一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群及其制備方法，該方法為：將包含EM菌的混合微生物菌種接種于培養(yǎng)基中，再加水制成發(fā)酵液，在發(fā)酵罐內(nèi)進行發(fā)酵；首先進行厭氧發(fā)酵，接種后每12小時通風一次，維持罐壓大于0.05mPa，罐溫37℃，培養(yǎng)24~48小時，再充分攪拌，然后放在紅色或白色的發(fā)酵桶中，置于陽光不直接照射但有光處，透氣半封閉條件下繼續(xù)發(fā)酵，每天攪拌1?2次，發(fā)酵終點時pH≤4.0，稀釋10倍后OD562值≥0.3。本發(fā)明還提供了該方法制備的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群。本發(fā)明提供的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群及其制備方法，在水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中能有效促進水體的改良、使之達到穩(wěn)定、可控的環(huán)境。
【專利說明】
一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種混合微生物及其制備方法，具體地，涉及一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖集約化的蓬勃發(fā)展，養(yǎng)殖水環(huán)境污染日益嚴重，由于環(huán)境惡化造成的水產(chǎn)動物疾病或由此引發(fā)的傳染性疾病大量劇增，已成為制約水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的主要障礙。而長期使用抗生素和其他化學藥物防治養(yǎng)殖病害已引發(fā)了一系列環(huán)境和社會問題。
[0003]近年來，人們開始嘗試在養(yǎng)殖水體中施用有益微生物制劑來改善養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境，提高養(yǎng)殖動物的免疫力，抑制病原微生物，從而減少疾病的發(fā)生。微生物制劑是由一些對人類和養(yǎng)殖對象無致病危害并能改良水質(zhì)狀況，能抑制水產(chǎn)病害的有益微生物制成。主要有硝化細菌、光合細菌、枯草桿菌、放線菌、乳酸菌、酵母菌、鏈球菌和EM微生物菌群等。
[0004]微生物直接或間接地作用于水產(chǎn)養(yǎng)殖對象和養(yǎng)殖環(huán)境，很好地分解養(yǎng)殖生物排泄物、殘餌以及浮游植物殘體等有機物，同時微生物鏈在水質(zhì)凈化中通過氧化、還原、光合、同化和異化作用把有機物轉(zhuǎn)變?yōu)楹唵蔚幕衔?，保證水質(zhì)的正常功能，從而維持養(yǎng)殖環(huán)境生態(tài)系統(tǒng)中養(yǎng)殖生物、病原、水質(zhì)間的平衡。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的混合微生物及其制備方法，該混合微生物擁有超強的繁殖力以及對環(huán)境的適應能力，在水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中能有效促進水體的改良、使之達到穩(wěn)定、可控的環(huán)境。
[0006]為了達到上述目的，本發(fā)明提供了一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其中，該方法為:將包含EM菌的混合微生物菌種接種于培養(yǎng)基中，再加水制成發(fā)酵液，在發(fā)酵罐內(nèi)進行發(fā)酵;首先進行厭氧發(fā)酵，接種后每12小時通風一次，無需攪拌，維持罐壓大于0.05mPa，罐溫37°C，培養(yǎng)24?48小時，再充分攪拌，然后放在紅色或白色的發(fā)酵桶中，置于陽光不直接照射但有光處，透氣半封閉條件下繼續(xù)發(fā)酵，每天攪拌1-2次，發(fā)酵終點時pH<4.0，稀釋10倍后00562值20.3。
