專(zhuān)利名稱(chēng)：一種治療心腦血管病的注射用藥物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療心腦血管病的藥物及其制備方法，尤其涉及一種由燈盞花素和從黃芪中提取出的黃芪皂苷組成的治療心腦血管病的注射用藥物及其制備方法。
背景技術(shù)：
祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為，“氣為血之帥，血為氣之母”，氣行則血行，而血液運(yùn)行不暢也會(huì)影響到氣的生化運(yùn)行，故在治療相關(guān)疾病時(shí)，一般主張將補(bǔ)氣藥與活血藥配伍使用，以達(dá)到氣血同治的效果。
黃芪是一益氣固表、對(duì)心臟有保護(hù)作用、能提高機(jī)體免疫功能的傳統(tǒng)中藥。它主要含有皂苷、多糖，此外還含有氨基酸、黃酮等成分?，F(xiàn)代藥理及臨床研究表明黃芪皂苷是黃芪中主要的有效部位，其主要起效成分為其中的黃芪甲苷。黃芪皂苷可通過(guò)Na+、K+-ATP酶實(shí)現(xiàn)強(qiáng)心，具有正性肌力作用，擴(kuò)張血管，降低血壓，改善心肌收縮性能，增加冠脈流量，保護(hù)心肌，減輕心肌缺血再灌注損傷和抗心力衰竭、抗氧自由基、保護(hù)腦細(xì)胞、抗凝、改善微循環(huán)、抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡或壞死，保護(hù)半暗帶等作用。但現(xiàn)有的黃芪藥物，黃芪提取物中的雜質(zhì)含量多、黃芪皂苷純度低，一般低于30％，黃芪甲苷的含量也很低，約為0.04％，如成都地奧、上海福達(dá)等生產(chǎn)的黃芪注射液。由于工藝原因，一般采用水提多次醇沉法，而水提黃芪皂苷的提取率較低，且濾過(guò)比較困難，慢而易堵塞濾布，不易操作；醇沉?xí)r黃芪皂苷的損失也比較大，因而制劑中黃芪皂苷的純度低，其純度在30％以下。總之，現(xiàn)有的以黃芪提取物制得的藥物，由于提取物中黃芪皂苷的純度低、雜質(zhì)多，且黃芪皂苷中的主要起效成份黃芪甲苷的含量也很低，使得其療效差，補(bǔ)氣作用有待提高。
燈盞花素具有較好的活血化瘀作用，對(duì)改善腦血管循環(huán)、增加腦血流量有明顯的效果，是治療腦梗死的有效制劑，近年發(fā)現(xiàn)，燈盞花素對(duì)心血管亦有很好的擴(kuò)張作用，可降低外周阻力、減少心肌耗氧量、促進(jìn)側(cè)枝循環(huán)、抑制血小板凝集，對(duì)冠心病心絞痛有較好的療效。現(xiàn)有燈盞花素注射液具有較好的活血化瘀作用，但它無(wú)益氣作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是提供一種治療心腦血管病的注射用藥物，該注射用藥物具有很強(qiáng)的益氣行血作用、又能活血化瘀，氣血同治，療效高。
本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是一種治療心腦血管病的注射用藥物，它由燈盞花素和從黃芪中提取出的純度為80％以上的高純度黃芪皂苷兩種原料制成，且黃芪皂苷中，黃芪甲苷的含量在20％-30％。
本發(fā)明藥物所用原料的重量配比可以為從黃芪中提取出的純度為80％以上的高純度黃芪皂苷1份，燈盞花素0.1-10份。
本發(fā)明藥物所用原料的優(yōu)選配比為高純度黃芪皂苷1份，燈盞花素0.2-5份。更優(yōu)選的配比為高純度黃芪皂苷1份，燈盞花素0.5-2份。最佳配比則為高純度黃芪皂苷1份，燈盞花素1份。
本發(fā)明藥物的劑型可以是注射液、輸液、粉針、等注射給藥制劑劑型劑型。
所治的心腦血管病主要包括腦血栓、腦缺血、冠心病、心絞痛、心肌缺血、心衰、心律失常等。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是該注射用藥物含有燈盞花素和高純度黃芪皂苷，因此其益氣行血作用大大增強(qiáng)，又能活血化淤，氣血同治，產(chǎn)生協(xié)同作用。比由純度低，但總皂苷含量相同的黃芪皂苷和相同含量的燈盞花素制成的藥物，效果大大提高；同時(shí)，在高純度黃芪皂苷中，將水溶性差的主要有效成份黃芪甲苷含量控制在20％-30％的范圍內(nèi)，既使該制劑的療效，比低含量黃芪甲苷的制劑療效更高，也使制劑中不溶性微粒少，符合注射用藥要求，保證用藥安全。
