專利名稱：：碳青霉烯類化合物側鏈的含量測定方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及醫(yī)藥領域，具體涉及一種碳青霉烯類化合物側鏈的含量測定方法。
背景技術：
：隨著近年來抗生素耐藥問題日趨明顯，多藥耐藥性菌株屢見報道，除了需要對抗生素的使用進行更為合理的控制外，臨床上亟需開發(fā)新一代擁有高效抗菌活性的新型抗感染治療藥物，碳青霉烯類化合物的出現(xiàn)，滿足了這種需要。碳青霉烯(carbapenem)類化合物是20世紀70年代發(fā)展起來的新型結構的(3-內酰胺類抗生素。先后上市的有亞胺培南(imipenem)、帕尼培南(panipenem)、美羅培南(meropenem)、比阿培南(biapenem)、厄他培南(ertapenem)和多尼培南(doripenem)等。由于該類藥對革蘭氏陽性、革蘭氏陰性菌、需氧菌和厭氧菌等均具有超廣譜強效抗菌作用，并有良好的組織滲透性，對各種細菌感染療效優(yōu)異，毒副作用少。近幾年來-直受到人們的關注。碳青霉烯類化合物的結構都是由母核和側鏈兩部分構成，母核部分基本相同，而且已經(jīng)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)；側鏈部分則不盡相同，但都有一個共同的特點，就是側鏈都含有巰基。側鏈通過該巰基與母核對接，經(jīng)過一系列反應，得到產(chǎn)品。由于該類藥大多都是注射劑，產(chǎn)品質量至關重要。側鏈中間體的純度，直接影響對接反應的結果。如果測定側鏈的純度不準確，就無法確定母核與側鏈的投料比，造成原料的浪費，而且給后處理造成很大的困難，使生產(chǎn)成本大幅上升；更嚴重的是可能造成最終產(chǎn)品質量不合格。側鏈的合成過程中有可能產(chǎn)生大量的無機鹽(如氯化鈉、碳酸鈉、氯化銨)和有機鹽，(如乙酸鈉、甲酸鈉)。某些側鏈在水中溶解度較大，而反應液中又有大量的有機鹽和無機鹽與之共存，這些與產(chǎn)品共存的鹽很難通過常規(guī)的方法除去。為了獲得高純度的側鏈需要反復精制，即使經(jīng)過反復精制，是否能達到合理的純度，也無法證明，所以真正意義上的分離十分困難?，F(xiàn)有技術中碳青霉烯類化合物側鏈的含量測定一般都采用HPLC法。但這種含量測定方法的缺點是顯而易見的反應過程中產(chǎn)生的無機鹽和有機鹽在HPLC中沒有吸收峰，所以如果采用HPLC面積歸一化法不能準確反映側鏈的含量，而且受到對照品的限制，無法準確、快速的進行測定。基于碳青霉烯類化合物巨大的應用前景，人們一直迫切希望找到一種簡單、快速，而且能準確反映碳青霉烯類化合物側鏈真實含量的通用的測定方法。
發(fā)明內容為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種碳青霉烯類化合物側鏈的含量測定方法。本發(fā)明的測定方法包括如下步驟-(1)將碳青霉烯類化合物側鏈溶于溶劑中；(2)用碘滴定液標定；(3)將滴定結果用空白試驗校正；(4)按下式計算側鏈的含量y(l/2/2)x(F母Mx腿其中，C(丄12):碘滴定液摩爾濃度；2V:為滴定碳青霉烯類化合物側鏈時消耗碘滴定液的體積，ml;V(l:為滴定空白時消耗的碘滴定液的體積，ml;M:為碳青霉烯類化合物側鏈的摩爾分子量；W:為樣品稱樣量，mg;X:為所測樣品的含量，mg。其中，歩驟(1)中所述的碳青霉烯類化合物側鏈優(yōu)選自如下化合物化合物l:比阿培南側鏈6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[l，2-a][l，2，4]三氮唑內錄氯化物；化合物2:關羅培南側鏈(2S,4S)-4-巰基-1-(對硝基芐氧羰基)-1-吡咯垸-2-(N，N-二甲基)甲酰胺；化合物3:帕尼培南側鏈(3S)-1-(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯烷；化合物4:厄他培南側鏈(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-[(3-對硝基芐氧?；?苯氨甲?；鵠-4-巰基吡咯烷；化合物5:亞胺培南側鏈N-[(N-對硝基芐氧羰基)亞胺甲撐基]胺基乙基硫醇；化合物6:多尼培南側鏈(2S,4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-(N-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯院；化合物7:多尼培南側鏈(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-對硝基芐氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷；化合物8:多尼培南側鏈(28，48)-1-叔丁氧羰基-2-(^叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷。進步優(yōu)選自6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[1,2-a][1，2，4]三氮唑內鑰氯化物；(2S，4S)-4-巰基-1-(對硝基芐氧羰基)-1-吡咯垸-2-(N，N-二甲基)甲酰胺；(3S)-1-(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯烷；(2S，4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-[(3-對硝基芐氧?；?苯氨甲?