專利名稱：弧菌數(shù)量快速檢測方法
技術領域：
本發(fā)明涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖技術領域，具體說可用于水體或其它水域環(huán)境保護和衛(wèi)生行業(yè)的弧菌監(jiān)測一種儀器。
背景技術：
弧菌是水產(chǎn)養(yǎng)殖中主要的細菌病原生物之一。它引起魚類的弧菌病，其主要癥狀是各鰭條出血發(fā)紅，肛門紅腫，軀干部皮膚褪色、糜爛或隆起。有的病魚體表現(xiàn)出血性潰瘍，腸道通常有充血，肝臟腫大呈土黃色，有出血斑。也包括溶藻弧菌、副溶血弧菌，感染大多數(shù)的養(yǎng)殖魚類，如虹鱒、鰻、香魚、五條鰤、大鱗大馬哈魚、銀大馬哈魚等，對紅鳉、美洲紅點鮭，鯽、銀鯽、鯉魚、烏鱧、斑馬魚、劍尾魚、扁鮫等也有威脅?；【≈饕餍杏跉W、日、美、中等，一旦流行，死亡率很高。鰻弧菌病是由鰻弧菌引起的一種細菌性魚病，主要危害我國南方養(yǎng)殖的鰻鱺，對北方的鮭、鱒魚也有一定的危害。在對蝦養(yǎng)殖業(yè)中，弧菌是最主要的細菌性病害，如對蝦紅腿病死亡率達到90％；褐斑病死亡不嚴重，但降低水產(chǎn)品品質(zhì)；對蝦熒光病(發(fā)熒光的弧菌)，高溫時僅數(shù)小時即可死亡；另外對蝦爛鰓病也以弧菌為主要病原，80年代以來，江蘇南部海域曾發(fā)生文蛤大量死亡，3～4于即死亡85％，為溶藻弧菌引起，而臺灣麗文蛤的病原菌是副溶血弧菌，總之，弧菌病一旦蔓延，就來勢猛烈，許多魚池尚來不及治菌，已死亡殆半。
由于弧菌對水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)有極大的危害，人們研究了各種殺滅弧菌的方法，如投喂口服或注射弧菌疫苗，在每立方米水中潑灑1克漂白粉殺滅水中的弧菌，或用三氯異氰尿酸、磺胺甲基嘧啶、土霉素也可抑制和消滅弧菌，但是到目前為止，人們還沒有預測該病流行的依據(jù)或方法，因此，以現(xiàn)該病流行的前兆是殺弧菌的關鍵，當前，檢測弧菌的常規(guī)方法是平板主數(shù)法，每次耗時3～5天，生產(chǎn)上難以使用；更先進的DNA探針技術目前尚未推廣，且只能進行定性分析。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供利用弧菌的生理特性及種群增長原理，在設定條件下，當弧菌生長到一定密度時，由于弧菌的生長速度與設定條件有密切的關系，通過反應時間可以反推接種弧菌的密度，達到檢測的目的一種弧菌數(shù)量快速檢測方法。
為完成上述的發(fā)明目的所采取的技術方案利用弧菌的生理特性及種群增長原理，本方法由五部分組成，首先經(jīng)控溫裝置，將生長溫度控制在10℃～38℃之間，最佳溫度25℃左右；第二步經(jīng)反應器接種培養(yǎng)，將鹽濃度設置在1％左右，生長PH值為6～10其最佳PH值為8左右；第三步通過傳感器監(jiān)測反應器的變化，由光電儀器自動控制出變化，當弧菌生長到一定密度時，可使專用的顯示色劑變色；第四步控制器是本方法的核心，決定反應終點，是利用弧菌的生長速度與設定條件之間的關系決定反應終點；第五步顯示器檢測弧菌數(shù)量，通過反應器反推出接種弧菌的密度時間，達到檢測目的進行殺菌。
本發(fā)明的優(yōu)點可在3～8小時內(nèi)檢出水中弧菌數(shù)量，根據(jù)弧菌生長情況弧菌數(shù)量進行殺滅細菌，正確率高效果好。


圖1為本發(fā)明流程圖；圖2為本發(fā)明檢測方法的裝置圖。
