一種用于黃龍病防控的藥劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于黃龍病防控的藥劑，并采用樹干輸液的方法施藥。每100ml藥劑的主要構(gòu)成是：氨芐青霉素0.5?1克；環(huán)戊基哌嗪利福霉素，0.2?0.5克；穩(wěn)定劑：1,2? 丁二醇0.5?2mL；防凍劑：乙二醇，0.1?2 mL；新型助滲劑：氮酮，0.1?2 mL；分散劑：木質(zhì)素磺酸鈉，0.1?2克；乳化劑：十二烷基苯磺酸鈉，0.1?2克；助溶劑：DMSO，0.1?2 mL；其余：去離子水補(bǔ)充至100ml。本發(fā)明的組合物是根據(jù)黃龍病防控的客觀需要，通過(guò)利用兩種殺菌機(jī)制不同的殺菌劑進(jìn)行合理的混配，并采用樹干輸液的方法施藥，可使制劑優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，并具備高效、低毒、安全、經(jīng)濟(jì)、多功能的特性，可更好的防控黃龍病。
【專利說(shuō)明】
一種用于黃龍病防控的藥劑
技術(shù)領(lǐng)域
[000?]本發(fā)明涉及一種氨節(jié)青霉素殺菌劑與環(huán)戊基哌嗪利福霉素 Rifapentine殺菌劑的 組合物，并采用樹干輸液的方法施藥，用于黃龍病防控。
【背景技術(shù)】
[0002] 柑橘黃龍病是無(wú)法治愈的毀滅性病害，也是世界柑橘生產(chǎn)上最為嚴(yán)重的病害。柑 橘植株被侵染后，一般在染病2-3年后即失去商業(yè)價(jià)值。自發(fā)現(xiàn)以來(lái)，該病借助苗木嫁接調(diào) 運(yùn)和蟲媒介體-柑橘木虱迅速傳播，現(xiàn)已廣泛分布于東南亞、非洲、阿拉伯半島、印度、巴西 和美國(guó)佛羅里達(dá)和加利福利亞等50多個(gè)國(guó)家和地區(qū)。世界上已超1億株柑橘樹被黃龍病摧 毀。在我國(guó)有柑橘栽培的20個(gè)省(市，地區(qū)）中已有10多個(gè)主產(chǎn)省受到該病的嚴(yán)重危害。
[0003] 目前尚無(wú)任何可用的抗黃龍病的柑橘品種。但研究發(fā)現(xiàn):黃龍病的病原為韌皮部 桿菌屬細(xì)菌(Candidatus Liberibacter)。這種細(xì)菌對(duì)抗生素較為敏感。氨節(jié)青霉素鈉是一 種高效、低毒、應(yīng)用廣泛的半合成的廣譜青霉素，對(duì)多種病原細(xì)菌均有很好的抑制作用，其 分子中含有青霉烷、能破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁并在細(xì)菌細(xì)胞的繁殖期起殺菌作用。環(huán)戊基哌嗪 利福霉素為半合成廣譜殺菌劑，最低抑菌濃度低。該藥可與依賴DNA的RNA多聚酶的亞單位 牢固結(jié)合，抑制細(xì)菌RNA的合成，防止該酶與DNA連接，從而阻斷RNA轉(zhuǎn)錄過(guò)程，使DNA和蛋白 的合成停止。黃龍病的防控有其獨(dú)特性:如果只施用單一品種的殺菌劑雖然可以短時(shí)間降 低黃龍病濃度，但黃龍病菌會(huì)很快產(chǎn)生抗藥性，從而大大減弱殺菌劑的藥效。因此本發(fā)明的 兩種不同殺菌機(jī)制的殺菌劑協(xié)同混配使用方法對(duì)黃龍病的防控極為關(guān)鍵。
[0004] 傳統(tǒng)的殺菌劑外施方法，簡(jiǎn)單易行。但是柑橘黃龍病菌是一種比較特殊的病原菌， 其特異地寄生于柑橘的韌皮部，傳統(tǒng)的殺菌劑外施方法較難滲入柑橘外表皮，因此藥效較 差。而采用樹干輸液的方法施藥，可使藥劑直接進(jìn)入樹體，避開柑橘外表皮，到達(dá)病菌寄生 處，大大提高了藥劑的有效性，并具備安全、低污染的特性，可更好的防控黃龍病。
[0005] 根據(jù)檢索相關(guān)的研究及專利文獻(xiàn)，未見有氨芐青霉素殺菌劑與環(huán)戊基哌嗪利福霉 素混配加工成樹干注射劑的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于提供一種用于黃龍病防控的藥劑。
