專利名稱：治療血膽甾醇過多的甾族苷類的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及甾類糖苷以及應用它們的方法，特別是作為血膽甾醇過多治療劑和抗動脈粥樣硬化劑在哺乳動物中的應用。
已知的許多具有降低血膽甾醇作用的產(chǎn)物是交聯(lián)的合成聚合物如聚苯乙烯。例如，交聯(lián)的、水不溶的膽汁酸結(jié)合的聚苯乙烯為基礎(chǔ)的樹脂如Cholestyramine
劑具有砂礫的口感，因此適口性不好。此外，這些樹脂小球在體內(nèi)一般效果低。因此這些物質(zhì)有效的降低血膽甾醇的劑量過大，每天通常需服用14-24克配制的產(chǎn)物。具有降低血膽甾醇作用的其他已知的聚合物包括如歐洲專利申請?zhí)?212145中所述的天然產(chǎn)物脫乙酰殼多糖和脫乙酰殼多糖衍生物。但是，它們有效的降低血膽甾醇的劑量也是高的。
其他的控制血膽甾醇過多的藥物包括植物提取物如“首蓿皂角苷”。但是，這些植物提取物具有變化的成分并含有顯著量的非有用的化學物質(zhì)。由于成分的改變，因此很難確定標準的劑量或預計存在的雜質(zhì)。所以這些提取物不太適合用于人。此外，純化這些提取物是昂貴的。由于另外一些合成產(chǎn)生的純“衍生的皂角苷配基”化合物，如由螺甾烷、螺甾烯或衍生的甾醇類化合物按重量計抑制膽甾醇吸收比首蓿提取物更有效，因此可以按合理大小的劑量服用。因為上述物質(zhì)的化學成分是已知的，并且它們可以高純度進行合成，所以它們適合用于任何溫血動物，包括人。
然而，除非服用大劑量，否則純的皂角苷配基類藥物不能顯著地抑制膽甾醇的吸收。只有當與其他部分結(jié)合時皂角苷配基才有所希望的效果。所述皂角苷配基類化合物的實例有惕告吉寧和薯蕷皂甙配基類化合物，尤其是它們的配糖物。P.K.Kintia，Iu.K.Vasilenko，G.M.Gorianu，V.A.Bobeiko，I.V.Suetina，N.E.Mashchenko(Kim.Pharm.Zh.，1981，15(9)，55)公開了3-O-(β-D-吡喃半乳糖基)核柯配基以及它作為降低血膽甾醇藥物的應用。美國專利號4，602，003和4，602，005公開了某些甾族苷，尤其是3-O-(β-D-吡喃葡糖基)惕告吉寧和3-O-(β-D-纖維素二糖基)惕告吉寧以及它們作為控制血膽甾醇過多的應用。如進行比較，例如與降膽敏相比，3-O-(β-D-纖維素二糖基)惕告吉寧具有較好的降低血膽甾醇的作用。
此外，下面敘述的某些其他的甾族苷已經(jīng)公開，但是這些公開的報道沒有降低血膽甾醇作用方面的內(nèi)容。Dimoglo，A.S.;Choban I.N.;Bersuker，I.B.;Kintya，P.K.;Balashova，N.N.;在“Structural Features of the Antioxidant and fungicidal Activity of Steroid Glycosides”(Bioorg.Khim，11(3)，408～413，1985)一文中公開了巖配基β-D-吡喃半乳糖苷和惕告吉寧β-D-乳糖苷。Schneides，J.J.在“Preparation and Properties of Some New Steroid β-D-Glucopyranosides，β-D-Glucopyranosiduronic Acids，and Derivatives”(Card.Research，17，199～207，1971)一文中公開了惕告吉寧β-D-吡喃糖醛酸葡糖苷。Pegel，K.H.Walker，H.在“Sterol Glycoside with Activity as Prostaglandin Synthetase Inhibitor”(美國專利4，260，603，1981，4，7)一文中公開了核柯配基β-D-吡喃葡糖苷。Segal，R.;Shud，F(xiàn).;Milo-Goldzweig，I.在“HemolyticProperties of Synthetic Glycosides”(J.Pharm.Sci.，67(11)，1589～1592，1978)一文中公開了惕告吉寧β-D-麥芽糖苷，惕告吉寧β-L-吡喃巖藻糖苷，菝葜配基β-麥芽糖苷和惕告吉寧α-L-鼠李糖苷。Gutsu，E.V.;Kintya，P.K.;Lazurevskii，G.V.在“Steroid Glycosides from the Roots of Capsicum Annuum 11The Structure of the Capsicosides”(Khim.Prir.Soedin.，(2)，242-246，1987)一文中公開了惕告吉寧α-D-吡喃阿拉伯聚糖苷和惕告吉寧β-D-吡喃半乳糖苷。Hostettmann，K.;Hostettmann-Kaldas，M.;Nakanishi，K.在“Molluscicidal Saponins from Cornus Florida L.”(Helv.Chim.Acta，61，1990～1995，1978)一文中公開了菝葜配基β-D-吡喃半乳糖苷。Yang，C.;Li，K.;Ding，Y.在“Steroidal Saponins from Several Species of Liliiflorae Plants”(Yunnan Zhiwu Yanjiu ZengKan，Suppl.3，13-23，1990)一文中公開了(25S)-核柯配基纖維素二糖苷。Seo，S.;Tomita，Y.;Tori，K.;Yoshimura，Y.在“Determination of the Absolute Configuration of a Secondary Hydroxy Group in a Chiral Secondary Alcohol Using Glycosidation Shifts in Carbon-13 NMR Spectroscopy”(J.Am.Chem.Soc.，100(11)，3331～3339，1978)一文中公開了菝葜配基β-葡糖苷和菝葜配基α-葡糖基。Lazurevskii，G.V.;Goryanu，G.M.;Kintya，P.K.在“Steroid Glycosides from Asparagus Officinalis”(Dokl.Akad.Nauk.SSSR，231(6)，1479～81，1976)一文中公開了薩灑皂草配基β-葡糖苷。
雖然以上所述的降低血膽甾醇化合物在本技術(shù)領(lǐng)域顯示了一定的作用，但是在本技術(shù)領(lǐng)域范圍內(nèi)仍需繼續(xù)研究以便改進降低血膽甾醇類藥物。
本發(fā)明涉及甾類糖苷，尤其是螺甾烷基糖苷，它們可用作為降低血膽甾醇藥物和抗動脈粥樣硬化的藥物。本發(fā)明化合物具有下式，
其中(A)
Q4和Q5均為亞甲基;
并且其中R1為β-D-吡喃葡糖基，β-D-吡喃糖醛酸葡糖基，β-D-2-乙酰氨基-2-脫氧-吡喃葡糖基，β-D-吡喃半乳糖基，β-D-吡喃巖藻糖基，β-L-吡喃巖藻糖基，β-D-吡喃木糖基，
β-L-吡喃木糖基，α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，α-L-吡喃阿拉伯聚糖基，α-D-纖維素二糖基，β-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，β-D-龍膽二糖基，3-O-β-D-吡喃半乳糖基-α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，或β-D-麥芽三糖基;
或者(B)Q1、Q4和Q5均為亞甲基;
并且其中R1為β-D-吡喃葡糖基，β-D-吡喃糖醛酸葡糖基，β-D-2-乙酰氨基-2-脫氧-吡喃葡糖基，β-D-吡喃巖藻糖基，
β-L-吡喃巖藻糖基，β-D-吡喃木糖基，β-L-吡喃木糖基，α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，α-L-吡喃阿拉伯聚糖基，β-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，β-D-龍膽二糖基，3-O-β-D-吡喃半乳糖基-α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，或β-D-麥芽三糖基;
或者(C)Q1、Q4和Q5均為亞甲基;
Q2為羰基;
C25為R構(gòu)型并且其中R1為β-D-吡喃糖醛酸葡糖基，β-D-2-乙酰氨基-2-脫氧-吡喃葡糖基，β-D-吡喃巖藻糖基，β-L-吡喃巖藻糖基，
β-D-吡喃木糖基，β-L-吡喃木糖基，α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，α-L-吡喃阿拉伯聚糖基，β-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，β-D-龍膽二糖基，3-O-β-D-吡喃半乳糖基-α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，或β-D-麥芽三糖基;
或者(D)Q1、Q2、Q4和Q5各自為亞甲基;
并且其中R1為β-D-2-乙酰氨基-2-脫氧-吡喃葡糖基，β-D-吡喃巖藻糖基，β-D-吡喃木糖基，β-L-吡喃木糖基，α-L-吡喃阿拉伯聚糖基，β-D-纖維素二糖基，
β-D-龍膽二糖基，3-O-β-D-吡喃半乳糖基-α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，或β-D-麥芽三糖基;
或者(E)Q1、Q2和Q5各自為亞甲基;
C5為α型;
C25為R構(gòu)型;
并且其中R1為β-D-吡喃半乳糖基，α-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，或β-D-麥芽三糖基;
或者(F)Q1、Q2和Q4各自為亞甲基;
C5為α型C25為R構(gòu)型并且其中R1為β-D-吡喃半乳糖基，α-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，或β-D-麥芽三糖基;
條件是不包括(3β，5α，25R)-3-[(β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷。
第一組較好的式ⅠA化合物包括下述化合物，其中Q1為羰基，
，Q4為亞甲基，Q5為亞甲基，C5氫是α型，C25為R構(gòu)型。在上述一組中，特別好的是以下化合物，其中Q1為羰基，R1為β-D-纖維素二糖基，α-D-纖維素二糖基、β-D-吡喃葡糖基、β-D-吡喃半乳糖基、β-D-乳糖基、β-D-麥芽糖基或β-D-麥芽三糖基。在該組中特別好的是以下化合物，其中Q1為
，R1為β-D-纖維素二糖基。本組中其他特別好的是以下化合物，其中Q1為
R1為β-D-纖維素二糖基。
第二組較好的式ⅠA化合物包括下述化合物，其中Q1為亞甲基，Q2為
，Q4為亞甲基，Q5為亞甲基，C5氫為α型，C25為R構(gòu)型。在第二組中特別好的是以下化合物，其中Q2為
，R1為β-D-纖維素二糖基，第三組較好的式ⅠA化合物包括下述化合物，其中Q1為羰基、
，Q3為
Q4為亞甲基，Q5為亞甲基，C5氫為α型，C25為R構(gòu)型。在該組中特別好的是以下化合物，其中Q1為羰基，Q2為羰基，R1為β-D-纖維素二糖基。該組中其他特別好的是以下化合物，其中Q1為羰基，Q2為
，R1為β-D-纖維素二糖基。該組中其他特別好的是以下化合物，其中Q1為羰基，Q2為，R1為β-D-纖維素二糖基。該組中其他特別好的是以下化合物，其中Q1為羰基，Q2為
，R1為β-D-乳糖基。該組中其他特別好的是以下化合物，其中Q1為
，Q2為羰基，R1為β-D-纖維素二糖基。該組中其他特別好的是以下化合物，其中Q1為
，Q2為羰基，R1為β-D-纖維素二糖基。
第四組較好的式ⅠA化合物包括下述化合物，其中Q1為亞甲基，Q2為羰基，Q3為
，Q4為亞甲基，Q5為亞甲基，C5氫為α型，C25為R構(gòu)型。該組中特別好的是以下化合物，其中R1為β-D-乳糖基或β-D-纖維素二糖基。
第五組較好的式ⅠA化合物包括下述化合物，其中Q1和Q2各自為亞甲基，Q3為
，Q4和Q5各自為亞甲基，C25為R構(gòu)型。該組中特別好的是以下化合物，其中C5氫為α型，R1為β-D-龍膽二糖基。該組中其他特別好的是以下化合物，其中C5氫為β型，R1為β-D-纖維素二糖基。
第六組較好的式ⅠA化合物包括下述化合物，其中Q1、Q2和Q5各自為亞甲基，Q3為
，Q4為羰基，C5氫為α型，C25為R構(gòu)型。該組中特別好的是以下化合物，其中R1為β-D-纖維素二糖基。
第七組較好的式ⅠA化合物包括下述化合物，其中Q1、Q2和Q4各自為亞甲基，Q3為
，Q5為羰基，C5氫為α型，C25為R構(gòu)型。該組中特別好的是以下化合物，其中R1為β-D-纖維素二糖基。
