黃酮類化合物，是植物的二級次生代謝產(chǎn)物?；ㄇ嗨鼐哂休^高的營養(yǎng)價值，經(jīng)常食用含有花青素的蔬菜水果對身體很有益處，可以保護身體免受自由基的損傷，能夠增強免疫力，抵抗衰老。植物積累花青素能夠幫助植物抵抗逆境，花青素是一種高效的抗氧化劑，能夠保護植物不受自由基傷害。目前對于提高植物花青素積累的方法有一些報道，如利用L-谷氨酸處理著色期的蘋果，能夠提高蘋果果皮的花青素合成及積累(汪良駒等，L-谷氨酸促進富士蘋果花青素積累的效應[J]，果樹學報，2006，23:157-160);以及利用轉(zhuǎn)基因的方法促進花青素合成結構基因的表達，從而提高作物的花青素含量(梁毅等，洋蔥花青素合成相關基因(AcPALl)的克隆和表達分析[J]，生物技術學報，2014，22 ;47-54)。然而轉(zhuǎn)基因技術由于其操作及產(chǎn)品安全鑒定的復雜性，并不適合在紫甘藍栽培上進行推廣。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為了解決現(xiàn)有技術中存在的問題，本發(fā)明的目的是提供一種快速有效、易于推廣應用的提高紫甘藍花青素含量的方法。
[0004]為了實現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明首先提供一種能夠有效提高紫甘藍花青素含量的方法，所述方法為:將紫甘藍種子用清水漂洗干凈，然后在20-30°C下浸泡于褪黑素溶液中12_24h，沖洗干凈后進行播種。
[0005]進一步地，所述褪黑素溶液的濃度為10 μ mol/L?1000 μ mol/Lo
[0006]作為優(yōu)選，所述褪黑素溶液的濃度為100 μ mol/L。
[0007]作為優(yōu)選，將紫甘藍種子在25°C下浸泡于褪黑素溶液中。
[0008]本發(fā)明還提供了褪黑素在提高紫甘藍花青素含量中的應用。
[0009]具體為，利用濃度為10 μ mol/L?1000 μ mol/L的褪黑素溶液浸泡紫甘藍種子，將種子沖洗干凈后進行播種。
[0010]作為優(yōu)選，所述褪黑素溶液的濃度為lOOymol/L。
[0011]甘藍長成幼苗后，取樣進行花青素含量測定，相對于未被褪黑素提前浸泡過的幼苗，褪黑素處理提高了紫甘藍幼苗的花青素含量。
[0012]本發(fā)明的有益效果在于:
[0013]本發(fā)明提供了一種新的促進紫甘藍花青素積累的方法，利用Ιθμπιο?/L?1000 μ mol/L的褪黑素溶液浸泡紫甘藍種子，可顯著提高紫甘藍幼苗的花青素含量。
【附圖說明】
[0014]圖1為本發(fā)明實施例1中褪黑素處理對出苗后的紫甘藍幼苗胚根及子葉顏色的影響。
[0015]圖2為本發(fā)明實施例1中出苗后的紫甘藍幼苗的花青素含量。
[0016]圖3為本發(fā)明實施例1中褪黑素對紫甘藍幼苗成株的影響；
[0017]其中:左邊植株為未被褪黑素處理過的紫甘藍幼苗；右邊植株為經(jīng)過100 ymol/L褪黑素前處理的甘藍幼苗。
[0018]圖4為本發(fā)明實施例1中褪黑素對紫甘藍幼苗生長發(fā)育各階段花青素含量的影響；
[0019]其中:CK植株為未被褪黑素處理過的紫甘藍幼苗；M100植株為經(jīng)過lOOymol/L褪黑素前處理的甘藍幼苗。
【具體實施方式】
[0020]以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。
[0021]實施例1
[0022]播種前將紫甘藍種子用清水漂洗干凈，然后于室溫條件下(25°C )在褪黑素溶液中浸泡24h ；
[0023]褪黑素溶液配制方法:稱取0.232g褪黑素粉末(購自sigma公司，純度為98% )，在1mL無水乙醇中徹底溶解，加水至1L，此時褪黑素溶液濃度為lOOOymol/L。根據(jù)需要的褪黑素溶液濃度進行稀釋，有效的褪黑素溶液濃度為10 ymol/L?1000 ymol/L。
[0024]本實施例設置4個濃度處理，分別為10ymol/L、100ymol/L、500 ymol/L、1000 μmol/Lo
[0025]將浸泡好的種子用清水沖洗干凈，播種。每個處理設置3個重復。以清水浸泡的甘藍種子未對照。幼苗出土后，觀察幼苗的顏色，取樣測定紫甘藍幼苗的花青素含量。