；鵠-4-巰基吡咯烷；N-[(N-對硝基節(jié)氧羰基)亞胺甲撐基]胺基乙基硫醇；(:2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-對硝基芐氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷。最優(yōu)選為6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[l，2-a][1，2，4]三氮唑內鐵氯化物。歩驟(1)中所述的溶劑選自(a)水，(b)緩沖液，(c)水和有機溶劑的混合溶劑，(d)緩沖液和有機溶劑的混合溶劑；所述的水優(yōu)選為新沸過放冷的水；所述的緩沖液優(yōu)選pH4--8，進-一歩優(yōu)選S氨-氯化銨緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液、枸櫞酸-磷酸氫二鈉、醋酸-醋酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液；所述的有機溶劑優(yōu)選自甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、四氫呋喃、乙腈、二氧六環(huán)和二甲基甲酰胺，最優(yōu)選四氫呋喃。所述步驟(2)中，碘滴定液的濃度優(yōu)選為0.05-0.1mol/L。所述步驟(2)中，在用碘滴定液滴定前，還包括加入指示劑的歩驟，所述的指示劑優(yōu)選為淀粉或亞甲藍指示液。所述歩驟(2)中，在用碘滴定液滴定時，還包括接近終點時加入指示劑的歩驟，所述的指示劑優(yōu)選為淀粉或亞甲藍指示液。碳青霉烯類化合物側鏈用量優(yōu)選為O.]-lg;淀粉指示液用量優(yōu)選為l-5ml;亞甲藍指示液用量優(yōu)選為0.05-0.3ml。在用碘滴定液進行標定吋，終點的判斷為(1)加入淀粉指示液，滴定至溶液呈淺藍色不褪；(2)加入亞甲藍指示液，滴定至溶液呈綠色不褪；(3)不加指示液，滴定至溶液呈淺黃色不褪。對有機化合物進行HPLC測定，一般采用歸一化法，這具有簡單、快速的特點，適十反應的監(jiān)測；進行精確的含量測定，則需要內標法或外標法。通常情況下，HPLC測定方法具有化學測定方法無法比擬的優(yōu)勢。但內標法和外標法需要符合要求的對照品，這對于某些碳青霉烯類化合物側鏈來說，如6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[1，2-a][1，2，4]三氮唑內総氯化物，是非常困難的；而且由于某些側鏈中含有大量在HPLC中無吸收的鹽類物質，利用歸一化法不能真實反應側鏈的純度。所以，利用HPLC法無法建立碳青霉烯類化合物側鏈的通用測定方法?？紤]到側鏈產(chǎn)品中的雜質只含有無機鹽和有機鹽，不含有巰基，本發(fā)明人嘗試用檢測側鏈巰基的方法測定含量，即化學測定法。根據(jù)巰基易氧化的特性，嘗試用高錳酸鉀、重鉻酸鉀和溴酸鉀等氧化劑進行氧化，由于碳青霉烯類化合物側鏈結構復雜，除含有巰基外還含有氧、氮、雙鍵和季銨鹽，均因氧化劑氧化性過強或其它原因得不到滿意結果。分析原因可能是這三種氧化劑除對巰基氧化外，側鏈上的氮原子也被氧化形成氮氧化物，或側鏈被氧化破壞?；谝陨显?，考慮用相對弱的氧化劑碘來氧化巰基成二硫化合物的特性來對其進行測定，而其結構上的氧、氮、雙鍵和季銨鹽不受影響，結果獲得滿意結果，該方法不但可以用于含量測定，還可用于指導反應進程。本發(fā)明的有益效果在于(1)測定方法操作簡單，易于掌握，不需要任何設備，不需要標準樣品，無需繁瑣的操作。(2)測定方法快速，測試一個樣品一般只需要幾分鐘即可以完成，適用于實驗室或者工業(yè)生產(chǎn)過程中中間體含量的準確測定；不僅適用于含量測定，還可用于指導反應進程。(3)由于側鏈產(chǎn)品中雜質只含有無機鹽和有機鹽，不含有巰基，不會對測定造成千擾。所以本發(fā)明測定方法能準確反映側鏈的真實含量，進而能準確地計算投料比，保證了產(chǎn)品的質量。具體實施例方式下面將結合具體實施例對本發(fā)明作進一步說明，但不作為對本發(fā)明的限定。試劑碘、碘化鉀、三氧化二砷、氫氧化鈉、酚酞、淀粉、鹽酸、氫氧化鈉、甲基橙、硫酸、碳酸氫鈉均為分析純。碘滴定液(0.05mol/L)的配制取碘13.0g，加碘化鉀36g與水50ml溶解后，加鹽酸3滴與水適量使成1000ml，搖勻，用垂熔玻璃濾器濾過，保存于棕色具塞瓶中。碘滴定液的標定取在105。C干燥至恒重的基準三氧化二砷約0.15g，精密稱定，加氫氧化鈉滴定液(lmol/L)10ml，微熱使溶解，加水20ml與甲基橙指示液1滴，加硫酸滴定液(0.5mol/L)適量使黃色轉變?yōu)榉奂t色，再加碳酸氫鈉2g、水50ml與淀粉指示液2ml,用本液滴定至溶液顯淺藍紫色。每lml碘滴定液(0.05mol/L)相當于4.946mg的三氧化二砷。根據(jù)本液的消耗量與三氧化二砷的取用量，算出本液的濃度。即得。0.1mol/L的碘滴定液配制和標定按照與0.05mol/L碘滴定液相似的方法進行。實施例1淀粉指示液的配制取可溶性淀粉0.5g。加水5ml攪勻后，緩緩傾入100ml沸水，隨加隨攪拌，繼續(xù)煮沸2分鐘，放冷，傾取上層清液，即得。取化合物l:6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[，2-a][1，2，4]三氮唑內鎗氯化物約0.5g，精密稱定，置錐形瓶中，加新沸過放冷的水20ml使溶解，加2ml淀粉指示液，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺藍色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正，計算樣品含量。