本發(fā)明涉及材小蠹屬昆蟲檢疫鑒定技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種材小蠹屬昆蟲基因條形碼檢測試劑盒；本發(fā)明還涉及應(yīng)用該試劑盒進(jìn)行材小蠹屬昆蟲基因條形碼檢測的方法。

背景技術(shù)：

材小蠹屬(非中國種)是中國進(jìn)境植物檢疫性有害生物,我國口岸多次檢疫截獲國外的材小蠹種類。其主要分布于亞熱帶和熱帶地區(qū),是一類具有重要經(jīng)濟(jì)意義的林木蛀干害蟲。國內(nèi)外材小蠹的研究多數(shù)集中于形態(tài)學(xué)分類,有關(guān)該類群分子系統(tǒng)進(jìn)化方面的研究還較少。

隨著國際貿(mào)易與旅游業(yè)的發(fā)展以及氣候變化等因素的影響，有害生物的傳播風(fēng)險(xiǎn)加劇，生物安全已逐漸成為全球關(guān)注的重要問題。加強(qiáng)防控物種入侵首先要加強(qiáng)有害生物風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測與監(jiān)測，對(duì)口岸截獲樣品的準(zhǔn)確快速鑒定是其中一項(xiàng)重要內(nèi)容。分子鑒定的方法能實(shí)現(xiàn)外來有害物種的有效鑒定，DNA條形碼的出現(xiàn)能夠很好地應(yīng)對(duì)檢疫生物名錄不斷更新變化，國內(nèi)國際分子鑒定的方法難以統(tǒng)一化、標(biāo)準(zhǔn)化的問題。Foottit 等(2008)對(duì)13屬300種蚜蟲研究，證明 DNA 條形碼序列能夠有效區(qū)分其中96% 的物種，種內(nèi)的序列差異平均僅為 0. 2% ，對(duì)于入侵蚜蟲物種的監(jiān)測與防控具有重要意義；陳念和趙樹進(jìn)(2009)以毒蛾和果蠅為例綜述并討論了在入侵物種分子鑒定中，DNA 條形碼的方法比物種特異性 PCR 或 PCR-RFLP 鑒定方法更具有可操作性，在成本、周期和穩(wěn)定性方面具有明顯的優(yōu)勢，認(rèn)為 COⅠ條形碼是對(duì)入侵昆蟲準(zhǔn)確和靈活鑒定的首選方法。但是關(guān)于材小蠹屬昆蟲的基于條形碼快速檢測技術(shù)研究，國內(nèi)外相關(guān)報(bào)道并不多。因此，建立準(zhǔn)確可靠的材小蠹屬昆蟲條形碼檢測技術(shù)，不僅能為材小蠹屬昆蟲的分類鑒定提供一種新的方法，還能對(duì)我國防范外來物種入侵、筑牢國門生物安全防線具有重要的意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提出一種材小蠹屬昆蟲基因條形碼檢測試劑盒，實(shí)現(xiàn)快速高效的檢測材小蠹屬昆蟲。

本發(fā)明所要解決的另一個(gè)技術(shù)問題是提供了一種利用前述試劑盒進(jìn)行材小蠹屬昆蟲基因條形碼檢測的方法。

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下的技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的。本發(fā)明是一種材小蠹屬昆蟲基因條形碼檢測試劑盒，其特征在于：用于快速檢測材小蠹屬昆蟲，該試劑盒包括基因條形碼序列盤和引物試劑，所述的引物試劑的序列如下：

上游引物C1-J-2183：5,-CAACATTTATTTTGATTTTTTGG-3,；

下游引物TL2-N-3014：5,-TCCAATGCACTAATCTGCCATATTA-3,；

所述基因條形碼序列盤存有37條標(biāo)準(zhǔn)條碼序列，其序列見基因序列表中序列3－序列39所示。

優(yōu)選的試劑盒還包括下列試劑：Taqbuffer，MgC12，dNTPmix，TaqDNA聚合酶，ddH2O，DNA模板。

本發(fā)明試劑盒所述的引物試劑和其它試劑最好有10次以上的用量。

本發(fā)明所述的材小蠹屬昆蟲基因條形碼檢測試劑盒，所適用的小蠹屬昆蟲為12種，分別為：赤材小蠹、闊面材小蠹、單刻材小蠹、細(xì)點(diǎn)材小蠹、對(duì)粒材小蠹、伴隨材小蠹、暗翅材小蠹、四粒材小蠹、北方材小蠹、偽材小蠹、雙齒材小蠹和栗粒材小蠹。

本發(fā)明還公開了一種利用權(quán)利要求1所述的材小蠹屬昆蟲基因條形碼檢測試劑盒檢測材小蠹屬昆蟲的方法，其特點(diǎn)是，該方法包括以下步驟：

（一）DNA的提??；提取步驟如下：

（1）將待檢蟲體放入適量蒸餾水中，適當(dāng)晃動(dòng)，將蟲體內(nèi)的酒精置換出來，然后將蟲體置于吸水紙上吸干蟲體體表的水分；

（2）將蟲體放入離心管中，用小杵研磨；加入100μL pH8.3的CTAB分離緩沖液，研磨，再加入100μL上述分離液緩沖液中，繼續(xù)研磨，直至研磨充分；

（3）加入200μL pH8.3的CTAB分離緩沖液，漩渦混勻，加入3μL 20mg/mL Pro-k，輕柔混和，55℃保溫3-5小時(shí)，直到組織完全解體，離心管中液體清亮為止；

（4）13000rpm離心10分鐘，取上清液置于離心管中；

（5）加等體積的25:24:1的酚：氯仿：異戊醇抽提，上下顛倒十次，13000rpm離心5分鐘，重復(fù)抽提1-2次，直至水相與有機(jī)相界面處幾乎看不到白色的蛋白質(zhì)為止；

（6）取上清液于新離心管，加入等體積-20℃異丙醇，顛倒混合沉淀DNA，-20℃冰箱沉淀過夜或-70℃冰箱放置1-2小時(shí)；形成白色絮狀DNA沉淀；12000rpm離心10-20分鐘；

（7）棄上清液；將沉淀用500μL -20℃的70%乙醇溶液清洗，10000 rpm離心5分鐘，傾去液體，洗滌2次，將離心管倒置于吸水紙上晾干；

（8）沉淀晾干后，溶解于20-30μL的TE溶液中，-20℃保存；

（二）PCR反應(yīng)條件與反應(yīng)體系：

PCR反應(yīng)總體積為50μL，含1U Taq聚合酶，反應(yīng)緩沖液，2.5mmol/L MgCl2，0.25mmol/L dNTP，50ng 上游引物C1-J-2183，50ng TL2-N-3014TL2-N-3014，模板NDA為2 μL；

在200 μL的薄壁管中依次加入如上體系，混合均勻，置于PCR儀進(jìn)行PCR反應(yīng)，擴(kuò)增條件如下：94℃變性45s，51℃退火1min，72℃延伸1min，共35個(gè)循環(huán)；反應(yīng)前94℃預(yù)變性3min，反應(yīng)后72℃延伸5min；

（三）PCR結(jié)果判定：

擴(kuò)增反應(yīng)結(jié)束后，將PCR特異性擴(kuò)增產(chǎn)物在1%瓊脂糖膠上進(jìn)行電泳檢測；電泳結(jié)束后，將凝膠置于紫外分析儀上觀察，并用凝膠成像儀拍照后記錄結(jié)果；