本發(fā)明藥物的療效比同含量的低純度黃芪皂苷和同含量燈盞花素制成的藥物效果大大提高，可由以下藥理、藥效學(xué)試驗(yàn)證明一、黃芪皂苷使用純度的確定黃芪作為常用藥材，《中國(guó)藥典》規(guī)定了口服生藥量。黃芪經(jīng)提取分離純化，可以得到不同純度和含量的黃芪皂苷，其最佳純度沒(méi)有文獻(xiàn)報(bào)道，為確定在該處方中使用何純度的黃芪皂苷，進(jìn)行了純度篩選的藥理實(shí)驗(yàn)工作。篩選選用益氣實(shí)驗(yàn)的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。
實(shí)驗(yàn)材料
藥品黃芪皂苷提取物，純度20-80％。
動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，鼠齡8周，體重18～22g。
實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果取昆明種小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，每組10只。除正常對(duì)照組外，其余各組均采用饑餓法(按陳奇《中藥藥理研究方法學(xué)》小鼠氣虛模型方法)制備小鼠氣虛模型，同時(shí)按表1所示藥物和劑量尾靜脈注射給藥，正常對(duì)照組和氣虛模型組注射等容積生理鹽水，每天1次，連續(xù)給藥5天，各組末次給藥后30min，于25℃溫水中測(cè)各組小鼠負(fù)重(1/10體重)時(shí)的游泳時(shí)間(以動(dòng)物出現(xiàn)自然沉降10s不再浮起為限)，結(jié)果見(jiàn)表2表1給藥方案

表2不同純度的黃芪提取物對(duì)氣虛小鼠游泳時(shí)間的影響

(各給藥組均與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01給藥組間相互比較#P＜0.05)由表可見(jiàn)與正常對(duì)照組相比，氣虛模型組的游泳時(shí)間明顯縮短，表明造模成功；黃芪皂苷不同純度組對(duì)氣虛模型組小鼠的游泳時(shí)間均有延長(zhǎng)，并且呈純度正相關(guān)關(guān)系，純度為80％的實(shí)驗(yàn)組，明顯優(yōu)于純度為20％的實(shí)驗(yàn)組，P＜0.05，也優(yōu)于40％純度組。
二、高純度黃芪皂苷用量的確定純度80％或超過(guò)80％的黃芪皂苷，其使用量沒(méi)有文獻(xiàn)報(bào)道，為考察其用量是否科學(xué)，進(jìn)行了劑量確認(rèn)的藥理實(shí)驗(yàn)工作。篩選選用益氣實(shí)驗(yàn)的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。
實(shí)驗(yàn)材料藥品黃芪皂苷提取物，純度85％，濃度試驗(yàn)時(shí)將提取物配制成不同濃度使用。黃芪注射液，黑龍江省珍寶島制藥有限公司，批號(hào)20030106。
動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，鼠齡8周，體重18～22g。
實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果取昆明種小鼠70只，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，每組10只。除正常對(duì)照組外，其余各組均采用饑餓法(按陳奇《中藥藥理研究方法學(xué)》小鼠氣虛模型方法)制備小鼠氣虛模型，同時(shí)按表3所示藥物和劑量尾靜脈注射給藥，正常對(duì)照組和氣虛模型組注射等容積生理鹽水，每天1次，連續(xù)給藥5天，各組末次給藥后30min，于25℃溫水中測(cè)各組小鼠負(fù)重(1/10體重)時(shí)的游泳時(shí)間(以動(dòng)物出現(xiàn)自然沉降10s不再浮起為限)，結(jié)果見(jiàn)表4表3給藥方案

