一種含有丹參酚酸b和丹參素的藥物組合物及其制藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種含有丹參酚酸B和丹參素用于治療腎臟疾病 的藥物組合物及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 丹參酚酸B是三分子丹參素和一分子咖啡酸的縮合物，是一種縮酚酸類多羥基化 合物，淡黃色無定形粉末，分子式C36H30016。具有改善腎功能，防治心血管疾病，抗缺血損 傷，具有肝損傷保護(hù)作用，抗凝血和抗血栓，抗炎，改善腎功能等多種藥理作用。
[0003] 丹參素，白色針狀結(jié)晶，分子式C9H1005。具有抗凝、抗氧化作用，還具有改善心臟 功能，擴(kuò)張冠狀動脈作用。
[0004] 丹參酚酸A為無定形黃色粉末，是丹參中酚性酸的主要成分，為迷迭香酸衍生物， 分子式C26H22010。具有抗凝和抗血小板聚集作用，對于氧自由基誘導(dǎo)的心臟線粒體和肝線 粒體損傷具有保護(hù)作用，抑制脂質(zhì)過氧化作用，抗?jié)兒涂鼓[瘤作用。
[0005] 目前，已有報道丹參素和丹參酚酸B對腎臟疾病有一定的治療作用，但未見兩種 成分以固定投藥量組合用于治療腎臟病及其他疾病的報道，更未見到以丹參素、丹參酚酸B 和丹參酚酸A組合治療腎臟疾病的報道。本發(fā)明通過將兩種或兩種以上的成分進(jìn)行組合， 并進(jìn)行試驗(yàn)研究，得出在一定劑量范圍內(nèi)，能取得更優(yōu)的治療效果，從而為臨床治療腎臟疾 病提供了新的藥物和方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 經(jīng)過大量試驗(yàn)研究證實(shí)，本發(fā)明公開的藥物組合物能有效治療腎臟病、高血壓腎 病、腎病綜合征、肝病等。
[0007] 本發(fā)明組合物含有丹參酚酸B1-30份、丹參素1-30份。還可含有丹參酚酸A0. 5-5 份。
[0008] 本發(fā)明組合物成分可以是從丹參中提取得到，也可以通過化學(xué)合成得到。
[0009] 本發(fā)明藥物組成優(yōu)選：
[0010] 1.丹參酚酸Blmg、丹參素30mg。
[0011] 2.丹參酚酸B30mg、丹參素 lmg。
[0012] 3.丹參酚酸B15mg、丹參素15mg。
[0013] 4.丹參酚酸Blmg、丹參素30mg、丹參酚酸AO. 5mg。
[0014] 5.丹參酚酸B30mg、丹參素 lmg、丹參酚酸A5mg。
[0015] 6.丹參酚酸B15mg、丹參素15mg、丹參酚酸A3mg。
[0016] 本發(fā)明組合物可采用本領(lǐng)域常用技術(shù)手段將本發(fā)明藥物組合物制成任何一種臨 床所需劑型，可以制成液體、氣體、固體或半固體形式的制劑，優(yōu)選注射劑、片劑、顆粒劑、膠 囊劑、丸劑或沖劑。
[0017] 對本發(fā)明通過6組組合物與丹參酚酸B、丹參素和丹參酚酸A比較開展試驗(yàn)研究， 具體組合物如下：
[0018] 組合物一：丹參酚酸Blmg、丹參素30mg。
[0019] 組合物二：丹參酚酸B30mg、丹參素 lmg。
[0020] 組合物三：丹參酚酸B15mg、丹參素15mg。
[0021] 組合物四：丹參酚酸Blmg、丹參素30mg、丹參酚酸AO. 5mg。
[0022] 組合物五：丹參酚酸B30mg、丹參素 lmg、丹參酚酸A5mg。
[0023] 組合物六：丹參酚酸B15mg、丹參素15mg、丹參酚酸A3mg。
[0024] 實(shí)驗(yàn)一、本發(fā)明對慢性腎衰大鼠的治療作用
[0025] 1.實(shí)驗(yàn)動物SD大鼠110只，雌雄各半，體重200g±20g，購自中國科學(xué)院上海實(shí)驗(yàn) 動物中心。
[0026] 2.實(shí)驗(yàn)藥物本發(fā)明6組組合物藥物成分由大連美侖生物技術(shù)有限公司提供。實(shí)驗(yàn) 前按相應(yīng)量用〇. 5 %羧甲基纖維鈉配成60ml，備用，丹參素、丹參酚酸B和丹參酚酸A配制 濃度基本與組合物六濃度相同。
[0027] 3.實(shí)驗(yàn)方法取110只SD大鼠，隨即取出10只作為空白對照組，其余大鼠適應(yīng)性喂 養(yǎng)3天。除空白對照組外，其余大鼠用2. 5%腺嘌呤混懸液按250mg/kg/天灌胃，連續(xù)灌胃 給予3周，待出現(xiàn)血清尿素氮、肌酐升高等腎功能衰竭現(xiàn)象時，將符合要求的大鼠隨即分為 模型組、組合物一、組合物二、組合物三、組合物四、組合物五、組合物六、丹參素組、丹參酚 酸B組和丹參酚酸A組。用純水配制所需藥物60ml，組合物一至六組、丹參素組、丹參酚酸 B組和丹參酚酸A組分別灌胃給予相應(yīng)藥物體積均為10ml/kg，空白對照組和模型組灌胃給 予等體積的〇. 5 %羧甲基纖維鈉，每日給藥一次，連續(xù)給藥4周。末次給藥24h后，腹主動脈 取血，測定血清尿素氮、肌酐、血清白蛋白的含量和血液流變學(xué)各指標(biāo)，解剖腎臟進(jìn)行病理 切片，顯微鏡下觀察病理變化。