[0007]上述的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其中，所述的混合微生物菌種包含:EM菌群、光合菌群、子囊菌群和擔子菌群、以及包含酵母菌和乳酸菌的其他有益微生物菌群;EM菌群:光合菌群:子囊菌群和擔子菌群:包含酵母菌和乳酸菌的其他有益微生物菌群的重量比為2:3:3:2。
[0008]上述的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其中，所述的光合菌群由光能異養(yǎng)型紅螺菌科的單胞藻組成。
[0009]上述的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其中，所述的培養(yǎng)基按重量份數(shù)計包含酵母膏I份、蛋白胨2份、葡萄糖2份、瓊脂2份、糖蜜I份。所述的培養(yǎng)基按照Ikg培養(yǎng)基溶解于I噸水中的比例構(gòu)成發(fā)酵液。
[0010]上述的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其中，所述的培養(yǎng)基中還包含微量元素，所述微量元素添加的成分為硫酸氨、醋酸鈉、磷酸氫二鉀、硫酸鎂，添加劑量為
0.1?1.0mg/Lo
[0011]上述的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其中，所述的培養(yǎng)基，其pH為7.0-7.5，并在0.1mPa和 121°C條件下滅菌20min。
[0012]上述的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其中，所述的接種，其接種量為5-10%o
[0013]上述的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其中，所述的發(fā)酵，在接種后5小時之后，每15小時取樣測pH值、OD值至發(fā)酵結(jié)束。
[0014]上述的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其中，所述的發(fā)酵，其發(fā)酵天數(shù)超過150天，發(fā)酵結(jié)束后所得活性菌落總數(shù)2 80億/ml。
[0015]本發(fā)明還提供了一種上述的方法制備的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群，其中，所述的混合菌群按重量百分比計包含:光合菌群15%、酵母菌群25%、乳酸菌群40%。該混合菌群在O°C以下會進入休眠狀態(tài)，15°C以上38°C以下活性最高，80°C以上，部分菌群開始死亡。溫度低不會造成死亡，只會使其休眠，高溫會造成死亡。該混合菌群通過復合菌液制劑的方式使用，混合菌群與包含所述微量元素的所述培養(yǎng)基按重量比計4:1的比例組成所述的復合菌液制劑。
[0016]本發(fā)明提供的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群及其制備方法具有以下優(yōu)點:
該混合菌群自身擁有超強的繁殖力以及對環(huán)境的適應能力，在水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中能有效促進水體的改良、使之達到穩(wěn)定、可控的環(huán)境。并且其具有獨特的抗病能力、對促進水產(chǎn)品的健康生長，提高生產(chǎn)力，就現(xiàn)代養(yǎng)殖業(yè)而言可謂影響巨大。
【具體實施方式】
[0017]以下對本發(fā)明的【具體實施方式】作進一步地說明。
[0018]本發(fā)明提供的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，該方法為:
將包含EM菌的混合微生物菌種接種于培養(yǎng)基中，再加水制成發(fā)酵液，在發(fā)酵罐內(nèi)進行發(fā)酵，接種量為5_10%。按照Ikg培養(yǎng)基溶解于I噸水中的比例構(gòu)成發(fā)酵液。發(fā)酵液在發(fā)酵罐中的裝量為 100ml/250ml 或 250ml/500ml。