表4不同劑量的黃芪總皂苷對(duì)氣虛小鼠游泳時(shí)間的影響

(各給藥組均與模型組比較*＜0.05，**P＜0.01)由表可見(jiàn)與正常對(duì)照組相比，氣虛模型組的游泳時(shí)間明顯縮短，表明造模成功；黃芪提取物組3.33mg/kg以上劑量組對(duì)氣虛模型組小鼠的游泳時(shí)間顯著延長(zhǎng)(P＜0.01)，提示黃芪提取物組3.33mg/kg以上劑量組具有顯著補(bǔ)氣作用。折合人用劑量為0.16mg/kg以上時(shí)具有顯著的補(bǔ)氣作用，成人一日用量應(yīng)該在10mg左右。
三、燈盞花素用量的確定目前，燈盞花素上市銷(xiāo)售的制劑靜脈給藥的用量為5mg-20mg/日，參考有關(guān)文獻(xiàn)，10mg-20mg/日的劑量較為理想。為考察燈盞花素的最佳劑量和驗(yàn)證文獻(xiàn)報(bào)道的劑量，針對(duì)活血化瘀這一指標(biāo)，我們進(jìn)行了以下研究。
取昆明種小鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)時(shí)腹腔注射0.45％戊巴比妥鈉0.1ml/10g麻醉，然后將小鼠俯臥位固定在小鼠觀(guān)察臺(tái)上，滴加少許香柏油于耳廓表面，使耳廓平鋪于耳托上，置顯微鏡載物臺(tái)上。尾靜脈注射Adr10ml/kg(1mg/100ml)，同時(shí)按表所示藥物和劑量尾靜脈注射給藥一次，然后用40倍鏡觀(guān)察給藥前及給藥后5、15min耳廓微循環(huán)的微動(dòng)脈管徑和毛細(xì)血管開(kāi)放網(wǎng)點(diǎn)數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表5-表6。結(jié)果顯示，燈盞花素用1.67mg/kg以上有較好的效果，根據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)，人用劑量在8mg/日有效。
表5燈盞花素注射液對(duì)小鼠耳廓微循環(huán)微動(dòng)脈的影響

表6燈盞花素注射液對(duì)小鼠毛細(xì)血管開(kāi)放網(wǎng)點(diǎn)數(shù)的影響

四、高純度黃芪皂苷與燈盞花素的配比研究大鼠頸內(nèi)動(dòng)脈注射血栓局部腦缺血模型試驗(yàn)Wistar種大鼠80只，雌雄各半，體重200～250g，隨機(jī)分為8組，每組10只，按表7所示藥物和劑量尾靜脈注射給藥，1次/日，連續(xù)7天。末次給藥后30min，動(dòng)物用水合氯醛(350mg/kg)麻醉，固定后心臟取血，按文獻(xiàn)制備10個(gè)直徑0.35mm左右的淺紅色血栓；分離動(dòng)物左側(cè)頸總、頸內(nèi)及頸外動(dòng)脈，暫時(shí)動(dòng)脈夾夾閉頸總動(dòng)脈，從頸外動(dòng)脈距頸總動(dòng)脈分叉處約1cm處剪一小口，插管注入血栓，結(jié)扎頸外動(dòng)脈，恢復(fù)頸總動(dòng)脈供血，假手術(shù)組僅注入生理鹽水。此后于注入血栓24小時(shí)后將動(dòng)物斷頭處死取腦，稱(chēng)重，-20℃冰凍30分鐘后，切片，2％TTC溶液37℃染色15分，仔細(xì)剪下梗死區(qū)和非梗死區(qū)，分別稱(chēng)重，計(jì)算梗死區(qū)百分比。梗死區(qū)百分比＝梗死區(qū)重量÷腦總重×100％，結(jié)果見(jiàn)表8。
表7燈黃注射液配比篩選實(shí)驗(yàn)給藥方案

表8燈黃注射液對(duì)大鼠血栓性局部腦缺血模型梗塞區(qū)的影響

(模型組與假手術(shù)組比較△＜0.05，△△＜0.01各給藥組均與模型組比較*＜0.05，**P＜0.01給藥組間相互比較#P＜0.05))表8顯示，與假手術(shù)組相比，模型組大鼠注入血栓后梗死區(qū)面積有顯著性改變(P＜0.01)，表明造模成功。高純度黃芪皂苷及燈盞花素單獨(dú)使用均有一定的改善梗死區(qū)比例的作用，燈盞花素優(yōu)于高純度黃芪皂苷，但兩者無(wú)顯著性差異。高純度黃芪皂苷與燈盞花素合用，能夠顯著改善梗死區(qū)比例(P＜0.01)，從配比比例可知，二者1∶1的比例最佳，明顯優(yōu)于單用黃芪總皂苷組。