[0026]花青素測定米用pH差不法:
[0027]①稱取樣品0.lg，置于研缽中，加液氮研磨至粉末狀，置于2mL的離心管中備用。
[0028]②每種樣品準備六份，分為兩個小組，每個小組3次重復，分別加入2mL pH = 1.0的緩沖液(50mM KCl+150mM HCl)和 2mL pH = 4.5 的緩沖液(400mM 醋酸鈉 +240mM HCl)
[0029]③將混合物于4°C條件下，12，OOOg離心15min，吸取上清液并稀釋兩倍后，測定其在510nm處的OD值；
[0030]④按照下列公式計算樣品中的總花青素含量:
[0031]花青素含量(mg/g)= (Α510ρΗ1.0-Α510ρΗ4.5) X 484.8/24，825 X 稀釋倍數(shù)
[0032]其中常數(shù)484.8為花青素_3_葡萄糖苷氯化物的分子量，24，825為其在510nm處的摩爾吸光系數(shù)(ε )每個樣品總花青素含量取3次重復測量結果的平均值。
[0033]結果表明，褪黑素處理過的甘藍幼苗花青素含量得到了顯著提高。如圖1所示，經(jīng)過褪黑素溶液浸種的紫甘藍幼苗明顯比未被褪黑素處理過的幼苗顏色深，且測定幼苗中的花青素濃度也反映了相同的實驗規(guī)律，結果如圖2所示。其中促進效果最明顯的為100 μ mo I/L的褪黑素溶液濃度，將CK組的幼苗和M100處理的幼苗繼續(xù)進行栽培，分別在幼苗期、蓮座期和結球期取樣進行花青素含量的測定，發(fā)現(xiàn)在紫甘藍的生長發(fā)育過程中，100 ymol/L處理過的紫甘藍花青素含量抑制高于未被褪黑素處理過的植株如圖3和圖4所示。以上結果均說明褪黑素對種子的處理能夠提高紫甘藍的花青素合成。而花青素是目前公認的營養(yǎng)保健物質(zhì)，它是一種強氧化劑，能夠抵抗自由基傷害，延緩衰老。
[0034]雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實施方案對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎上，可以對之作一些修改或改進，這對本領域技術人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬于本發(fā)明要求保護的范圍。
【主權項】
1.一種提高紫甘藍花青素含量的方法，其特征在于，所述方法為將紫甘藍種子用清水漂洗干凈，然后在20-30°C下浸泡于褪黑素溶液中12-24h，沖洗干凈后進行播種。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述褪黑素溶液的濃度為10ymol/L?1000 μmol/Lo
3.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于，所述褪黑素溶液的濃度為100ymol/L。
4.根據(jù)權利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，將紫甘藍種子在25°C下浸泡于褪黑素溶液中。
5.褪黑素在提高紫甘藍花青素含量中的應用。
6.根據(jù)權利要求5所述的應用，其特征在于，利用濃度為10μ mo I/L?1000 μ mol/L的褪黑素溶液浸泡紫甘藍種子，將種子沖洗干凈后進行播種。
7.根據(jù)權利要求5所述的應用，其特征在于，所述褪黑素溶液的濃度為100ymol/L。
【專利摘要】本發(fā)明涉及農(nóng)作物培育，具體提供一種提高紫甘藍花青素含量的方法，將紫甘藍種子用清水漂洗干凈，然后在20-30℃下浸泡于褪黑素溶液中12-24h，沖洗干凈后進行播種。本發(fā)明提供了一種新的促進紫甘藍花青素積累的方法，利用10μmol/L～1000μmol/L的褪黑素溶液浸泡紫甘藍種子，可顯著提高紫甘藍幼苗的花青素含量。
【IPC分類】A01C1-00, A01N43-38, A01P21-00
【公開號】CN104686005
【申請?zhí)枴緾N201510058832
【發(fā)明人】郭仰東, 張娜, 齊艷, 曹蕓運, 張海軍, 李雙桃, 李虹霏, 孫倩倩, 張磊
【申請人】中國農(nóng)業(yè)大學
【公開日】2015年6月10日
【申請日】2015年2月4日