具體實施例方式在反應室的設定條件下，弧菌的生長模式是指數(shù)生長，弧菌生長的胞外產(chǎn)物可以改變培養(yǎng)條件，這種培養(yǎng)基條件的改變達到一定程度，可以使培養(yǎng)基中特定的指示劑變色，變色的臨界點與弧菌的接種密度有對應關系。本快速檢測方法由以下五個步驟來完成檢測結果，如圖1所示，首先經(jīng)控溫裝置，將生長溫度控制在10℃～38℃之間，最佳溫度25℃左右；第二步經(jīng)反應器接種培養(yǎng)，將鹽濃度設置在1％左右，生長PH值為6～10其最佳PH值為8左右；第三步通過傳感器監(jiān)測反應器的變化，由光電儀器自動控制出變化，當弧菌生長到一定密度時，可使專用的顯示色劑變色；第四步控制器是本方法的核心，決定反應終點，是利用弧菌的生長速度與設定條件之間的關系決定反應終點；第五步顯示器檢測弧菌數(shù)量，通過反應器反推出接種弧菌的密度時間，達到檢測目的進行殺菌。
監(jiān)測弧菌數(shù)量的裝置由圖2所示，整機由恒溫部分、檢測部分、記時部分、顯示部分及電源組成，電源220V供電連接恒溫部分，由加熱棒JRB經(jīng)溫控U15IC555電路控制；檢測部分由U14 ICLM139電壓比較器比較出控制信號，使三態(tài)門U13 IC74LS125開閉狀態(tài)，同時控制蜂鳴器U14啟動或停止；由U11 IC555電路組成的記時部分發(fā)出時鐘信號，經(jīng)U12 IC74LS393分頻到1秒方波信號，由方波信號經(jīng)IC74LS125傳遞給顯示部分；顯示部分由五只十進制運算單元U6～U10 IC74LS90和數(shù)字顯示單7五只U1～U5 IC74LS247和五只共陽極數(shù)碼管DS1～DS5組成，構成一個監(jiān)測弧菌數(shù)最快速檢測裝置。
權利要求
1.一種弧菌數(shù)量快速檢測方法，其特征在于整個快速檢測方法由五部分組成，首先經(jīng)控溫裝置，第二步經(jīng)反應器接種培養(yǎng)，第三步通過傳感器監(jiān)測反應器變化，第四步經(jīng)控制器決定反應終點，第五步顯示器顯示檢測弧菌數(shù)量。
2.根據(jù)權利要求1所述的弧菌數(shù)量決定快速檢方法，其特征在于控溫裝置將生長溫度控制在10℃～38℃，最佳25℃左右。
3.根據(jù)權利要求1所述的弧菌數(shù)量快速檢測方法，其特征在于反應器接種培養(yǎng)的鹽濃度在1％左右，生長PH值為6～10其最佳PH值為8左右。
4.根據(jù)權利要求1所述的弧菌數(shù)量快速檢測方法，其特征在于傳感器監(jiān)測反應器變化，是用光電儀器自動檢測出變化，當弧菌生長到一定密度時，可使專用的顯示色劑變色。
5.根據(jù)權利要求1所述的弧菌數(shù)量快速檢測方法，其特征在于控制器是利用弧菌的生長速度與設定條件之間的關系決定反應終點。
6.根據(jù)權利要求1所述的弧菌數(shù)量快速檢測方法，其特征在于顯示器顯示弧菌數(shù)量，是通過反應器反推出接種弧菌的密度時間，達到檢測目的進行殺菌。
全文摘要
一種弧菌數(shù)量快速檢測方法，其特征在于整個快速檢測方法由五部分組成，首先經(jīng)控制裝置，第二步經(jīng)反應器接種培養(yǎng)，第三步通過傳感器監(jiān)測反應器變化，第四步經(jīng)控制器決定反應終點，第五步顯示器顯示檢測弧菌數(shù)量。
文檔編號C12M1/36GK1425759SQ0114266
公開日2003年6月25日 申請日期2001年12月14日 優(yōu)先權日2001年12月14日
發(fā)明者袁峻峰 申請人:上海師范大學