本發(fā)明涉及抗抑郁藥物制備技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種乙酰化巴戟天水提物及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
巴戟天為藤狀灌木。根肉質(zhì)肥厚，圓柱形，不規(guī)則地斷續(xù)膨大，呈念珠狀。常規(guī)藥用功能為抗疲勞、增強免疫力、促進皮質(zhì)酮分泌、降壓和抗炎等作用。
現(xiàn)有技術(shù)報道了巴戟天水提液有抗抑郁作用(梁建輝，舒良，羅質(zhì)璞等.巴戟天水提物治療抑郁癥臨床療效初探.中國中藥雜志.2002.01.第27卷第1期),但該水提物活性差，其應(yīng)用受到了很大的限制，無法實現(xiàn)商業(yè)化生產(chǎn)和應(yīng)用。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種乙?；完焖嵛铩１景l(fā)明提供的乙?；完焖嵛锞哂锌挂钟艋钚愿?，能夠?qū)崿F(xiàn)乙酰化巴戟天水提物在抗抑郁藥物制備中的應(yīng)用。
本發(fā)明提供了一種乙酰化巴戟天水提物的制備方法，包括以下步驟：
取干燥的巴戟天水提物30g，與200ml乙酸酐和2g氨基磺酸混合，10～30℃反應(yīng)30min，將溫度升至60℃～90℃，反應(yīng)20min。
優(yōu)選的是，所述巴戟天水提物的提取方法為：以水為溶劑，對巴戟天進行回流提取。
優(yōu)選的是，反應(yīng)20min后，還包括濃縮、洗滌和干燥步驟。
優(yōu)選的是，所述濃縮為真空減壓濃縮。
優(yōu)選的是，所述洗滌采用乙酸乙酯進行洗滌。
本發(fā)明還提供了上述技術(shù)方案所述制備方法制備得到的乙?；完焖嵛?。
本發(fā)明還提供了上述技術(shù)方案所述制備方法制備得到的乙?；完焖嵛锘蛏鲜黾夹g(shù)方案所述乙?；完焖嵛镌谥苽淇挂钟羲幬镏械膽?yīng)用。
優(yōu)選的是，所述藥物的劑型包括固態(tài)粉劑。
優(yōu)選的是，所述藥物的服用方法包括水溶解后灌胃。
優(yōu)選的是，所述藥物的服用量為每天50～200mg/kg。
本發(fā)明提供了一種乙?；完焖嵛?。本發(fā)明提供的乙?；完焖嵛锞哂锌挂钟艋钚愿?，能夠?qū)崿F(xiàn)乙?；完焖嵛镌诳挂钟羲幬镏苽渲械膽?yīng)用。試驗結(jié)果表明，本發(fā)明提供的乙?；完焖嵛锟挂钟粜Ч@著，為抗抑郁藥物的制備提供了一種新的原料。
具體實施方式
本發(fā)明提供了一種乙?；完焖嵛锏闹苽浞椒ǎㄒ韵虏襟E：
取干燥的巴戟天水提物30g，與200ml乙酸酐和2g氨基磺酸混合，10～30℃反應(yīng)30min，將溫度升至60℃～90℃，反應(yīng)20min。
在本發(fā)明中，所述巴戟天水提物的制備方法為：以水為溶劑，對巴戟天進行回流提取。本發(fā)明對所述回流提取的具體參數(shù)沒有特殊的限定，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的回流提取操作即可，具體的，在本發(fā)明中，所述巴戟天與水的料液比優(yōu)選為1：10，每100g巴戟天的提取時間優(yōu)選為1.5～3h，更優(yōu)選為2h。本發(fā)明對巴戟天的來源沒有特殊的限定，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的市售巴戟天即可。
本發(fā)明得到巴戟天水提物后，優(yōu)選將巴戟天水提物進行濃縮、純化和干燥。本發(fā)明對所述濃縮、純化和干燥的方式?jīng)]有特殊的限定，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的巴戟天水提物濃縮、干燥的常規(guī)方法即可，如采用常規(guī)濃縮和干燥方法將巴戟天水提物干燥至粉狀。