結果如表1所示。表6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[1，2-a][1，2，4]三氮唑內鎗氯化物含量測定結果樣品測定值(％)平均值(％)RSD(%)198.2198.2698.3598.270.07298.8898.7698.6998.78().K)398.9298.8599.0398.930.09實施例2氨-氯化銨緩沖液的配制(pH8.0):取氯化銨1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1—30)調節(jié)pH值至8.0，即得。取化合物l:6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[1，2-a][1，2，4]三氮唑內鎿氯化物約0.3g，精密稱定，置錐形瓶中，加氨-氯化銨緩沖液20ml使溶解，加3ml淀粉指示液，搖勻，用碘滴定液(O.lmol/L)滴定至溶液顯淺藍色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正，計算樣品含量。結果如表2所示。表26，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑卩，2-a][1，2，4]三氮唑內鎗氯化物含量測定結果樣品測定值(％)平均值(％)RSD(%)199.0699.1299.1999.120.07299.2399.1799.1199.170.06398.7998.7498.8398.790.05實施例3亞甲藍指示液的配制取亞甲藍0.5g，加水使溶解成100ml。取化合物l:6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[l，2-a][1，2，4]三氮唑內鐺氯化物約0.3g，精密稱定，置錐形瓶中，加新沸過放冷的水30ml使溶解，加3-5滴亞甲藍指示液，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯綠色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正,計算樣品含量。結果如表3所示。表36，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[1，2-a][1,2，4]三氮唑內総氯化物含量測定結果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>實施例4取化合物2:(2S,4S)-4-巰基-卜(對硝基芐氧羰基)-1-吡咯垸-2-(N，N-二甲基)甲酰胺約O.lg，精密稱定，置錐形瓶中，用四氫呋喃10ml使其溶解，再加新沸過放冷的水10ml，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用仝白試驗校正，計算樣品含量。結果如表4所示。表4(2S.4S)-4-巰基-l-(對硝基芐氧羰萄-l-吡咯垸-2-(N，N-二甲基)甲酰胺含量測定結果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>實施例5枸櫞酸鹽緩沖液的配制(pH6.2):取2.1%枸櫞酸水溶液，用50。/。氫氧化鈉溶液調節(jié)pH值至6.2，即得。取化合物2:(2S,4S)-4-巰基-1-(對硝基芐氧羰基)-1-吡咯垸-2-(凡N-二甲基)甲酰胺約0.5g,精密稱定，置錐形瓶中，用乙醇30ml使其溶解，再加枸櫞酸鹽緩沖液20ml，搖勻，用碘滴定液(O.lmol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用^白試驗校正，計算樣品含量。結果如表5所示。表5(2S,4S)-4-巰基-l-(對硝基芐氧羰基)-l-吡咯烷-2-(N，N-二甲基)甲酰胺含量測定結果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>實施例6醋酸-醋酸鹽緩沖液的配制(pH4.6):取醋酸鈉54.6g，加水50ml使溶解，用冰醋酸調節(jié)pH值至4.6，再加水稀釋至100ml，即得。取化合物2:(2S,4S)-4-巰基-l-(對硝基芐氧羰基)-l-吡咯垸-2-(N，N-二甲基)甲酰胺約O.lg，精密稱定，置錐形瓶中，用丙酮10ml使其溶解，再加醋酸-醋酸鹽緩沖液10ml，搖勻，用碘滴定液(O.lmol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正，計算樣品含量。結果如表6所示。表6(2S，4S)-4-巰基-l-(對硝基芐氧羰基)-l-吡咯烷-2-(N，N-二甲基)甲酰胺含量測定結果樣品測定值(％)平均值(％)RSD(%)199.5399.6199.4899.540.07299.1599.2299.2999.220.07399.2799.3599.4299.350.08實施例7取化合物3:(3S)-1-(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯烷約0.1g，精密稱定，覽錐形瓶中，用乙腈10ml使其溶解，再加水10ml，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正，計算樣品含量。結果如表7所示。表7(3S)-1-(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯烷含量測定結果樣品測定值(％)平均值(％)RSD(%)198.3998.3198.4398.380.06298.8398.7798.6898.760.08398.6498.798.5898.640.06實施例8枸櫞酸-磷酸氫二鈉緩沖液的配制(pH4.0):甲液取枸櫞酸21g或無水枸櫞酸19.2g，加水使溶解成1000ml，置冰箱內保存。