照片顯示材小蠹與標(biāo)準(zhǔn)DNA樣品在450bp位置有清晰的擴(kuò)增條帶；即為目標(biāo)條帶；

（四）PCR產(chǎn)物測序獲得基因序列，得到待測材小蠹測序的序列；

（五）材小蠹屬昆蟲基因比對(duì)：

將待測材小蠹測序得到的序列與基因條形碼序列盤中標(biāo)準(zhǔn)基因條碼序列進(jìn)行比對(duì)，結(jié)果按以下方式運(yùn)行：

（1）與標(biāo)準(zhǔn)基因條碼序列相似度100%，則認(rèn)定其為該種類；

（2）沒有與任何標(biāo)準(zhǔn)條碼序列相似度達(dá)100%，則將待測材小蠹基因序翻譯為氨基酸，與標(biāo)準(zhǔn)基因條碼序列所對(duì)應(yīng)的氨基酸序列比對(duì)計(jì)算遺傳距離，與未知種類材小蠹基因序列遺傳距離小于2%的標(biāo)準(zhǔn)基因條碼種類，即為目標(biāo)種類；當(dāng)遺傳距離都大于2%，判定未知材小蠹種類不在此12種材小蠹范圍內(nèi)。

步驟（五）材小蠹屬昆蟲基因比對(duì)的優(yōu)選技術(shù)方案是：沒有與任何標(biāo)準(zhǔn)條碼序列相似度達(dá)100%，則將待測材小蠹基因序列按“無脊椎動(dòng)物密碼子”翻譯為氨基酸，與標(biāo)準(zhǔn)基因條碼序列所對(duì)應(yīng)的氨基酸序列使用“P-distance模型”計(jì)算遺傳距離，與未知種類材小蠹基因序列遺傳距離小于2%的標(biāo)準(zhǔn)基因條碼種類，即為目標(biāo)種類；當(dāng)遺傳距離都大于2%，判定未知材小蠹種類不在此12種材小蠹范圍內(nèi)。

步驟（三）PCR結(jié)果判定中優(yōu)選的技術(shù)特征是：將PCR特異性擴(kuò)增產(chǎn)物在含有0.5ug/mL EB Free的1%瓊脂糖膠上進(jìn)行電泳檢測。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提出的材小蠹屬昆蟲基因條形碼檢測試劑盒，以及一種高效、準(zhǔn)確、便捷的材小蠹屬昆蟲分子檢測方法，可在分子水平將材小蠹屬12種昆蟲種類區(qū)分，并具有如下特點(diǎn)：

（1）操作簡單，對(duì)物種分類鑒定知識(shí)缺乏的人也可以通過標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)流程對(duì)材小蠹屬物種進(jìn)行鑒定；

（2）不受個(gè)體發(fā)育階段和形態(tài)特征的限制，只要個(gè)體存在完整的目標(biāo)DNA片段即可滿足鑒定需求；

（3）目標(biāo)基因足夠短，僅為450bp，降低了實(shí)驗(yàn)對(duì)標(biāo)本質(zhì)量的需求，擴(kuò)增效率高；

（4）種間變異大而種內(nèi)變異小以區(qū)分不同物種；包含足夠的系統(tǒng)進(jìn)化信息以定位物種在分類系統(tǒng)中的位置。能滿足使用需求。

附圖說明

圖1是部分引物C1-J-2183/ TL2-N-3014 PCR擴(kuò)增結(jié)果圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。

實(shí)施例1，一種材小蠹屬昆蟲基因條形碼檢測試劑盒，包括基因條形碼序列盤和10次用量以上的引物試劑引物序列如下：

上游引物C1-J-2183(5^,-CAACATTTATTTTGATTTTTTGG-3^,)

下游引物TL2-N-3014(5^,-TCCAATGCACTAATCTGCCATATTA-3^,)

所述基因條形碼序列盤存有37條標(biāo)準(zhǔn)條碼序列，其序列見基因序列表中序列3－序列39所示，適用于下述12種材小蠹屬昆蟲檢測：

表1材小蠹屬種類名稱

其配套組分，還包括10次用量以上的下列試劑：Taqbuffer，MgC1₂，dNTPmix，TaqDNA聚合酶，ddH₂O，DNA模板。

實(shí)施例2，材小蠹屬昆蟲基因條形碼檢測方法：

選取赤材小蠹、竹蠹、闊面材小蠹、雙棘長蠹、單刻材小蠹、四粒材小蠹、栗粒材小蠹七份樣品作為待檢測樣品。采用實(shí)施例1的試劑盒檢測，步驟如下：

（1）DNA的提?。翰捎贸Ｒ?guī)蛋白酶K消化法提取總DNA。提取步驟如下：

將蟲體（處）放入適量蒸餾水中，適當(dāng)晃動(dòng)，將蟲體內(nèi)的酒精置換出來，然后將蟲體置于吸水紙上吸干蟲體體表的水分；將蟲體放入1.5ml的離心管中，用特制的小杵快速研磨幾下；加入100μL無毒CTAB分離緩沖液（PH8.3），研磨，再加入100μL上述分離液中，繼續(xù)研磨，直至研磨充分；加入200μL CTAB分離緩沖液（PH8.3），漩渦混勻，加入3μL 20mg/ml Pro-k，輕柔混和，55℃保溫3-5小時(shí)，直到組織完全解體，離心管中液體清亮為止；13000rpm離心10分鐘，取上清液于新離心管中；加等體積的酚：氯仿：異戊醇（25:24:1）抽提，上下顛倒十次，13000rpm離心5分鐘，重復(fù)抽提1-2次，直至水相與有機(jī)相界面處幾乎看不到白色的蛋白質(zhì)為止；取上清液于新離心管，加入等體積冰冷的異丙醇（預(yù)先置于-20℃冰箱內(nèi)），顛倒混合沉淀DNA，-20℃冰箱沉淀過夜或-70℃冰箱放置1-2小時(shí)；形成白色絮狀DNA沉淀；12000rpm離心10-30分鐘，棄上清液；將沉淀用500μL -20℃冰冷的70%乙醇溶液清洗，10000rpm離心5分鐘，小心傾去液體，洗滌2次，將離心管倒置于吸水紙上晾干；沉淀晾干后，溶解于20-30μL的TE溶液中，-20℃保存。

試驗(yàn)過程可以使用由V-gene biotechnology limited生產(chǎn)的基因組提取試劑盒。

（2）序列擴(kuò)增與測定

PCR反應(yīng)總體積為50μL，含1UTaq聚合酶，反應(yīng)緩沖液，2.5mmol/L MgCl₂,0.25mmol/LdNTP, 50ng C1-J-2183, 50ngTL2-N-3014,模板NDA為2 μL。擴(kuò)增條件如下：94℃變性45s,51℃退火1min,72℃延伸1min，共35個(gè)循環(huán)。反應(yīng)前94℃預(yù)變性3min，反應(yīng)后72℃延伸5min。擴(kuò)增反應(yīng)結(jié)束后，將PCR特異性擴(kuò)增產(chǎn)物在含有0.5ug/mlEB Free的1%瓊脂糖膠上進(jìn)行電泳檢測。電泳結(jié)束后，將凝膠置于紫外分析儀上觀察，并用凝膠成像儀拍照后記錄結(jié)果并分析。