藥物法所致心肌缺血模型試驗(yàn)健康草犬70只，體重8.5～12.5kg，雌雄兼用，分為7組，每組10只。經(jīng)用戊巴比妥納30mg/kg靜脈麻醉，背位固定后用泰盟BL-420型生物機(jī)能信號(hào)系統(tǒng)按照標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)聯(lián)連接導(dǎo)線(xiàn)，按照表9所示藥物和劑量給藥。給藥15min后記錄一段正常II導(dǎo)聯(lián)ECG，然后iv垂體后葉素1u/kg，在給藥后15s、30s、1min、2min、3min、4min、5min、10min、15min、20min分別記錄II導(dǎo)聯(lián)ECG，并以其中任何一時(shí)間的T波或ST段升高0.1mv或下降0.05mv作為心肌缺血陽(yáng)性動(dòng)物數(shù)，試驗(yàn)結(jié)果用SPSS軟件作Fisher精確檢驗(yàn)進(jìn)行組間顯著性差異比較，結(jié)果見(jiàn)表10。
表9燈黃注射液配比篩選實(shí)驗(yàn)給藥方案

表10燈黃注射液對(duì)T波位移的影響

表10顯示，高純度黃芪皂苷及燈盞花素單獨(dú)使用均有顯著的改善藥物所致心肌缺血對(duì)心電圖影響的作用，高純度黃芪皂苷優(yōu)于燈盞花素，但兩者無(wú)顯著性差異。高純度黃芪皂苷與燈盞花素合用，能夠顯著改善T波位移(P＜0.01)，從配比比例可知，二者1∶1的比例最佳。
注射用藥物在心腦血管疾病用藥的給藥劑型中，靜脈給藥是適宜的劑型，“中國(guó)藥典2005版”規(guī)定，靜脈給藥制劑應(yīng)進(jìn)行可見(jiàn)異物，不溶性微粒，鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)等有關(guān)物質(zhì)，無(wú)菌，熱原或細(xì)菌內(nèi)毒素，制劑安全性檢查，并應(yīng)符合藥典相關(guān)要求。
在研究中，黃芪皂苷的純度及黃芪甲苷的含量是關(guān)鍵技術(shù)，黃芪皂苷的純度直接影響制劑的安全性特征。將不同純度的黃芪皂苷與燈盞花素組合后，平行進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。選用指標(biāo)為大鼠被動(dòng)皮膚過(guò)敏試驗(yàn)。
取體重150～200g的雄性大鼠30只，隨機(jī)分為10組，即陰性對(duì)照(0.9％氯化鈉注射液)組、陽(yáng)性對(duì)照(1％卵白蛋白)組和受試品(相應(yīng)的黃芪皂苷+燈盞花素組合物溶液)，每組3只。按組別各組大鼠分別注射上述藥物0.15ml于兩腿，同時(shí)腹腔注射百日咳疫苗0.1ml/只。14天后斷頭取血，分別收集3組抗血清，各組抗血清分別混勻，-20℃冷凍保存。
選取100只大鼠，鼠齡6～8周，體重150～200g，隨機(jī)分為10組，每組10只，雌雄各半，即0.9％氯化鈉注射液(1∶5稀釋)組、卵白蛋白(1∶5稀釋)組、20％黃芪皂苷+燈盞花素(1∶5稀釋)組，20％黃芪皂苷+燈盞花素(1∶10稀釋)組，40％黃芪皂苷+燈盞花素(1∶5稀釋)組，40％黃芪皂苷+燈盞花素(1∶10稀釋)組，60％黃芪皂苷+燈盞花素(1∶5稀釋)組，60％黃芪皂苷+燈盞花素(1∶10稀釋)組，80％黃芪皂苷+燈盞花素(1∶5稀釋)組，80％黃芪皂苷+燈盞花素(1∶10稀釋)組。取上述各藥抗血清用0.9％氯化鈉稀釋成不同稀釋度，按組別于各組每只大鼠腹壁皮內(nèi)注射兩點(diǎn)，每點(diǎn)0.03ml。
各組致敏48h后立即進(jìn)行抗原攻擊。即按組別尾靜脈注射0.9％氯化鈉注射液、1％卵白蛋白、相應(yīng)的黃芪皂苷+燈盞花素組合物溶液0.2ml/只，以上溶液均用0.5％伊文思藍(lán)-0.9％氯化鈉配制。30min后斷頭處死動(dòng)物，將藍(lán)色斑皮片剪下，剪碎，加入丙酮-生理鹽水(7∶3)混合液5ml，浸泡48h，離心，取上清液在波長(zhǎng)610nm處測(cè)吸收度，結(jié)果見(jiàn)表11。
