專利名稱：磺丁基倍他環(huán)糊精中4-羥基丁烷磺酸鈉的分離與測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種分離與測(cè)定方法，具體涉及一種磺丁基倍他環(huán)糊精中4-羥基丁 烷磺酸鈉的分離與測(cè)定方法。
背景技術(shù)：
磺丁基倍他環(huán)糊精(sulfobutyl ether-β-cyclodextrin, SBE-β-CD)是 20 世紀(jì)90年代由美國(guó)CyDex公司開(kāi)發(fā)的β _環(huán)糊精衍生物，應(yīng)用于增加藥物溶解度和穩(wěn)定 性、提高藥物生物利用度、調(diào)節(jié)藥物釋放速度、防止揮發(fā)性成分逸散、改善不良?xì)馕?、減少刺 激性、降低不良反應(yīng)等方面?；嵌』端h(huán)糊精是β-CD與1，4-丁烷磺酸內(nèi)酯發(fā)生取代反 應(yīng)的產(chǎn)物。常用的SBE-β-⑶是7的SBE7-β-⑶，商品名為Captisol，常用其鈉鹽。4-羥 基丁烷磺酸是1，4- 丁烷磺酸內(nèi)酯水解產(chǎn)生的副產(chǎn)物。
磺丁基倍他環(huán)糊精中4-羥基丁烷磺酸鈉的測(cè)定方法未見(jiàn)國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道。
磺丁基倍他環(huán)糊精是一個(gè)離子型的環(huán)糊精衍生物，磺丁基倍他環(huán)糊精樣品中含有 4-羥基丁烷磺酸鈉、氯離子等雜質(zhì)離子。4-羥基丁烷磺酸鈉在磺丁基倍他環(huán)糊精中的限量 很低，在千分之一以下。因此需要尋找一個(gè)能夠?qū)悠分谢嵌』端h(huán)糊精、4-羥基丁烷 磺酸鈉、氯離子等有效分離，而且有較高的檢測(cè)靈敏度將4-羥基丁烷磺酸鈉檢測(cè)出來(lái)的方 法。
離子色譜法系采用高壓輸液泵系統(tǒng)將規(guī)定的洗脫液泵入裝有填充劑的色譜柱進(jìn) 行分離測(cè)定的色譜分析方法。注入的供試品由洗脫液帶入色譜柱內(nèi)進(jìn)行分離后，經(jīng)過(guò)抑制 器或衍生系統(tǒng)進(jìn)入檢測(cè)器，由積分儀或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄色譜信號(hào)。離子色譜法常用與無(wú) 機(jī)陰離子、無(wú)機(jī)陽(yáng)離子、有機(jī)酸、醇糖類、氨基糖類、氨基酸、蛋白質(zhì)、糖蛋白等物質(zhì)的定性和 定量分析。它的分離機(jī)理主要為離子交換，即基于離子交換樹(shù)脂上可解離的離子與流動(dòng)相 中具有相同電荷的溶質(zhì)離子之間進(jìn)行的可逆交換；離子色譜法其他分離機(jī)理還有形成離子 對(duì)、離子排阻等。
由于磺丁基倍他環(huán)糊精是一個(gè)離子型的環(huán)糊精衍生物，磺丁基倍他環(huán)糊精樣品中 還含有氯離子等其他雜質(zhì)離子。采用合適的洗脫液條件，4-羥基丁烷磺酸鈉、磺丁基倍他環(huán) 糊精、氯離子等在離子色譜能中實(shí)現(xiàn)很好的分離。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種磺丁基倍他環(huán)糊精中4-羥基丁烷磺酸鈉的分離與測(cè)定 方法，該方法采用離子色譜法，以陰離子分析柱為分離手段，以電導(dǎo)檢測(cè)器為檢測(cè)手段，以 此來(lái)解決磺丁基倍他環(huán)糊精中4-羥基丁烷磺酸鈉的限度分離與檢測(cè)問(wèn)題。4-羥基丁烷磺 酸鈉是磺丁基倍他環(huán)糊精合成過(guò)程中產(chǎn)生的重要副產(chǎn)物，對(duì)產(chǎn)品中的4-羥基丁烷磺酸鈉 應(yīng)當(dāng)進(jìn)行合理的質(zhì)量控制和檢驗(yàn)，從而提高產(chǎn)品的質(zhì)量和品質(zhì)。