得到干燥的巴戟天水提物后，本發(fā)明取干燥的巴戟天水提物30g，與200ml乙酸酐和2g氨基磺酸混合，10～30℃，更優(yōu)選為20～25℃。反應(yīng)30min，將溫度升至60℃～90℃，更優(yōu)選為80℃，反應(yīng)20min。本發(fā)明對所述乙酸酐和氨基磺酸的來源沒有特殊的限定，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的乙酸酐和氨基磺酸的常規(guī)市售產(chǎn)品即可。
反應(yīng)20min后，本發(fā)明優(yōu)選還包括濃縮、洗滌和干燥步驟。在本發(fā)明中，所述濃縮優(yōu)選為真空減壓濃縮。本發(fā)明對所述真空減壓濃縮的條件沒有特殊的限定，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的真空減壓濃縮操作條件即可。
在本發(fā)明中，所述洗滌優(yōu)選采用乙酸乙酯進行洗滌。本發(fā)明對所述洗滌的條件沒有特殊的限定，具體采用200ml乙酸乙酯分次進行洗滌。本發(fā)明所述洗滌的次數(shù)優(yōu)選為2～3次。在本發(fā)明中，所述洗滌能夠增加提取量。本發(fā)明所述干燥優(yōu)選采用水浴加熱干燥的方法，更優(yōu)選采用100℃的水進行加熱，將乙酸乙酯蒸發(fā)。
本發(fā)明還提供了上述技術(shù)方案所述制備方法制備得到的乙?；完焖嵛铩?/p>
本發(fā)明還提供了上述技術(shù)方案所述乙?；完焖嵛锘蛏鲜黾夹g(shù)方案所述制備方法制備得到的乙酰化巴戟天水提物在制備抗抑郁藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明對所述藥物的劑型沒有特殊的限定，在本發(fā)明中，所述藥物的劑型優(yōu)選包括固態(tài)粉劑。在本發(fā)明中，所述藥物的服用方法包括水溶解后灌胃。在本發(fā)明中，所述藥物的服用量為每天50～200mg/kg。
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明提供的一種乙?；完焖嵛锛捌渲苽浞椒ê蛻?yīng)用做進一步詳細的介紹，本發(fā)明的技術(shù)方案包括但不限于以下實施例。
實施例1
取干燥的巴戟天水提物30g，與200ml乙酸酐和2g氨基磺酸混合，15℃反應(yīng)30min，將溫度升至90℃，反應(yīng)20min，濃縮干燥。
實施例2
取干燥的巴戟天水提物30g，與200ml乙酸酐和2g氨基磺酸混合，25℃反應(yīng)30min，將溫度升至60℃，反應(yīng)20min，濃縮干燥。
實施例3
取干燥的巴戟天水提物30g，與200ml乙酸酐和2g氨基磺酸混合，30℃反應(yīng)30min，將溫度升至75℃，反應(yīng)20min，濃縮干燥。
實施例4
實施例4采用的是實施例1制備的乙酰化巴戟天水提物。
一、毒性實驗
乙?；完焖嵛飭未涡∈蠊辔附o藥量為5g/kg，未見死亡及異常變化，說明乙?；完焖嵛锒靖弊饔玫汀?/p>
二、行為學(xué)實驗
1、動物分組
實驗小鼠40只，按體重隨機分為5組，分別為正常對照組(生理鹽水)，氟西汀組(10mg·kg-1)，乙?；完焖嵛?50，100，200mg·kg-1組)，每組8只。
2、小鼠強迫游泳實驗
小鼠于實驗前l(fā)天進行6min游泳適應(yīng)。正式實驗將小鼠置于水深30cm，水溫(25±2)℃的透明圓柱形游泳筒中，觀察6min，記錄后4min內(nèi)的不動時間。
3、小鼠懸尾實驗
第8天給藥后lh將小鼠尾部1～2cm處部分貼在一水平木棍上，使動物成倒掛狀態(tài)，其頭部離臺面約20cm，懸掛兩側(cè)用板隔開動物視線。觀察6min，并記錄后4min內(nèi)小鼠的不動時間。