電泳圖，如圖1所示，7個(gè)樣品中（8為空白對(duì)照），5種材小蠹都擴(kuò)增出450bp大小的條帶，竹蠹、雙棘長蠹未擴(kuò)增出條帶，排除的這兩個(gè)種不在材小蠹昆蟲之內(nèi)，符合實(shí)際，排除準(zhǔn)確。擴(kuò)增出條帶的產(chǎn)物以引物作為測序引物進(jìn)行雙向測序，由上海捷瑞生物科技有限公司采用常規(guī)技術(shù)完成。

（3）基因比對(duì)

利用現(xiàn)有的比對(duì)軟件和計(jì)算機(jī)技術(shù)，未知種類材小蠹測序得到的序列結(jié)果與基因條形碼序列盤中標(biāo)準(zhǔn)基因條碼序列進(jìn)行比較，結(jié)果按以下方式運(yùn)行：

A:與標(biāo)準(zhǔn)基因條碼序列相似度100％，則認(rèn)定其為該種；

B:沒有與任何標(biāo)準(zhǔn)條碼序列相似度達(dá)，則將未知種類材小蠹基因序列按“無脊椎動(dòng)物密碼子”翻譯為氨基酸，與標(biāo)準(zhǔn)基因條碼的氨基酸序列使用“P-distance模型”計(jì)算遺傳距離，與未知種類材小蠹基因序列遺傳距離小于2％的標(biāo)準(zhǔn)基因條碼種類，即為目標(biāo)種類；如果遺傳距離都大于2％，說明未知材小蠹種類不在此12種材小蠹范圍內(nèi)。

所得5條序列依次輸入基因條形碼序列盤進(jìn)行計(jì)算比對(duì)，結(jié)果如下:

1.赤材小蠹序列與序列盤中赤材小蠹標(biāo)準(zhǔn)條碼基因相似度為99％，與序列盤中赤材小蠹標(biāo)準(zhǔn)條碼基因遺傳距離0.4％，按結(jié)果認(rèn)定規(guī)則認(rèn)定為赤材小蠹，鑒定結(jié)果準(zhǔn)確。

2. 闊面材小蠹序列與序列盤中闊面材小蠹標(biāo)準(zhǔn)條碼基因相似度為100％，鑒定結(jié)果準(zhǔn)確。

3. 單刻材小蠹序列與序列盤中單刻材小蠹標(biāo)準(zhǔn)條碼基因相似度為98％，與序列盤中單刻材小蠹標(biāo)準(zhǔn)條碼基因遺傳距離0.6％，按結(jié)果認(rèn)定規(guī)則認(rèn)定為單刻材小蠹，鑒定結(jié)果準(zhǔn)確。

