本發(fā)明涉及食品保健，具體涉及亞麻酸在制備抗幽門螺桿菌產品中的用途。

背景技術：

1、作為最常見的致病細菌之一，幽門螺桿菌(helicobacter?pylori，hp)在人群中的感染率極高為50％左右。幽門螺桿菌初期感染會引起口臭、反酸，進一步可以發(fā)展為胃炎、消化性潰瘍、胃粘膜相關淋巴組織淋巴瘤(malt)和胃癌等胃腸道疾病，自1994年以來，who屬下的國際癌癥研究機構將幽門螺桿菌列為胃癌的i類致癌原。

2、目前，臨床上常用的針對幽門螺桿菌感染的治療方案是四聯(lián)療法，即聯(lián)合使用一種質子泵抑制劑、兩種抗生素以及一種鉍劑對幽門螺桿菌進行治療。其中，常用的抗生素包括阿莫西林、甲硝唑、克拉霉素和左氧氟沙星等。

3、然而，隨著抗生素的長期廣泛使用，幽門螺桿菌對抗生素的耐藥性逐漸增加，導致相關方法對幽門螺桿菌的治療效果大幅下降，而且，抗生素的使用，還會引起胃腸道功能紊亂、菌群失調等現(xiàn)象。

4、因此，尋找新的治療幽門螺桿菌感染的替代療法尤為重要。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明目的是提供一種新的治療幽門螺桿菌感染的替代療法。通過體外實驗以及分子對接亞麻酸具有較好的抗幽門螺桿菌感染的作用。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術方案為：提供亞麻酸在制備抗幽門螺桿菌產品中的用途。

3、在一種可選的實施方式中，所述用途包括在制備治療或預防幽門螺桿菌感染的產品中的用途。

4、在一種可選的實施方式中，所述用途包括在制備滅殺幽門螺桿菌產品中的用途。

5、在一種可選的實施方式中，所述用途包括在制備抑制幽門螺桿菌脲酶活性產品中的用途。

6、在一種可選的實施方式中，所述的亞麻酸包括：亞麻酸粉、亞麻酸微囊粉、亞麻酸提取物、亞麻酸油乳化液。

7、在一種可選的實施方式中，所述亞麻酸粉為高含量亞麻酸粉。

8、在一種可選的實施方式中，所述亞麻酸微囊粉為紫蘇籽油微囊粉、亞麻籽油微囊粉、沙棘果油微囊粉、牡丹籽油微囊粉、水飛薊籽油微囊粉、火麻仁油微囊粉中的一種或若干種。

9、在一種可選的實施方式中，所述亞麻酸提取物為紫蘇籽提取物、亞麻籽提取物、沙棘提取物、牡丹籽提取物、火麻仁提取物中的一種或若干種。

10、在一種可選的實施方式中，所述亞麻酸油乳化液為亞麻酸乙酯乳化液、亞油酸乳化液、紫蘇籽油乳化液、亞麻籽油乳化液、沙棘果油乳化液、牡丹籽油乳化液、水飛薊籽油乳化液、火麻仁油乳化液中的一種或若干種。

11、在一種可選的實施方式中，所述成分還包括鋅制劑，所述鋅制劑為酵母鋅粉、螯合鋅粉、乳酸鋅粉、氧化鋅粉、蛋白鋅粉、檸檬酸鋅、葡萄糖酸鋅中的一種或多種。

12、在一種可選的實施方式中，所述產品包括壓片糖果、軟/硬膠囊劑、固體飲料、牙膏。

13、亞麻酸是從含有亞麻酸植物中的提取物，具有活性。本發(fā)明公開了亞麻酸對幽門螺桿菌具有很好的抑制作用，并且通過體外實驗以及分子對接技術驗證，可將其用作抗幽門螺桿菌感染的有效物質，因此，本發(fā)明為幽門螺桿菌感染的治療提供了一種新的替代療法。

14、為進一步闡述本發(fā)明為達成預定發(fā)明目的所采取的技術手段及結果，以下以較佳實施例，對依據(jù)本發(fā)明的具體實施方式、技術方案及特征，詳細說明如后。下述說明中的多個實施例中的特定特征、結構、或特點可由任何合適形式組合。

15、實施例中未注明具體實驗步驟或條件者，按照本領域內的文獻所描述的常規(guī)實驗步驟的操作或條件即可進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為可以通過市購獲得的常規(guī)試劑產品。

16、以下結合具體實施例對本發(fā)明作進一步詳細描述，這些實施例不能理解為限制本發(fā)明所要求保護的范圍。

17、實施例1。

18、本實施例用于驗證亞麻酸對幽門螺桿菌的體外滅殺作用。

19、本實施例中，以幽門螺桿菌菌株hp43504(來源：購自商城北納創(chuàng)聯(lián)生物科技有限公司)作為實驗菌株，以乙酰氧肟酸(aha)為陽性對照。實驗中，aha的母液為利用pbs溶解的濃度為160mm的aha溶液，aha在培養(yǎng)基中的濃度為160μm；亞麻酸的母液為利用100％dmso溶解的濃度為160mm的亞麻酸溶液，亞麻酸在培養(yǎng)基中的濃度為160μm；實驗開始時，hp43504菌液的起始濃度為2.4×107cfu/ml，每孔2ml。