另一方面，本發(fā)明還涉及控制哺乳動物血膽甾醇過多或動脈粥樣硬化的方法，該方法包括給患有血膽甾醇過多或動脈粥樣硬化的哺乳動物服用控制血膽醇過多或動脈粥樣硬化劑量的式Ⅰ螺甾烷基糖苷，
其中(A)
Q4和Q5均為亞甲基;
并且其中
R1為β-D-吡喃葡糖基，β-D-吡喃糖醛酸葡糖基，β-D-2-乙酰氨基-2-脫氧-吡喃葡糖基，β-D-吡喃半乳糖基，β-D-吡喃巖藻糖基，β-L-吡喃巖藻糖基，β-D-吡喃木糖基，β-L-吡喃木糖基，α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，α-L-吡喃阿拉伯聚糖基，α-D-纖維素二糖基，β-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，β-D-龍膽二糖基，3-O-β-D-吡喃半乳糖基-α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，或β-D-麥芽三糖基;
或者(B)Q1、Q2和Q5各自為亞甲基;
C5為α型;
C25為R構(gòu)型;
并且其中R1為β-D-吡喃半乳糖基，β-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，或β-D-麥芽三糖基;
或者(C)Q1、Q2和Q4各自為亞甲基
C5為α型;
C25為R構(gòu)型并且其中R1為β-D-吡喃半乳糖基，β-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，或β-D-麥芽三糖基;
條件是不包括(3β，5α，25R)-3-[(α-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷，(3β，5α，25R)-3-[(β-D-吡喃葡糖基)氧]螺甾烷，(3β，5α，25R)-3-[(β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷或(3β，5α，25R)-3-[(β-D-吡喃半乳糖基)氧]螺甾烷-12-酮。
第一組較好的式Ⅰ化合物是下述化合物，其中Q1、Q2、Q4和Q5為亞甲基，C25為R構(gòu)型，Q3為
。該組中特別好的是以下化合物，其中C5氫為α型，R1為β-D-吡喃葡糖基、β-D-麥芽糖基、β-D-乳糖基、β-D-龍膽二糖基或β-D-吡喃半乳糖基。該組中其他特別好的是以下化合物，其中C5氫為β型，R1為β-D-纖維素二糖素。
第二組較好的式Ⅰ化合物是下述化合物，其中Q1為羰基、
，Q2為亞甲基，Q3為
，Q4和Q5各自為亞甲基，C25為R構(gòu)型，C5氫為α構(gòu)型。第二組中特別好的是以下化合物，其中Q1為羰基。R1為β-D-纖維素二糖基、α-D-纖維素二糖基、β-D-吡喃葡糖基、β-D-吡喃半乳糖基、β-D-乳糖基、β-D-麥芽糖基或β-D-麥芽三糖基。第二組中其他特別好的是以下化合物，其中Q1為
，R1為β-D-纖維素二糖基。該組中其他特別好的是以下化合物，其中Q1為
，R1為β-D-纖維素二糖基。
第三組較好的式Ⅰ化合物是下述化合物，其中Q1為亞甲基，Q2為羰基、
，Q3為
，Q4和Q5各自為亞甲基，C25為R構(gòu)型，C5氫為α型。第三組中特別好的是以下化合物，其中Q2為羰基，R1為β-D-纖維素二糖基或β-D-乳糖基。第三組中其他特別好的是以下化合物，其中Q2為
，R1為β-D-纖維素二糖基或β-吡喃半乳糖基。
第四組較好的式Ⅰ化合物是下述化合物，其中Q1為羰基、<p>β-D-龍膽二糖基，3-O-β-D-吡喃半乳糖基-α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，或β-D-麥芽三糖基;
或者(E)Q1、Q2和Q5各自為亞甲基;
C5為α型;
C25為R構(gòu)型;
并且其中R1為β-D-吡喃半乳糖基，α-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，或β-D-麥芽三糖基;
或者(F)Q1、Q2和Q4各自為亞甲基;
C5為α型C25為R構(gòu)型
反應式Ⅲ
反應式Ⅳ
反應式Ⅴ
反應式Ⅵ
式ⅠA化合物是式Ⅰ化合物的子集。因此，在本發(fā)明下面詳細的敘述(例如怎么實施本發(fā)明，如何應用本發(fā)明)中，所涉及的式Ⅰ化合物，固有地包括式ⅠA化合物。
下面的反應式Ⅰ，Ⅱ和Ⅲ敘述了如何制得其中Q4和Q5均為亞甲基的式Ⅰ化合物。
根據(jù)反應式Ⅰ，所需的其中Q1、Q2和Q3定義同上的式Ⅰ化合物可以按下法制得使合適的α全乙?；氖舰蠡衔锘颚氯阴；氖舰艋衔?其中Q1和Q2的定義同上，X或為一鍵，或為亞烷基-O-)脫乙酰化。
脫乙酰化通常按下法進行在溶劑(如甲醇、四氫呋喃、正丙醇或它們的混合液)中，于約40-100℃(一般在回流溫度)和0.5psi～50psi(一般為常壓)下使式Ⅲ或式Ⅳ化合物與親核的堿(如甲醇鈉或氰化鉀)反應約0.25～約2小時。此外，對于式Ⅰ化合物，如果糖為吡喃糖醛酸葡糖基，那么將生成的脫乙酰化的化合物進一步水解，例如與氫氧化鈉反應。如果需要，將其中Q1或Q2為羰基的上述化合物進行還原(以另一可供選擇的方法在偶合之前進行還原)，得到相應的醇(見反應式Ⅳ和有關(guān)的教科書)。如果需要，以類似的方法將其中Q1或Q2為羥基的上述化合物進行氧化(以另一可供選擇的方法在偶合之前進行氧化)，得到相應的羰基化合物。
所需的式Ⅲ化合物(其中Q1為Q2的定義同上)可以通過將合適的式Ⅳ化合物(其中Q1和Q2的定義同上)正位異構(gòu)化制得。立體化學術(shù)語α和β是指糖的連接碳的構(gòu)型。
正位異構(gòu)化通常按下法進行在無水的非質(zhì)子傳遞溶劑(如二氯甲烷)中，于20℃～約40℃(一般在室溫)，與無機酸(如氫溴酸)反應至少24小時，一般需數(shù)天。但是對于吡喃阿拉伯聚糖基衍生物，α異頭物可直接由以下所述糖-甾族化合物偶合得到，而β異頭物可從上述方法(即“反轉(zhuǎn)”)得到。
根據(jù)反應式Ⅱ，所需的式Ⅳ化合物(其中Q1和Q2的定義同上)可以通過將合適的乙酰化的糖鹵化物(如溴化物)和甾族化合物進行偶合制得。更具體地說，對于其中糖不是β-D-麥芽糖基、β-D-龍膽二糖基或β-D-2-乙酰氨基-2-脫氧-吡喃葡糖基的上述式Ⅳ化合物，需應用促進合適的式Ⅴ化合物(其中Q1和Q2的定義同上，X為一鍵或為亞烷基-O-)偶合的氟化鋅和全乙?；奶躯u化物，而對于其中糖是β-D-麥芽糖基、β-D-龍膽二糖基或β-D-2-乙酰氨基-2-脫氧-吡喃葡糖基的上述式Ⅳ化合物，需應用促進合適的式Ⅵ化合物(如式Ⅴ化合物的三甲基甲硅烷基醚，其中Q1和Q2的定義同上，X為一鍵或為亞烷基-O-)偶合的溴化汞和氰化汞以及全乙酰化的糖鹵化物。
通常將促進式Ⅴ化合物偶合的氟化鋅和全乙酰化的糖溴化物以及式Ⅴ化合物置于對反應呈惰性的非質(zhì)子的無水溶劑(如乙腈)中，溫度為約20℃-100℃，保持約0.5-12小時。一般應用約0.5-4當量(以式Ⅴ化合物為基礎(chǔ))氟化鋅和約0.5-3當量乙?；奶卿寤?。偶合反應用酸催化較好，最好是應用反應中產(chǎn)生的氫鹵酸作為酸催化劑。雖然通?？梢詰贸悍磻?，但是所需化合物可以在0.5-50psi壓力下進行制備。在優(yōu)先選用的分離技術(shù)中，通過加入約25～75%水和剩余部分的醇(如甲醇)，苷可以從粗的過濾反應混合物(如產(chǎn)物的乙腈溶液)中折出。與萃取分離法相比，從甲醇水溶液/乙腈中使產(chǎn)物沉淀的方法需要的處理過程較少，并且可提供較高純度的產(chǎn)物。
通常將促進式Ⅵ化合物偶合的溴化汞和氰化汞以及乙?；奶卿寤锖褪舰龌衔镏糜跓o水的非質(zhì)子傳遞溶劑(如二氯甲烷)中，溫度為約20℃～100℃，保持約0.5～6小時。一般應用約0.5～4當量(以式Ⅵ化合物為基礎(chǔ))溴化汞和氰化汞以及約0.5～3當量全乙?；奶卿寤?如β-D-麥芽糖基、β-D-龍膽二糖基或β-D-2-乙酰氨基-2-脫氧-吡喃葡糖基)。雖然通?？梢詰贸悍磻撬杌衔锟梢栽?.5-50psi壓力下制備。最好按以上所述促進式Ⅴ化合物偶合的氟化鋅法進行產(chǎn)物的分離。
將合適的式Ⅴ化合物(其中Q1和Q2的定義同上，X為一鍵或亞烷基-O-)進行甲硅烷基化，可以制得所需的式Ⅵ化合物(其中Q1和Q2的定義同上，X為一鍵或亞烷基-O-)。
通常將式Ⅴ化合物，堿如三乙胺和活性的三烷基甲硅烷基化合物(如三甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯或三甲基甲硅烷基氯化物)于無水的非質(zhì)子傳遞溶劑(如二氯甲烷)中，在約低于10℃下反應約0.5-2小時。
按照反應式Ⅲ，將合適的式Ⅶ化合物(其中Q1和Q2的定義同上)進行還原，可以制得所需的式Ⅴ化合物(其中Q1和Q2的定義同上，X為亞烷基-O-)。
上述還原反應通常按下法進行式Ⅶ化合物與氫化鋰鋁的反應在無水溶劑(如四氫呋喃)中，于約低于10℃下進行，反應時間為約0.5-3小時。
將合適的式Ⅷ化合物(其中Q1和Q2的定義同上)與重氮基乙酸乙酯于乙酸銠二聚物存在下進行偶合，可以制得所需的式Ⅶ化合物(其中Q1和Q2的定義同上)。因此，將式Ⅷ化合物和重氮基乙酸乙酯于非質(zhì)子傳遞溶劑(如二氯甲烷)中于乙酸銠二聚物存在下，在室溫下反應約0.5-3小時。
上述反應路線的起始原料(如重氮基乙酸乙酯、全乙?；奶躯u化物)可以買得到，或者可以由本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員用一般的有機合成的方法容易地制得。
此外，為了制備上述甾族化合物，下面的段落敘述各種式Ⅷ化合物的制備方法。制備式Ⅷ甾族化合物(其中Q1為亞甲基，Q2、C5氫和C25碳的立體化學的定義如下)的參考文獻列于表Ⅰ。
下面的段落敘述并/或給出由上面表Ⅰ所述式Ⅷ化合物制備本專利用作起始原料的各種甾族化合物(即在C3位的另一立體化學，在C11和C12的氧化作用以及不同的差向異構(gòu)體)的參與文獻。一般來講，各種氧化的甾族化合物的制備方法是與C3、C5和C25位立體化學無關(guān)的。因此，一當?shù)玫紺3、C5和C25位的合適立體化學(其中Q1和Q2各自為亞甲基，或者其中Q1為亞甲基，Q2為羰基)，那么可以從其中制備在Q1和Q2上各種氧化的化合物。
這里所述的一些制備方法需要將間接的官能團(即Q1、Q2和Q3)進行保護。需用的所述保護基可根據(jù)間接官能團的性質(zhì)以及制備方法進行變化。它們可以由本技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的專業(yè)人員容易地確定。保護基一般的敘述及它們的應用見T.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley &amp; Sons，New York，1981。
通過下述的兩個方法，可以將其中Q1為亞甲基，Q2為亞甲基或羰基，C3羥基為β型的式Ⅷ化合物轉(zhuǎn)變?yōu)槠渲蠧3羥基為α型的相應的式Ⅷ化合物。可以應用所述制備方法而與C25立體化學無關(guān)。
如果Q2為羰基，那么可以接照Engel和Rakhit(Can.J.Chem.40，2153，1962)所述方法，使該甾族化合物與乙二醇在酸催化劑存在下進行反應，將羰基以縮酮(如乙二醇縮酮)進行保護。如果C5氫為α型，那么于二氯甲烷中用氯鉻酸吡啶鎓(pcc)在室溫下使C3羥基進行氧化為酮。然后按Gondos和Orr.的方法(J.Chem.Soc.Chem.Commun.21，1239，1982)，于四氫呋喃中，用立體位阻還原劑如D-SelectrideR還原劑在低溫下進行還原，得到C3α醇。如果需要，用酸如鹽酸，于合適的溶劑如丙酮中脫去Q2保護基。
對于其中C5氫為β型的所述化合物，可以應用與C5氫為α型的同樣方法，但是C3酮用硼氫化鈉于乙醇中進行還原，結(jié)果得到C3α醇。
反應圖示Ⅳ列出了從其中Q1為亞甲基，Q2為羰基的式Ⅷ化合物開始，得到其中Q1和Q2定義同上的式Ⅷ化合物的反應路線。
一般來講，上述化合物的制備方法可以在L.F.Fieser and M.Fieser的Steroids一書(Reinhold Pub.Corp.，New York，1959)及其參考文獻中找到，但是下面敘述的內(nèi)容(它對于反應式Ⅳ是關(guān)鍵的)提供了特定的指導。
簡單地說，按照反應圖示Ⅳ方法1，根據(jù)J.Chem.Soc.1956，4344所述的方法，將起始原料進行乙酰化和溴化。然后中間體用氫化鋰鋁進行還原，并按Helv.Act.Chim.，1953，36，1241類似的方法用氧化銀進行處理。用三氯乙酸使得到的β-11，12-環(huán)氧化物開環(huán)，皂化，并用鋅和乙酸進行還原(見J.Chem.Soc.1956，4330)，得到方法1所示產(chǎn)物。