4. 四粒材小蠹序列與序列盤中四粒材小蠹標(biāo)準(zhǔn)條碼基因相似度為100％，鑒定結(jié)果準(zhǔn)確。

5. 栗粒材小蠹與序列盤中栗粒材小蠹標(biāo)準(zhǔn)條碼基基因相似度為100％，鑒定結(jié)果準(zhǔn)確。

所有結(jié)果與供試的樣本種類相符，結(jié)果符合要求，表明該試劑盒可以準(zhǔn)確鑒定這5種材小蠹。

SEQUENCE LISTING

<110> 中華人民共和國連云港出入境檢驗(yàn)檢疫局

<120> 一種材小蠹屬昆蟲基因條形碼檢測試劑盒

<130> 2016

<160> 39

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 23

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 上游引物C1-J-2183

<400> 1

caacatttat tttgattttt tgg 23

<210> 2

<211> 25

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 下游引物TL2-N-3014

<400> 2

tccaatgcac taatctgcca tatta 25

<210> 3

<211> 533

<212> DNA

<213> 赤材小蠹（Xyleborus ferrugineus）

<400> 3

gcttcttttt tacctctttc ttgcctaatg atatgagaga ttataccaaa tcctggtaga 60

atgagaatgt atacttctgg gtggccaaag aatcagaata gatgttgata aaggattgga 120

tcacctcccc cggctgggtc aaagaaggat gtgttaatgt ttcgatctgt tagtaatata 180

gtgattcctc cagctaatac tggtaaggaa aggagaagta gaattgctgt aatctttaca 240

gcccaagtga agagggaaag ttgctcaggc tttatccctg aaggatgtat attaataatg 300

gtagagataa agttgatagc ccctaagatg gaggaaactc cagatatatg aagactaaaa 360

attgccaagt caattgatgc tccttcatga gcaatatttg cggctaaagg ggggtagaca 420

gttcaccctg tccctgctcc tttgtcaata attcttctta ttaataataa tgatagactt 480

ggcggaagaa gtcagaatct tatgttgtta agtcgtggga aagctaaatg tgg 533

<210> 4

<211> 556

<212> DNA

<213> 赤材小蠹（Xyleborus ferrugineus）

<400> 4

ctccaaaggc ttcttttttc ccgctttctt gtctaatgat atgggagatt atgccaaatc 60

ctggtagaat gagaatgtat acttctgggt gaccaaagaa tcaaaataag tgctgataaa 120

ggattgggtc ccctcctccg gctgggtcaa agaaggaggt gttaatattt cgatctgtta 180

gcaatattgt aattcctcca gctagaactg gcagggagag aagaagtagg attgctgtaa 240

tttttacggc tcaagtaaaa agggagagtt gttcaggctt tatgcctgtt gggtgcatat 300

taataatggt agaaataaag ttgatagccc ctaagatgga tgaaacccca gatatatgta 360

gactaaaaat agctaggtcg attgaagctc cttcatgggc aatgtttgca gctaaaggag 420

ggtagacggt tcatcctgtt cctgctcctt tatcaataat tcttcttatt agaaggagtg 480

ataggcttgg gggaaggagc cagaatctta tgttgtttag tcgcgggaat gctatgtctg 540

gtgctcctaa tattaa 556

<210> 5

<211> 556

<212> DNA

<213> 赤材小蠹（Xyleborus ferrugineus）

<400> 5

ctccaaaggc ttctttcttt ccactttctt gtctgatgat atgagagatt ataccaaatc 60

ctggtaaaat aagaatatat acttctggat gaccaaaaaa tcaaaatagg tgttgataaa 120

gaattgggtc ccctcctcct gctgggtcaa agaaggatgt gttaatgttt cggtctgtta 180

gtaatattgt gattcctcca gctagtactg gtaaagaaag aagaagtaga attgctgtga 240

tttttacagc tcatgtaaaa agggaaagtt gttcaggctt tattcctgtt gggtgtatat 300

taataatagt agaaataaag ttgatggctc ctaagatgga ggaaactcca gatatgtgaa 360

gactgaaaat tgctaaatcg attgatgctc cttcgtgagc gatgtttgcg gctaaaggcg 420

ggtaaacagt tcaacctgtt cctgcgcctt tgtcaataat tcttcttatt aataagagtg 480

atagtctggg gggaaggagc caaaatctta tgttgttaag tcgtggaaaa gctatatctg 540

gcgctcctag cattaa 556

<210> 6

<211> 542

<212> DNA

<213> 赤材小蠹（Xyleborus ferrugineus）

<400> 6

tttttacctc tttcttgtct aataatatgg gagattatac caaatcctgg taggattaga 60

atatatactt ctgggtgacc aaagaatcaa aatagatgtt gataaagaat tggatctccc 120

cctccggctg ggtcaaagaa ggatgtgttg atgtttcgat ctgtcagtaa tattgtaatt 180

cctccagcta gtactggtaa agaaagaaga agtagaattg ctgtaatttt cacagctcag 240

gtgaaaaggg aaagttgctc aggcttcatt cctgaggggt gtatattaat aatggtagag 300

ataaagttga tagcccctag gatggaagag accccagaca tgtgaagact aaaaattgct 360

aaatcgattg atgctccttc gtgagcaata tttgcggcta atgggggata aacggttcat 420

cctgtccctg ctcctttgtc gataattctt cttattaata atagtgatag gcttggtgga 480

agaagtcaaa atcttatgtt gttaagtcgt gggaatgcta tatctggtgc ccctagtatt 540

aa 542

<210> 7

<211> 544

<212> DNA

<213> 赤材小蠹（Xyleborus ferrugineus）

<400> 7

tttttttacc tctttcttgt ctaatgatat gagagattat accaaatcct ggtaaaataa 60

gaatatatac ttctggatgg ccaaaaaatc aaaatagatg ttgataaaga attgggtccc 120

caccccctgc tgggtcaaag aaggatgtgt taatgtttcg gtctgttagt aatattgtga 180

ttccaccagc tagtactggt aaagaaagaa ggagtagaat tgctgtaatt tttacagctc 240

atgtaaaaag ggaaagttgc tcgggcttta ttcctgttgg gtgtatatta ataatagtag 300

aaataaagtt gatggcccct aggatggagg aagctccaga tatgtgaaga ctaaaaattg 360

ctaaatcgat tgatgcccct tcatgggcaa tgtttgcggc taaaggtgga taaacagttc 420

aacctgttcc tgcgcctttg tcaataattc ttcttattaa taagagtgac agtctggggg 480

gaaggagtca aaatcttatg ttgttaagtc gtggaaatgc tatatctggt gctcctagca 540

ttaa 544

<210> 8

<211> 629

<212> DNA

<213> 闊面材小蠹（Xyleborus validus）

<400> 8

cctacaggaa ttaaaatttt tagttgatta gcaacctacc atggaacaca aatcaatcca 60

aatccatcat ctctttgagc cctaggattc ctattcctat ttaccatagg aggattaaca 120

ggagtagttt tagccaattc ttctcttgat attattttac atgatactta ctacgtggtt 180

gcacatttcc actatgtttt atctataggg gcagtattcg ctattatagc aggcttagta 240

caatgattcc cattatttac aggactaacc ttaaataata aatatctgaa aacccaattt 300

atctctatat ttattggagt aaatttaaca ttcttccctc aacatttctt aggactaagt 360

ggtataccac gacgatattc agattatcct gacgcatata tcatatgaaa tattatctca 420

tcaattggta gactaatttc attagtaaga atcatatttt tcatcttcat tctttgagaa 480

agattctcag taaaacgtct agctatctct tccctcaaca tatcttcctc aattgaatga 540

ttacaaaaat tttcccctgc agagcataga tacaatgaac tacctgccat tacctcaagc 600

ttctaatatg gcagattagt gcattgaaa 629

<210> 9

<211> 658

<212> DNA

<213> 單刻材小蠹（Xyleborus monographus）

<400> 9

aactctatac ttcatttttg gagcatgggc cggaatagta ggaacatctc ttagtgtact 60

aattcgaaca gaattaggaa ctccaggaag actaattata gatgaccaaa tctttaacac 120

tattgtcaca gcccatgcat tcattataat tttctttata gttataccaa ttttaatcgg 180

aggatttggt aattgactcg tgcctctaat actaggagca cctgatatag cattcccccg 240

ccttaacaac ataaggttct ggctcctccc gccaagcctt tcactcttac taataagtag 300

aattatcgac aaaggagcag gtacaggatg aacagtttac ccccctttag cagctaatat 360

tgctcacgaa ggagcttcca tcgacctagc aattttcaga ctacatatat caggagtctc 420

ttctattcta ggggcaatta actttatttc aacaatcatc aatatacacc caacaggaat 480

aaagccagag caactctctc tatttacctg agctgtaaaa atcacagcag ttctgctgct 540

cctatcactc ccagttttag caggaggaat cacaatatta ttgacagacc gaaacattaa 600

tacctcattt tttgacccag caggaggggg agatcctatt ttataccaac acctattt 658

<210> 10

<211> 594

<212> DNA

<213> 單刻材小蠹（Xyleborus monographus）

<400> 10