乙液取磷酸氫二鈉71.63g，加水使溶解成l()O()ml。取上述甲液61.45ml與乙液38.55ml混合，搖勻，即得。取化合物3:(3S)-1-(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯烷約0.3g，精密稱定，置錐形瓶中，用二甲基甲酰胺20ml使其溶解，再加枸櫞酸-磷酸氫二鈉20ml，搖勻，用碘滴定液(O.lmol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正，計算樣品含量。結果如表8所示。表8(3S)-1-(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯烷含量測定結果樣品測定值(％)平均值(％)RSD(%)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實施例9取化合物3:(3S)-1-(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯垸約0.18，精密稱定，置錐形瓶中，用二氧六環(huán)10ml使其溶解，再加水10ml，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正，計算樣品含量。結果如表9所示。表9(3S)-卜(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯烷含量測定結果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實施例0取化合物4:(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-[(3-對硝基節(jié)氧酰基傳氨甲?；鵋-巰基吡咯烷約0.6g，精密稱定，置錐形瓶中，用四氫呋喃30ml使其溶解，再加水30ml，搖勻，用碘滴定液(O.lniol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正，計算樣品含量。結果如表10所示。表10(2S，4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-[(3-對硝基芐氧酰基)苯氨甲?；鵠-4-巰基吡咯烷含量測定結果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實施例11氨-氯化銨緩沖液的配制(pH8.0):取氯化銨1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1—30)調節(jié)pH值至8.0，即得。取化合物4:(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-[(3-對硝基芐氧?；?苯氨甲?；鵠-4-巰基吡咯垸約0.4g，精密稱定，置錐形瓶中，用甲醇30ml使其溶解，再加氨-氯化鈸緩沖液30ml，搖勻，用碘滴定液(0.mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正，計算樣品含量。結果如表ll所示。表11(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-[(3-對硝基芐氧?；?苯氨甲?；鵠-4-巰基吡咯烷<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>取化合物4:(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-[(3-對硝基芐氧?；?苯氨甲?；鵠-4-巰基吡咯烷約0.1g，精密稱定，置錐形瓶中，用乙腈10ml使其溶解，再加枸櫞酸鹽緩沖液10ml，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正，計算樣品含量。結果如表12所示。表12(2S,'1S)-1-對硝基節(jié)氧羰基-2-[(3-對硝基節(jié)氧?；?苯氨甲?；鵠-l-巰基吡咯垸含量測定結果樣<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>實施例13取化合物5:N-f(N-對硝基芐氧羰萄亞胺甲撐基]胺基乙基硫醇約O.lg，精密稱定，置錐形瓶屮，用乙腈10ml使其溶解，再加枸櫞酸鹽緩沖液10ml，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正，計算樣品含量。結果如表3所示。表13N-[(N-對硝基芐氧羰基)亞胺甲撐基]胺基乙基硫醇含量測定結果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>實施例14取化合物5:N-[(N-對硝基芐氧羰基)亞胺甲撐基]胺基乙基硫醇約O.lg，精密稱定，置錐形瓶中，用乙腈10ml使其溶解，再加枸櫞酸鹽緩沖液10ml，搖勻，用碘滴定液(().lmol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空O試驗校正，計算樣品含量。結果如表14所示。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>實施例15磷酸鹽緩沖液的配制(pH7.0):取磷酸氫二鈉0.68g，加0.1mol/L氫氧化鈉29.1ml,用水稀釋至100ml,即得。