在方法2中，按J.Chem.Soc.1956.430所述的方法將起始原料有選擇地進行乙酰化。按Org.Syn.1976，55，84所述方法，生成的產(chǎn)物用三氧化鉻和吡啶進行氧化。按Synthesis，1973，790所述方法，生成的產(chǎn)物用氰化鉀于水、甲醇和THF中進行皂化，得到方法2所示的產(chǎn)物。
在方法3中，將起始原料轉(zhuǎn)變成相應的甲苯磺?；?，再按J.Am.Chem.Soc.1954.76，4013類似的方法將其用甲醇鈉處理。按Tetrahedron Letters，1976，1973所述的方法，生成的產(chǎn)物11-烯用四氧化鋨和N-甲基嗎啉N-氧化物進行氧化，得到方法3所示的產(chǎn)物。
在方法4中，用美國專利號3，178，418所述方法，將起始原料進行一溴化。用J.Chem.Soc.1956，4330方法將上述中間體進行水解，得到方法4所示產(chǎn)物。
在方法5和6中，按J.Am.Chem.Soc.1954，76，4013所述方法，用氫化鋰鋁將起始原料還原。方法5和6所示產(chǎn)物用層析法進行分離。
在方法7中，按J.Am.Chem.Soc.1951，73，1777所述的方法，用氫化鋰鋁將起始原料還原，得到所示產(chǎn)物。
在方法8中，按J.Am.Chem.Soc.1953，75，1282所述的方法，用鋰和氨將起始原料還原，得到所示產(chǎn)物。
在方法9中，按J.Am.chem.Soc.1955，77，1632所述的方法將起始原料乙酰化，得到乙酸酯混合物，由該混合物中可以分離出3，11-二乙酸酯。然后按Org.Syn.1976，55，84所述的方法，用三氧化鉻和吡啶將未被保護的12-醇進行氧化。乙酸酯的皂化得到方法9所示產(chǎn)物。
在方法10中，按J.Chem.Soc.1956，4330所述的方法將起始原料二乙?；?。按J.Chem.Soc.1956，4334所述的方法，用鈣和氨將二乙酸酯還原，得到方法10所示產(chǎn)物。
在方法11中，按J.Am.Chem.Soc.1953，75，1282所述的方法，用鋰和氨將起始原料還原，得到方法1所示產(chǎn)物。
在方法12中，按J.Am.Chem.Soc.1951，73，1777所述的方法，用氫化鋰鋁將起始原料還原，得到方法12所示產(chǎn)物。
在方法13中，按J.Am.Chem.Soc.1972，94，6190所述的方法，用叔丁基二甲基氯硅烷和咪唑?qū)⑵鹗荚系?-醇進行選擇性保護。按Org.Syn.1976，55，84所述的方法，用三氧化鉻和吡啶將上述產(chǎn)物氧化。然后按J.Am.Chem.Soc.1972，94，6190所述的方法，于乙腈中用氫氟酸將3-醇脫去甲硅烷基，得到方法13所示產(chǎn)物。
在方法14中，按J.Am.Chem.soc.1972，94，6190所述的方法，用叔丁基二甲基氯硅烷和咪唑?qū)⑵鹗荚系?-醇進行選擇性保護。按J.Am.Chem.Soc.1951，73，1777所述方法，用氫化鋰鋁將得到的中間體還原。得到的中間體的12-醇進行選擇性乙?；瑢?1-醇用三甲基甲硅烷基三氟乙酸酯(trimethylsilytriflate)和2，6-二甲基吡啶進行甲硅烷基化(Tetrahedron Letters 1981，22，3455)，然后用氫化鋰鋁脫去12-醇上的乙?；⒂寐然@水溶液中止該反應。按Org.Syn.1976，55，84所述的方法，用三氧化鉻和吡啶于二氯甲烷中使12-醇氧化，然后再按J.Am.Chem.Soc.1972，94，6190所述的方法，用氫氟酸于乙腈中脫去甲硅烷基，得到方法14所示產(chǎn)物。
按照反應式Ⅴ，所需式ⅠA化合物(其中Q1、Q2、Q3、Q4、Q5，C5和C25同以上(E)中所述(即在Q4位氧化))可以按下述方法制備。
所需式Ⅹ化合物可以通過氧化惕告吉寧Ⅸ制得。氧化反應通常按下法進行在對反應呈惰性的溶劑如二氯甲烷中，于0℃-室溫，使惕告吉寧與氯鉻酸吡啶鎓反應約2-10小時。
將式Ⅹ化合物溴化，接著進行消除反應，可以制得所需式Ⅺ化合物。溴化通常按下法進行使式Ⅹ化合物與溴素于四氫呋喃中，在約-78℃反應，接著溫熱至室溫保持約1-3小時。消除反應是將以上制得的溴化產(chǎn)物與溴化鋰和碳酸鋰于極性非質(zhì)子傳遞溶劑(如二甲基甲酰胺)中，在約100℃-140℃反應約1-4小時。
所需式Ⅶ化合物是將合適的式Ⅺ化合物進行環(huán)氧化作用，接著用氫化鋰鋁還原而制得。環(huán)氧化作用通常是按下法進行;使式Ⅺ化合物與過氧化氫和氫氧化鈉于極性的質(zhì)子活潑的溶劑(如甲醇)中在室溫下反應約2-6小時。還原反應是使上面制得的環(huán)氧化物與氫化鋰鋁于對反應呈惰性的溶劑(如四氫呋喃)中，在室溫下反應約2-6小時。
所需的式ⅠA化合物(如在以上(E)中所述，其中Q4含有一羥基)可以按下法制備將合適的式Ⅻ化合物用氟化鋅進行催化偶合，接著用甲醇鈉按以上所述進行脫乙?；Ｆ渲蠶4為羰基的所述化合物可以按類似的方法制備，但在脫乙酰化作用之前需用氯鉻酸吡啶鎓(如式Ⅹ化合物所述)進行氧化反應。
按照反應路線Ⅵ，所需的式ⅠA化合物(其中Q1、Q2、Q3、Q4、Q5、C5和C25同以上(F)所述(即在Q5位被氧化))可以按下述方法制備。
所需的式(ⅩⅣ)化合物可以按下法制得將薯蕷皂甙元(Ⅷ)的醇官能團進行保護(如P所示)，接著將烯烴進行硼氫化反應。通常將薯蕷皂甙元與乙氧基氯代甲烷和二異丙基乙胺于無水溶劑(如二氯甲烷)中，在室溫反應約2-6小時，使式(ⅩⅢ)的醇羥基作為乙氧基甲基醚進行保護。硼氫化反應按下法進行將以上制得的化合物與甲硼烷-四氫呋喃復合物于對反應呈惰性的溶劑如四氫呋喃中，在室溫下反應約1-6小時。
所需的式ⅩⅤ化合物可以按下法制備將合適的式ⅩⅣ化合物進行氧化，接著脫去醇保護基。氧化反應通常按下法進行使式ⅩⅣ化合物與氯鉻酸吡啶鎓于無水溶劑如二氯甲烷中，在室溫下反應約2-8小時。使以上制得的氧化產(chǎn)物與濃鹽酸于混合溶劑(含有甲醇和四氫呋喃)中，在約40℃-65℃反應約5分鐘-1小時，可以完成脫去醇保護基。
所需的式ⅠA化合物(如在以上(F)中所述，其中Q5為羰基)可以按下法制備用合適的式ⅩⅤ化合物以氟化鋅進行催化偶合反應，接著用甲醇鈉按以上所述進行脫乙?；磻?。其中Q5含有一羥基的化合物可以按類似的方法制備，但在脫乙?；靶柽M行還原反應。該還原反應通常在乙醇和二氯甲烷的混合溶劑中，于室溫下，用硼氫化鈉反應約1-6小時。
用實質(zhì)上已知的方法，例如通過層析和/或分級結(jié)晶法，根據(jù)非對映體物理化學上的不同性質(zhì)，可以將制得的具有不對稱碳原子的式Ⅰ化合物進行分離。
其中糖為β-D-吡喃糖醛酸葡糖基的本發(fā)明化合物是酸性的，因此它們可以形成堿式鹽。所有這些堿式鹽是在本發(fā)明的范圍內(nèi)，并且它們可以用一般的方法制得。例如，它們可以簡單地按下法制備通常將化學計算比例的上述酸性化合物與堿根據(jù)需要于水或非水或部分水的介質(zhì)中反應。根據(jù)需要，將得到的鹽通過過濾，用非水溶劑使其析出、然后過濾，蒸發(fā)溶劑得到，或在水溶液的情況下經(jīng)冷凍干燥收集。
此外，許多本發(fā)明的化合物可以以水合物的形式進行分離。
本發(fā)明化合物是有效的膽甾醇吸收的抑制劑，因此它們可適用于作為治療哺乳動物(尤其是人)的血膽甾醇過多控制劑。由于血膽甾醇過多與綜合的心血管、大腦血管或外周血管的疾病有密切的關(guān)系，因此本發(fā)明化合物可防止動脈粥樣硬化(尤其是動脈硬化)的發(fā)展。
本發(fā)明化合物控制血膽甾醇過多的作用可以根據(jù)標準的方法進行證明。例如，本發(fā)明化合物在體內(nèi)抑制腸吸收膽甾醇作用可以用Melchoir和Hawell(J.Lipid Res.，1985，26，306-315)的方法測定。
與對照相比，在雄性金黃色敘利亞倉鼠(Syrian hamsters)中，以減少膽甾醇吸收的降血膽甾醇藥物的劑量大小來確定其活性。給雄性金黃色敘利亞倉鼠喂飼沒有膽甾醇的飼料(對照組動物)，或喂飼補加有1%膽甾醇和0.5%膽酸的飼料4天。接著動物禁食18小時，然后給動物口服1.5毫升含有0.25%甲基纖維素、0.6%吐溫80和10%乙醇的水丸劑(對照組動物)，或給動物口服含所需濃度受試化合物的丸劑。一當喂飼丸劑之后，使動物接收第二份1.5毫升含有1%[3H]膽甾醇(2.0μci/動物;210dpm/nmol)和0.5%膽酸的倉鼠口服液體飼料，并且再次禁食24小時。在第二次禁食期結(jié)束時，處死動物，切除肝臟，皂化并且通過加入過氧化氫使等分試樣脫色，并評價其放射性。根據(jù)所測得的肝臟重量，計算總的肝的放射性。膽甾醇吸收的程度以口服丸劑在肝臟中存在24小時后口服丸劑總的放射性的百分比表示。
本發(fā)明化合物的抗動脈粥樣硬化作用，可以通過該類藥物減少免動脈中脂質(zhì)沉積的藥物劑量大小情況確定。雄性新西蘭白兔喂飼含0.4%膽甾醇和5%花生油的飼料1周(每天1餐)。1周之后，每天給予兔所需的受試化合物。在8.5周之后，中斷藥物處理，并再給動物2周含有膽甾醇的喂料，然后轉(zhuǎn)變?yōu)闊o膽甾醇的飼料5周。將動物處死，動脈從胸弓移至骼的支脈。清除動脈的外膜，軸向打開，然后按Holman等(Lab.Invest.1958，7，42-47)所述方法用蘇丹Ⅳ染色。用Optimas影像分析系統(tǒng)(影像處理系統(tǒng))，通過密度測定法測定染色表面積的百分比。與對照組相比，減少的脂質(zhì)沉積以藥物處理組中染色的表面積減少的百分比表示。
可以通過運送本發(fā)明化合物到腸腔的任一方法給予本發(fā)明化合物。這些方法包括經(jīng)口的途徑給藥、經(jīng)十二指腸途徑給藥等。
當然，服用的甾族的苷其劑量將取決于需治療的對象、疾病的嚴重程度、給藥方式以及主治醫(yī)生的判斷。但是有效劑量在0.71-200毫克/公斤/天的范圍內(nèi)，2-50毫克/公斤/天較好，2-7毫克/公斤/天最好。對于體重平均為70公斤的人來說，有效劑量的范圍為0.05-14克/天，0.14-3.5克/天較好，0.14-0.5克/天最好。
對于優(yōu)先選用的口服給藥，藥用組合物可以是溶液劑、混懸液劑、片劑、小丸劑、膠囊劑、粉劑、緩釋制劑等形式。
根據(jù)準備應用的給藥方式，藥用組合物可以是固體、半固體或液體的劑型，例如片劑、小丸劑、膠囊劑、粉劑、液劑、混懸液劑等，最好是適用于單次給藥的準確劑量的單位劑量形式。藥用組合物包括一般的藥用載體和賦形劑以及作為有效成分的本發(fā)明化合物。此外，藥用組合物還可以包括其他有療效的藥物或藥用附加劑、載體或輔助劑等。
本發(fā)明的藥用組合物可以含有0.1-95%，最好是1-70%本發(fā)明化合物。在任何情況下，需服用的本發(fā)明組合物或配方均含有一定數(shù)量的減輕需治療對象病癥(即血膽甾醇過多或動脈粥樣硬化)的有效劑量的本發(fā)明化合物。
對于固體藥用組合物，常用的無毒固體載體包括例如藥用等級的甘露糖醇、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、滑石、纖維素、葡萄糖、蔗糖、碳酸鎂等。
服用的液體藥用組合物可以按下法制備將本發(fā)明化合物溶解或分散在載體(如水、鹽水、葡萄糖水溶液、甘油、乙醇等)中，或者按另外的方法配制，并且使其有選擇地與藥用輔助劑混合，結(jié)果得到溶液劑或混懸液劑。
與一定劑量的有效成分一起配制不同的藥用組合物的方法是已知的，或者對于熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員是顯而易見的。例如可參見Remington′s Pharmaceutical Sciences.，Mack Publishing Company，Easter，Pa.，15th Edition(1975)。
實例1(3β，5α，12β，25R)-3-[(β-D-半乳糖基)氧]-12-羥基螺甾烷酮的還原于室溫下向(3β，5α，25R)-3-[(β-D-半乳糖基)氧]螺甾烷-12-酮[1.33克，2.24毫摩爾;由(3β，5α，25R)-3-[(四乙?；?β-D-半乳糖基)氧]螺甾烷-12-酮(制備方法B2)按實例3所述的方法，通過脫乙?；频胅、乙醇(130毫升)和氯仿(260毫升)的溶液中加入硼氫化鈉(0.51克，13.4毫摩爾)和乙醇(50毫升)的溶液。攪拌4小時后，加入甲醇(200毫升)并繼續(xù)攪拌2小時。反應混合物經(jīng)真空濃縮得到3.38克粗品。用甲醇(80毫升)和水(8毫升)的混合液重結(jié)晶，隨后用冷的甲醇(20毫升)洗滌并干燥，得到1.33克(定量產(chǎn)率)標題化合物。
MS595(M+H).
MP＞200℃. 高分辨FAB MS(m/e)計算值C33H55O9595.3846，實測值595.3861用合適的起始物質(zhì)，按實例1類似的方法制備以下標題化合物。
實例2
(3β，5α，12β，25R)-3-[(β-D-纖維素二糖基)氧]-12-羥基螺甾烷m.p. M.S.