[0028] 4.檢測指標(biāo)
[0029] (1)測定血清尿素氮、肌酐和血清白蛋白的含量
[0030] (2)血液流變學(xué)檢查
[0031] (3)病理學(xué)檢查
[0032] 5.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0033] (1)本發(fā)明對慢性腎衰模型大鼠血清尿素氮、肌酐和血清白蛋白的影響。見表1。 [0034] 表1本發(fā)明對慢性腎衰大鼠血清尿素氮、肌酐和血清白蛋白的影響)
[0035]
[0036] 注：各組與模型組比較*P〈0. 05，**P〈0. 01
[0037] 結(jié)果表明：空白對照組與模型組比較尿素氮和肌酐明顯較低，血清白蛋白明顯較 高，且有顯著性差異，表明造模后，已對大鼠造成嚴(yán)重?fù)p傷，經(jīng)過4周的治療各給藥組大鼠 尿素氮和肌酐明顯降低，血清白蛋白明顯升高，且有顯著性差異（P〈〇. 05或p〈0. 01)，且指 標(biāo)改善情況優(yōu)于單有等劑量的丹參素、丹參酚酸B和丹參酚酸A。
[0038] (2)本發(fā)明對慢性腎衰大鼠血液流變學(xué)的影響。見表2。
[0039] 表2本發(fā)明對慢性腎衰大鼠血液流變學(xué)的影響（i ± s )

[0042] 注：各組與模型組比較*Ρ〈0· 05, **Ρ〈0· 01
[0043] 結(jié)果表明：空白對照組與模型組比較全血粘度，血漿粘度和紅細(xì)胞壓積均明顯較 低，且有顯著性差異，表明造模后，已對大鼠造成嚴(yán)重?fù)p傷，經(jīng)過4周的治療各給藥組大鼠 全血粘度，血漿粘度和紅細(xì)胞壓積均明顯降低，且有顯著性差異（Ρ〈〇. 05或ρ〈0. 01)，且指 標(biāo)改善情況優(yōu)于或等于單有等劑量的丹參素、丹參酚酸B和丹參酚酸Α。
[0044] (3) HE染色顯微鏡下觀察結(jié)果
[0045] 空白對照組：腎小球和腎小管清晰，結(jié)構(gòu)正常，未見病理改變；
[0046] 模型組：腎小球萎縮，腎小管明顯擴(kuò)張，近曲小管和遠(yuǎn)曲小管上皮細(xì)胞均有明顯濁 腫和變性發(fā)生，腎間質(zhì)纖維組織增生，并有慢性炎細(xì)胞浸潤；
[0047] 各給藥組：腎小球輕微充血，結(jié)構(gòu)未見異常，腎小管有輕微擴(kuò)張，無明顯炎細(xì)胞浸 潤。
[0048] 6.結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，各給藥組對慢性腎衰均有較好地治療作用，具體表現(xiàn)在改 善血肌酐、尿素氮、血清白蛋白、血液流變學(xué)各指標(biāo)和病理學(xué)特征方面。
[0049] 實(shí)驗(yàn)二、考察本發(fā)明藥物對高血壓腎病的治療作用
[0050] 1.實(shí)驗(yàn)動物自發(fā)性高血壓大鼠110只，雌雄各半，體重180_220g，購自中國科學(xué)院 上海實(shí)驗(yàn)動物中心。
[0051] 2.實(shí)驗(yàn)藥物本發(fā)明6組組合物藥物成分由大連美侖生物技術(shù)有限公司提供。實(shí)驗(yàn) 前按相應(yīng)量用〇. 5 %羧甲基纖維鈉配成60ml，備用，丹參素、丹參酚酸B和丹參酚酸A配制 濃度基本與組合物六濃度相同。
[0052] 3.實(shí)驗(yàn)方法
[0053] 待測得自發(fā)性高血壓大鼠尿微量白蛋白為20-200mg/L時為自發(fā)性高血壓腎病模 型復(fù)制成功，剔除不合格大鼠，隨機(jī)分為組合物一至六組和丹參素、丹參酚酸B和丹參酚酸 A組，另取10只做為對照組。各給藥組灌胃給予相應(yīng)藥物0. 5ml/10g，對照組給予等體積的 羧甲基纖維鈉，每天給藥一次，連續(xù)給藥4周。
[0054] 4.檢測指標(biāo)
[0055] 4. 1測定血壓。給藥前，測定大鼠清醒狀態(tài)下的尾靜脈收縮壓，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時，再次測 定大鼠尾靜脈的收縮壓，且每次測三次求平均值。
[0056] 4. 2測定各組大鼠尿液中尿微量白蛋白、尿02微球蛋白。實(shí)驗(yàn)結(jié)束前收集12h尿 液，收集尿液期間禁食，不禁水。
[0057] 4. 3測定血液中血肌酐和尿素氮的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時心臟取血，用濟(jì)南漢方醫(yī)療器 械有限公司生產(chǎn)的全自動生化分析儀測定血肌酐和尿素氮。
[0058] 5實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0059] 5. 1組合物對自發(fā)性高血壓腎病大鼠血壓的影響，見表3。
[0060] 表3本發(fā)明組合物對實(shí)驗(yàn)前后自發(fā)性高血壓腎病大鼠血壓的影響（X 土S)