[0007] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案： 本發(fā)明公開了一種含有氨節(jié)青霉素殺菌劑與環(huán)戊基哌嗪利福霉素 Rifapentine殺菌劑 的組合物，并采用樹干輸液的方法施藥。每l〇〇ml藥劑的主要構(gòu)成是:氨芐青霉素0.5-1克； 環(huán)戊基哌嗪利福霉素，0.2-0.5克;穩(wěn)定劑：1，2- 丁二醇0.5-2mL;防凍劑：乙二醇，0.1-2 mL;新型助滲劑:氮酮，0.1-2 mL;分散劑:木質(zhì)素磺酸鈉，0.1-2克;乳化劑:十二烷基苯磺酸 鈉，0.1-2克;助溶劑:DMS0,0.1-2 mL;其余:去離子水補(bǔ)充至100ml。
[0008] 該藥劑采用樹干輸液的方法施藥。
[0009] 制備方法:稱取氨芐青霉素、環(huán)戊基哌嗪利福霉素、木質(zhì)素磺酸鈉、十二烷基苯磺 酸鈉原藥適量，一起加入到錐型混合機(jī)中混合2小時(shí)，將混合后的物料加入到氣流粉碎機(jī)中 進(jìn)行粉碎，粉碎后的物料再加入到錐型混合機(jī)中混合2小時(shí)，使用10目和60目的標(biāo)準(zhǔn)篩進(jìn)行 篩分，取兩篩中間的物料，加入適量去離子水充分?jǐn)嚢枞芙?，然后加入適量1，2-丁二醇、乙 二醇、氮酮、DMSO,充分?jǐn)嚢枞芙?，最后用去離子水調(diào)配至合適濃度，然后加入離心瓶， 12000g離心30分鐘，取上清液即制得藥劑。
[0010]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:本發(fā)明的組合物是根據(jù)黃龍病防控的客觀需要，通過(guò)利用兩 種不同殺菌機(jī)制的殺菌劑進(jìn)行合理的混配，并采用樹干輸液的方法施藥，可使制劑優(yōu)勢(shì)互 補(bǔ)，并具備高效、低毒、安全、經(jīng)濟(jì)、多功能的特性，可更好的防控黃龍病。
【具體實(shí)施方式】
[0011]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說(shuō)明： 實(shí)施例1. 2014年5月在廣東省廣州市白云區(qū)鐘落潭鎮(zhèn)柑橘場(chǎng)隨機(jī)選取40棵柑橘樹，進(jìn)行黃龍病 檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn):其黃龍病發(fā)病率為100%。試驗(yàn)設(shè)計(jì)遵循隨機(jī)選取原則，隨機(jī)選取10株作為 處理組，采用樹干輸液法，輸入藥劑(每l〇〇ml藥劑的主要構(gòu)成是氨芐青霉素1克;環(huán)戊基哌 嗪利福霉素，0.2克;穩(wěn)定劑：1，2- 丁二醇lmL;防凍劑：乙二醇，0.2 mL;新型助滲劑:氮酮， 0.5 mL;分散劑:木質(zhì)素磺酸鈉，0.5克;乳化劑:十二烷基苯磺酸鈉，0.5%克;助溶劑:DMS0， 0.5mL)，另隨機(jī)選取10株輸入清水做對(duì)照，從5月1日開始施藥，每月初施藥一次，每次施藥 300mL，共計(jì)輸液4次。施藥前采集柑橘葉片樣品，每個(gè)月取樣一次，采集的樣品提取DNA后進(jìn) 行實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法測(cè)定植株的黃龍病菌Ct值數(shù)量的變動(dòng)情況。 表1處理組柑橘中黃龍病菌CT值隨時(shí)間的變化
*注同列數(shù)據(jù)具有差異顯著（T-test) 表2柑橘樣品中黃龍病菌濃度*105 (病原菌個(gè)數(shù)/每克柑橘病樣）隨時(shí)間的變化
*注同列數(shù)據(jù)具有差異顯著（T-test) 結(jié)果發(fā)現(xiàn)處理組與對(duì)照組的黃龍病菌Ct值以及黃龍病菌濃度值在處理前無(wú)顯著差異 (P>0.05)，而兩組的Ct值在處理30天、60天、90天和120天后顯著增大(PS0.05)，以及病原 濃度值顯著降低(P<〇.05,結(jié)果見表1，表2)。表明輸液處理對(duì)抑制柑橘病樹的黃龍病菌濃 度有較好的作用。