4、開場實驗
采用底面為正方形的敞箱，長100cm，寬100cm，高50cm，底面用黑線分為9面積相近的正方形。實驗時將大鼠放在敞箱正中心，以大鼠5min內(nèi)水平運動越格數(shù)(至少3爪跨過邊界)評價其運動性；以垂直運動直立次數(shù)(兩前爪離開地面)評價其探究性。通過比較乙?；完焖嵛锝o藥組給藥前后自主運動變化情況來考察乙?；完焖嵛锸欠裼凶灾髋d奮作用，同時以給予生理鹽水的空白組和給予陽性對照藥鹽酸氟西汀的陽性對照組來進行隨行對照。
實驗過程
給藥前通過觀察大鼠在敞箱內(nèi)的活動，記錄5min內(nèi)水平運動越格數(shù)以及垂直運動直立的次數(shù)；在給藥7天后，觀察大鼠在敞箱內(nèi)的活動，記錄5min內(nèi)水平運動越格數(shù)以及垂直運動直立的次數(shù)。將各組實驗數(shù)據(jù)用spss統(tǒng)計軟件進行處理，水平運動變化率和垂直運動變化率。
計算方法如下:
水平運動變化率＝(給藥7天后水平運動越格數(shù)一給藥前水平運動越格數(shù))/給藥前水平運動越格數(shù)×100％
垂直運動變化率＝(給藥7天后垂直運動越格數(shù)一給藥前垂直運動越格數(shù))/給藥前垂直運動越格數(shù)×100％
將各組實驗數(shù)據(jù)進行t檢驗，考察其是否存在顯著性差異。
三、機制研究
利血平拮抗實驗
另取小鼠40只，按體重隨機分為5組，分別為正常對照組(生理鹽水)，氟西汀組(10mg·kg-1)，乙酰化巴戟天水提物(50，100，200mg·kg-1組)，每組8只。同時灌胃給予利血平片0.于第8天給藥1h后，利血平4mg·kg-1ip，1h后將動物放在直徑7.5cm的圓形白紙中央，觀察15s，比較各組小鼠仍然呆在圈內(nèi)的個數(shù)。4h后將溫度計探頭輕輕插入動物肛門l～2cm處，測定動物體溫，比較各組體溫。
四、實驗結(jié)果
1、小鼠強迫游泳實驗
實驗結(jié)果見表1，由結(jié)果可知，與空白對照組比較，乙酰化巴戟天水提物各劑量組小鼠的強迫游泳不動狀態(tài)持續(xù)時間明顯減少，其中，中、高劑量組降低小鼠的強迫游泳不動狀態(tài)持續(xù)時間明顯(p＜0.01)。
表1乙?；完焖嵛飳π∈髲娖扔斡静粍訝顟B(tài)持續(xù)時間的影響(
與正常對照組比較，*p＜0.05，**p＜0.01
2、小鼠懸尾實驗
實驗結(jié)果見表2，由結(jié)果可知，與空白對照組比較，乙酰化巴戟天水提物各劑量組小鼠的懸尾不動狀態(tài)持續(xù)時間明顯減少，其中中、高劑量組降低小鼠的懸尾不動狀態(tài)持續(xù)時間明顯(p＜0.01)。
表2乙?；完焖嵛飳π∈髴椅膊粍訝顟B(tài)持續(xù)時間的影響(
與正常對照組比較，*p＜0.05，**p＜0.01
3組合物對開場實驗中小鼠自主活動的影響
運用spss軟件，進行t檢驗，乙?；完焖嵛锝M水平運動和垂直運動與空白組相比均無顯著性差異(p>0.05)，和陽性對照藥鹽酸氟西汀組一樣，表明在給予巴戟天衍生物后對中樞神經(jīng)系統(tǒng)無自主興奮作用。
表3乙酰化巴戟天水提物對開場實驗小鼠平行移動格數(shù)和直立次數(shù)的影響(
與正常對照組比較，*p＜0.05，**p＜0.01
4、對利血平拮抗小鼠模型的影響
與模型組比較，氟西汀和乙?；完焖嵛?50，100，200mg·kg-1組)均能顯著改善利血平誘導(dǎo)的體溫下降(p<0.05-0.01)，對利血平誘導(dǎo)的運動不能也有一定的拮抗作用，并呈現(xiàn)出一定的劑量依賴性，見表4。
表4乙?；完焖嵛飳睫卓剐∈竽Ｐ腕w溫和運動不能的影響(
與正常對照組比較，*p＜0.05，**p＜0.01。
以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護范圍。