表11大鼠被動(dòng)皮膚過(guò)敏試驗(yàn)結(jié)果

注各給藥組與0.9％氯化鈉注射液組比較*P＜0.05*P＜0.05***P＜0.001表11顯示，黃芪皂苷的純度與藍(lán)斑浸出液吸光度成負(fù)相關(guān)關(guān)系，表明純度越高，藥物導(dǎo)致發(fā)生過(guò)敏反映的程度越低。為了藥物制劑的安全性，應(yīng)選用高純度黃芪皂苷。
在黃芪皂苷中，含有至少5種黃芪皂苷的單體物質(zhì)，其中黃芪甲苷是最重要的一種，黃芪甲苷在水中的溶解性較差。因此，控制黃芪皂苷中黃芪甲苷的含量對(duì)該組合物能否制備為靜脈給藥制劑至關(guān)重要。研究中，將含不同含量黃芪甲苷的黃芪皂苷與燈盞花素配伍，進(jìn)行不溶物微粒的檢查，以確定黃芪甲苷的含量。
表12黃芪甲苷含量不同的80％高純度黃芪皂苷與燈盞花素配伍不溶性微粒及療效考察，藥效學(xué)選用大鼠頸內(nèi)動(dòng)脈注射血栓局部腦缺血模型試驗(yàn)進(jìn)行篩選，測(cè)定各組梗塞區(qū)的質(zhì)量百分比以及腦勻漿中酶學(xué)指標(biāo)的改變。

注藥效學(xué)研究各給藥組與模型組比較*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001表12顯示，黃芪皂苷中黃芪甲苷的含量與該注射用藥物的藥效溶解性密切相關(guān)，黃芪甲苷含量越高，療效越好，但溶解性越差；當(dāng)黃芪甲苷含量超過(guò)30％，不溶性微粒達(dá)不到藥典要求；含量低于20％，療效不理想，含量超過(guò)20％后，藥物療效增加不明顯，基本已達(dá)到最大的效能，故黃芪甲苷適宜的含量為20-30％總之，黃芪甲皂含量在20％-30％時(shí)，既使藥物的治療效果最好，又在制備注射劑時(shí)其可溶性最好，符合藥典要求，能夠直接有效地在注射入體內(nèi)，發(fā)揮作用。
本發(fā)明的另一目的是提供上述治療心腦血管病的注射用藥物的制備方法一種制備權(quán)利要求1所述的治療心腦血管病的注射用藥物的方法，其具體作法為(1)、從黃芪藥材中提取高純度黃芪皂苷a、醇提切制成2～3mm厚的斜片，加入3-5倍藥材量的60-80％乙醇，循環(huán)回流浸出提取4-6小時(shí)，浸出溫度為40～50℃，合并乙醇，得提取液；b、醇沉將a步的提取液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，再加入乙醇至含醇量為70-85％，靜置，濾過(guò)；濾液再次減壓回收乙醇至無(wú)醇味，再加入醇提時(shí)黃芪藥材重量0.5-2倍的水，冷藏靜置，濾過(guò)得濾液；c、超濾將b步的濾液用管式離心機(jī)進(jìn)行≥20000轉(zhuǎn)/分鐘的高速離心過(guò)濾，清液用截留分子量為6000-10000的超濾柱(膜)超濾；濃縮超濾液至比重為1.0～1.1的浸膏；d、萃取將c步的浸膏加入2-4％的Na2CO3，用水飽和正丁醇穿透萃取至無(wú)Liebermann反應(yīng)；e、吸附減壓濃縮正丁醇液至近干，加入適量碳酸鈣，攪拌均勻，以無(wú)明顯團(tuán)塊為度，得碳酸鈣吸附物；f洗滌將e步所得碳酸鈣吸附物用2-4倍量的丙酮-乙醚(1∶1)水浴回流3次，每次20-40分鐘，濾過(guò)；碳酸鈣吸附物用乙醇回流提取至無(wú)色，回收乙醇，并于50-70℃真空干燥，收集干燥固形物。
由本方法制備的黃芪皂苷純度不低于80％，并且黃芪皂苷也即總皂苷中黃芪甲苷的含量在20-30％。
(2)、制劑將燈盞花素和(1)步提取出的高純度黃芪皂苷均勻混合后，加入助劑、制劑，即得。