＞200℃ 757(M+H)FAB HRMS(m/e)計算值C39H64O14Na779.4194779(M+Na) 實測值779.4250實例3(3β，5α，25R)-3-[(β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷-11-酮脫乙酰作用將(3β，5α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷-11-酮(6.57克，6.26毫摩爾)、甲醇鈉(68毫克，1.25毫摩爾)、甲醇(35毫升)和四氫呋喃(75毫升)的混合物加熱回流1小時，隨后于室溫攪拌12小時。30分鐘內(nèi)形成白色沉淀。將最后的混懸液真空濃縮，得到6.0克粗品。該粗品經(jīng)快速層析純化(洗脫液∶氯仿，隨后用8∶2氯仿∶甲醇)，得到2.71克(產(chǎn)率57%)標題化合物。
1H NMR(DMSO-d6)δ5.22(d，J＝5Hz，1H);5.00(m，3H);4.64(s，1H);4.58(t，J＝5Hz，1H);4.54(t，J＝6Hz，1H);4.34(q，J＝8Hz，1H);4.27(d，J＝8Hz，1H);4.23(d，J＝8Hz，1H);3.68-2.94(m，15H);2.34(m，2H);2.08-0.81(m，23H);0.92(s，3H);0.86(d，J＝7Hz，3H);0.72(d，J＝6Hz，3H);0.59(s，3H).DEPT13C NMR(DMSO-d6)δ210.4(s)，108.8(s)，103.6(d)，100.6(d)，81.1(d)，80.6(d)，77.2(d)，76.9(d)，76.5(d)，75.5(d)，75.1(d)，73.7(d)，73.6(d)，70.5(d)，66.4(t)，63.5(d)，61.5(t)，60.9(t)，50.5(d)，57.1(t)，54.7(d)，44.3(s)，44.1(d)，41.7(d)，36.8(d)，35.6(t)，35.2(s)，34.0(t)，32.6(t)，31.3(s)，30.2(d)，29.2(t)，28.9(t)，28.2(t)，17.5(q)，17.3(q)，14.8(q)，12.3(q).IR(KBr)3407(s)，1700(m)cm-1.高分辨 FAB MS(m/e)計算值C39H62O14Na 777.4037，實測值777.4108.分析計算值C39H62O14·2H2O，C 59.22 H 8.41;實測值C 59.48，H 8.48.MP＞300℃.
按以下方法制備含一分子結(jié)晶水的上述標題化合物將按上述方法制備的20克粗品、600毫升正丙醇和400毫升水的混合物攪拌并加熱回流。向所得的溶液中加入2.0克硅藻土。當仍在回流時，濾除不溶物。濾液在大氣壓下蒸餾至總體積為600毫升，并冷卻至室溫。將所得的混懸液?；?小時，過濾收集產(chǎn)物。使上述重結(jié)晶的未干燥的重結(jié)晶濾餅混懸在500毫升甲醇中。該混懸液加熱回流16小時，冷卻至室溫，?；?8小時，并經(jīng)過濾分離。真空干燥后得到16.1克(回收率81%)含一分子結(jié)晶水的實例3標題化合物。
實例4-47用合適的起始物質(zhì)，按上述類似的方法制備以下化合物。
實例號 化合物名稱m.p. M.S. 分子式 元素分析4.) (3β,5α,25R)-3-[(β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷-12-酮&gt;200℃ 755(M+H) C39H62O14計算值C59.22;H8.41777(M+Na) ·2H2O 實測值C59.54;H8.645.) (3α,5α,25R)-3-[(β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷&gt;300℃ 741(M+H) C37H64O13計算值C62.46;H8.74·0.5H2O 實測值C62.31;H8.366.) (3β,5β,25R)-3-[(β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷&gt;300℃ 741(M+H) C37H64O13計算值C61.72;H8.77·H2O 實測值C61.76;H9.047.) (3β,5α,25R)-3-[(β-D-葡糖醛酸基)氧]螺甾烷&gt;200℃ 615(M+Na) FAB HRMS(m/e): 計算值C33H51O9Na2637.3278637(M+2Na) 實測值637.33298.) (3β,5α,25R)-3-[(β-D-葡糖基)氧]螺甾烷-12-酮&gt;200℃ 593(M+H) C33H52O9計算值C64.89;H8.91615(M+Na) ·H2O 實測值 C64.46;H8.629.) (3β,5α,25R)-3-[(β-D-半乳糖基)氧]螺甾烷-11-酮&gt;200℃ 593(M+H) C33H52O9計算值C65.38;H8.89615(M+Na) ·0.75H2O 實測值C65.34;H8.6310.) (3β,5β,25S)-3-[(β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷&gt;250℃ 741(M+H) C39H64O13計算值C60.99;H8.85·1.5H2O 實測值C60.69;H8.9011.) (3β,5α,25R)-3-([(β-D-纖維素二糖基)氧]乙氧基)螺甾烷&gt;250℃ 785(M+H) C41H68O14計算值C60.65;H8.81·1.5H2O 實測值C60.53;H8.97
實例號 化合物名稱m.p. M.S. 分子式 元素分析12.) (3β,5α,25R)-3-([(β-D-吡喃半乳糖基)氧]乙氧基)螺甾烷225℃ 623(M+H) C35H58O9計算值C65.14;H9.45(dec) ·1.25H2O 實測值C65.39;H9.6113.) (3β,5α,25R)-3-[(β-D-麥芽糖基)氧]螺甾烷230℃ 741(M+H) C39H64O13計算值 C60.30;H8.82(dec) ·2H2O 實測值C60.64;H8.8414.) (3β,5α,25R)-3-[(β-D-乳糖基)氧]螺甾烷&gt;260℃ 741(M+H) C39H64O13計算值C63.22;H8.71實測值C6296;H8.6515.) (3β,5α,25R)-3-[(β-D-乳糖基)氧]螺甾烷-12-酮&gt;260℃ 755(M+H) C39H62O14計算值C61.31;H8.31·0.5H2O 實測值C61.02;H8.4516.)
210-212℃ 620(M+H) C39H62O14計算值C65.91;H9.32N2.20·1.0H2O 實測值C66.07;H9.55;
N2.2617.) (3β,5α,25R)-3-[(β-D-龍膽二糖基)氧]螺甾烷265℃ 741(M+H) C39H64O13計算值C61.72;H8.77(dec) ·1.0H2O 實測值C61.71;H8.9618.) (3β,5α,25R)-3-[(α-L-吡喃阿拉伯聚糖基)氧]螺甾烷&gt;200℃ 549(M+H) C32H52O7計算值C68.36;H9.59·0.75H2O 實測值C68.30;H9.6419.) (3β,5α,25R)-3-[(α-D-吡喃阿拉伯聚糖基)氧]螺甾烷&gt;200℃ 549(M+H) C32H52O7計算值C65.73;H9.65·2.0H2O 實測值C65.54;H9.25
實例號 化合物名稱m.p. M.S. 分子式 元素分析20.) (3β,5α,25R)-3-[(β-L-吡喃木糖基)氧]螺甾烷&gt;230℃ 549(M+H) C32H52O7計算值C68.91;H9.58·0.5H2O 實測值C68.52;H9.3621.) (3β,5α,25R)-3-[(β-L-吡喃巖藻糖基)氧]螺甾烷&gt;230℃ 561(M+H) C33H54O7計算值C68.25;H9.72·1.0H2O 實測值C68.62;H9.5322.) (3β,5α,25R)-3-[(β-D-吡喃木糖基)氧]螺甾烷&gt;220℃ 549(M+H) C32H52O7計算值C66.23;H9.64·1.75H2O 實測值C66.32;H9.3123.) (3β,5α,25R)-3-[(β-D-吡喃巖藻糖基)氧]螺甾烷&gt;220℃ 563(M+H) C33H54O7計算值C69.32;H9.69·0.5H2O 實測值C69.32;H9.7824.) (3β,5α,25R)-3-[(β-D-吡喃半乳糖基)氧]螺甾烷&gt;200℃ 579(M+H) C33H54O8計算值C66.12;H9.47·1.25H2O 實測值C66.46;H9.2625.) (3β,5α,25R)-3-[(3-O-β-D-吡喃半乳糖基)-α-D-吡喃阿拉伯聚糖基)氧]螺甾烷&gt;200℃ 579(M+H) C38H62O12計算值C62.64;H8.78·1H2O 實測值C62.93;H8.6626.) (3β,5α,25S)-3-[(β-D-吡喃半乳糖基)氧]螺甾烷&gt;200℃ 579(M+H) C33H54O8計算值C64.51;H9.44·2H2O 實測值C64.69;H9.4127.) (3β,5α,25R)-3-[(α-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷-11-酮290-292℃ 777(M+Na) FAB HRMS(m/e): 計算值C39H62O14755.4218實測值755.4163
反應式Ⅳ
實例48(3β，5α，11β，25R)-3-[(β-D-纖維素二糖基)氧]-11-羥基螺甾烷-12-酮脫乙酰作用根據(jù)Synthesis，1973，790所述的方法，將(3β，5α，11β，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷-11-醇-12-酮(240毫克，0.225毫摩爾)溶于甲醇(20毫升)和四氫呋喃(10毫升)中。向該溶液中加入氰化鉀(146毫克，2.25毫摩爾)在水(0.1毫升)和甲醇(5毫升)中的溶液。將得到的混合物加熱至80℃并保持4小時。冷卻后，使混合物濃縮至干并經(jīng)快速層析純化(用9∶1氯仿∶甲醇洗脫)，得到標題化合物。
Mp 245-247℃，MS(m/e)771(P+1)，793(P+Na).分析計算值C39H62O15·3H2O，C 56.70，H 8.31;實測值C 56.97，H 7.80.
制備A1(3β，5α，25R)-3-[(七乙?；?α-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷-11-酮正位異構(gòu)化作用在室溫下將氫溴酸(30%乙酸溶液，1.2毫升)加到(3β，5α，25R)-3-[(七乙酰基-β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷-11-酮(2.0克)的二氯甲烷(35毫升)溶液中，得到的混合物在室溫下攪拌94小時。緩慢地加入飽和碳酸氫鈉水溶液(20毫升)中止反應。分離有機層、用硫酸鎂干燥和真空干燥，得到1.637克黑色固體。經(jīng)重復的快速層析純化(用1∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫)，得到651毫克(產(chǎn)率33%)標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ5.41(t，J＝10Hz，1H);509(復雜峰，3H);4.91(t，J＝8Hz，1H);4.69(dd，J＝4 &amp; 10Hz，1H);4.49(復雜峰，3H);4.36(dd，J＝4 &amp; 13Hz，1H);3.99(m，3H);3.67(m，2H);3.40(m，3H);2.45(m，1H);2.22(s，2H);2.11(s，3H);2.07(s，3H);2.03(s，6H);2.00(s，3H);1.99(s，3H);1.97(s，3H);2.00-0.80(m，22H);1.02(s，3H);0.92(d，J＝7Hz，3H);0.77(d，J＝7Hz，3H);0.69(s，3H).DEPT13C NMR(CDCl3)δ210.0(s)，170.5(s)，170.3(s)，170.2(s)，169.6(s)，169.3(s)，169.1(s)，109.2(s)，100.9(d)，94.3(d)，80.6(d)，78.0(d)，77.0(d)，73.1(d)，71.9(d)，71.8(d)，71.2(d)，69.6(d)，68.1(d)，67.8(d)，66.9(d)，64.4(d)，62.0(t)，61.5(t)，60.7(d)，57.6(t)，55.7(d)，45.0(d)，44.3(s)，41.8(d)，36.9(d)，35.5(t)，35.4(t)，35.1(s)，32.7(t)，31.3(t)，31.2(t)，30.2(d)，28.7(t)，28.0(t)，27.4(t)，20.9(q)，20.7(q)，20.6(q)，20.5(q)，17.1(q)，17.0(q)，14.2(q)，12.1(q).IR(Kbr)1751(s)，1706(m)cm-1.MS(m/e)1049(M+H)，1071(M+Na).分析計算值 C53H76O21·H2O，C 59.65 H 7.37實測值C 59.66 H 7.00.MP248-249℃.
制備B1(3β，5α，25R)-3-[(七乙酰基-β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷-11-酮氟化鋅促進游離螺甾烷的偶合(3β，5α，25R)-3-羥基螺甾烷-11-酮(3.0克，6.97毫摩爾)和無水氯化鋅(2.88克，27.9毫摩爾)在無水乙腈(175毫升)中的混懸液經(jīng)蒸餾除去75毫升乙腈而達到干燥。將混懸液冷卻，加入七乙?；?β-D-纖維素二糖基溴化物(9.75克，13.9毫摩爾)，所得的混懸液加熱至65℃并保持3小時。冷卻至室溫后，加入二氯甲烷(150毫升)，混懸液攪拌10分鐘并過濾。濾液在真空下濃縮，得到10克粗品。將該物質(zhì)溶于8∶2的氯仿∶甲醇中，預先吸附在硅膠上并經(jīng)快速層析純化(洗脫液1∶1乙酸乙酯∶己烷，然后用單一的乙酸乙酯)，得到6.81克(產(chǎn)率93%)標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ5∶11(復雜峰，2H);5.04(t，J＝9Hz，1H);4.90(t，J＝9Hz，1H);4.83(t，J＝8Hz，1H);4.49(復雜峰，4H);4.34(dd，J＝4.5 &amp; 12.5Hz，1H);4.04(t，J＝13Hz，1H);4.03(t，J＝11Hz，1H);3.72(t，J＝9.5Hz，1H);3.65(m，1H);3.56(m，1H);3.45(m，1H);2.47(m，1H);2.22(s，2H);2.08(s，3H);2.06(s，3H);2.00(s，6H);1.99(s，6H);1.96(s，3H);2.00-1.00(m，22H);0.98(s，3H);0.92(d，J＝7Hz，3H);0.77(d，J＝7Hz，3H);0.68(s，3H).DEPT13C NMR(CDCl3)δ209.9(s)，170.5(s)，170.3(s)，170.2(s)，169.9(s)，169.8(s)，169.5(s)，169.3(s)，169.0(s)，109.2(s)，100.8(d)，99.4(d)，90.0(s)，80.6(d)，79.4(d)，76.6(d)，75.3(s)，72.9(d)，72.6(d)，72.5(d)，71.9(d)，71.8(d)，71.6(d)，67.8(s)，66.9(t)，64.4(d)，62.1(t)，61.5(t)，60.8(s)，60.7(d)，57.6(t)，55.7(d)，44.8(d)，44.3(s)，41.8(d)，36.9(d)，35.6(t)，35.2(s)，34.1(t)，32.7(t)，31.3(t)，31.2(t)，30.2(d)，29.0(t)，28.7(t)，28.0(t)，20.9(q)，20.7(q)，20.6(q)，20.5(q)，20.5(q)，17.1(q)，17.0(q)，14.2(q)，12.0(q).IR(KBr)1756(s)，1706(m)cm-1.MS(m/e)1049(M+H).分析計算值 C53H76O21·H2O，C 59.65，H 7.37實測值C 59.86，H 7.25.MP210-212℃.