取化合物5:N-[(N-對硝基芐氧羰基)亞胺甲撐基]胺基乙基硫醇約O.lg，精密稱定，置錐形瓶中，用四氫呋喃10ml使其溶解，再加磷酸鹽緩沖液10ml，搖勻，用碘滴定液(0.1niol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正，計算樣品含量。結果如表15所示。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>實施例16取化合物6:(2S,4S)-l-對硝基芐氧幾基-2-(N-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷約0.1g，精密稱定，置錐形瓶中，用異丙醇10ml使其溶解，再加磷酸鹽緩沖液10ml，搖勻，用碘滴定液ro.lmol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正，計算樣品含量。結果如表16所示。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>實施例17取化合物6:(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-氨磺酰氨萄甲基-4-巰基吡咯烷約O.lg，精密稱定，置錐形瓶中，用乙醇10ml使其溶解，再加水10ml，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正，計算樣品含量。結果如表n所示。表17(2S,4S)-l-對硝基節(jié)氧羰基-2-(N-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷含量測定結果樣品測定值(％)平均值(％)RSD(%)199.3399.5199.499.410.09299.1499.2199.0999.150.06398.2698.3598.4298.340.08實施例18取化合物7:(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-對硝基芐氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷約0.1g，精密稱定，置錐形瓶中，用四氫呋喃10ml使其溶解，再加水10ml，搖勻，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正，計算樣品含量。結果如表18所示。表18(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-對硝基芐氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷含量測定結果樣品測定值(％)平均值(％)RSD(%)199.3799.5199.4299.430.07298.9398.8798.7898.860.08398.7498.6798.5798.660.09實施例19取化合物7:(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-對硝基芐氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷約0.1g，精密稱定，置錐形瓶中，用甲醇10ml使其溶解，再加水10ml，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正，計算樣品含量。結果如表19所示。表19(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-對硝基芐氧撥基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷含量測定結果樣品測定值(％)平均值(％)RSD(%)199.4699.5199.3699.440.08298.6998.7798.5598.670.11398.7398.6598.5898.650.08實施例20取化合物8:(2S,4S)-1-叔丁氧羰基-2-(^叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷約O.lg，精密稱定，置錐形瓶中，用異內醇10ml使其溶解，冉加水10ml，搖勻，用碘滴定液14(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校正，計算樣品含量。結果如表20所示。表20(2S,4S)-l-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯垸含量測定結果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>實施例21取化合物8:(2S,4S)-l-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯垸約O.lg，精密稱定，置錐形瓶中，用異丙醇10ml使其溶解，再加水10ml，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結果用空白試驗校:lH，計算樣品含量。結果如表21所示。表21(2S,4S)-l-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯垸含量測定結果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>權利要求1.