[0019]首先進行厭氧發(fā)酵，接種后每12小時通風一次，無需攪拌，維持罐壓大于0.05mPa，罐溫37°C，培養(yǎng)24?48小時。
[0020]再充分攪拌，然后放在紅色或白色的發(fā)酵桶中，置于陽光不直接照射但有光處，優(yōu)選地，置于樹蔭弱光下或置于室內(nèi)靠窗處培養(yǎng)，透氣半封閉條件下，例如半開桶蓋，繼續(xù)發(fā)酵，每天攪拌1-2次，發(fā)酵終點時pH <4.0,稀釋10倍后OD562值I 0.3。培養(yǎng)成功后理想顏色是紫紅或鮮紅色。
[0021]在接種后5小時之后，每15小時取樣測pH值、OD值至發(fā)酵結(jié)束。
[0022]發(fā)酵天數(shù)超過150天，發(fā)酵結(jié)束后所得活性菌落總數(shù)?80億/ml。
[0023]混合微生物菌種包含:EM菌群、光合菌群、子囊菌群和擔子菌群、以及包含酵母菌和乳酸菌的其他有益微生物菌群;EM菌群:光合菌群:子囊菌群和擔子菌群:包含酵母菌和乳酸菌的其他有益微生物菌群的重量比為2:3:3: 2。光合菌群由光能異養(yǎng)型紅螺菌科的單胞藻組成。
[0024]EM菌(Effective Microorganisms)是以光合細菌、乳酸菌、酵母菌和放線菌為主的10個屬80余個微生物復合而成的菌群。
[0025]光能異養(yǎng)型紅螺菌科的單胞藻，通過光合磷酸化獲得能量，其自身在光能異養(yǎng)型的天然能力使其能夠在水中光照條件下可直接利用降解有機質(zhì)和硫化氫并使自身得以增殖，同時凈化了水體。
[0026]子囊菌群和擔子菌群，是科學家通過觀察和利用史前上萬年的微生物的有性繁殖，在子囊中產(chǎn)生子囊孢子，利用這種已存在上萬年的微生物超強的生命力來當研究基礎(chǔ)，最終借助科學手段來促使菌絲組成菌絲體，形成含有子囊的子實體。使其得以在現(xiàn)在的科學中實際應用。
[0027]包含酵母菌和乳酸菌的其他有益微生物菌群，對水體的氨氮調(diào)解起著絕對的作用，但是卻不能一次性使用，或者在水體已經(jīng)出現(xiàn)不平衡時才使用則效果不明顯，控制不當反而會增加負作用。因此應通過微量點加的科學性儀器加以實施，并且以微生物載體的特征調(diào)整自營性微生物菌體的適用范圍。當這類自營性微生物在與水體接觸、以平衡的方式緩慢地融入水體的狀態(tài)下，通過科學調(diào)控，將進一步激發(fā)復合菌體對消解水體中的氨氮及氮硝化合物的作用使之持續(xù)有效，以解決水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中氨氮超標對水產(chǎn)動物的影響。
[0028]培養(yǎng)基按重量份數(shù)計包含酵母膏I份、蛋白胨2份、葡萄糖2份、瓊脂2份、糖蜜I份。培養(yǎng)基中還包含微量元素，微量元素添加的成分為硫酸氨、醋酸鈉、磷酸氫二鉀、硫酸鎂，添加劑量為0.1?1.0mg/L，能夠促進菌種生長和增強活性。培養(yǎng)基pH為7.0-7.5，并在
0.1mPa和121 °C條件下滅菌20min。
[0029]本發(fā)明還提供了上述的方法制備的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群，按重量百分比計包含:光合菌群15%、酵母菌群25%、乳酸菌群40%。
[0030]光合菌為光能型原核微生物，以太陽光作為能源、無芽孢、革蘭氏陰性菌。在厭氧光照或好氧黑暗條件下利用自然界中的有機物、硫化物、氨等作為供氫體兼碳源進行光合作用，在生態(tài)系統(tǒng)中具有重要的地位。
[0031]酵母菌是一種單細胞真菌，行兼性厭氧生活。廣泛用于精飼料以增加飼料中的蛋白質(zhì)含量，以提供足夠的營養(yǎng)達到促進生長、提高機體的免疫力、提高養(yǎng)殖生物品質(zhì)等。它還具有促進水體中其他有益菌的生長繁殖，穩(wěn)定微生態(tài)平衡的作用。
[0032]乳酸菌是能發(fā)酵葡萄糖或乳糖產(chǎn)生乳酸的異養(yǎng)厭氧細菌，無芽孢、革蘭氏陽性，是人類和動物的正常菌群，但極個別的也可能致病。其主要功能有:提供營養(yǎng)與促生長效應；改善消化道功能，維持體內(nèi)的菌群平衡;改善免疫力，抑制疾病的發(fā)生;抗菌效應，阻止病原菌的入侵。
