作為聯(lián)蛋白信號(hào)通路激活劑的二酮與羥基酮的制作方法
【專利說(shuō)明】作為聯(lián)蛋白信號(hào)通路激活劑的二酬與哲基酬
[OOOU 本發(fā)明專利申請(qǐng)是國(guó)際申請(qǐng)?zhí)枮镻CT/US2011/048086,國(guó)際申請(qǐng)日為2011年8月 17日，進(jìn)入中國(guó)國(guó)家階段的申請(qǐng)?zhí)枮?01180050153. 1，名稱為"作為聯(lián)蛋白信號(hào)通路激活 劑的二酬與哲基酬"的發(fā)明專利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。
[000引相關(guān)申請(qǐng)
[0003] 本申請(qǐng)要求2010年8月18日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?1/374,687和2010年12 月29日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?1/427, 974的權(quán)益，其通過(guò)引用全文納入本文。
技術(shù)領(lǐng)域
[0004] 本發(fā)明設(shè)及Wnt途徑中一種或多種蛋白的激活劑，包括一種或多種Wnt蛋白的激 活劑，W及包含所述激活劑的組合物。更特別地，其設(shè)及使用0-二酬、丫-二酬或丫-哲 基酬或其鹽或類似物W治療骨質(zhì)疏松和骨關(guān)節(jié)?。怀晒遣蝗?、骨質(zhì)缺損、骨折、牙周疾病、耳 硬化癥、傷口愈合、顧面崎形、溶瘤骨疾病、與中樞神經(jīng)系統(tǒng)分化和發(fā)育相關(guān)的創(chuàng)傷性腦損 傷，包含帕金森病、中風(fēng)、缺血性腦血管病、癒痛、阿爾茨海默病、抑郁癥、雙相障礙、精神分 裂癥；眼病如衰老相關(guān)的黃斑變性、糖尿病黃斑水腫或視網(wǎng)膜色素變性和干細(xì)胞分化及生 長(zhǎng)相關(guān)的疾病，包含脫發(fā)，造血相關(guān)疾病和組織再生相關(guān)疾病。
【背景技術(shù)】
[0005] 所述Wnt/e-聯(lián)蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)很多生物過(guò)程重要。其調(diào)節(jié)胚胎形 式中尚未發(fā)育細(xì)胞的命運(yùn)。所述Wnt/e-聯(lián)蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)干細(xì)胞自我更新 和增殖W及成年生物體中干細(xì)胞的發(fā)育（如皮膚細(xì)胞、骨細(xì)胞、肝細(xì)胞等）重要 [Science (2002)，296 (5573)，1644 - 1646]。所述 Wnt/ 0 -聯(lián)蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路調(diào) 節(jié)發(fā)育、形態(tài)、增殖、運(yùn)動(dòng)和細(xì)胞命運(yùn)[Annual Review of Cell and Developmental Biology (2004)，20, 781-810]。所述Wnt/ e -聯(lián)蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)腫瘤發(fā)生起關(guān)鍵作用， 并且在數(shù)種人癌癥中觀察到該個(gè)系統(tǒng)的不當(dāng)激活["Wnt Signaling in Human Cancer(人 癌癥中的 Wnt 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)）"，Si 即 al Transduction in Cancer(第 169-187 頁(yè)）（2006)施普 林格公司（Springer)]。在人中，Wnt/e-聯(lián)蛋白首次描述為與E-巧粘著蛋白胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域 和Wnt/e-聯(lián)蛋白相互作用的蛋白，使巧粘著蛋白復(fù)合物錯(cuò)定在肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架上[Sci ence (1991)，254巧036)，1359-1361]。然后，發(fā)現(xiàn)了哺乳動(dòng)物Wnt/ 0 -聯(lián)蛋白的其他作用；即 是作為Wnt/0 -聯(lián)蛋白傳遞信號(hào)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑。