[0012] 實(shí)施例2. 2014年4月在廣東省廣州市大豐柑橘基地隨機(jī)選取20棵柑橘樹，進(jìn)行黃龍病檢測(cè)，結(jié)果 發(fā)現(xiàn):其黃龍病發(fā)病率為100%。試驗(yàn)設(shè)計(jì)遵循隨機(jī)選取原則，隨機(jī)選取10株作為處理組，采 用樹干輸液法，輸入藥劑(每l〇〇ml藥劑的主要構(gòu)成是氨芐青霉素0.5克;環(huán)戊基哌嗪利福霉 素，0.5克;穩(wěn)定劑：1，2- 丁二醇0.5mL;新型助滲劑:氮酮，0.5 mL;分散劑:木質(zhì)素磺酸鈉， 〇. 5克;乳化劑:十二烷基苯磺酸鈉，0.5克;助溶劑:DMSO，1 mL)，另隨機(jī)選取10株輸入清水 做對(duì)照，從4月1日開始施藥，每月初施藥一次，每次施藥300mL，共計(jì)輸液4次。施藥前采集 兩組植株枝端的葉片樣品，每個(gè)月取樣一次，采集的樣品提取DNA后進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR 方法測(cè)定植株的黃龍病菌Ct值數(shù)量的變動(dòng)情況。
[0013]表3處理柑橘盆栽苗中黃龍病菌CT值隨時(shí)間的變化
*注同列數(shù)據(jù)具有差異顯著（T-test) 表4柑橘樣品中黃龍病菌濃度*104 (病原菌個(gè)數(shù)/每克柑橘病樣）隨時(shí)間的變化
*注同列數(shù)據(jù)具有差異顯著（T-test) 結(jié)果發(fā)現(xiàn)處理組與對(duì)照組的黃龍病菌CT值與黃龍病菌濃度值在處理前無(wú)顯著差異(P> 0.05)，而兩組的Ct值在處理30天、60天、90天和120天后顯著增大(P<0.05)，以及病原濃度 值顯著降低(P<〇.05,結(jié)果見表3,表4)。表明輸液處理對(duì)抑制柑橘病樹的黃龍病菌濃度有 較好的作用。
[0014]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡依本發(fā)明申請(qǐng)專利范圍所做的均等變化與 修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種用于黃龍病防控的藥劑，其特征在于:每l〇〇ml藥劑的主要組成為:氨芐青霉素 〇. 5-1克;環(huán)戊基哌嗪利福霉素0.2-0.5克;穩(wěn)定劑：1，2- 丁二醇0.5-2mL;防凍劑：乙二醇， 0.1-2 mL;新型助滲劑:氮酮，0.1-2 mL;分散劑:木質(zhì)素磺酸鈉，0.1-2克;乳化劑:十二烷基 苯磺酸鈉，〇. 1-2克;助溶劑:DMSO，0.1-2 mL;其余:去離子水補(bǔ)充至100ml。2. 如權(quán)利要求1所述的一種用于黃龍病防控的藥劑的制備方法，其特征在于:稱取氨芐 青霉素、環(huán)戊基哌嗪利福霉素、木質(zhì)素磺酸鈉、十二烷基苯磺酸鈉原藥適量，一起加入到錐 型混合機(jī)中混合2小時(shí)，將混合后的物料加入到氣流粉碎機(jī)中進(jìn)行粉碎，粉碎后的物料再加 入到錐型混合機(jī)中混合2小時(shí)，使用10目和60目的標(biāo)準(zhǔn)篩進(jìn)行篩分，取兩篩中間的物料，加 入適量去離子水充分?jǐn)嚢枞芙?，然后加?，2-丁二醇、乙二醇、氮酮、DMSO，充分?jǐn)嚢枞芙猓?最后用去離子水調(diào)配至合適濃度，然后加入離心瓶，12000g離心30分鐘，取上清液即制得藥 劑。
【文檔編號(hào)】A01N43/90GK106070262SQ201610459019
【公開日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年6月23日
【發(fā)明人】趙弘巍, 邱智濤
【申請(qǐng)人】南京農(nóng)業(yè)大學(xué)