[0033]該混合菌群在O °C以下會進入休眠狀態(tài)，15°C以上38°C以下活性最高，80°C以上，部分菌群開始死亡。溫度低不會造成死亡，只會使其休眠，高溫會造成死亡。并且僅需要較低氧分壓下正常生活的微生物。正常大氣的氧分壓為0.2Pa，而EM菌僅生活在0.01?0.03Pa下便可以生存。
[0034]該混合菌群通過復合菌液制劑的方式使用，混合菌群與上述的包含微量元素的培養(yǎng)基按重量比計4:1的比例組成復合菌液制劑。
[0035]以下通過實施例對本發(fā)明的實施方式進行更詳細的說明。
[0036]實施例1
制備Ikg營養(yǎng)菌液制劑，采用混合菌種發(fā)酵工藝進行生產(chǎn)。
[0037]按EM菌群:光合菌群:子囊菌群和擔子菌群:包含酵母菌和乳酸菌的其他有益微生物菌群按重量比計為2:3:3:2的比例組成混合菌種。將其接種于培養(yǎng)基中。
[0038]培養(yǎng)基配方為按重量份數(shù)計包含酵母膏I份、蛋白胨2份、葡萄糖2份、瓊脂2份、糖蜜I份。培養(yǎng)基中還包含微量元素，微量元素添加的成分為硫酸氨、醋酸鈉、磷酸氫二鉀、硫酸鎂，添加劑量為0.1?1.0mg/L。
[0039]培養(yǎng)基再加水制成發(fā)酵液，按照Ikg培養(yǎng)基溶解于I噸水中的比例構(gòu)成發(fā)酵液?？刂苝H 7.0-7.5，發(fā)酵罐中發(fā)酵液裝量為1001111/2501111，或2501111/5001111，控制0.111^3、121°(:滅菌20mino
[0040]接種量控制5?10%，厭氧發(fā)酵，接種后每12小時通風一次，使發(fā)酵液翻動均勻，無需攪拌，維持罐壓0.05mPa以上，罐溫37°C，培養(yǎng)24?48小時。經(jīng)充分攪拌后置于樹蔭弱光下或置于室內(nèi)靠窗處培養(yǎng)(不讓太陽光直接照射瓶身，但必須透弱光)，可選用紅色或白色的桶培養(yǎng)，半開桶蓋(微透氣或半密封狀態(tài))。要求每天攪拌1-2次。培養(yǎng)成功后理想顏色是紫紅或鮮紅色。
[0041 ]發(fā)酵中在接種后5小時后，每15小時取樣測pH值、OD值至放罐。
[0042]發(fā)酵終點控制pH <4.0，稀釋10倍OD562值2 0.3。
[0043]得到的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群，按重量百分比計包含:光合菌群15%、酵母菌群25%、乳酸菌群40%。
[0044]該混合菌群通過復合菌液制劑的方式使用，混合菌群與上述的包含微量元素的培養(yǎng)基按重量比計4:1的比例組成復合菌液制劑。
[0045]在使用時，因水體菌體總數(shù)落以及水域和養(yǎng)殖品種不同會有很大的差異，本實施例僅就四大家魚這種養(yǎng)殖品種池塘里每立方水體適用的混合菌群保守數(shù)量為:2g。混合菌群每ml有80億以上的菌活菌數(shù)，每立方水體用2ml，相當于160億以上的活菌數(shù)為最合適，這樣能夠有效控制此菌種在水體中的優(yōu)勢。保持菌種的有效成分，需要約10-15天為周期使用一次為基準。
[0046]在pH值高于9時，潑灑包含該混合菌群的復合菌液制劑，Ikg/畝，15天為一個周期。每立方水體的話控制在約2g。
[0047]溶解氧超過9的情況下對混合菌群總體影響不大，溶解氧在6-10這個幅度內(nèi)都根據(jù)溫度在15°C至30°C為最佳培育溫度。該溶解氧含量和溫度間活性最好，最為可控。
[0048]本發(fā)明提供的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群及其制備方法，該混合菌群屬于需氧微生物，為耗氧型菌，是采用EM菌等菌種在特定條件下經(jīng)擴大培養(yǎng)后所形成的綜合性有益菌體。擁有超強的繁殖力以及對環(huán)境的適應能力，在水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中能有效促進水體的改良、使之達到穩(wěn)定、可控的環(huán)境。并且其具有獨特的抗病能力、對促進水產(chǎn)品的健康生長，提高生產(chǎn)力，就現(xiàn)代養(yǎng)殖業(yè)而言可謂影響巨大。