本發(fā)明的制備方法，其提取為60-80％乙醇提取，純化方法為醇沉、超濾、萃取、吸附、洗滌等。而現(xiàn)有的黃芪提取方法為水提醇沉，由于工藝過(guò)于簡(jiǎn)單，使得所得的提取物及相關(guān)制劑中黃酮、多糖等雜質(zhì)含量較多，黃芪皂苷純度均在30％以下；而本方法針對(duì)黃芪皂苷的物理化學(xué)性質(zhì)，設(shè)計(jì)的提取純化工藝1、經(jīng)過(guò)較低濃度醇提，比水提提出的雜質(zhì)少；2、較高濃度醇沉，能有效去除多糖等雜質(zhì)；3、超濾能有效去除大分子雜質(zhì)；4、萃取可去除低極性雜質(zhì)；5、吸附、洗滌以去除偏堿性雜質(zhì)。這些步驟尤其是超濾、萃取等關(guān)鍵步驟，最大限度地去除了各類(lèi)雜質(zhì)，使得提取物中黃芪皂苷的純度提高到80％以上，最高可達(dá)95％；同時(shí)避免了強(qiáng)堿處理，使得黃芪甲苷含量控制在20-30％范圍內(nèi)。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。
實(shí)施例一本例的具體作法為(1)、提取高純度黃芪皂苷a、醇提將黃芪藥材切制成2～3mm厚的斜片，加入4倍藥材量的70％乙醇，循環(huán)回流浸出提取5小時(shí)，浸出溫度為45℃，合并乙醇，得提取液。b、醇沉將a步的提取液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，再加入乙醇至含醇量為80％，靜置，濾過(guò)；濾液再次減壓回收乙醇至無(wú)醇味，再加入醇提時(shí)黃芪藥材重量2倍的水，冷藏靜置，濾過(guò)得濾液。c、超濾將b步的濾液用管式離心機(jī)進(jìn)行≥20000轉(zhuǎn)/分鐘的高速離心過(guò)濾，清液用截留分子量為6000-10000的超濾柱(膜)超濾；濃縮超濾液至比重為1.0～1.1的浸膏。d、萃取將c步的浸膏加入浸膏量3％的Na2CO3，用水飽和的正丁醇穿透萃取至無(wú)Liebermann反應(yīng)。e、吸附減壓濃縮正丁醇液至近干，加入碳酸鈣，攪拌均勻，碳酸鈣的加入量以無(wú)明顯團(tuán)塊為度，得碳酸鈣吸附物。f洗滌將e步所得碳酸鈣吸附物用3倍量的丙酮-乙醚(1∶1)水浴回流3次，每次30分鐘，濾過(guò)；碳酸鈣吸附物用乙醇回流提取至無(wú)色，回收乙醇，并于60℃真空干燥，收集干燥固形物，即制得純度為80％以上的高純度黃芪皂苷，其中黃芪甲苷的含量為22-25％。
(2)、制劑將1份重的燈盞花素和1份重的以上步驟提取出的80％以上的高純度黃芪皂苷均勻混合后，加入注射制劑用輔料、采用現(xiàn)有注射劑工藝進(jìn)行制劑，即得重量配比為高純度黃芪皂苷1份，燈盞花素1份的注射劑。
實(shí)施例二本例的具體作法為(1)、提取高純度黃芪皂苷a、醇提將黃芪藥材切制成2～3mm厚的斜片，加入5倍藥材量的80％乙醇，循環(huán)回流浸出提取6小時(shí)，浸出溫度為50℃，合并乙醇，得提取液；b、醇沉將a步的提取液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，再加入乙醇至含醇量為85％，靜置，濾過(guò)；濾液再次減壓回收乙醇至無(wú)醇味，再加入醇提時(shí)黃芪藥材重量2倍的水，冷藏靜置，濾過(guò)得濾液；c、超濾將b步的濾液用管式離心機(jī)進(jìn)行≥20000轉(zhuǎn)/分鐘的高速離心過(guò)濾，清液用截留分子量為6000-10000的超濾柱(膜)超濾；濃縮超濾液至比重為1.0～1.1的浸膏；d、萃取將c步的浸膏加入浸膏量4％的Na2CO3，用水飽和的正丁醇穿透萃取至無(wú)Liebermann反應(yīng)；e、吸附減壓濃縮正丁醇液至近干，加入碳酸鈣，攪拌均勻，碳酸鈣的加入量以無(wú)明顯團(tuán)塊為度，得碳酸鈣吸附物；f洗滌將e步所得碳酸鈣吸附物用4倍量的丙酮-乙醚(2∶1)水浴回流4次，每次40分鐘，濾過(guò)；碳酸鈣吸附物用乙醇回流提取至無(wú)色，回收乙醇，并于70℃真空干燥，收集干燥固形物，即制得純度為80％以上的高純度黃芪皂苷，其中黃芪甲苷的含量為20-26％。
(2)、制劑將1.5份重的燈盞花素和1份重的以上(1)步提取出的高純度黃芪皂苷均勻混合后，加入制備粉針制劑的常用輔料、采用現(xiàn)有粉針制劑工藝進(jìn)行制劑，即得重量配比為高純度黃芪皂苷1份，燈盞花素1.5份的粉針劑。
