本發(fā)明屬于醫(yī)藥，具體涉及具有抗氧化活性的倍半萜化合物及其制備方法、藥物組合物及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、公開該背景技術(shù)部分的信息僅僅旨在增加對本發(fā)明的總體背景的理解，而不必然被視為承認或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已經(jīng)成為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。

2、氧化反應(yīng)廣泛發(fā)生于自然界中，然而過度的氧化反應(yīng)產(chǎn)生的自由基會導(dǎo)致細胞受損甚至致使一些疾病發(fā)生?？寡趸瘎┑闹匾栽谟谄淇梢圆东@或中和自由基，減少自由基對細胞的損害。體內(nèi)適當(dāng)?shù)目寡趸镔|(zhì)可以減少氧化應(yīng)激反應(yīng)，從而達到保護細胞、減少氧化損傷的作用。倍半萜類化合物廣泛存在于自然界中，具有多種多樣的結(jié)構(gòu)類型，例如：吉馬烷型、桉葉烷型、愈創(chuàng)木烷型、沒藥烷型、杜松烷型、烏藥烷型、珊瑚烷型及艾里莫芬烷型等；因倍半萜具有多種多樣的骨架類型，所以其具有抗腫瘤、抗氧化、抗炎、抗菌、抗病毒等豐富多樣的生物學(xué)活性，所以極大地拓展了倍半萜在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用前景。

3、倍半萜類化合物廣泛分布于唇形科(lamiaceae)植物之中，扭連錢(marmoritiscomplanate(dunn)a.l.budantzev)是唇形科扭連錢屬植物，主要生長在滇西北地區(qū)高山上，是一種多年生的草本植物，根莖木質(zhì)，褐色。本品又名漏孜堆保、色堆嘎保、年都哇。扭錢連具有消炎、止痛、退熱的功效，但是其化學(xué)成分和生物活性研究尚未報道。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、為了解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的是提供具有抗氧化活性的倍半萜化合物及其制備方法、藥物組合物及應(yīng)用。本發(fā)明首次從扭連錢中分離到一種具有新骨架結(jié)構(gòu)的倍半萜類化合物，在研究中發(fā)現(xiàn)該化合物具有抗氧化活性，可以促進超氧化物歧化酶的酶活，促進mn-sod、cu/zn-sod、nrf2、nqo1基因mrna的表達。

2、為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明是通過如下的技術(shù)方案來實現(xiàn)：

3、第一方面，一種具有抗氧化活性的倍半萜化合物，具有如式i所示的結(jié)構(gòu)：

4、

5、第二方面，一種如第一方面所述的倍半萜化合物的制備方法，包括以下步驟：

6、s1、將干燥的扭連錢地上部分粉碎，用乙醇水溶液加熱回流提取，將提取液用紗布過濾，再用濾紙減壓抽濾，濃縮得到粗浸膏；

7、s2、粗浸膏用水均勻混懸后，再用乙酸乙酯、正丁醇依次萃取，將每相合并后，減壓濃縮，得到乙酸乙酯相萃取物、正丁醇相萃取物和水相萃取物；

8、s3、乙酸乙酯相萃取物進行mci柱層析，使用甲醇-水梯度洗脫，得到7段組分fr.i-fr.ⅶ；

9、s4、fr.ii組分行硅膠柱層析分離，使用石油醚-丙酮洗脫，tlc檢測后合并洗脫液為12份，減壓濃縮，得到fr.ⅱ1-fr.ii12；

10、s5、fr.ⅱ5組分進行ods反相柱層析，tlc檢測，合并洗脫液，得到6段組分fr.ⅱ5a-fr.ii5f；

11、s6、fr.ⅱ5b組分使用半制備高效液相色譜進行制備分離，收集tr＝19.5min部分的洗脫液，減壓濃縮，得到倍半萜化合物。

12、優(yōu)選的，步驟s1中，乙醇水溶液的體積分數(shù)為90％～95％，加熱回流時間為1.9～2.1h。

13、優(yōu)選的，步驟s3中，使用甲醇-水梯度洗脫中甲醇和水的體積比依次為3:7、5:5、6:4、7:3、8:2、9:1和10:0。

14、優(yōu)選的，步驟s4中，石油醚-丙酮洗脫中石油醚和丙酮的體積比依次為100:1、60:1、50:1、40:1、30:1、20:1、10:1、5:1、3:1、2:1、1:1。