用合適的起始物質(zhì)，按與上述通法類似的方法制備以下化合物(制備B2～B41)。
制備B2(3β，5α，25R)-3-[(四乙?；?β-D-半乳糖基)氧]螺甾烷-12-酮制備B3(3α，5α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷制備B4(3β，5β，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷制備B5(3β，5α，25R)-3-[(三乙?；?β-D-葡糖醛酸基)氧]螺甾烷甲酯制備B6(3β，5α，25R)-3-[(四乙酰基-β-D-吡喃葡糖基)氧]螺甾烷-12-酮制備B7(3β，5α，25R)-3-[(四乙?；?β-D-吡喃半乳糖基)氧]螺甾烷-11-酮制備B8(3β，5α，25R)-3-[(七乙酰基-β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷制備B9(3β，5α，25R)-3-([(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]乙氧基)螺甾烷制備B10(3β，5α，25R)-3-([(四乙?；?β-D-吡喃半乳糖基)氧]乙氧基)螺甾烷制備B11(3β，5α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-乳糖基)氧]螺甾烷制備B12(3β，5α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-乳糖基)氧]螺甾烷-12-酮制備B13(3β，5α，25R)-3-[(三乙?；?α-L-吡喃阿拉伯聚糖基)氧]螺甾烷制備B14(3β，5α，25R)-3-[(三乙?；?α-D-吡喃阿拉伯聚糖基)氧]螺甾烷制備B15(3β，5α，25R)-3-[(三乙酰基-β-L-吡喃木糖基)氧]螺甾烷制備B16(3β，5α，25R)-3-[(三乙?；?β-L-吡喃巖藻糖基)氧]螺甾烷制備B17(3β，5α，25R)-3-[(三乙?；?β-D-吡喃木糖基)氧]螺甾烷制備B18(3β，5α，25R)-3-[(三乙?；?β-D-吡喃巖藻糖基)氧]螺甾烷制備B19(3β，5α，25R)-3-[(四乙?；?β-D-吡喃半乳糖基)氧]螺甾烷制備B20(3β，5α，25R)-3-[(六乙酰基-3-O-β-D-吡喃半乳糖基-α-D-吡喃阿拉伯聚糖基)氧]螺甾烷制備B21(3β，5α，25S)-3-[(四乙?；?β-D-吡喃半乳糖基)氧]螺甾烷制備B22(3β，5α，12β，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]-12-羥基螺甾烷-11-酮制備B23(3β，5α，11α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]-11-羥基螺甾烷制備B24(3β，5α，11β，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]-11-羥基螺甾烷制備B25(3β，5α，25R)-3-[(四乙酰基-β-D-吡喃葡糖基)氧]螺甾烷-11-酮制備B26(3β，5α，11β，12β，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]-11，12-二(羥基)螺甾烷制備B27(3β，5α，11α，12β，25R)-3-[(七乙酰基-β-D-纖維素二糖基)氧]-11，12-二(羥基)螺甾烷制備B28(3β，5α，12α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]-12-羥基螺甾烷制備B29(3β，5α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-乳糖基)氧]-螺甾烷-11-酮制備B30(3β，5α，25R)-3-[(七乙酰基-β-D-纖維素二糖基)氧]-螺甾烷-12-酮制備B31(3β，5α，11α，12α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]-11，12-二羥基螺甾烷制備B32(3β，5α，11α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]-11-羥基螺甾烷-12-酮制備B33(3β，5α，25R)-3-[(七乙酰基-β-D-纖維素二糖基)氧]-螺甾烷-11，12-二酮制備B34(3β，5α，11β，12α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]-11，12-二(羥基)螺甾烷制備B35(3β，5α，12α，25R)-3-[(β-D-纖維素二糖基)氧]-12-羥基螺甾烷-11-酮制備B36(3β，5α，12β，25R)-3-[(七乙?；?β-D-乳糖基)氧]-12-羥基螺甾烷-11-酮制備B37(3β，5α，25R)-3-[(十二乙?；?β-D-麥芽三糖基)氧]螺甾烷-11-酮制備B38(3β，5α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-麥芽糖基)氧]螺甾烷-11-酮制備B39(1α，3β，5α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]-1-羥基螺甾烷制備B40(3β，5α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷-6-酮制備B41(3β，5α，11β，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]-11-羥基螺甾烷-12-酮制備C1(3β，5α，25R)-3-[(七乙酰基-β-D-乳糖基)氧]螺甾烷溴化汞/氰化汞促進甲硅烷基化螺甾烷的偶合在室溫下將粉狀4A分子篩(1克)加到三甲基甲硅烷基惕告吉寧(1.17克，2.4毫摩爾)和乙酰溴乳糖(3.36克，4.8毫摩爾)的CH2Cl2(15毫升)和CH3CN(5毫升)溶液中。攪拌15分鐘后加入Hg(CN)2(2.4克，9.6毫摩爾)和HgBr2(3.4克，9.6毫摩爾)，混合物于室溫下攪拌3小時?；旌衔镉靡宜嵋阴?50毫升)稀釋并過濾。濾液依次用1N HCl(3×30毫升)和鹽水(1×30毫升)洗滌，干燥(Na2SO4)并過濾，然后真空濃縮。產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化(10-20% EtOAc/CH2Cl2)，得到400毫克產(chǎn)物，為無色固體。
MS 489(M+H)+.
1H NMR(250MHz，CDCl3)δ5.35(d，1H，J＝1.0Hz);5.2(dd，1H，J＝4.5，4.5Hz);5.15(dd，1H，J＝6.0，5.0Hz);4.95(dd，1H，J＝4.5，1.0Hz);4.85(dd，1H，J＝5.0，4.5Hz);4.55(d，1H，J＝6.0Hz);4.4(m，3H);4.1(m，3H);3.85(t，1H，J＝3.0Hz);3.8(t，1H，J＝4.5Hz);3.5(m，3H);3.35(t，1H，J＝5.0Hz);2.15(s，3H);2.12(s，3H);2.07(s，12H);2.0(s，3H);2.0-0.5(m，27H);0.98(d，3H，J＝4.0Hz);0.82(s，3H);0.8(d，3H，J＝4.0Hz);0.73(s，3H).
用合適的起始物質(zhì)，按與上述通法類似的方法制備以下化合物(制備C2-C4)。
制備C2(3β，5α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-麥芽糖基)氧]螺甾烷制備C3(3β，5α，25R)-3-[(三乙?；?β-D-乙酰氨基-2-脫氧吡喃葡糖基)氧]螺甾烷制備C4(3β，5α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-龍膽二糖基)氧]螺甾烷制備D1
(3β，5α，25R)-3-三甲基甲硅烷氧基螺甾烷螺甾烷的甲硅烷基化于0℃將三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(4毫升，22.1毫摩爾)滴加到惕告吉寧(6克，14.4毫摩爾)和三乙胺(6毫升，45毫摩爾)的CH2Cl2(50毫升)溶液中。1小時后，混合物用乙醚(100毫升)稀釋，并依次用飽和NaHCO3溶液(2×50毫升)和鹽水(1×50毫升)洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾并真空濃縮。加入甲醇，形成的沉淀過濾，用甲醇洗滌并干燥，得到6.2克產(chǎn)物，為無色固體。
MP 197-198℃.MS 489(M+H)+.1H NMR(250MHz，CDCl3)δ4.38(q，1H，J＝3.0Hz);3.5(m，2H);3.4(t，1H，J＝5.5Hz);2.0-0.5(m，27H);1.0(d，3H，J＝4.0Hz);0.85(s，3H);0.8(d，3H，J＝4.0Hz);0.75(s，3H);0.1(s，9H).
制備E1(3β，5α，25R)-3-(2-羥基乙氧基)螺甾烷氫化鋰鋁還原于0℃將氫化鋰鋁(0.285克，7.5毫摩爾)加到惕告吉寧-O-乙酸乙酯(2.5克，4.98毫摩爾)的THF(50毫升)溶液中。1小時后，依次地加入H2O(0.285毫升)、15% NaOH(0.285毫升)和H2O(0.85毫升)中止反應。混合物用乙醚(25毫升)稀釋，用MgSO4干燥，過濾并真空濃縮，得到2.1克產(chǎn)物，為無色固體。
MP 207-208℃.MS 461(M+H)+.
1H NMR(250MHz，CDCl3)δ4.4(q，1H，J＝3.0Hz);3.7(m，2H);3.6(m，2H);3.5(m，1H);3.4(t，1H，J＝5.5Hz);3.3(m，1H);2.0-0.5(m，28H)，1.0(d，3H，J＝4.0Hz);0.85(s，3H);0.8(d，3H，J＝4.0Hz);0.75(s，3H).
制備F1((3β，5α，25R)螺甾烷-3-基)-O-乙酸乙酯[Rh(OAc)2]2催化偶合在室溫下于1小時內(nèi)將溶于30毫升CH2Cl2的重氮基乙酸乙酯(5.5毫升，0.048摩爾)滴加到惕告吉寧(10克，0.024摩爾)和乙酸銠二聚物(250毫克)的CH2Cl2(250毫升)溶液中。在整個滴加過程中放出氣體，當?shù)渭油戤吅髮⒒旌衔镌贁嚢?小時?；旌衔镉眉和?100毫升)稀釋，通過硅膠柱過濾。濾液在真空下濃縮，向殘余物中加入甲醇，形成的沉淀經(jīng)過濾并用甲醇洗滌，干燥，得到6.0克產(chǎn)物，為無色固體。
MP 119-120℃.MS 503(M+H)+.
1H NMR(250MHz，CDCl3)δ4.35(q，1H，J＝3.0Hz);4.2(m，2H);4.1(s，2H);3.4(m，3H);2.0-0.5(m，30H);0.95(d，3H，J＝4.0Hz);0.8(s，3H);0.75(d，3H，J＝4.0Hz);0.72(s，3H).