實(shí)施例三本例的具體作法為(1)、提取高純度黃芪皂苷a、醇提將黃芪藥材切制成2～3mm厚的斜片，加入3倍藥材量的60％乙醇，循環(huán)回流浸出提取4小時(shí)，浸出溫度為40℃，合并乙醇，得提取液；b、醇沉將a步的提取液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，再加入乙醇至含醇量為70％，靜置，濾過(guò)；濾液再次減壓回收乙醇至無(wú)醇味，再加入醇提時(shí)黃芪藥材重量0.5倍的水，冷藏靜置，濾過(guò)得濾液；c、超濾將b步的濾液用管式離心機(jī)進(jìn)行≥20000轉(zhuǎn)/分鐘的高速離心過(guò)濾，清液用截留分子量為6000-10000的超濾柱(膜)超濾；濃縮超濾液至比重為1.0～1.1的浸膏；d、萃取將c步的浸膏加入浸膏量2％的Na2CO3，用水飽和的正丁醇穿透萃取至無(wú)Liebermann反應(yīng)；e、吸附減壓濃縮正丁醇液至近干，加入碳酸鈣，攪拌均勻，碳酸鈣的加入量以無(wú)明顯團(tuán)塊為度，得碳酸鈣吸附物；f洗滌將e步所得碳酸鈣吸附物用2倍量的丙酮-乙醚(0.5∶1)水浴回流2次，每次20分鐘，濾過(guò)；碳酸鈣吸附物用乙醇回流提取至無(wú)色，回收乙醇，并于50℃真空干燥，收集干燥固形物，即制得純度為80％以上的高純度黃芪皂苷，其中黃芪甲苷的含量為24-30％。
(2)、制劑將5份重的燈盞花素和1份重的以上(1)步提取出的高純度黃芪皂苷均勻混合后，加入輸液的輔料、采用現(xiàn)有制劑工藝進(jìn)行制劑，即得重量配比為高純度黃芪皂苷1份，燈盞花素5份的輸液藥物。
實(shí)施例四本例的具體作法為(1)、提取高純度黃芪皂苷a、醇提將黃芪藥材切制成2～3mm厚的斜片，加入4倍藥材量的75％乙醇，循環(huán)回流浸出提取4.5小時(shí)，浸出溫度為50℃，合并乙醇，得提取液；b、醇沉將a步的提取液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，再加入乙醇至含醇量為75％，靜置，濾過(guò)；濾液再次減壓回收乙醇至無(wú)醇味，再加入醇提時(shí)黃芪藥材重量1.5倍的水，冷藏靜置，濾過(guò)得濾液；c、超濾將b步的濾液用管式離心機(jī)進(jìn)行≥20000轉(zhuǎn)/分鐘的高速離心過(guò)濾，清液用截留分子量為6000-10000的超濾柱(膜)超濾；濃縮超濾液至比重為1.0～1.1的浸膏；d、萃取將c步的浸膏加入浸膏量3.5％的Na2CO3，用水飽和的正丁醇穿透萃取至無(wú)Liebermann反應(yīng)；e、吸附減壓濃縮正丁醇液至近干，加入碳酸鈣，攪拌均勻，碳酸鈣的加入量以無(wú)明顯團(tuán)塊為度，得碳酸鈣吸附物；f洗滌將e步所得碳酸鈣吸附物用3倍量的丙酮-乙醚(1.5∶1)水浴回流3次，每次40分鐘，濾過(guò)；碳酸鈣吸附物用乙醇回流提取至無(wú)色，回收乙醇，并于65℃真空干燥，收集干燥固形物，即制得純度為80％以上的高純度黃芪皂苷，其中黃芪甲苷的含量為24-28％。
(2)、制劑將0.5份重的燈盞花素和1份重的以上(1)步提取出的高純度黃芪皂苷均勻混合后，加入輸液制劑輔料、采用現(xiàn)有輸液制劑工藝進(jìn)行制劑，即得重量配比為高純度黃芪皂苷1份，燈盞花素0.5份的輸液藥物。
實(shí)施例五本例的具體作法與實(shí)施例一基本相同，不同的僅僅是高純度黃芪皂苷和燈盞花素的重量配比為1∶0.2。
實(shí)施例六本例的具體作法與實(shí)施例一基本相同，不同的僅僅是高純度黃芪皂苷和燈盞花素的重量配比為1∶2。
實(shí)施例七本例的具體作法與實(shí)施例一基本相同，不同的僅僅是高純度黃芪皂苷和燈盞花素的重量配比為1∶0.1。
實(shí)施例八本例的具體作法與實(shí)施例一基本相同，不同的僅僅是高純度黃芪皂苷和燈盞花素的重量配比為1∶10。
實(shí)施例八本例的具體作法與實(shí)施例一基本相同，不同的僅僅是高純度黃芪皂苷和燈盞花素的重量配比為1∶4。
實(shí)施例九本例的具體作法與實(shí)施例一基本相同，不同的僅僅是高純度黃芪皂苷和燈盞花素的重量配比為1∶8。
顯然，本發(fā)明所指的高純度黃芪皂苷的純度為80％以上，包括80％這一端點(diǎn)值。