ggaatagtag gaacatctct tagtgtacta attcgaacag aattaggaac tccaggaaga 60

ctaattatag atgatcaaat ctttaacact attgtcacag cccatgcatt cattataatt 120

ttctttatag ttataccaat tttaatcgga ggatttggta attgactcgt gcctctaata 180

ctaggagcac ctgatatagc attcccccgc cttaacaaca taaggttctg gctcctcccg 240

ccaagccttt cactcttact aataagtaga attatcgaca aaggagcagg tacaggatga 300

acagtttacc cccctttagc agctaatatt gctcacgaag gagcttccat cgacctagca 360

attttcagac tacatatatc aggagtctct tctattctag gggcaattaa ctttatttca 420

acaatcatca atatacaccc aacaggaata aagccagagc aactctccct atttacctga 480

gctgtaaaaa tcacagcagt tctgctgctc ctatcactcc cagttttagc aggaggaatc 540

acaatattat tgacagaccg aaacattaat acctcatttt ttgacccagc agga 594

<210> 11

<211> 585

<212> DNA

<213> 細(xì)點(diǎn)材小蠹（Xyleborus pelliculosus）

<400> 11

aatagtagga acatcactaa gagtactaat tcgaacagaa ctaggaactc caggtagtct 60

aattagagat gatcaaatct tcaacacaat tgttacagct catgcattca tcataatctt 120

ttttatagtt ataccaatcc taatcggagg atttggaaat tgattagtac ccctaatatt 180

aggagcccca gatatagcct tcccacgact caacaacata agcttttgat tactacctcc 240

cagtctatca cttcttttaa tgagaagaat aattgacaaa ggagcaggaa caggatgaac 300

agtctatccc cctcttgctg ctaacatcgc ccatgaagga gcatctgtag acttagcaat 360

ctttagactt catatatcag gagcatcctc aattctagga gcaatcaact tcatttcaac 420

catcattaac atacatccat caggaataaa accagaacaa ttatccctat ttacatgagc 480

agtaaaaatt acagccattc tattactatt gtccctacca gttttagcag gaggaatcac 540

aatactactc acagaccgaa atattaatac ttcattcttt gaccc 585

<210> 12

<211> 523

<212> DNA

<213> 對(duì)粒材小蠹（Xyleborus perforans）

<400> 12

ttttttttac ctctttcttg tctaataatg tgggaaatta taccaaatcc tggtaaaata 60

agaatataaa cttctgggtg gccaaaaaat cagaataagt gttgatatag aattggatca 120

ccccctcctg ctggatcaaa aaaagatgta ttgatatttc gatctgttag tagtatagta 180

attcctccag ctaatactgg tagggaaagt agaagtagaa ttgctgtaat tttcacagct 240

caggtgaaca gggaaagttg ttctggcttt attcctgttg gatgtatatt aataattgtt 300

gaaatgaaat tgatggcccc caggattgat gagataccag atatatgaag tctgaaaata 360

gctaaatcaa ttgatgctcc ttcatgagca atgtttgcag ctagtggtgg gtatacagtt 420

caacctgttc cagctccttt atcaacaata cttcttatta gaaggagtga taagcttggg 480

ggaagaagtc agaatcttat attgtttagt cgtgggaaag cta 523

<210> 13

<211> 532

<212> DNA

<213> 對(duì)粒材小蠹（Xyleborus perforans）

<400> 13

aatggcttct tttttacctc tttcttgtct aataatgtgt gaaattatac caaatcctgg 60

taaaataaga atataaactt ctgggtggcc aaaaaatcag aataaatgtt gatatagaat 120

tgggtcccca cctcctgctg gatcaaaaaa agatgtattg atgtttcgat ctgttagtag 180

tatagtaatt cccccggcta atactggtag ggagagtaga agtagaattg ctgtaatttt 240

tacagctcag gtgaacaggg aaagttgttc tggctttatc cctgttggat gtatattaat 300

aattgttgaa atgaaattga tggcccctag gattgatgag acaccagata tgtgaagtct 360

gaaaatagct aaatcaattg atgctccttc atgagcaatg tttgcagcta gtggtgggta 420

cacagttcaa cctgtcccag ctcctttgtc aacaatactt cttattagaa gtagtgatag 480

gcttggggga agaagtcaga atcttatatt gtttagtcgt gggaaggcta ta 532

<210> 14

<211> 521

<212> DNA

<213> 對(duì)粒材小蠹（Xyleborus perforans）

<400> 14

tttttttacc tctttcttga ctaataatgt gcgagattat accaaaacca gggagaataa 60

gaatataaac ttctgggtgt ccgaaaaacc aaaagagatg ttgataaaga attgggtctc 120

ctcctcctgc aggatcaaag aaagaggtgt taatatttcg atctgttagc aatattgtaa 180

ttcctcctgc taatacaggt agggaaagta ataacaaaat tgctgtgatt tttacagctc 240

aggtaaagag agagagttgt tcaggcttta tacctgttgg atgtatattg atgatggtag 300

agataaaatt aattgctcct aagattgaag agactcctga tatatgcaat ctgaagatgg 360

ccaggtcaat tgaggctcct tcatgagcga tatttgcggc taaaggggga taaacagttc 420

atcctgttcc ggctccttta tcaataattc ttcttataag aagaagagac aatcttgggg 480

gaagaagtca aaatcttatg ttgttaagtc gtgggaatgc t 521

<210> 15

<211> 555

<212> DNA

<213> 對(duì)粒材小蠹（Xyleborus perforans）

<400> 15

gccaaaggtt ctttttttcc ctctttcttg actaataatg tgagagatta taccaaatcc 60

aggaagaata aggatataaa cttctgggtg tccgaaaaat caaaataggt gctggtatag 120

aattggatct cctcctccgg caggatcaaa gaaagaggtg ttaatatttc gatctgttag 180

taatattgta attccgcctg ctaatactgg cagggaaagt aataacaaaa ttgctgtgat 240

ttttacagct caggtaaaga gagagagttg ttcaggcttt attcctgttg gatgtatatt 300

gatgatagta gaaataaaat taattgctcc taggattgaa gagattcctg acatgtgtaa 360

tctgaagatg gctaggtcaa ttgaggctcc ttcgtgagcg atatttgcgg ctaacggtgg 420

gtagacagtt catcctgttc cagctccttt atcaataatt cttcttataa gaagaaggga 480

taatcttggg ggaagaagtc aaaatcttat gttgttaagt cgtgggaatg ctatatctgg 540

ggctcctagt attaa 555

<210> 16

<211> 556

<212> DNA

<213> 對(duì)粒材小蠹（Xyleborus perforans）

<400> 16

cgccaaaggc ttcttttttc cctctttctt gactaataat gtgagagatt ataccaaatc 60

caggaagaat aaggatataa acttctgggt gtccgaaaaa tcaaaatagg tgctggtata 120

gaattggatc tcctcctccg gcaggatcaa agaaagaggt gttaatattt cgatctgtta 180

gtaatattgt aattccgcct gctaatactg gcagggaaag taataacaaa attgctgtga 240

tttttacagc tcaggtaaag agagagagtt gttcaggctt tattcctgtt ggatgtatat 300

tgatgatagt agaaataaaa ttaattgctc ctaggattga agagattcct gacatgtgta 360

atctgaagat ggctaggtca attgaggctc cttcgtgagc gatatttgcg gctaacggtg 420

ggtagacagt tcatcctgtt ccagctcctt tatcaataat tcttcttata agaagaaggg 480

ataatcttgg gggaagaagt caaaatctta tgttgttaag tcgtgggaat gctatatctg 540

gggctcctag tattaa 556

<210> 17

<211> 525

<212> DNA

<213> 伴隨材小蠹（Xyleborus affinis）

<400> 17

actgatgata tgggaaatta taccgaatcc tgggagaatg agaatgtata tttttgggtg 60

tccaaagaat cagaaaagat gstgataaag aattggatct ccccctccag ctgggtcaaa 120

aaatgacgta ttaatattac ggtctgttaa tagtattgta atcccccctg ctaatacagg 180

caatgataat aaaagtaaaa ttgctgkgat tttcacagyt caggkgaata gggagagttk 240

ttctggtttt attcmtgttg ggtgtatatt aataawagta gaaataawgt tgattgctcc 300

caggattgat garactcctg atatatgtaa gctaaaaayg gctaartcaa ttgaggcgcc 360

ttcatgggcg atatttgcag ctaggggagg gtagacagtt caacctgtcc cagctccttt 420

gtcaataatt cttcttatta ataataagga taatcttggc ggtaagagtc agaaccttat 480

attgttgagc cgtggnaagg ctatatctgg ggcccctaac attaa 525

<210> 18

<211> 525

<212> DNA

<213> 伴隨材小蠹（Xyleborus affinis）

<400> 18

actgatgata tgggaaatta taccgaatcc tgggagaatg agaatgtata cttctggatg 60

cccaaagaat cagaaaagat gttgataaag gattggatct ccccctcctg ctgggtcaaa 120