一種碳青霉烯類化合物側鏈的含量測定方法，其特征在于包括如下步驟(1)將碳青霉烯類化合物側鏈溶于溶劑中；(2)用碘滴定液滴定；(3)將滴定結果用空白試驗校正；(4)按下式計算側鏈的含量<mathsid="math0001"num="0001"><math><![CDATA[<mrow><mi>X</mi><mo>=</mo><mfrac><mrow><mi>C</mi><mrow><mo>(</mo><mn>1</mn><mo>/</mo><mn>2</mn><msub><mi>I</mi><mn>2</mn></msub><mo>)</mo></mrow><mo>&times;</mo><mrow><mo>(</mo><mi>V</mi><mo>-</mo><msub><mi>V</mi><mn>0</mn></msub><mo>)</mo></mrow><mo>&times;</mo><mi>M</mi></mrow><mi>W</mi></mfrac><mo>&times;</mo><mn>100</mn><mo>%</mo></mrow>]]></math>id="icf0001"file="A2008100532890002C1.tif"wi="62"he="9"top="60"left="90"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/></maths>式中，id="icf0002"file="A2008100532890002C2.tif"wi="15"he="9"top="71"left="40"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>為碘滴定液的摩爾濃度；V為滴定碳青霉烯類化合物側鏈時消耗碘滴定液的體積；V0為滴定空白時消耗的碘滴定液的體積；M為碳青霉烯類化合物側鏈的摩爾分子量；W為樣品稱樣量；X為所測樣品的含量。2.權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述的碳青霉烯類化合物側鏈選自如下化合物:6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[1，2-a][l，2，4]三氮唑內総氯化物；(2S,4S)-4-巰基-l-(對-硝基芐氧羰基)-l-吡咯烷-2-(N，N-二甲基)甲酰胺；(3S)-卜(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯烷;(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-[(3-對硝基芐氧?；?苯氨甲?；鵠-4-巰基吡咯烷；N—[(N-對硝基芐氧羰基)亞胺甲撐基]胺基乙基硫醇；(2S，4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷；(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-對硝基芐氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷；(2S,4S)-l-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷。3.權利要求2所述的測定方法，其特征在于，所述的碳青霉烯類化合物側鏈為6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[1，2-a]卩，2，4]三氮唑內鎿氯化物。4.權利要求1所述的測定方法，其特征在于，歩驟(1)中所述的溶劑選自(a)水，(b)緩沖液，(c)水和有機溶劑的混合溶劑，(d)緩沖液和有機溶劑的混合溶劑。5.權利要求4所述的測定方法，其特征在于，所述的水為新沸過放冷的水；所述的緩沖液pH48;所述的有機溶劑選自甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、四氫呋喃、乙腈、二氧六環(huán)和二甲基甲酰胺。6.權利要求5所述的測定方法，其特征在于，所述的緩沖液選自氨-氯化鉸緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液、枸櫞酸-磷酸氫二鈉、醋酸-醋酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液；所述的有機溶劑為四氫呋喃。7.權利要求l所述的測定方法,其特征在于，所述步驟(2)中，碘滴定液的濃度為0.05-0.1mo/L。8.權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述步驟(2)中，在用碘滴定液滴定前，還包括加入指示劑的步驟。9.權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述步驟(2)中，在用碘滴定液滴定時，還包括接近終點時加入指示劑的步驟。10.權利要求8或9所述的測定方法，其特征在于，所述的指示劑為淀粉或亞甲藍指示液。全文摘要本發(fā)明涉及一種碳青霉烯類化合物側鏈的含量測定方法，包括如下步驟(1)將碳青霉烯類化合物側鏈溶于溶劑中；(2)用碘滴定液滴定；(3)將滴定結果用空白試驗校正；(4)按下式計算側鏈的含量X＝(C(1/2I₂)×(V-V₀)×M)/W×100％。本發(fā)明的測定方法操作簡單、快速，能準確反映側鏈的真實含量，不僅適用于含量測定，還可用于指導反應進程。文檔編號G01N21/77GK101592615SQ200810053289公開日2009年12月2日申請日期2008年5月29日優(yōu)先權日2008年5月29日發(fā)明者劉文崢,王國成,王雅瓊,鄭秋瑩,陳詠梅申請人:天津天士力集團有限公司