本方法具有樣品用量少、檢 測(cè)靈敏度高、重現(xiàn)性高、結(jié)果可靠的優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明的技術(shù)方案是一種磺丁基倍他環(huán)糊精中4-羥基丁烷磺酸鈉的分離與測(cè) 定方法，其特征在于，步驟如下⑴配制洗脫液；⑵配制磺丁基倍他環(huán)糊精樣品溶液；⑶配制4-羥基丁烷磺酸鈉的對(duì)照品溶液，或4-羥基丁烷磺酸的對(duì)照品溶液；(4)離子色譜采用陰離子色譜柱為分離手段，采用電導(dǎo)檢測(cè)器；樣品分別進(jìn)樣，用步驟 ⑴配制的洗脫液洗脫磺丁基倍他環(huán)糊精樣品或?qū)φ掌啡芤海?5)分別檢測(cè)出4-羥基丁烷磺酸鈉的對(duì)照品溶液或4-羥基丁烷磺酸的對(duì)照品溶液中， 4-羥基丁烷磺酸的峰面積(或者可以認(rèn)為，該峰面積是反映4-羥基丁烷磺酸根的峰面積)；(6)根據(jù)步驟( 的數(shù)據(jù)計(jì)算出磺丁基倍他環(huán)糊精樣品中4-羥基丁烷磺酸鈉的含量。
所述的洗脫液可以是碳酸鈉-碳酸氫鈉系統(tǒng)、氫氧化鈉-碳酸鈉系統(tǒng)或者氫氧化 鉀-碳酸鉀系統(tǒng)；碳酸鈉-碳酸氫鈉洗脫液中碳酸鈉碳酸氫鈉=0 30m mol/L 0 40m mol/L ；氫氧 化鈉-碳酸鈉或氫氧化鉀-碳酸鉀洗脫液中，氫氧化鈉-碳酸鈉，或氫氧化鉀-碳酸鉀=0 15m mol/L :0 15m mol/L。
所述的磺丁基倍他環(huán)糊精樣品溶液和4-羥基丁烷磺酸鈉對(duì)照品溶液的濃度可以 為 10mg/ml 禾口 10μ g/ml。
換言之，本發(fā)明各步驟的具體操作方法是⑴洗脫液的配制碳酸鈉-碳酸氫鈉洗脫液配制稱取碳酸鈉、碳酸氫鈉適量，溶于去 離子水，配制成碳酸鈉碳酸氫鈉=0 30m mol/L 0 40m mol/L的洗脫液；氫氧化鈉-碳酸鈉，或氫氧化鉀-碳酸鉀洗脫液的配制稱取氫氧化鈉、碳酸鈉，或氫氧 化鉀、碳酸鉀適量，溶于去離子水，配制成氫氧化鈉碳酸鈉，或氫氧化鉀碳酸鉀=0 15m mol/L 0 15m mol/L 的洗脫液；⑵樣品溶液的配制稱取磺丁基倍他環(huán)糊精，溶于去離子水，配制成適當(dāng)濃度的樣品 溶液；⑶對(duì)照品溶液的配制稱取4-羥基丁烷磺酸鈉，或4-羥基丁烷磺酸，溶于去離子水， 配制成適當(dāng)濃度的對(duì)照品溶液；(4)離子色譜采用陰離子分析柱為分離手段，采用電導(dǎo)檢測(cè)器，分別將樣品溶液和對(duì)照 品溶液進(jìn)樣；(5)分別檢測(cè)出4-羥基丁烷磺酸鈉的對(duì)照品溶液或4-羥基丁烷磺酸的對(duì)照品溶液中， 4-羥基丁烷磺酸根的峰面積；(6)根據(jù)步驟( 的數(shù)據(jù)計(jì)算出磺丁基倍他環(huán)糊精樣品中4-羥基丁烷磺酸鈉的含量。
采用本發(fā)明的離子色譜系統(tǒng)，樣品與雜質(zhì)直間能夠有效分離，檢測(cè)靈敏度很高， 4-羥基丁烷磺酸鈉的最低檢測(cè)限可達(dá)ng/ml的級(jí)別。由于樣品中4-羥基丁烷磺酸鈉的限 量很低，在千分之一以下，所以對(duì)檢測(cè)器的靈敏度有較高的要求。選用電導(dǎo)檢測(cè)器能夠較好 的達(dá)到檢測(cè)要求。


圖1為實(shí)施例3碳酸鈉-碳酸氫鈉系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線；圖2為實(shí)施例3濃度10. 007mg/ml的樣品溶液進(jìn)樣，色譜圖； 圖3為實(shí)施例3濃度10. 18 μ g/ml對(duì)照品色譜圖； 圖4為實(shí)施例4氫氧化鈉系統(tǒng)洗脫液的標(biāo)準(zhǔn)曲線； 圖5為實(shí)施例4濃度5. 011mg/ml的樣品溶液進(jìn)樣，色譜圖； 圖6為實(shí)施例4濃度5. 062 μ g/ml對(duì)照品色譜圖。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)論述。
實(shí)施例1，碳酸鈉-碳酸氫鈉洗脫液的配制，稱取碳酸鈉0. 214g，碳酸氫鈉1. 026g，加去離子水2000ml溶解，得濃度為Im mol/L碳 酸鈉+6m mol/L碳酸氫鈉，總濃度為7m mol/L的洗脫液。
實(shí)施例2，氫氧化鈉洗脫液的配制，稱取氫氧化鈉0. 443g，加去離子水2000ml溶解，得濃度為5. 5m mol/L的洗脫液。