用本發(fā)明的方法從黃芪藥材中提取出的高純度黃芪皂苷的純度值，會(huì)因黃芪藥材的質(zhì)量不同而有所變化；但只要黃芪藥材的質(zhì)量符合中國(guó)藥典要求，提取出的高純度黃芪皂苷的純度即不低于80％，總皂苷中黃芪甲苷的含量也應(yīng)控制在20-30％。
權(quán)利要求
1.一種治療心腦血管病的注射用藥物，它由燈盞花素和從黃芪中提取出的純度為80％以上的高純度黃芪皂苷兩種原料制成，且高純度黃芪皂苷中黃芪甲苷的含量為20-30％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療心腦血管病的注射用藥物，其特征在于所述的兩種原料的重量配比為高純度黃芪皂苷1份，燈盞花素0.1-10份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的治療心腦血管病的注射用藥物，其特征在于所述的兩種原料的重量配比為高純度黃芪皂苷1份，燈盞花素0.2-5份。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的治療心腦血管病的注射用藥物，其特征在于所述的兩種原料的重量配比為高純度黃芪皂苷1份，燈盞花素0.5-2份。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的治療心腦血管病的注射用藥物，其特征在于所述的兩種原料的重量配比為高純度黃芪皂苷1份，燈盞花素1份。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4或5所述的治療心腦血管病的注射用藥物，其特征在于它的劑型可以是注射液、輸液、粉針。
7.一種制備權(quán)利要求1或2或3或4或5所述的治療心腦血管病的注射用藥物的方法，其具體作法為(1)、提取高純度黃芪皂苷a、醇提將黃芪藥材切制成2～3mm厚的斜片，加入3-5倍藥材量的60-80％乙醇，循環(huán)回流浸出提取4-6小時(shí)，浸出溫度為40～50℃，合并乙醇，得提取液；b、醇沉將a步的提取液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，再加入乙醇至含醇量為70-85％，靜置，濾過(guò)；濾液再次減壓回收乙醇至無(wú)醇味，再加入醇提時(shí)黃芪藥材重量0.5-2倍的水，冷藏靜置，濾過(guò)得濾液；c、超濾將b步的濾液用管式離心機(jī)進(jìn)行≥20000轉(zhuǎn)/分鐘的高速離心過(guò)濾，清液用截留分子量為6000-10000的超濾柱(膜)超濾；濃縮超濾液至比重為1.0～1.1的浸膏；d、萃取將c步的浸膏加入浸膏量2-4％的Na2CO3，用水飽和的正丁醇穿透萃取至無(wú)Liebermann反應(yīng)；e、吸附減壓濃縮正丁醇液至近干，加入碳酸鈣，攪拌均勻，碳酸鈣的加入量以無(wú)明顯團(tuán)塊為度，得碳酸鈣吸附物；f洗滌將e步所得碳酸鈣吸附物用2-4倍量的丙酮-乙醚(0.5-2∶1)水浴回流2-4次，每次20-40分鐘，濾過(guò)；碳酸鈣吸附物用乙醇回流提取至無(wú)色，回收乙醇，并于50-70℃真空干燥，收集干燥固形物，即制得純度為80％以上的高純度黃芪皂苷，且黃芪皂苷中黃芪甲苷的含量在20％-30％，(2)、制劑將燈盞花素和(1)步提取出的高純度黃芪皂苷按所述比例均勻混合后，制劑，即得。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種治療心腦血管病的注射用藥物及其制備方法，它由燈盞花素和從黃芪中提取出的純度為 80％以上的高純度黃芪皂苷兩種原料組成，且黃芪皂苷中黃芪甲苷的含量為20－30％。該注射用藥物具有很強(qiáng)的益氣行血作用，又能活血化淤、氣血同治，療效顯著提高，比由同含量的低純度黃芪皂苷和同含量的燈盞花素制成的藥物的效果大大提高，并且具有可靠的安全性。
文檔編號(hào)A61K36/481GK1839868SQ20061002023
公開(kāi)日2006年10月4日 申請(qǐng)日期2006年1月26日 優(yōu)先權(quán)日2006年1月26日
發(fā)明者陳謹(jǐn), 唐燦 申請(qǐng)人:成都和康藥業(yè)有限責(zé)任公司