[0049]盡管本發(fā)明的內(nèi)容已經(jīng)通過上述優(yōu)選實施例作了詳細介紹，但應當認識到上述的描述不應被認為是對本發(fā)明的限制。在本領(lǐng)域技術(shù)人員閱讀了上述內(nèi)容后，對于本發(fā)明的多種修改和替代都將是顯而易見的。因此，本發(fā)明的保護范圍應由所附的權(quán)利要求來限定。
【主權(quán)項】
1.一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其特征在于，該方法為:將包含EM菌的混合微生物菌種接種于培養(yǎng)基中，再加水制成發(fā)酵液，在發(fā)酵罐內(nèi)進行發(fā)酵;首先進行厭氧發(fā)酵，接種后每12小時通風一次，無需攪拌，維持罐壓大于0.05mPa，罐溫37°C，培養(yǎng)24?48小時，再充分攪拌，然后放在紅色或白色的發(fā)酵桶中，置于陽光不直接照射但有光處，透氣半封閉條件下繼續(xù)發(fā)酵，每天攪拌1-2次，發(fā)酵終點時pH < 4.0，稀釋10倍后OD562值2 0.3。2.如權(quán)利要求1所述的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其特征在于，所述的混合微生物菌種包含:EM菌群、光合菌群、子囊菌群和擔子菌群、以及包含酵母菌和乳酸菌的其他有益微生物菌群;EM菌群:光合菌群:子囊菌群和擔子菌群:包含酵母菌和乳酸菌的其他有益微生物菌群的重量比為2:3:3:2。3.如權(quán)利要求2所述的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其特征在于，所述的光合菌群由光能異養(yǎng)型紅螺菌科的單胞藻組成。4.如權(quán)利要求1所述的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)基按重量份數(shù)計包含酵母膏I份、蛋白胨2份、葡萄糖2份、瓊脂2份、糖蜜I份;所述的培養(yǎng)基按照I kg培養(yǎng)基溶解于I噸水中的比例構(gòu)成發(fā)酵液。5.如權(quán)利要求4所述的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)基中還包含微量元素，所述微量元素添加的成分為硫酸氨、醋酸鈉、磷酸氫二鉀、硫酸鎂。6.如權(quán)利要求5所述的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)基，其PH為7.0-7.5，并在0.1mPa和121°C條件下滅菌20min。7.如權(quán)利要求1所述的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其特征在于，所述的接種，其接種量為5-10%。8.如權(quán)利要求1所述的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其特征在于，所述的發(fā)酵，在接種后5小時之后，每15小時取樣測pH值、OD值至發(fā)酵結(jié)束。9.如權(quán)利要求8所述的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群的制備方法，其特征在于，所述的發(fā)酵，其發(fā)酵天數(shù)超過150天，發(fā)酵結(jié)束后所得活性菌落總數(shù)2 80億/ml。10.—種如權(quán)利要求1?9中任意一項所述的方法制備的用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的好氧混合菌群，其特征在于，所述的混合菌群按重量百分比計包含:光合菌群15%、酵母菌群25%、乳酸菌群40%。
【文檔編號】C12N1/20GK105861394SQ201610417749
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年6月15日
【發(fā)明人】徐陳國
【申請人】佛山市百特利農(nóng)業(yè)生態(tài)科技有限公司