實(shí)施例3，碳酸鈉-碳酸氫鈉系統(tǒng)4-羥基丁烷磺酸鈉的檢測(cè)， 離子色譜儀DI0NEX ICS-90型離子色譜儀(美國(guó)戴安公司)， IonPac AG23 (4X50謹(jǐn))陰離子保護(hù)柱，ASRS300 (4 mm)陰離子抑制器，色譜柱=Iorfac AS23陰離子分析柱0X250 mm )，電導(dǎo)檢測(cè)器。
1)4-羥基丁烷磺酸鈉對(duì)照品溶液的配制精密稱取101.81mg的4-羥基丁烷磺酸鈉至100ml量瓶，定容得0. 1018mg/ml的4-羥 基丁烷磺酸鈉，分別精密移取0. Iml,0. 3ml,0. 5ml,0. 7ml,0. 9ml至50ml容量瓶中，用去離 子水定容，得到濃度分別為2. 036，6. 108,10. 18，14. 25，18. 32 μ g/ml的4-羥基丁烷磺酸 鈉。
2)磺丁基倍他環(huán)糊精樣品溶液的配制精密稱取樣品500. 36mg，去離子水溶解定容至50ml，得濃度為10. 007mg/ml溶液。
3)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制將濃度分別為2. 036，6. 108，10. 18，14. 25，18. 32 μ g/ml的4-羥基丁烷磺酸鈉進(jìn)樣，洗 脫液為實(shí)施例1中的碳酸鈉-碳酸氫鈉系統(tǒng)溶液，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果線性良好，標(biāo)準(zhǔn)曲線 如圖1。
4)樣品的檢測(cè)將濃度為10. 007mg/ml的樣品溶液進(jìn)樣，色譜圖為圖2，濃度為10. 18 μ g/ml對(duì)照品色 譜圖為圖3。
實(shí)施例4，氫氧化鈉系統(tǒng)4-羥基丁烷磺酸鈉的檢測(cè)， 離子色譜儀DI0NEX ICS2000型離子色譜儀(美國(guó)戴安公司)， IonPac AG19 (4X50謹(jǐn))陰離子保護(hù)柱，ASRS300 (4 mm)陰離子抑制器，色譜柱=Iorfac AS19陰離子分析柱0X250 mm )。
電導(dǎo)檢測(cè)器。
1)4-羥基丁烷磺酸鈉對(duì)照品溶液的配制精密稱取50. 62 mg 4-羥基丁烷磺酸鈉至IOOml量瓶，定容得506. 2 μ g/ml 4-羥基 丁烷磺酸鈉，分別精密移取0. 25ml，0. 5ml，Iml，2ml，3ml至IOOml容量瓶中，用去離子水定 容，得到濃度分別為1.266,2. 531，5. 062，10. 12，15. 19 μ g/ml的4-羥基丁烷磺酸鈉。
2)磺丁基倍他環(huán)糊精樣品溶液的配制精密稱取樣品501. lang，去離子水溶解定容至100ml，得濃度為5. 011mg/ml溶液。
3)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制將濃度分別為2. 036，6. 108，10. 18，14. 25，18. 32 μ g/ml的4-羥基丁烷磺酸鈉進(jìn)樣，洗 脫液為實(shí)施例2中的氫氧化鈉系統(tǒng)溶液，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果線性良好，標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖4。
4)樣品的檢測(cè)將濃度為5. Ollmg/ml的樣品溶液進(jìn)樣，色譜圖為圖5，濃度為5. 062 μ g/ml對(duì)照品色譜 圖為圖6。
以上對(duì)本發(fā)明較佳實(shí)施方式的描述并不限制本發(fā)明，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)本 發(fā)明作出各種改變或變形，只要不脫離本發(fā)明的精神，均應(yīng)屬于本發(fā)明所附權(quán)利要求的范圍。
權(quán)利要求