[0006] Wnt配體存在時(shí)，如果不被分泌的括抗劑抑制，所述Wnt配體結(jié)合卷曲蛋白 (化izzled)(Fzd)/低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白（LR巧復(fù)合物，激活所述胞質(zhì)蛋白蓬亂 蛋白（dishevelled)(果蛹值roso地ila)中的Dsh和脊椎動(dòng)物中的Dvl)。尚未充分了 解化h/Dvl如何被精確激活，但是已經(jīng)提示了酪蛋白激酶l(CKl)和酪蛋白激酶2(CK2) 的磯酸化起部分作用[Proceedings of the P^Jational Academy of Sciences of the USA (1999)，96 (22)，12548-12552]。然后Dsh/Dvl抑制多蛋白復(fù)合物（e -聯(lián)蛋白-軸蛋 白（Axin)-腺瘤性結(jié)腸息肉?。ˋPC)-糖原合成酶激酶（GSK)-3 0)的活性，其通過(guò)磯酸 化祀定e-聯(lián)蛋白W由蛋白酶體降解。提示了Dsh/Dvi結(jié)合CKI并且因此抑制e-聯(lián) 蛋白的啟動(dòng)（priming)和間接防止0 -聯(lián)蛋白的GSK-3 0磯酸化[Genes&Developme nt(2002)，16巧)，1066 - 1076]。Wnt刺激后，Dvl也顯示募集GSK-3結(jié)合蛋白佑B巧到多蛋 白復(fù)合物。GBP可W從軸蛋白中滴定GSK-30，并且W該種方式抑制0-聯(lián)蛋白的磯酸化。 最終，描述了通過(guò)LRP把軸蛋白隔離在細(xì)胞膜上[Molecular cell (2001)，7 (4)，801-809]。 所述整體結(jié)果是細(xì)胞質(zhì)0-聯(lián)蛋白的積聚。穩(wěn)定的0-聯(lián)蛋白然后移位到核中，并且結(jié)合 到DNA結(jié)合蛋白T細(xì)胞因子（Tcf)/淋己增強(qiáng)因子（Lef)家族的成員上，引起Wnt祀標(biāo)基因 的轉(zhuǎn)錄。
[0007] Wnt配體消失時(shí)，軸蛋白募集CK1到多蛋白復(fù)合物，造成0-聯(lián)蛋白的啟動(dòng) (priming)和GSK-3 0進(jìn)行的0-聯(lián)蛋白磯酸化級(jí)聯(lián)起始。磯酸化的0-聯(lián)蛋白然后被包 含P-轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白重復(fù)的蛋白（P-TrC巧識(shí)別，和被蛋白酶體降解，降低胞質(zhì)0-聯(lián)蛋白的水 平。
[000引所述Wnt/e-聯(lián)蛋白通路的異?；罨a(chǎn)生數(shù)種表型，包含發(fā)展出各種人 癌癥和造成干細(xì)胞異常發(fā)育和功能的疾病陽(yáng)ncogene (2009)，28 (21)，2163 - 2172 ; Cancer Cell (2008), 14(6), 471-484 ;American Journal of Patholo gy但003)，162巧)，1495-1502]。所述Wnt/e -聯(lián)蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的慢性活化設(shè)及了各種人 惡性腫瘤的發(fā)展，包含高骨量綜合征、硬化性骨化病、結(jié)直腸癌、肝細(xì)胞癌（肥C)、卵巢癌、子 宮癌、膜腺癌和黑素瘤巧1〇633373(1999)21(12)，1021 - 1030;〔611(2000)，103(2)，311" 320 ;Genes Dev. (2000),14(15),1837 - 1851]。由于所述 Wnt/P-聯(lián)蛋白通路參與無(wú)數(shù)種 生長(zhǎng)和發(fā)育的過(guò)程，設(shè)及所述Wnt/e-聯(lián)蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的蛋白突變與各種人疾病密切 相關(guān)，例如發(fā)育異常、毛囊形態(tài)發(fā)生、干細(xì)胞分化、骨形成和細(xì)胞增殖。