aaatgacgta ttaatattac ggtctgttaa tagtattgta atccctccag ctaatacagg 180

caatgataat aaaagtaaaa ttgctgtgat tttcacggct caggtgaata gggagagctg 240

ttctggtttt attcctgttg ggtgtatatt aataatagta gaaataaagt tgattgcccc 300

caggattgat garactcctg atatatgtaa gctaaaaatg gctaagtcaa ttgaggcccc 360

ttcgtgggcg atatttgcag ctagaggggg gtagacagtt caacctgtcc cagctccttt 420

gtcaataatt cttcttatta gtaataagga taatcttggt ggtaggagcc agaaccttat 480

attgttgagc cgtgggaagg ctatatctgg ggctcccagc attaa 525

<210> 19

<211> 556

<212> DNA

<213> 伴隨材小蠹（Xyleborus affinis）

<400> 19

caccaaaggc ttcttttttt cctctttctt gactgatgat atgggaaatt ataccgaatc 60

ctgggagaat gagaatgtat acttctggat gcccaaagaa tcagaaaaga tgttgataaa 120

ggattggatc tccccctcct gctgggtcaa aaaatgacgt attaatatta cggtctgtta 180

atagtattgt aatccctcca gctaatacag gcaatgataa taaaagtaaa attgctgtga 240

ttttcacggc tcaggtgaat agggagagct gttctggttt tattcctgtt gggtgtatat 300

taataatagt agaaataaag ttgattgccc ccaggattga tgagactcct gatatatgta 360

agctaaaaat ggctaagtca attgaggccc cttcgtgggc gatatttgca gctagagggg 420

ggtagacagt tcaacctgtc ccagctcctt tgtcaataat tcttcttatt agtaataagg 480

ataatcttgg tggtaggagc cagaacctta tattgttgag ccgtgggaag gctatatctg 540

gggctcccag cattaa 556

<210> 20

<211> 536

<212> DNA

<213> 伴隨材小蠹（Xyleborus affinis）

<400> 20

caccaaaggc ttcttttttt cctctttctt gactgataat atgggaaatt ataccgaatc 60

ctgggagaat gagaatgtat acttctgggt gtccaaagaa tcagaaaaga tgctgataaa 120

gaattggatc tccccctcca gctgggtcaa aaaatgacgt attaatatta cggtctgtta 180

atagtattgt aatcccccct gctaatacag gcaatgataa taaaagtaaa attgctgtga 240

ttttcacagc tcaggtgaat agggagagtt gttctggttt tattcctgtt gggtgtatat 300

taataatagt agaaataaag ttgattgctc ccaggattga tgagactcct gatatatgta 360

agctaaaaat ggctaaktca attgaggcgc cttcatgggc gatatttgca gctaggggag 420

ggtagacagt tcaacctgtc ccagctcctt tgtcaataat tcttcttatt aataataagg 480

ataatcttgg cggtaagagt cagaacctta tattgttgag ccgtgggaag gctata 536

<210> 21

<211> 622

<212> DNA

<213> 暗翅材小蠹（Xyleborus semiopacus）

<400> 21

gaattataat ttttagttga ttagcaactt accacggaac ccaaatcttg gctagaccaa 60

gatctctatg agctctaggt ttcctattcc tattcactat aggaggatta acaggagttg 120

ttctagctaa ttcctcttta gacatcattc ttcatgatac atattatgta gtagcccatt 180

ttcactacgt cttatctata ggggcagtat ttgcaattat agcaggccta gttcaatgat 240

tcccattatt tacaggacta acattgaata ataaatatct aaaaacccaa tttatcgcca 300

tatttattgg agtaaacata acattttttc cccaacattt tttaggattg agaggaatac 360

cacgacgata ttcagattac cctgatgcat acataatatg aaatattatc tcctcaattg 420

gaagactaat ttcattatta agaattctat ttttcatctt cattatatga gaaagattct 480

cagtaaaacg attatcaatt acatcactaa atatatcttc atcaattgaa tgattacaaa 540

aattcgcccc agcagaacat agctataatg aactacctgc tattgcttca tatttctaat 600

atggcagatt agtgcattga aa 622

<210> 22

<211> 622

<212> DNA

<213> 暗翅材小蠹（Xyleborus semiopacus）

<400> 22

gaattataat ttttagttga ttagcaactt accacggaac ccaaatcttg gctagaccaa 60

gatctctatg agctctaggt ttcctattcc tattcactat aggaggatta acaggagttg 120

ttctagctaa ttcctcttta gacatcattc ttcatgatac atattatgta gtagcccatt 180

ttcactacgt cttatctata ggggcagtat ttgcaattat agcaggccta gttcaatgat 240

tcccattatt tacaggacta acattgaata ataaatatct aaaaacccaa tttatcgcca 300

tatttattgg agtaaacata acattttttc cccaacattt tttaggattg agaggaatac 360

cacgacgata ttcagattac cctgatgcat acataatatg aaatattatc tcctcaattg 420

gaagactaat ttcattatta agaattctat ttttcatctt cattatatga gaaagattct 480

cagtaaaacg attatcaatt acatcactaa atatatcttc atcaattgaa tgattacaaa 540

aattcgcccc agcagaacat agctataatg aactacctgc tattgcttca tatttctaat 600

atggcagatt agtgcattga aa 622

<210> 23

<211> 585

<212> DNA

<213> 四粒材小蠹（Xyleborus similes）

<400> 23

aatagttggt acatctttaa gagtccttat ccgaacagaa ttaggaacac caggaagatt 60

aattatagat gatcaaatct ttaacaccat tgttacagcc cacgctttca tcataatttt 120

ctttatagtt ataccaatcc taattggcgg attcggaaat tgattagtcc ccctaatatt 180

aggtgcaccc gacatagcct tcccacgact taataatata agattttgat tactaccccc 240

aagactatca cttcttctta taagaagaat cattgacaaa ggagcaggaa caggatgaac 300

agtatatcca cctctagcag ctaatattgc tcatgaaggg gcatctattg atttggcaat 360

ttttagccta catatatcag gagtatcttc aattctaggg gcaatcaatt tcatttctac 420

aattatcaac atacacccaa caggaataaa acctgagcaa ctttccctat ttacatgagc 480

cgtaaaaatt acagctattc tccttcttct atctctacct gtcttagcag ggggaattac 540

catactatta acagatcgaa atgttaacac ctcatttttt gaccc 585

<210> 24

<211> 487

<212> DNA

<213> 四粒材小蠹（Xyleborus similes）

<400> 24

ttagttcccc taataatcgg tgcccccgat atggcgtttc cccgcataaa caacataagc 60

ttctgactct tacctccctc tctcctactc ctgctcgcat ctgctatagt ggaggccgga 120

gcaggaacag gttgaacagt ctaccctccc ttagcaggga actactccca ccctggagcc 180

tccgtagacc taaccatctt ctccttacac ctagcaggtg tctcctctat cttaggggcc 240

atcaatttca tcacaacaat tatcaatata aaaccccctg ccataaccca gtaccaaaca 300

cccctcttcg tctgatccgt cctaatcaca gcagtcctac ttctcctatc tctcccagtc 360

ctagctgctg gcatcactat actactaaca gaccgcaacc tcaacaccac cttcttcgac 420

cccgccggag gaggagaccc cattctatac caacacctat tctgattttt cggtcaccct 480

gaagttt 487

<210> 25

<211> 460

<212> DNA

<213> 四粒材小蠹（Xyleborus similes）

<400> 25

atttcccaca tatcagacat aggactccta ggatttttag tttgagctca ccatatattt 60

acagtaggaa tagatgtaga cacacgagcc tacttcacct cagctacaat aattatcgca 120

gttccaacag gaattaaaat ttttagctga ctagcaacat atcatggaac acaagtatct 180

tcaagaccaa ggtccatatg agctctagga ttcctattct tattcaccat aggagggtta 240

acaggagtag ttttagcaaa ttcatcctta gatattattc tacatgatac atattacgta 300

gtagctcatt tccattacgt cctatcaata ggagctgtat ttgctattat agcaggatta 360

gtacaatggt tccctctctt tacaggatta accctaaaca gtaaactaaa aaaaatccaa 420

tttatttcta tattcattgg agtaaacatg actttcttcc 460

<210> 26

<211> 606

<212> DNA

<213> 北方材小蠹（Xyleborus dispar）

<400> 26

acattatatt tcatttttgg tgcctgagca ggaatagtag gancatctnt gagaatanta 60

attcgcacag aattaggaac cccgggaaga ttaattagag acgatcaaat ttttaacact 120

attgttncag cccatgcttt cattataatt ttttttatag taataccaat cctaattgga 180

ggattcggaa attggctagt tcctctgata ttaggagcac cagatatagc ctttccacga 240