制備G1(3β，5α，11β，12α，25R)螺甾烷-3，11，12-三醇(3β，5α，11α，25R)-11，23-二溴-3-乙酰氧基螺甾烷-12-酮用(3β，5α，25R)-3-乙酰氧基螺甾烷-12-酮，按J.Chem.Soc.，按1956，4344中所述的方法合成標題化合物。
(3β，5α，11α，12β，25R)-11，23-二溴螺甾烷-3，12-二醇將(3β，5α，11α，25R)-11，23-二溴-3-乙酰氧基螺甾烷-12-酮(20.00克，與甲苯共沸干燥)溶于THF(600毫升)中并冷卻至-78℃。緩慢加入氫化鋰鋁(96.0毫升，1.0M THF溶液)，得到的混合物于-78℃攪拌2小時。于0℃攪拌0.5小時。用套管將混合物小心地轉(zhuǎn)移到攪拌的3M氯化銨水溶液(200毫升)中。分離有機相，與固體殘余物的THF洗液合并，濃縮，得到標題化合物。
(3β，5α，11β，12β，25R)-23-溴-11，12-環(huán)氧螺甾烷-3-醇以下方法是改變的Helv.Act.Chem.1953，36，1241方法。在室溫下將(3β，5α，11α，12β，25R)-11，23-二溴螺甾烷-3，12-二醇(18.08克)溶于吡啶(500毫升)中，并用氧化銀(70.0克)處理。所得的混合物在暗處攪拌71小時。將混合物過濾。依次用乙醚和氯仿洗滌固體。這些洗滌液與濾液合并并濃縮。得到的固體經(jīng)快速層析純化(1∶1己烷∶乙酸乙酯)，得到12.2克1∶1標題化合物與(3β，5α，25R)-23-溴螺甾烷-3-醇-12-酮的混合物。進一步層析(7∶3己烷∶乙酸乙酯)得到純的標題化合物。
(3β，5α，11β，12α，25R)-23-溴-12-(三氯乙酰氧基)螺甾烷-3，11-二醇按J.Chem.Soc.1956，4330所述的方法，在室溫下將(3β，5α，11β，12β，25R)-23-溴-11，12-環(huán)氧螺甾烷-3-醇用三氯乙酸的甲苯溶液處理3天，得到標題化合物。
(3β，5α，11β，12α，25R)-23-溴-螺甾烷-3，11，12-三醇按J.Chem.Soc.1956，4330所述的方法，將(3β，5α，11β，12α，25R)-23-溴-12-(三氯乙酰氧基)螺甾烷-3，11-二醇用氫氧化鈉水溶液和乙醇皂化，得到標題化合物。
(3β，5α，11β，12α，25R)-螺甾烷-3，11，12-三醇按J.Chem.Soc.1956，4330所述的方法，將(3β，5α，11β，12α，25R)-23-溴-12-(三氯乙酰氧基)螺甾烷-3，11-二醇用鋅和乙酸還原，得到標題化合物。
制備G2
(3β，5α，12α，25R)螺甾烷-3，12-二醇-11-酮(3β，5α，11β，12α，25R)-3，12-二(乙酰氧基)螺甾烷-11-醇按J.Chem.Soc.1956，4330所述的方法，將(3β，5α，11β，12α，25R)螺甾烷-3，11，12-三醇(制備G1)用乙酰酐和吡啶有選擇地乙?；玫綐祟}化合物。
(3β，5α，12α，25R)-3，12-二(乙酰氧基)螺甾烷-11酮按Org.Syn.1976，55，84所述的方法，將(3β，5α，11β，12α，25R)-3，12-二(乙酰氧基)螺甾烷-11-醇用三氧化鉻和吡啶在二氯甲烷溶液中氧化，得到標題化合物。
(3β，5α，12α，25R)螺甾烷-3，12-二醇-11-酮按Syn.1973，790所述的方法，將(3β，5α，12α，25R)-3，12-二(乙酰氧基)螺甾烷-11-酮用氰化鉀水溶液、甲醇和THF皂化，得到標題化合物。
制備G3(3β，5α，11β，25R)螺甾烷-3，11-二醇(3β，5α，11β，25R)螺甾烷-3，11-二醇按J.Am.Chem.Soc.1951，73，1777所述的方法，在室溫下將(3β，5α，25R)螺甾烷-3-醇-11-酮(Aldrich Chemical Company，Milwaukee，WI或Steraloids Inc.，Wilton，N.H.，或見制備G13)用氫化鋰鋁的THF溶液還原，轉(zhuǎn)化成標題化合物。
制備G4(3β，5α，11α，25R)螺甾烷-3，11-二醇(3β，5α，11β，25R)螺甾烷-3，11-二醇按J.Am.Chem.Soc.1953，75，1282所述的方法，將(3β，5α，25R)螺甾烷-3-醇-11-酮(Aldrich Chemical Company，Milwaukee，WI或Steraloids Inc.，Wilton，N.H.，或見制備G13)用鋰和氨還原，轉(zhuǎn)化成標題化合物。
制備G5(3β，5α，11β，12β，25R)螺甾烷-3，11，12-三醇(3β，5α，11β，12β，25R)螺甾烷-3，11，12-三醇按J.Am.Chem.Soc.1951，73，1777所述的方法，在室溫下將(3β，5α，12β，25R)-3，12-二(乙酰氧基)螺甾烷-11-酮(從Steraloids，Inc.購買，或見制備G13)用氫化鋰鋁的THF溶液還原，轉(zhuǎn)化成標題化合物。
制備G6(3β，5α，11α，12β，25R)螺甾烷-3，11，12-三醇(3β，5α，12β，25R)螺甾烷-3，12-二醇-11-酮將(3β，5α，12β，25R)-3，12-二(乙酰氧基)螺甾烷-11-酮(從Steraloids，Inc.購買，或見制備G13)用碳酸鉀水溶液、甲醇和THF皂化，得到標題化合物。
(3β，5α，11α，12β，25R)螺甾烷-3，11，12-三醇按J.Am.Chem.Soc.1953，75，1282所述的方法，將(3β，5α，12β，25R)螺甾烷-3，12-二醇-11-酮用鋰和氨還原，轉(zhuǎn)化成標題化合物。
制備G7(3β，5α，12α，25R)螺甾烷-3，12-二醇(3β，5α，12α，25R)螺甾烷-3，12-二醇按J.Am.Chem.Soc.1954，76，4013所述的方法，將(3β，5α，25R)螺甾烷-3-醇-12-酮用氫化鋰鋁的乙醚溶液還原，得到C-12醇的混合物，從中分離出標題化合物。
制備G8(3β，5α，25R)螺甾烷-3-醇-11，12-二酮(3β，5α，12β，25R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)螺甾烷-12-醇-11-酮按J.Am.Chem.Soc.1972，94，6190所述的方法，將(3β，5α，12β，25R)螺甾烷-3，12-二醇-11酮(見制備G6)用叔丁基二甲基氯硅烷和咪唑的DMF溶液甲硅烷基化，得到標題化合物。
(3β，5α，25R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)螺甾烷-11，12-二酮按Org.Syn.1976，55，84所述的方法，將(3β，5α，12β，25R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)螺甾烷-12-醇-11-酮用三氧化鉻和吡啶的二氯甲烷溶液氧化，得到標題化合物。
(3β，5α，25R)螺甾烷-3-醇-11，12-二酮按J.Am.Chem.Soc.1972，94，6190所述的方法，將(3β，5α，25R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)螺甾烷-11，12-二酮用氫氟酸的乙腈溶液脫去甲硅烷基，得到標題化合物。
制備G9(3β，5α，11β，25R)螺甾烷-3，11-二醇-12-酮(3β，5α，11β，12β，25R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)螺甾烷-11，12-二醇按J.Am.Chem.Soc.1951，73，1777所述的方法，在室溫下將(3β，5α，12β，25R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)螺甾烷-12-醇-11-酮(見制備G8)用氧化鋰鋁的THF溶液還原，轉(zhuǎn)化成標題化合物。
(3β，5α，11β，12β，25R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)12-乙酰氧基螺甾烷-11-醇將(3β，5α，11β，12β，25R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)螺甾烷-11，12-二醇用乙酸酐、吡啶和二甲氨基吡啶的二氯甲烷溶液有選擇地乙酰化，得到標題化合物。
(3β，5α，11β，12β，25R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-11-(三甲基甲硅烷氧基)-12-乙酰氧基螺甾烷按Tetrahedron Letters，1981，22，3455所述的方法，將(3β，5α，11β，12β，25R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-12-乙酰氧基螺甾烷-11-醇用三甲基甲硅烷基三氟乙酸酯(trimethylsilyltriflate)和2，6-二甲基吡啶的二氯甲烷溶液甲硅烷基化。
(3β，5α，11β，12β，25R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-11-(三甲基甲硅烷氧基)螺甾烷-12-醇將(3β，5α，11β，12β，25R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-11-(三甲基甲硅烷氧基)-12-乙酰氧基螺甾烷用氫化鋰鋁的THF溶液處理脫去乙?；S后小心地加入氯化銨水溶液。所得的標題化合物經(jīng)硅膠層析，標題化合物的11-12個甲硅烷基在柱上移動，因此可不經(jīng)純化應用。
(3β，5α，11β，25R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-11-(三甲基甲硅烷氧基)螺甾烷-12-酮按Org.Syn.1976，55，84所述的方法，將(3β，5α，11β，12β，25R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-11-(三甲基甲硅烷氧基)螺甾烷-12-醇用三氧化鉻和吡啶的二氯甲烷溶液進行氧化，得到標題化合物。
(3β，5α，11β，25R)螺甾烷-3，11-二醇-12-酮按J.Am.Chem.Soc.1972，94，6190所述的方法，將(3β，5α，11β，25R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-11-(三甲基甲硅烷氧基)螺甾烷-12-酮用氫氟酸的乙腈溶液進行脫甲硅烷基，從而得到標題化合物。必須小心地處理標題化合物，因為當它與堿接觸時，它會重排為(3β，5α，12β，25R)螺甾烷-3，12-二醇-11-酮。
制備G10(3β，5α，11α，25R)螺甾烷-3，11-二醇-12-酮(3β，5α，11α，12β，25R)-3，11-二(乙酰氧基)螺甾烷-12-醇按J.Am.Chem.Soc.1955，77，1632所述的方法，將(3β，5α，11α，12β，25R)螺甾烷-3，11，12-三醇(見制備G6)乙?；玫揭宜狨サ幕旌衔?，從其中分離出標題化合物。
(3β，5α，11α，25R)-3，11-二(乙酰氧基)螺甾烷-12-酮按Org.Syn.1976，55，84所述的方法，將(3β，5α，11α，12β，25R)-3，11-二(乙酰氧基)螺甾烷-12-醇用三氧化鉻和吡啶的二氯甲烷溶液氧化，得到標題化合物。
(3β，5α，11α，25R)螺甾烷-3，11-二醇-12-酮將(3β，5α，11α，25R)-3，11-二(乙酰氧基)螺甾烷-12-酮用甲醇鈉的甲醇和THF溶液皂化，得到標題化合物。
制備G11(3β，5α，11α，12α，25R)螺甾烷-3，11，12-三醇(3β，5α，25R)螺甾烷-3-醇-12-甲苯磺?；陮?3β，5α，25R)螺甾烷-3-醇-12-酮(8.00克)溶于冰乙酸(200毫升)中，并溫熱至50℃。加入對甲苯磺?；ｋ?6.928克)，溶液于50℃攪拌30分鐘。在室溫下再攪拌2小時后，加入水(200毫升)。收集得到的固體，用水(100毫升)洗滌、干燥、與回流的丙酮(300毫升)一起研磨，趁熱過濾，并干燥，得到3.903克標題化合物。
(3β，5α，25R)螺甾-11-烯-3-醇將(3β，5α，25R)螺甾烷-3-醇-12甲苯磺?；?9.100克)和甲醇鈉(8.379克)在DMF(200毫升)中的混合物加熱至150℃并保持35分鐘，然后冷卻至室溫。接著混合物倒入冰水(1200毫升)中，將得到的混懸液過濾。收集的固體用水(100毫升)洗滌、空氣干燥并溶于二氯甲烷(700毫升)中。該溶液用水(2×200毫升)洗滌、用MgSO4干燥并濃縮，得到白色固體。隨后經(jīng)快速層析，分離得到標題化合物(m.p.179～181℃，J.Am.Chem.Soc.1954，76，4013報道的m.p.為188～192℃)。
(3β，5α，11α，12α，25R)螺甾烷-3，11，12-三醇按Tetrahedron Letters 1976，1973所述的方法，將(3β，5α，25R)螺甾-11-烯-3-醇用四氧化鋨和N-甲基嗎啉-N-氧化物在水、叔丁醇和丙酮中的溶液氧化，得到標題化合物。
制備G12(3β，5α，12β，25R)螺甾烷-3，12-二醇-11-酮(3β，5α，11β，25R)-11-溴螺甾烷-3-醇-12-酮將50加侖甲醇裝入搪瓷反應器內(nèi)，然后在液面下通入氯化氫氣體直至重量為7.7公斤(5.0當量)。通氯化氫氣體完畢后，向反應器中加入18.8公斤(42.2摩爾)(3β，5α，25R)螺甾烷-3-醇-12-酮、50加侖甲醇和10加侖二氯甲烷?；旌衔锢鋮s至10℃，并在2小時內(nèi)加入8.4公斤溴(52.7摩爾，1.25當量)在10加侖二氯甲烷中的溶液，同時使罐的溫度保持在約10℃。當加入完畢后，將反應液溫熱至室溫并攪拌2小時。此時TLC表明反應已完成。
反應液用50加侖水稀釋并攪拌10分鐘。分層后，水層用30加侖二氯甲烷萃取2次。3份合并的有機萃取層用30加侖水洗滌2次，用30加侖飽和鹽水洗滌1次，然后用7.0公斤硫酸鎂干燥。在30英寸Lapp濾器上濾除干燥劑，然后用3加侖的二氯甲烷洗滌2次。將濾液和洗滌液合并，并在大氣壓下蒸餾至總體積為7加侖。加入10加侖甲醇，蒸餾，再加入10加侖甲醇并繼續(xù)蒸餾。當最后的體積小于10加侖時將混合物冷卻至室溫。所得的混懸液粒化2小時，于30英寸Lapp濾器上過濾，濾餅用3加侖甲醇洗滌2次。濾餅于45～50℃真空干燥，得到12.6公斤(產(chǎn)率58.6%)標題化合物。
(3β，5α，12β，25R)螺甾烷-3，12-二醇-11-酮將12.4公斤(3β，5α，11β，25R)-11-溴螺甾烷-3-醇-12-酮(24.34摩爾)、33加侖叔丁醇、33加侖水和7.5公斤(189摩爾，7.75當量)粒狀氫氧化鈉裝入搪瓷反應器內(nèi)。加熱回流使反應1.5小時，在回流下保持4.5小時(罐溫度為83℃)，然后冷卻至室溫。此時TLC表明反應已完成。
反應液經(jīng)蒸餾除去叔丁醇。這由真空蒸餾和常壓蒸餾完成。濃縮期間分2次加入水，每次32.5加侖。當除去叔丁醇后，將水混懸液冷卻至室溫并?；?小時。混懸液在30英寸Lapp濾器上過濾，用3加侖水洗滌2次，濾餅于60℃空氣干燥。得到11.1公斤標題化合物。
制備G13(3β，5α，25R)螺甾烷-3-醇-11-酮(3β，5α，12β，25R)-3，12-二乙酰氧基螺甾烷-11-酮將26加侖吡啶、26加侖乙酸酐和11.0公斤(3β，5α，12β，25R)螺甾烷-3，12-二醇-11-酮(制備G12)裝入搪瓷反應器中?；旌衔锘亓?小時(罐內(nèi)溫度為128℃)，然后使其冷至室溫。將反應液真空蒸餾至總體積為15加侖(蒸餾期間罐溫度約為45℃)?；鞈乙河?5加侖乙酸稀釋，再真空蒸餾至總體積為15加侖(最終罐溫度約為80℃)?；旌衔镉?7加侖水稀釋，并冷至室溫。粒化5小時后，在30英寸Lapp濾器上過濾分離標題化合物，然后用水洗滌2次，每次3加侖。濾餅在真空下于60℃干燥，得到12.2公斤(93.3%)。
(3β，5α，25R)螺甾烷-3-醇-11-酮經(jīng)內(nèi)部蛇形管通入液氮，使不銹鋼反應器冷卻至-80℃。向反應器內(nèi)加入氨直至裝料量為54.5公斤(80升，3.200摩爾，170當量)。
在注入氨的同時，將10.0公斤(3β，5α，12β，25R)-3，12-二乙酰氧基螺甾烷-11-酮(18.84摩爾)和40加侖THF裝入搪瓷反應器內(nèi)。該溶液在大氣壓下蒸餾，直至達到總體積為26加侖。
注入氨結(jié)束時，在30分鐘內(nèi)加2.8公斤鈣屑(69.0克原子，3.7當量)，同時保持罐溫度為-50℃。在上述加入結(jié)束時，于20分鐘內(nèi)加入(3β，5α，12β，25R)-3，12-二乙酰氧基螺甾烷-11-酮的THF溶液(加入結(jié)束時罐內(nèi)溫度為-35℃)，隨后用1.0加侖THF洗滌。反應混合物于-35℃～-40℃攪拌30分鐘。當反應液為-35℃～-40℃時，依次加入3.33升溴代苯(4.98公斤，31.7摩爾，1.68當量)和3.33升水。
加完后，開始從反應器內(nèi)蒸餾氨。該蒸餾導向水洗滌器。當全部的氨被蒸除后，反應液(于24℃)轉(zhuǎn)移到搪瓷反應器內(nèi)，然后用4加侖THF洗滌。將合并的溶液和洗滌液真空蒸餾至粘稠的油狀物。向其中加入35加侖甲醇和3.3公斤(59摩爾)粒狀氫氧化鉀。混合物加熱回流1小時，冷卻，再加入10升乙酸和44加侖水。將混懸液進一步冷卻至室溫，并粒化1小時。在30英寸Lapp濾器上過濾分出標題化合物，然后用5加侖3∶1水/甲醇洗滌。于55℃真空干燥，得到7.05公斤(86.9%)。
制備G物理數(shù)據(jù)制備G中所述的全部(3β，5α，25R)螺甾烷-3-醇類化合物均得到滿意的MS和IR數(shù)據(jù)(見表1)。各種二醇和三醇產(chǎn)物可通過質(zhì)子NMR譜區(qū)別(見表2)。
表1特征的質(zhì)譜和紅外光譜數(shù)據(jù)LSMIS IR化合物 分子式 母離子 特征的共振(cm-1,強度,溶劑)11α-醇 C27H44O4433 3575(m),3440(m)(CHCl3)11β-醇 C27H44O4433 3560(m),3425(m)(CHCl3)12α-醇 C27H44O4433 3590(m),3420(m)(CHCl3)12β-醇 C27H44O4433 ---11α,12α-二醇 C27H44O5449 3424(m)(KBr)11α,12β-二醇 C27H44O5449 3550(m),3450(m)(CHCl3)11β,12α-二醇 C27H44O5449 3441(m)(KBr)11β,12β-二醇 C27H44O5449 3600(m),3450(m)(CHCl3)11α-醇12-酮 C27H42O5447 3515(m),1705(s)(KBr)11β-醇12-酮 C27H42O5447 3450(m),1712(s)(KBr)12α-醇11-酮 C27H42O5447 3410(m),1706(s)(KBr)12β-醇11-酮 C27H42O5447 3475(m),1708(s)(CHCl3)11,12-二酮 C27H40O5445 3600(w),3400(m),1710(w)1670(s),1605(m)(CHCl3)111-酮 C27H42O4431 3600(w),3450(m),1705(s)(CHCl3)1-數(shù)據(jù)提示，該化合物在CHCl3中容易互變異構(gòu)成烯醇酮式。
表2特征的質(zhì)子核磁共振譜數(shù)據(jù)2化合物 峰&gt;2ppm11α-醇 3.90(ddd,6,6&amp;4Hz,1H),2.26(dt,13&amp;4,1H)11β-醇 4.22(br s,1H)12α-醇 3.67(s,1H),2.37(dd,8&amp;7Hz,1H)12β-醇 3.26(dd,10&amp;4Hz,1H)11α,12α-二醇 3.91(m,1H),3.56(d,3H,1H),2.45(dd,9&amp;7Hz,1H)11α,12β-二醇 3.55(m,1H),3.03(d,8H,1H),2.21(dt,12&amp;4Hz,1H)
11β,12β-二醇 4.07(br s,1H),3.13(d,3Hz,1H)11α-醇12-酮 3.72(m,1H),2.39(dt,13&amp;4Hz,1H)11β-醇12-酮 3.96(m,1H),2.2(m,1H)12α-醇11-酮 3.51(s,1H),2.57(dd,8&amp;7Hz,1H),2.2(complex,7H)12β-醇11-酮 3.78(s,1H),2.39(dt,13&amp;4Hz,1H),2.1(m,2H)除11β-醇-12-酮溶于DMSO-d6中外，所有樣品都溶于CDCl3中。H116，H13，H26eg和H26ax的峰也于＞2ppm處觀察到。在CDCl3中，這些峰于4.37(ddd，J＝9.9和7Hz，1H)，3.56(七重峰，J＝4Hz，1H)，3.45(ddd，J＝10，6和2Hz，1H)，3.35(t，J＝11Hz，1H)處觀察到。
制備H1(5α，25R)螺甾烷-3-酮于0℃將氯鉻酸吡啶鎓(pcc)加到惕告吉寧(50.00克，120.0毫摩爾)、硅藻土(160克)的CH2Cl2(1000毫升)混合物中。使反應達到室溫并攪拌5小時。反應液用10004毫升Et2O稀釋，并通過硅膠柱過濾。硅膠柱用另外的6000毫升Et2O洗滌。濾液在真空下濃縮，得到45.00克標題化合物(90.4%)。
1HNMR(250MHz，CDCl3)d4.38(q，J＝7Hz，1H);3.40(m，2H);2.20-2.45(m，3H);0.70-2.14(m，36H);1.02(s，3H);0.96(d，J＝7Hz，3H);0.76(s，3H);0.76(d，J＝7Hz，3H).MS415(M+H)+;MP 209-211℃.