20、本實施例中涉及的實驗組如下所示。

21、aha組：含160μm?aha的布氏肉湯培養(yǎng)基+hp43504菌液。

22、nc組(aha組的對照組)：正常布氏肉湯培養(yǎng)基+hp43504菌液。

23、亞麻酸組：含160μm?亞麻酸的布氏肉湯培養(yǎng)基+hp43504菌液。

24、0.1％dmso組(亞麻酸組的對照組)：含0.1％dmso的布氏肉湯培養(yǎng)基+hp43504菌液。

25、加液完成后，各實驗組均在孵育24、32h后于600nm處測定吸光度值(od)，并分別計算aha和亞麻酸對hp43504菌株的抑制率，計算公式為。

26、幽門螺桿菌抑制率(％)=(od對照組-od處理組)/od對照組×100％。

27、在上式中，當處理組為aha組時，對照組為nc組，當處理組為亞麻酸組時，對照組為0.1％dmso組。結果如下。

28、在相同濃度下，亞麻酸表現(xiàn)出比化合物aha更強的幽門螺桿菌滅菌活性，且滅菌率隨時間的增加而增加，在32h時滅菌率達96.6％。

29、實施例2。

30、本實施例用于驗證亞麻酸對幽門螺桿菌脲酶活性的抑制作用。

31、本實施例中，以aha為陽性對照。aha的母液為利用pbs溶解的濃度為320mm的aha溶液，并依次稀釋為濃度為5μm、10μm、20μm、40μm、80μm、160μm、320μm的系列濃度溶液。亞麻酸的母液為利用100％dmso溶解的濃度為320mm的亞麻酸溶液，并依次稀釋為濃度為5μm、10μm、20μm、40μm、80μm、160μm、320μm的系列濃度溶液。幽門螺桿菌脲酶溶液(利用hp43504菌株培養(yǎng)并提取得到)的濃度為2u/ml，尿素溶液的濃度為20mm。

32、本實施例中涉及的實驗組如下所示。

33、空白組：幽門螺桿菌脲酶溶液40μl+0.1％dmso?40μl+尿素溶液40μl+顯色液80μl。

34、亞麻酸組(共7組)：幽門螺桿菌脲酶溶液40μl+系列濃度的亞麻酸溶液40μl+尿素溶液40μl+顯色液80μl。

35、aha組(共7組)：幽門螺桿菌脲酶溶液40μl+系列濃度的aha溶液40μl+尿素溶液40μl+顯色液80μl。

36、背景組1：pbs40μl+0.1％dmso40μl+尿素溶液40μl+顯色液80μl。

37、背景組2：pbs40μl+亞麻酸溶液40μl+尿素溶液40μl+顯色液80μl。

38、各實驗組按照上述配置加液(尿素溶液、顯色液除外)，加液完成后，先置于37℃條件下避光孵育20min，然后在室溫下加入尿素溶液，避光反應20min，再加入顯色液并避光顯色10min。顯色反應結束后吸取200μl孵育液至96孔板上，通過酶標儀測定630nm下的吸光度絕對值(od)。

39、并計算各亞麻酸組和aha組的殘余脲酶活性，計算公式如下。

40、殘余脲酶活性(％)=(od處理組-od背景組2)/(od空白組-od背景組1)×100％。

41、在上式中，處理組為系列濃度的各亞麻酸組或者aha組。

42、亞麻酸和陽性對照aha均對幽門螺桿菌脲酶的酶活性具有抑制作用，且抑制效果隨著亞麻酸濃度的增加而增強，呈現(xiàn)明顯的劑量依賴效應。

43、運用spss軟件分別計算亞麻酸和aha對幽門螺桿菌脲酶活性的半數(shù)抑制濃度ic50。計算結果顯示亞麻酸對幽門螺桿菌脲酶活性有較高的抑制能力(ic50為35.66μm)，高于陽性對照aha(ic50為94.72μm)，顯示出良好的應用價值。

44、實施例3。

45、本實施例用于說明亞麻酸與幽門螺桿菌脲酶的分子對接機制。

46、從pdb數(shù)據(jù)庫下載幽門螺桿菌脲酶的晶體結構6zja(解析度為)，依據(jù)其催化機理和活性位點進行加氫去水等相應的處理。亞麻酸采用ligprep模塊進行質子化預測以及3d結構轉換。使用schrodinger2021-3軟件中的glide模塊進行6zja/亞麻酸的分子對接研究。

47、亞麻酸與幽門螺桿菌脲酶的結合打分為7.230，亞麻酸結合在6zja活性口袋，可以與脲酶蛋白上的asn-168、asp-165、asp-223、gln-222、arg-338氨基酸殘基形成距離為2.2、2.3、2.5、2.6、2.4、的氫鍵作用，還和his-221氨基酸殘基形成距離為的pi-pi作用，這些氨基酸殘基對脲酶的催化活性有重要影響，亞麻酸與這些氨基酸殘基結合后能夠有效抑制脲酶的催化活性。

48、以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實施方式；但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此。任何熟悉本技術領域的技術人員在本發(fā)明揭露的技術范圍內，根據(jù)本發(fā)明的技術方案及其改進構思加以等同替換或改變，都應涵蓋在本發(fā)明的保護范圍內。