[0009] 脫發(fā)
[0010] 毛發(fā)在稱為毛囊的皮膚下面囊狀結(jié)構(gòu)中形成。例如在人頭皮上發(fā)現(xiàn)的可見毛發(fā)實(shí) 際上是發(fā)干，發(fā)干是從毛囊中生長(zhǎng)出的角質(zhì)化、硬化組織。特別地，所述發(fā)干大部分由角質(zhì) 形成細(xì)胞生成的角蛋白組成。
[0011] 正常的毛囊在生長(zhǎng)階段（生長(zhǎng)期）、變性階段（退行期）和休止階段（靜止期 (telogen))之間循環(huán)。頭皮毛發(fā)有相對(duì)長(zhǎng)的生命周期：所述生長(zhǎng)期范圍為2-6年、所 述退行期范圍為數(shù)天-數(shù)周，和所述靜止期為約3個(gè)月。人身體其他部分發(fā)現(xiàn)的更短毛 發(fā)有相應(yīng)更短的生長(zhǎng)期持續(xù)時(shí)間。所述毛發(fā)和毛囊的形態(tài)在毛發(fā)生命周期過(guò)程中變化顯 著[Dermatology in General Medicine (卷 I), McGraw-Hill, Inc. , 1993,第 290-91 頁(yè)； Sperling, L. C. ;J. Amer. Acad. Dermatology (1991), 25 (1，第 1 部分），1-17]。
[0012] 生長(zhǎng)期中，所述毛囊有高代謝活性。所述囊包含囊基底的真皮乳突（papilla);和 真皮乳突周圍的表皮基質(zhì)細(xì)胞形成所述發(fā)干的基底，其通過(guò)所述毛管從乳突向上延伸。所 述基質(zhì)細(xì)胞是毛發(fā)的活性生長(zhǎng)部分。
[0013] 在退行期，所述基質(zhì)細(xì)胞從乳突回縮，并且發(fā)生其他變性改變。例如，所述向毛囊 提供血液和營(yíng)養(yǎng)的血管和毛細(xì)血管萎縮且停止功能。一組列上皮細(xì)胞柱向上推動(dòng)角質(zhì)化的 近端發(fā)干，并且在囊內(nèi)發(fā)生細(xì)胞死亡。所述發(fā)干然后從頭皮或身體其他部分脫落，并且所述 毛囊進(jìn)入靜止期；毛發(fā)生長(zhǎng)循環(huán)的休止階段。
[0014] 盡管未完全理解毛囊的調(diào)節(jié)和生長(zhǎng)，其代表了組織形態(tài)發(fā)生中的增殖、分化和細(xì) 胞相互作用的動(dòng)態(tài)過(guò)程。據(jù)信毛囊僅在發(fā)育早期形成，并且不能被取代。因此，損傷或無(wú)功 能的毛囊增加一般與脫發(fā)有關(guān)。
[0015] 男性型或女性型秀發(fā)需要男性或女性激素如雄激素的出現(xiàn)，但是原因未知。在任 意男性中脫發(fā)的程度很大程度取決于他從他父親、母親或雙親中遺傳的基因。脫發(fā)在鬟角 或頭頂開始。如果男性型脫發(fā)在中青年時(shí)期開始，隨后的脫發(fā)通常相當(dāng)廣泛。男性秀發(fā)呈 波浪形進(jìn)行。脫發(fā)可W在早期20多歲開始，然后停止，僅在數(shù)年后再開始。在年齡20-30 歲時(shí)，30%的男性有秀斑。該持續(xù)增加直到50-60歲，那時(shí)50%的男性全部秀發(fā)。
[0016] 脫發(fā)的速率受年齡增長(zhǎng)、由于遺傳基因引起的早期秀發(fā)趨勢(shì)和毛囊內(nèi)男性激素二 氨睪酬值HT)過(guò)多的影響。DHT作用在毛囊內(nèi)的激素受體上，并且因此減慢毛發(fā)生成和生成 軟弱、更短的毛發(fā)。有時(shí)DHT生成甚至完全終止了毛發(fā)的生長(zhǎng)。盡管秀發(fā)男性在其毛囊內(nèi) 有高于平均量的DHT，他們通常沒(méi)有高于平均的循環(huán)睪酬水平。
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