cttaataata taagattttg actactacca ccaagattaa cccttctatt aataagaaga 300

attattgata aaggagcagg aacaggatga actgtttatc caccattagc tgccaatatc 360

gcccacgaag gagcatctgt tgacctagca atttttaggc tccatatatc aggaatatca 420

tctattcttg gggcaattaa ttttatctct acaattatta atatacaccc tacaggaata 480

aagcccgaac aactatccct atttacatga gcagtaaaaa tcacagccat tcttttatta 540

ttatctctcc ccgttctagc aggagggatt actatattat taacagatcg taatatcant 600

acatca 606

<210> 27

<211> 620

<212> DNA

<213> 北方材小蠹（Xyleborus dispar）

<400> 27

taggaacatc tctgagaata ctaattcgca cagaattagg aaccccggga agattaatta 60

gagacgatca aatttttaac actattgtta cagcccatgc tttcattata atttttttta 120

tagtaatacc aatcctaatt ggaggattcg gaaattggct agttcctctg atattaggag 180

caccagatat agcctttcca cgacttaata atataagatt ttgactacta ccaccaagat 240

taacccttct attaataaga agaattattg ataaaggagc aggaacagga tgaactgttt 300

atccaccatt agctgccaat atcgcccacg aaggagcatc tgttgaccta gcaattttta 360

ggctccatat atcaggaata tcatctattc ttggggcaat taattttatc tctacaatta 420

ttaatataca ccctacagga ataaagcccg aacaactatc cctatttaca tgagcagtaa 480

aaatcacagc cattctttta ttattatctc tccccgttct agcaggaggg attactatat 540

tattaacaga tcgtaatatc aatacatcat tttttgaccc agcaggagga ggagacccag 600

tcctttacca acacctattt 620

<210> 28

<211> 591

<212> DNA

<213> 北方材小蠹（Xyleborus dispar）

<400> 28

acattatatt tcatttttgg tgcctgagca ggaatagtag gaacatctct gagaatacta 60

attcgcacag aattaggaac cccgggaaga ttaattagag acgatcaaat ttttaacact 120

attgttacag cccatgcttt cattataatt ttttttatag taataccaat cctaattgga 180

ggattcggaa attggctagt tcctctgata ttaggagcac cagatatagc ctttccacga 240

cttaataata taagattttg actactacca ccaagattaa cccttctatt aataagaaga 300

attattgata aaggagcagg aacaggatga actgtttatc caccattagc tgccaatatc 360

gcccacgaag gagcatctgt tgacctagca atttttaggc tccatatatc aggaatatca 420

tctattcttg gggcaattaa ttttatctct acaattatta atatacaccc tacaggaata 480

aagcccgaac aactatccct atttacatga gcagtaaaaa tcacagccat tcttttatta 540

ttatctctcc ccgttctagc aggagggatt actatattat taacagatcg t 591

<210> 29

<211> 658

<212> DNA

<213> 北方材小蠹（Xyleborus dispar）

<400> 29

tacattatat ttcatttttg gtgcctgagc aggaatagta ggaacatctc tgagaatact 60

aattcgcaca gaattaggaa ccccgggaag attaattaga gacgatcaaa tttttaacac 120

tattgttaca gcccatgctt tcattataat tttttttata gtaataccaa tcctaattgg 180

aggattcgga aattggctag ttcctctgat attaggagca ccagatatag cctttccacg 240

acttaataat ataagatttt gactactacc accaagatta acccttctat taataagaag 300

aattattgat aaaggagcag gaacaggatg aactgtttat ccaccattag ctgccaatat 360

cgcccacgaa ggagcatctg ttgacctagc aatttttagg ctccatatat caggaatatc 420

atctattctt ggggcaatta attttatctc tacaattatt aatatacacc ctacaggaat 480

aaagcccgaa caactatccc tatttacatg agcagtaaaa atcacagcca ttcttttatt 540

attatctctc cccgttctag caggagggat tactatatta ttaacagatc gtaatatcaa 600

tacatcattt tttgacccag caggaggagg agacccagtc ctttaccaac acctattt 658

<210> 30

<211> 585

<212> DNA

<213> 偽材小蠹（Xyleborus fallax）

<400> 30

aatagtagga acatcattaa gtgtcctaat ccgaacagag ctaggtaccc caggaagttt 60

aattggagat gatcaaattt tcaataccgt agtaactgct cacgctttta ttataatttt 120

ttttatagtt ataccaatcc taattggagg attcggaaat tgactagtgc ctttaatatt 180

aggagcccct gatatagcat tcccacgact taataatata agattctgat tacttccccc 240

aagattatcc cttctcttaa taagaagaat cgttgataaa ggagctggaa ctggttgaac 300

agtttacccc cctttagcag ccaacattgc tcatgaagga gcctctgttg atctcgccat 360

ctttagccta cacatatctg gggtctcttc aattcttggg gctattaact tcatttctac 420

aattattaat atacacccag caggaataaa gcccgaacaa ctctccctat tcacttgatc 480

agtaaaaatc acagctattc ttttacttct atccctacct gtccttgcag gaggaatcac 540

tatactccta acagatcgaa atgtcaacac atcatttttt gaccc 585

<210> 31

<211> 556

<212> DNA

<213> 雙齒材小蠹（Xyleborus bispinatus）

<400> 31

ctccgaaggc ttccttttta cctctttctt gtctaataat gtgggagatt ataccaaatc 60

ctgggaggat tagaatgtat acttcagggt ggccaaagaa tcagaaaagg tgttggtata 120

ggattgggtc acctcccccg gctgggtcaa agaaggatgt attaacgttt cgatctgtta 180

gtaatatagt aataccccct gctaatacag gtaaggagag gaggagtaaa actgctgtaa 240

tttttacagc tcatgtaaag agggacagtt gttctggttt catccctgtt gggtgtatat 300

tgataatagt agaaataaag ttaattgctc ctaagattga ggagactcct gatatatgta 360

atctgaagat agccaagtca attgaggctc cttcatgagc aatgtttgcg gctaatggtg 420

ggtagactgt tcaaccagta ccggccccct tatcaatgat tcttcttatt aggaggagag 480

ataggcttgg tgggagtagt cagaatctta tgttgttaag tcgtgggaag gctatatctg 540

gggcccctaa tattag 556

<210> 32

<211> 556

<212> DNA

<213> 雙齒材小蠹（Xyleborus bispinatus）

<400> 32

ctccgaaggc ttccttttta cctctttctt gtctaataat gtgagagatt ataccaaatc 60

ctgggaggat tagaatgtat acttcagggt ggccaaagaa tcagaaaagg tgttggtata 120

ggattgggtc acctcccccg gctgggtcaa agaaggatgt attaacgttt cgatctgtta 180

gtaatatagt aataccccct gctaatacag gtaaggagag gaggagtaaa actgctgtaa 240

tttttacagc tcatgtaaag agggacagtt gttctggttt tatccctgtt gggtgtatat 300

tgataatagt agaaataaag ttaattgctc ctaagattga ggagactcct gatatatgta 360

atctgaagat agccaagtca attgaggccc cttcatgagc aatgtttgcg gctaatggtg 420

ggtagactgt tcaaccagta ccggctccct tatcaatgat tcttcttatt aggaggagag 480

ataggcttgg tgggagtagt cagaatctta tgttgttaag tcgtgggaag gctatatctg 540

gggctcccaa tattag 556

<210> 33

<211> 528

<212> DNA

<213> 雙齒材小蠹（Xyleborus bispinatus）

<400> 33

ttgtctaata atgtgagaga ttataccaaa tcctgggagg attagaatgt atacttcagg 60

gtgaccaaag aatcagaaaa ggtgttggta taggattggg tcacctcccc cggaggggtc 120

aaagaaggat gtattaacgt ttcgatctgt tagtaatata gtaatacccc ctgctagtac 180

aggtaaggag aggaggagta aaactgctgt aatttttaca gctcatgtaa aaagggacag 240

ttgttctggt tttatccctg ttgggtgtat attgataata gtagaaataa agttaattgc 300

tcctaggatt gaggagactc ctgatatatg taatctaaag atagccaggt caattgaggc 360

tccttcatga gcaatgtttg cggctaatgg tgggtagact gttcaaccag tcccggctcc 420

cttgtcaatg attcttctta ttagaaggag agataggctt ggcgggagta gtcagaatct 480

tatgttgtta agtcgtggga aggccatatc tggagctcct agtattag 528

<210> 34

<211> 544

<212> DNA

<213> 雙齒材小蠹（Xyleborus bispinatus）

<220>

<221> misc_feature

<222> (431)..(431)