15、優(yōu)選的，步驟s5中，ods反相柱層析中使用甲醇-水進行洗脫分離，甲醇和水的體積比依次為5:5、6:4、7:3、8:2、9:1、10:0。

16、優(yōu)選的，步驟s6中，半制備高效液相色譜中洗脫劑為體積比為80:20的甲醇-水，流速為1.4～1.6ml/min。

17、優(yōu)選的，tlc檢測使用石油醚-丙酮2：1混合溶劑為展開劑，紫外燈的波長為254nm和365nm，使用的顯色劑為10％硫酸乙醇。

18、第三方面，一種藥物組合物，包括如第一方面所述的倍半萜化合物。

19、第四方面，如第一方面所述的倍半萜化合物或如第三方面所述的藥物組合物在制備抗氧化產(chǎn)品中的應(yīng)用。

20、上述本發(fā)明的一種或多種技術(shù)方案取得的有益效果如下：

21、本發(fā)明首次從扭連錢中分離到一種具有新骨架結(jié)構(gòu)的倍半萜類化合物，在研究中發(fā)現(xiàn)該化合物具有抗氧化活性，可以促進超氧化物歧化酶的酶活，促進mn-sod、cu/zn-sod、nrf2、nqo1基因mrna的表達，彌補了扭連錢的化學(xué)成分和生物活性研究中的空白。

22、本發(fā)明使用甲醇-水和石油醚-丙酮作為洗脫體系對扭連錢粗乙酸乙酯粗浸膏進行洗脫，獲得分級組分并提取得到高純度的倍半萜類化合物。倍半萜類化合物的提取過程可連續(xù)進行，流程簡單，提取純度高，可用于工業(yè)生產(chǎn)。洗脫體系的設(shè)置也可為扭連錢其他組分的提取提供參考，為扭連錢的化學(xué)成分和生物活性研究提供了基礎(chǔ)。

技術(shù)特征：

1.一種具有抗氧化活性的倍半萜化合物，其特征在于，具有如式i所示的結(jié)構(gòu)：

2.一種如權(quán)利要求1所述的倍半萜化合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

3.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟s1中，乙醇水溶液的體積分數(shù)為90％～95％，加熱回流時間為1.9～2.1h。

4.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟s3中，使用甲醇-水梯度洗脫中甲醇和水的體積比依次為3:7、5:5、6:4、7:3、8:2、9:1和10:0。

5.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟s4中，石油醚-丙酮洗脫中石油醚和丙酮的體積比依次為100:1、60:1、50:1、40:1、30:1、20:1、10:1、5:1、3:1、2:1、1:1。

6.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟s5中，ods反相柱層析中使用甲醇-水進行洗脫分離，甲醇和水的體積比依次為5:5、6:4、7:3、8:2、9:1、10:0。

7.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟s6中，半制備高效液相色譜中洗脫劑為體積比為80:20的甲醇-水，流速為1.4～1.6ml/min。

8.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，tlc檢測使用石油醚-丙酮2：1混合溶劑為展開劑，紫外燈的波長為254nm和365nm，使用的顯色劑為10％硫酸乙醇。

9.一種藥物組合物，其特征在于，包括如權(quán)利要求1所述的倍半萜化合物。

10.如權(quán)利要求1所述的倍半萜化合物或如權(quán)利要求9所述的藥物組合物在制備抗氧化產(chǎn)品中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及具有抗氧化活性的倍半萜化合物及其制備方法、藥物組合物及應(yīng)用。倍半萜化合物具有如式I所示的結(jié)構(gòu)：本發(fā)明首次從扭連錢中分離到一種具有新骨架結(jié)構(gòu)的倍半萜類化合物，在研究中發(fā)現(xiàn)該化合物具有抗氧化活性，可以促進超氧化物歧化酶的酶活，促進Mn?SOD、Cu/Zn?SOD、Nrf2、NQO1基因mRNA的表達，彌補了扭連錢的化學(xué)成分和生物活性研究中的空白。

技術(shù)研發(fā)人員：張教真,劉瑞鳳,張城敏,吳沛霖,王永杰,婁紅祥
受保護的技術(shù)使用者：山東大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/21