制備H2(2α，5α，25R)-2-溴代螺甾烷-3-酮在氮氣流下將(5α，25R)螺甾烷-3-酮(1.00克，2.41毫摩爾)和四氫呋喃(10毫升)的混合物冷卻至-78℃。加入溴(0.39克，2.41毫摩爾)，反應混合物逐漸溫熱至室溫。3小時后，加入飽和的亞硫酸氫鈉溶液中止反應?；旌衔镉靡宜嵋阴ハ♂?，依次用飽和的亞硫酸氫鈉(1X)、飽和的碳酸氫鈉(1X)、鹽水(1X)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。加入乙醚，生成的沉淀經(jīng)過濾，并用己烷洗滌，得到1.20克(85%)標題化合物。
1HNMR(250MHz，CDCl3)d4.75(q，J＝7Hz，1H);4.40(q，J＝7Hz，1H);3.40(m，2H);2.64(q，J＝6，1H);2.40(m，2H);0.70-2.55(m，34H);1.10(s，3H);0.96(d，J＝7Hz，3H);0.80(s，3H);0.80(d，J＝7，3H).MS 493(M+H)+.
制備H3(5α，25R)螺甾-1-烯-3-酮在氮氣流下將溴化鋰(0.700克，8.06毫摩爾)、碳酸鋰(1.20克，16.24毫摩爾)和無水N，N-二甲基甲酰胺(30毫升)的混合物加熱至95℃。向該混合物中加入(2α，5α，25R)-2-溴代螺甾烷-3-酮(4.00克，8.11毫摩爾)。反應混合物于130℃攪拌3小時。冷卻至室溫后，反應混合物用乙酸乙酯稀釋，依次用水(3X)、鹽水(1X)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮，得到3.31克(98%)標題化合物。
1HNMR(250MHz，CDCl3)d7.10(d，J＝10Hz，1H);5.85(d，J＝10Hz，1H)，4.40(q，J＝7Hz，1H);3.40(m，2H);2.30(m，2H);0.70-2.05(m，33H);1.02(s，3H);0.96(d，J＝7Hz，3H);0.80(s，3H);0.78(d，J＝7Hz，3H).MS413(M+H)+.
制備H4(1α，2α，5α，25R)-1，2-環(huán)氧-螺甾烷-3-酮在氮氣流下將(5α，25R)螺甾-1-烯-3-酮(2.87克，6.96毫摩爾)、四氫呋喃(30毫升)、甲醇(50毫升)和15%氫氧化鈉(1毫升)的混合物攪拌?；旌衔锢鋮s至0℃并加入30%過氧化氫(5毫升)。反應混合物逐漸溫熱至室溫并攪拌4小時。反應液用乙酸乙酯稀釋，冷卻至0℃，然后加入飽和的亞硫酸氫鈉溶液中止反應?；旌衔镆来斡蔑柡偷膩喠蛩釟溻c(2X)、鹽水(1X)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮，得到2.64克(88%)標題化合物。
1HNMR(250MHz，CDCl3)d4.40(q，J＝7Hz，1H);3.40(m，3H);3.24(d，J＝6Hz，1H);2.25(dd，J＝18，4Hz，1H);0.70-2.28(m，34H);0.98(d，J＝7Hz，3H);0.92(s，3H);0.80(s，3H);0.78(d，J＝7Hz，3H).MS 429(M+H)+.
制備H5(1α，3β，5α，25R)-1，3-二(羥基)螺甾烷于0℃向(1α，2α，5α，25R)-1，2-環(huán)氧螺甾烷-3-酮的THF(20毫升)溶液中加入氫化鋰鋁(0.43克，15.38毫摩爾)。將反應液逐漸溫熱至室溫，3小時后再加入氫化鋰鋁(0.10克，3.58毫摩爾)。1小時后將反應液冷卻至0℃，依次加入H2O(0.75毫升)、15%NaOH(0.75毫升)和H2O(1.50毫升)中止反應?；旌衔镉肕gSO4干燥，過濾并真空濃縮。產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化(50% EtOAc/50%己烷～95% EtOAc/5% MeOH)，得到0.460克(34%)標題化合物。
1HNMR(250MHz，CDCl3)d 4.48(q，J＝7Hz，1H);4.04(m，1H);3.80(m，1H);3.40(m，2H);0.75-2.05(m，37H);0.96(d，J＝6Hz，3H);0.84(s，3H);0.78(d，J＝6Hz，3H);0.76(s，3H).MS 433(M+H)+.
制備I1(3β，5α，25R)-3-[(七乙酰基-β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷-1-酮于0℃向(1α，3β，5α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]-1-羥基螺甾烷(0.2克，0.19毫摩爾，見制備B39)、硅藻土(0.2克)的CH2Cl2(5毫升)混合物中加入氯鉻酸吡啶鎓(0.123克，0.57毫摩爾)。使反應達到室溫，并攪拌2小時。反應液用15毫升Et2O稀釋，經(jīng)硅膠柱過濾。硅膠柱用另外的500毫升Et2O洗滌。濾液在真空下濃縮，得到0.18克標題化合物(90%)。
1HNMR(250MHz，CDCl3)d 5.15(m，3H);4.90(m，2H);4.50(m，2H);4.35(m，2H);4.05(m，2H);3.65(m，3H);3.40(m，2H);2.35(t，J＝12.5Hz，1H);2.60(q，J＝6Hz，1H);1.95-2.20(m，21H);0.70-1.90(m，37H);1.15(s，3H);0.95(d，J＝7Hz，3H);0.80(d，J＝6Hz，3H);0.76(s，3H).MS1049(M+H)+.
制備J1(3β，25R)-3-乙氧基甲氧基-5-螺甾烯在氮氣流下于室溫將薯蕷皂苷元(2.5克，6.0毫摩爾)、氯甲基乙基醚(1.14克，12.0毫摩爾)、二異丙基乙胺(3.90克，30.0毫摩爾)和1，2-二氯乙烷(75毫升)的混合物攪拌4小時。加入甲醇(＜1毫升)中止反應。混合物用乙酸乙酯稀釋，依次用水(2X)、鹽水(1X)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮，得到2.17克(76.5%)標題化合物，為無色固體。
1H NMR(250MHz，CDCl3)d 5.35(d，2H，J＝7.0Hz);4.75(s，2H);4.4(m，1H);3.6(q，2H，J＝7.0Hz);3.4(m，2H);3.35(t，1H，J＝11Hz);2.4-0.7(m，38H);1.2(s，3H);0.95(d，3H，J＝7Hz);0.8(d，3H，J＝7Hz);0.75(s，3H).MS777(M+Na)+;mp 125-127℃.
制備J2
(3β，5α，6α，25R)-3-乙氧基甲氧基-6-羥基螺甾烷向(3β，25R)-3-乙氧基甲氧基-5-螺甾烯(0.10克，0.21毫摩爾)的四氫呋喃(8毫升)溶液中加入甲硼烷-四氫呋喃復合物(0.68毫升，0.68毫摩爾)。在氮氣流下于室溫將混合物攪拌3.5小時。反應混合物冷卻至0℃并加入甲醇(1.5毫升)、15%氫氧化鈉溶液(1.5毫升)和30%過氧化氫(1.5毫升)。然后將反應混合物逐漸溫熱至室溫并攪拌過夜。于0℃加入飽和的亞硫酸氫鈉溶液中止反應。混合物用乙酸乙酯稀釋，依次用氯化銨溶液(1X)、鹽水(1X)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮，得到0.11克6α-醇和6β-醇的混合物。經(jīng)硅膠快速層析分離2個產(chǎn)物(6∶4己烷/乙酸乙酯)。主要產(chǎn)物(Rf＝0.40)鑒定為標題化合物。
1H NMR(250MHz;CDCl3)d 4.7(s，2H);4.4(m，1H);3.6(q，2H，J＝11.0Hz);3.45(m，3H);3.35(t，1H，J＝11.0Hz);2.3-0.6(m，41H);1.8(d，3H，J＝7.0Hz);0.82(s，3H)，0.78(d，3H，J＝7.0Hz);0.75(s，3H).MS491(M+H)+;mp171℃.
制備J3(3β，5α，25R)-3-乙氧基甲氧基-螺甾烷-6-酮于0℃向(3β，5α，6α，25R)-3-乙氧基甲氧基-6-羥基螺甾烷(0.90克，1.8毫摩爾)和硅藻土(8.0克)的無水二氯甲烷混合物中加入氯鉻酸吡啶鎓(1.98克，9.20毫摩爾)。在1小時內(nèi)將反應混合物逐漸溫熱至室溫，并再攪拌5小時。然后反應混合物經(jīng)硅膠柱過濾，用乙醚作為洗脫劑。合并的乙醚流出液在真空下濃縮，得到0.80克(91%)標題化合物，為無色固體。
1H NMR(250MHz;CDCl3)d 4.75(m，2H);4.4(m，1H);3.6(q，2H，J＝7.0Hz);3.45(m，2H);3.35(t，1H，J＝11.0Hz);2.4-0.6(m，40H);0.9(d，3H，J＝7.0Hz);0.8(d，3H，J＝7.0Hz);0.78(s，6H).MS489.0(M+H)+;mp 191-193℃.
制備J4(3β，5α，25R)-螺甾烷-6-酮向(3β，5α，25R)-3-乙氧基甲氧基-螺甾烷-6-酮(0.70克，1.43毫摩爾)的甲醇(10毫升)和四氫呋喃(10毫升)溶液中加入濃鹽酸(2滴)。混合物在氮氣流下攪拌并加熱至62℃。15分鐘后，將反應液冷至0℃并用15%氫氧化鈉溶液中和?；旌衔锝?jīng)真空濃縮，然后用乙酸乙酯稀釋。有機層依次用水(2X)、鹽水(1X)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空濃縮并經(jīng)快速層析純化(1∶1己烷/乙酸乙酯)，得到0.55克(89.4%)標題化合物，為無色固體。
1H NMR(250MHz;CDCl3)d 4.4(m，1H);3.45(m，2H);3.35(t，1H，J＝11.0Hz);2.35-0.6(m，38H);0.95(d，3H，J＝7.0Hz);0.75(d，3H，J＝7.0);0.71(s，6H).MS431(M+H)+;mp 210-212℃.