<223> n is a, c, g, or t

<400> 34

tttttttacc tctttcttgt ctaataatgt gagagattat accaaatcct gggaggatta 60

gaatgtatac ttcagggtga ccaaaaaatc agaaaaggtg ttggtatagg attgggtcac 120

ctcccccggc tgggtcaaag aaggatgtat taacgtttcg atctgttagt aatatagtaa 180

taccccctgc tagtacaggt aaggagagca ggagtaaaac tgctgtaatt tttacagctc 240

atgtaaaaag ggatagttgt tctggtttta tccctgttgg gtgtatattg ataatagtag 300

aaataaagtt aattgctcct aggattgagg agactcctga tatatgtaat ctaaagatag 360

ccaggtcaat tgaggctcct tcatgagcaa tgtttgcggc taacggtggg tagactgttc 420

aaccagtccc ngcccctttg tcaatgattc ttcttattag aaggagggat aggcttggtg 480

ggaggagtca gaatcttatg ttgttaagtc gtgggaaggc catatctggg gcccctagta 540

ttag 544

<210> 35

<211> 555

<212> DNA

<213> 雙齒材小蠹（Xyleborus bispinatus）

<400> 35

tccgaatgct tcttttttac ctctttcttg tctaataatg tgagagatta taccaaatcc 60

tgggaggatt agaatgtata cttcagggtg accaaaaaat cagaaaaggt gttggtatag 120

gattgggtca cctcccccgg ctgggtcaaa gaaggatgta ttaacgtttc gatctgttag 180

taatatagta ataccccctg ctagtacagg taaggagagc aggagtaaaa ctgctgtaat 240

ttttacagct catgtaaaaa gggatagttg ttctggtttt attcctgttg ggtgtatatt 300

gataatagta gaaataaagt taattgctcc taggattgag gagactcctg atatatgtaa 360

tctaaagata gccaggtcaa ttgaggctcc ttcatgagca atgtttgcgg ctaacggtgg 420

gtagactgtt caaccagtcc cggccccttt gtcaatgatt cttcttatta gaaggaggga 480

taggcttggt gggaggagtc agaatcttat gttgttaagt cgtgggaagg ccatatctgg 540

ggcccctagt attag 555

<210> 36

<211> 807

<212> DNA

<213> 雙齒材小蠹（Xyleborus bispinatus）

<400> 36

catccagaag tgtatattct tattttacca ggatttggca taatctccca tatcatcagg 60

caagaaagtg ggaaaaaaga agcctttgga gtcttaggaa taatctatgc tataagagcc 120

attggcttgc taggattcct agtatgagct catcatatat ttacagtagg aatagatgta 180

gatacacggg cctatttcac ttcagccact ataatcattg cagttcccac cggaattaaa 240

attttcagtt gactagccac atatcatggt acacaaattt ctgcaagccc tagctcacta 300

tgagccctgg ggtttttatt tctatttacc ataggagggt taacaggggt tgttctagcc 360

aattcttccc ttgacatcat tctccacgac acatactatg tagtagctca ttttcactat 420

gtactatcca taggagcagt attcgctatt atagcagggt tggtccaatg attcccacta 480

ttcacaggac taacattaaa caataaatac ttaaaaaccc aatttattgc catattcatt 540

ggagtgaacc taacattctt cccccaacat ttcctaggac taagagggat gcctcgacga 600

tactctgact acccagatgc gtatattata tgaaatatta tctcatcaat tggaagtcta 660

atttcccttg taagaatcct attcttcatc ttcatcgtat gagaaagatt ctctgttaaa 720

cgaataaata tcacctcttt aaatatatct tcatccattg agtgactaca aaaattttca 780

ccagcagagc acagatataa tgaactc 807

<210> 37

<211> 515

<212> DNA

<213> 栗粒材小蠹（Xyleborus volvulus）

<400> 37

ttttacctct ttcttgtcta ataatgtggg aaattatacc aaatcctggt aaaataagaa 60

tataaacttc tgggtggcca aaaaatcaga ataagtgttg atatagaatt ggatcacccc 120

ctcctgctgg atcaaaaaaa gatgtattga tatttcgatc tgttagtagt atagtaattc 180

ctccggctaa tactggtagg gaaagtagaa gtagaattgc tgtaattttc acagctcagg 240

tgaacaggga aagttgttct ggctttattc ctgttggatg tatattaata attgttgaaa 300

tgaaattgat ggcccccagg attgatgaga taccagatat atgaagtctg aaaatagcta 360

aatcaattga tgctccttca tgagcaatgt ttgcagctag tggtggatat acagttcaac 420

ctgttccagc tcctttatca acaatacttc ttattagaag gagtgataag cttgggggaa 480

gaagtcagaa tcttatattg tttagtcgtg ggaaa 515

<210> 38

<211> 515

<212> DNA

<213> 栗粒材小蠹（Xyleborus volvulus）

<400> 38

ttttacctct ttcttgtcta ataatgtggg aaattatacc aaatcctggt aaaataagaa 60

tataaacttc tgggtggcca aaaaatcaga ataagtgttg atatagaatt ggatcacccc 120

ctcctgctgg atcaaaaaaa gatgtattga tatttcgatc tgttagtagt atagtaattc 180

ctccagctaa tactggtagg gaaagtagaa gtagaattgc tgtaattttc acagctcagg 240

tgaacaggga aagttgttct ggctttattc ctgttggatg tatattaata attgttgaaa 300

tgaaattgat ggcccccagg attgatgaga taccagatat atgaagtctg aaaatagcta 360

aatcaattga tgctccttca tgagcaatgt ttgcagctag tggtggatat acagttcaac 420

ctgttccagc tcctttatca acaatacttc ttattagaag gagtgataag cttgggggaa 480

gaagtcagaa tcttatattg tttagtcgtg ggaaa 515

<210> 39

<211> 510

<212> DNA

<213> 栗粒材小蠹（Xyleborus volvulus）

<400> 39

cctctttctt gtctaataat gtgggaaatt ataccaaatc ctggtaaaat aagaatataa 60

acttctgggt ggccaaaaaa tcagaataaa tgttgatata gaattgggtc cccacctcct 120

gctggatcaa aaaaagatgt attgatgttt cgatctgtta gtagtatagt aattcccccg 180

gctaatactg gtagggagag tagaagtaga attgctgtaa tttttacagc tcaggtgaac 240

agggaaagtt gttctggctt tatccctgtt ggatgtatat taataattgt tgaaatgaaa 300

ttgatggccc ctaggattga tganacacca gatatgtgaa gtctgaaaat agctaaatca 360

attgatgctc cttcatgagc aatgtttgca gctagtggtg gatacacagt tcaacctgtc 420

ccagctcctt tgtcaacaat acttcttatt agaagtagtg ataggcttgg gggaagaagt 480

cagaatctta tattgtttag tcgtgggaag 510