1.一種磺丁基倍他環(huán)糊精中4-羥基丁烷磺酸鈉的分離與測(cè)定方法，其特征在于，分離 與測(cè)定步驟為⑴配制洗脫液；⑵配制磺丁基倍他環(huán)糊精樣品溶液；⑶配制4-羥基丁烷磺酸鈉的對(duì)照品溶液，或4-羥基丁烷磺酸的對(duì)照品溶液；(4)離子色譜采用陰離子色譜柱為分離手段，采用電導(dǎo)檢測(cè)器；樣品分別進(jìn)樣，用步驟 ⑴配制的洗脫液洗脫磺丁基倍他環(huán)糊精樣品或?qū)φ掌啡芤海?5)分別檢測(cè)出4-羥基丁烷磺酸鈉的對(duì)照品溶液或4-羥基丁烷磺酸的對(duì)照品溶液中， 4-羥基丁烷磺酸根的峰面積；(6)根據(jù)步驟( 的數(shù)據(jù)計(jì)算出磺丁基倍他環(huán)糊精樣品中4-羥基丁烷磺酸鈉的含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磺丁基倍他環(huán)糊精中4-羥基丁烷磺酸鈉的分離與測(cè)定方法， 其特征在于，各步驟的具體操作方法是⑴洗脫液的配制碳酸鈉-碳酸氫鈉洗脫液配制稱取碳酸鈉、碳酸氫鈉適量，溶于去 離子水，配制成碳酸鈉碳酸氫鈉=0 30m mol/L 0 40m mol/L的洗脫液；氫氧化鈉-碳酸鈉，或氫氧化鉀-碳酸鉀洗脫液的配制稱取氫氧化鈉、碳酸鈉，或氫氧 化鉀、碳酸鉀適量，溶于去離子水，配制成氫氧化鈉碳酸鈉，或氫氧化鉀碳酸鉀=0 15m mol/L 0 15m mol/L 的洗脫液；⑵樣品溶液的配制稱取磺丁基倍他環(huán)糊精，溶于去離子水，配制成適當(dāng)濃度的樣品 溶液；⑶對(duì)照品溶液的配制稱取4-羥基丁烷磺酸鈉，或4-羥基丁烷磺酸，溶于去離子水， 配制成適當(dāng)濃度的對(duì)照品溶液；(4)離子色譜采用陰離子分析柱為分離手段，采用電導(dǎo)檢測(cè)器，分別將樣品溶液和對(duì)照 品溶液進(jìn)樣；(5)分別檢測(cè)出4-羥基丁烷磺酸鈉的對(duì)照品溶液或4-羥基丁烷磺酸的對(duì)照品溶液中， 4-羥基丁烷磺酸根的峰面積；(6)根據(jù)步驟( 的數(shù)據(jù)計(jì)算出磺丁基倍他環(huán)糊精樣品中4-羥基丁烷磺酸鈉的含量。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的磺丁基倍他環(huán)糊精中4-羥基丁烷磺酸鈉的分離與測(cè)定方法， 其特征在于，所述的碳酸鈉-碳酸氫鈉洗脫液，碳酸鈉碳酸氫鈉=0 IOm mol/L 0 15m mol/L0
4.根據(jù)權(quán)利要求3根據(jù)權(quán)利要求2所述的磺丁基倍他環(huán)糊精中4-羥基丁烷磺酸鈉的 分離與測(cè)定方法，其特征在于，所述的氫氧化鈉-碳酸鈉，或氫氧化鉀-碳酸鉀洗脫液，氫氧 化鈉碳酸鈉，或氫氧化鉀碳酸鉀=3 10m mol/L 0 10m mol/L。
全文摘要
磺丁基倍他環(huán)糊精中4-羥基丁烷磺酸鈉的分離與測(cè)定方法采用離子色譜法，以陰離子分析柱為分離手段，采用電導(dǎo)檢測(cè)器，洗脫液為碳酸鈉-碳酸氫鈉系統(tǒng)或者碳酸鈉(鉀)-氫氧化鈉(鉀)系統(tǒng)，以此來(lái)解決磺丁基倍他環(huán)糊精中4-羥基丁烷磺酸(鈉)的限度檢測(cè)問(wèn)題。步驟⑴配制適當(dāng)濃度的洗脫液，洗脫液是碳酸鈉-碳酸氫鈉系統(tǒng)或者碳酸鈉(鉀)-氫氧化鈉(鉀)系統(tǒng);⑵配制適當(dāng)濃度的磺丁基倍他環(huán)糊精樣品溶液和4-羥基丁烷磺酸(鈉)對(duì)照品溶液;⑶離子色譜采用陰離子色譜柱、電導(dǎo)檢測(cè)器，樣品溶液和對(duì)照品溶液分別進(jìn)樣檢測(cè)，樣品溶液中4-羥基丁烷磺酸(鈉)的峰面積低于對(duì)照品峰面積為樣品合格。本檢測(cè)方法靈敏，樣品用量少、重現(xiàn)性高、結(jié)果可靠，可對(duì)磺丁基倍他環(huán)糊精進(jìn)行質(zhì)量控制和檢驗(yàn)，從而提高產(chǎn)品的品質(zhì)。
文檔編號(hào)G01N30/14GK102033115SQ20101053578
公開(kāi)日2011年4月27日 申請(qǐng)日期2010年11月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月9日
發(fā)明者孫文芳, 孫曉東, 李莉, 王猛, 童文正 申請(qǐng)人:海南和德通醫(yī)藥科技有限公司