制備K1(3β，5α，6α，25R)-3-[(七乙?；?β-D-纖維素二糖基)氧]-6-羥基螺甾烷向(3β，5α，25R)-3-[(七乙酰基-β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷-6-酮(1.5克，1.43毫摩爾，見制備B41)的乙醇(20毫升)和二氯甲烷(5毫升)溶液中加入硼氫化鈉(0.11克，2.86毫摩爾)，在氮氣流下于室溫將混合物攪拌4小時。然后反應混合物冷至0℃，并用1N鹽酸中和?；旌衔镌谡婵障虏糠值貪饪s，然后用乙酸乙酯稀釋，依次用1N鹽酸(1X)、鹽水(1X)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮，得到1.00克(66%)標題化合物，為無色固體。
1H NMR(250MHz;CDCl3)d 5.2-4.4(m，14H);4.3(m，1H);3.75-3.35(m，3H);3.3(t，1H，J＝11.0Hz);2.15-0.5(m，59H);0.95(s，3H);0.90(d，3H，J＝7.0Hz);0.75(s，3H);0.70(d，3H，J＝7.0Hz).MS1051(M+H)+應該理解，本發(fā)明不限于本文以上所述內(nèi)容和所示具體實例，而是可以進行各種變化和改進，但不偏離以下權(quán)利要求所述新定則的精神和范圍。
權(quán)利要求
1.螺甾烷基苷(式IA)，
Q4和Q5均為亞甲基；并且其中R1為β-D-吡喃葡糖基，β-D-吡喃糖醛酸葡糖基，β-D-2-乙酰氨基-2-脫氧-吡喃葡糖基，β-D-吡喃半乳糖基，β-D-吡喃巖藻糖基，β-L-吡喃巖藻糖基，β-D-吡喃木糖基，β-L-吡喃木糖基，α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，α-L-吡喃阿拉伯聚糖基，α-D-纖維素二糖基，β-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，β-D-龍膽二糖基，3-O-β-D-吡喃半乳糖基-α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，或β-D-麥芽三糖基；或者(B)Q1，Q4和Q5均為亞甲基；
并且其中R1為β-D-吡喃葡糖基，β-D-吡喃糖醛酸葡糖基，β-D-2-乙酰氨基-2-脫氧-吡喃葡糖基，β-D-吡喃巖藻糖基，β-L-吡喃巖藻糖基，β-D-吡喃木糖基，β-L-吡喃木糖基，α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，α-L-吡喃阿拉伯聚糖基，β-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，β-D-龍膽二糖基，3-O-β-D-吡喃半乳糖基-α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，或β-D-麥芽三糖基；或者(C)Q1，Q4和Q5均為亞甲基；
C25為R構(gòu)型并且其中R1為β-D-吡喃糖醛酸葡糖基，β-D-2-乙酰氨基-2-脫氧-吡喃葡糖基，β-D-吡喃巖藻糖基，β-L-吡喃巖藻糖基，β-D-吡喃木糖基，β-L-吡喃木糖基，α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，α-L-吡喃阿拉伯聚糖基，β-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，β-D-龍膽二糖基，3-O-β-D-吡喃半乳糖基-α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，或β-D-麥芽三糖基；或者(D)Q1，Q2，Q4和Q5均為亞甲基；和Q3為
R1O-亞烷基
或R1O-亞烷基
并且其中R1為β-D-2-乙酰氨基-2-脫氧-吡喃葡糖基，β-D-吡喃巖藻糖基，β-D-吡喃木糖基，β-L-吡喃木糖基，α-L-吡喃阿拉伯聚糖基，β-D-纖維素二糖基，β-D-龍膽二糖基，3-O-β-D-吡喃半乳糖基-α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，或β-麥芽三糖基；或者(E)Q1，Q2和Q5均為亞甲基；Q4為羰基或
；Q3為
；C5為α型；C25為R構(gòu)型并且其中R1為β-D-吡喃半乳糖基，β-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，或β-D-麥芽三糖基；或者(F)Q1，Q2和Q4各自為亞甲基；Q5為羰基或
Q3為
C5為α型；C25為R構(gòu)型并且其中R1為β-D-吡喃半乳糖基，β-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，或β-D-麥芽三糖基；條件是不包括(3β，5α，25R)-3-[(β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷。
2.權(quán)利要求1所述的化合物，其中Q1為羰基、
Q2、Q4和Q5各自為亞甲基，Q3為
，C5氫為α型，C25為R構(gòu)型。
3.權(quán)利要求2所述的化合物，其中Q1為羰基，R1為β-D-纖維素二糖基。
4.權(quán)利要求2所述的化合物，其中Q1為羰基，R1為β-D-吡喃半乳糖基。
5.權(quán)利要求2所述的化合物，其中Q1為羰基，R1為α-D-纖維素二糖基。
6.權(quán)利要求2所述的化合物，其中Q1為羰基，R1為β-D-吡喃葡糖基。
7.權(quán)利要求2所述的化合物，其中Q1為羰基，R1為β-D-乳糖基。
8.權(quán)利要求2所述的化合物，其中Q1為羰基，R1為β-D-麥芽糖基。
9.權(quán)利要求2所述的化合物，其中Q1為羰基，R1為β-D-麥芽三糖基。
10.權(quán)利要求2所述的化合物，其中Q1為
，R1為β-D-纖維素二糖基。
11.權(quán)利要求2所述的化合物，其中Q1為
，R1為β-D-纖維素二糖基。
12.權(quán)利要求1所述的化合物，其中Q1，Q4和Q5各自為亞甲基，Q2為
C5氫為α型，C25為R構(gòu)型。
13.權(quán)利要求12所述的化合物，其中Q2為
，R1為β-D-纖維素二糖基。
14.權(quán)利要求1所述的化合物，其中Q1為羰基、
Q2為羰基、
Q4和Q5各自為亞甲基，C25為R構(gòu)型，C5氫為α型。
15.權(quán)利要求14所述的化合物，其中Q1為羰基，Q2為羰基，R1為β-D-纖維素二糖基。
16.權(quán)利要求14所述的化合物，其中Q1為羰基，Q2為
，R1為β-D-纖維素二糖基。
17.權(quán)利要求14所述的化合物，其中Q1為羰基，Q2為
，R1為β-D-乳糖基。
18.權(quán)利要求14所述的化合物，其中Q1為
，Q2為羰基，R1為β-D-纖維素二糖基。
19.權(quán)利要求14所述的化合物，其中Q1為
，Q2為羰基，R1為β-D-纖維素二糖基。
20.權(quán)利要求1所述的化合物，其中Q1、Q4和Q5各自為亞甲基，Q2為羰基，Q3為
，C5氫為α型，C25為R構(gòu)型。
21.權(quán)利要求20所述的化合物，其中R1為β-D-乳糖基。
22.權(quán)利要求20所述的化合物，其中R1為β-D-纖維素二糖基。
23.權(quán)利要求1所述的化合物，其中Q1和Q2、Q4和Q5各自為亞甲基，Q3為
，C25為R構(gòu)型。
24.權(quán)利要求23所述的化合物，其中C5氫為β型，R1為β-D-纖維素二糖基。
25.權(quán)利要求23所述的化合物，其中C5氫為α型，R1為β-D-龍膽二糖基。
26.權(quán)利要求1所述的化合物，其中Q1、Q2和Q5各自為亞甲基，Q3為
，Q4為羰基，C5氫為α型，C25為R構(gòu)型。
27.權(quán)利要求26所述的化合物，其中R1為β-D-纖維素二糖基。
28.權(quán)利要求1所述的化合物，其中Q1、Q2和Q4各自為亞甲基，Q3為
，Q5為羰基，C5氫為α型，C25為R構(gòu)型。
29.權(quán)利要求28所述的化合物，其中R1為β-D-纖維素二糖基。
30.控制哺乳動物血膽甾醇過多和動脈粥樣硬化的方法，該方法包括給患有血膽甾醇過多或動脈粥樣硬化的哺乳動物服用控制血膽甾醇過多或動脈粥樣硬化劑量的螺甾烷苷(式Ⅰ)。
其中(A)
Q4和Q5均為亞甲基;并且其中R1為β-D-吡喃葡糖基，β-D-吡喃糖醛酸葡糖基，β-D-2-乙酰氨基-2-脫氧-吡喃葡糖基，β-D-吡喃半乳糖基，β-D-吡喃巖藻糖基，β-L-吡喃巖藻糖基，β-D-吡喃木糖基，β-L-吡喃木糖基，α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，α-L-吡喃阿拉伯聚糖基，α-D-纖維素二糖基，β-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，β-D-龍膽二糖基，3-O-β-D-吡喃半乳糖基-α-D-吡喃阿拉伯聚糖基，或β-D-麥芽三糖基;或者(B)Q1、Q2和Q5均為亞甲基;
Q4為羰基或
C5為α型;C25為R構(gòu)型并且其中R1為β-D-吡喃半乳糖基，β-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，或β-D-麥芽三糖基;或者(C)Q1，Q2和Q4各自為亞甲基;
Q5為羰基或
;C5為α型;C25為R構(gòu)型并且其中R1為β-D-吡喃半乳糖基，β-D-纖維素二糖基，β-D-乳糖基，β-D-麥芽糖基，或β-D-麥芽三糖基;條件是不包括(3β，5α，25R)-3-[(α-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷，(3β，5α，25R)-3-[(β-D-吡喃葡糖基)氧]螺甾烷，(3β，5α，25R)-3-[(β-D-纖維素二糖基)氧]螺甾烷或(3β，5α，25R)-3-[(β-D-吡喃半乳糖基)氧]螺甾烷-12-酮。
31.權(quán)利要求30所述的方法，其中Q1，Q2，Q4和Q5各自為亞甲基，C25為R構(gòu)型，Q3為
。
32.權(quán)利要求31所述的方法，其中C5氫為β型，R1為β-D-纖維素二糖基。
33.權(quán)利要求31所述的方法，其中C5氫為α型，R1為β-D-吡喃糖醛酸葡糖基。
34.權(quán)利要求31所述的方法，其中C5氫為α型，R1為β-D-麥芽糖基。
35.權(quán)利要求31所述的方法，其中C5氫為α型，R1為β-D-乳糖基。
36.權(quán)利要求31所述的方法，其中C5氫為α型，R1為β-D-龍膽二糖基。
37.權(quán)利要求31所述的方法，其中C5氫為α型，R1為β-D-吡喃半乳糖基。
38.權(quán)利要求30所述的方法，其中Q1為羰基、
，Q2、Q4和Q5各自為亞甲基，Q3為
，C25為R構(gòu)型，C5氫為α型。
39.權(quán)利要求38所述的方法，其中Q1為羰基，R1為β-D-纖維素二糖基。
40.權(quán)利要求38所述的方法，其中Q1為羰基，R1為β-D-吡喃半乳糖基。
41.權(quán)利要求38所述的方法，其中Q1為羰基，R1為β-D-纖維素二糖基。
42.權(quán)利要求38所述的方法，其中Q1為羰基，R1為β-D-吡喃葡糖基。
43.權(quán)利要求38所述的方法，其中Q1為羰基，R1為β-D-麥芽糖基。
44.權(quán)利要求38所述的方法，其中Q1為羰基，R1為β-D-麥芽三糖基。
45.權(quán)利要求38所述的方法，其中Q1為羰基，R1為β-D-乳糖基。
46.權(quán)利要求38所述的方法，其中Q1為
／R1為β-D-纖維素二糖基。
47.權(quán)利要求38所述的方法，其中Q1為
，R1為β-D-纖維素二糖基。
48.權(quán)利要求30所述的方法，其中Q1、Q4和Q5各自為亞甲基，Q2為羰基、
C25為R構(gòu)型，C5氫為α型。
49.權(quán)利要求48所述的方法，其中Q2為羰基，R1為β-D-纖維素二糖基。
50.權(quán)利要求48所述的方法，其中Q2為羰基，R1為β-D-乳糖基。
51.權(quán)利要求48所述的方法，其中Q2為
，R1為β-D-纖維素二糖基。
52.權(quán)利要求48所述的方法，其中Q2為
，R1為β-D-吡喃半乳糖基。
53.權(quán)利要求30所述的方法，其中Q1為羰基、
，Q2為羰基、
Q4和Q5各自為亞甲基，C25為R構(gòu)型，C5氫為α型。
54.權(quán)利要求53所述的方法，其中Q1為羰基，Q2為羰基，R1為β-D-纖維素二糖基。
55.權(quán)利要求53所述的方法，其中Q1為羰基，Q2為
，R1為β-D-纖維素二糖基。
56.權(quán)利要求53所述的方法，其中Q1為羰基，Q2為
，R1為β-D-乳糖基。
57.權(quán)利要求53所述的方法，其中Q1為
，Q2為羰基，R1為β-D-纖維素二糖基。
58.權(quán)利要求53所述的方法，其中Q1為
，Q2為羰基，R1為β-D-纖維素二糖基。
59.權(quán)利要求30所述的方法，其中Q1、Q2和Q5各自為亞甲基，Q3為
，Q4為羰基，C5氫為α型，C25為R構(gòu)型。
60.權(quán)利要求59所述的方法，其中R1為β-D-纖維素二糖基。
61.權(quán)利要求30所述的方法，其中Q1、Q2和Q4各自為亞甲基，Q3為
，Q5為羰基，C5氫為α型，C25為R構(gòu)型。
62.權(quán)利要求61所述的方法，其中R1為β-D-纖維素二糖基。
63.控制哺乳動物血膽甾醇過多或動脈粥樣硬化的藥用組合物，該組合物包括權(quán)利要求1所述的化合物和藥學上適用的載體。
64.含有權(quán)利要求1所述化合物的水合物的組合物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一些可用作為降低血膽甾醇藥物和治療動脈粥樣硬化藥物的甾族苷。
文檔編號C07J71/00GK1085561SQ93107620
公開日1994年4月20日 申請日期1993年6月25日 優(yōu)先權(quán)日1992年6月26日
發(fā)明者M·P·鄧尼諾, P·A·麥卡錫 申請人:美國輝瑞有限公司