專利名稱：一種干性食品包裝紙中2,4-二硝基苯酚的測定方法
技術領域：
本發(fā)明屬于包裝材料理化指標檢測技術領域，具體涉及一種干性食品包裝紙(主要包含速食包裝紙、糖果用紙、面食用紙等)中2，4- 二硝基苯酚的測定方法。
背景技術：
2，4-二硝基苯酚(2，4 一 dinitrophenol，簡稱DNP)，微溶于水，溶于乙醇、乙醚、苯和氯仿等有機溶劑。2，4- 二硝基苯酚屬于原漿毒，毒性很大，人經口最低致死量LDLo為36mg/kg，大鼠經口半數致死量(LD50)為30mg/kg，其中毒機制主要是直接作用于能量代謝，刺激氧化過程，抑制磷酸化過程。主要用于染料、顯影劑、藥物、指示劑、殺蟲劑及木材防
腐等工業(yè)。干性食品包裝紙是食品包裝中不可或缺的重要組成部分，其安全性是食品總體安全性非常重要的一個方面，而食品包裝材料安全性控制的源頭，根本是生產原料。鑒于2，4-二硝基苯酚極有可能會作為生產原料，在紙張的生產過程中用到。因此探索一種快速、準確的2，4-二硝基苯酚檢測方法，對干性食品包裝紙中的2，4-二硝基苯酚進行有效控制，保障干性食品包裝紙的使用安全性，是非常迫切和必要的。目前，對痕量2，4-二硝基苯酚的檢測方法有多種，分別有液相色譜法、分光光度法、氣相色譜法、全光譜技術分析、氣相色譜/質譜聯用法、微分脈沖伏安法、電化學檢測法等。其中，液相色譜法靈敏度高、重復性好，易于推廣應用；顯色樹脂分光光度法是創(chuàng)新的方法，但前處理復雜，不便于自動化操作；全光譜技術適合于樣品中含多種結構類似物的辨別分析，缺點是儀器較貴，難以推 廣應用；鑒于2，4- 二硝基苯酚的極性較強，在GC的分析過程中會造成峰形狀嚴重拖尾，并使柱效嚴重降低，因此，2，4- 二硝基苯酚并不適合于直接使用氣相色譜法或氣相色譜/質譜聯用法進行分析；微分脈沖伏安法、電化學檢測法選擇性高、靈敏度好，但不易于推廣應用。綜上所述，液相色譜法是測定2，4- 二硝基苯酚含量的重要手段之一。但現有的文獻報道大多集中于廢水、環(huán)境樣品等方面的報道，并沒有對紙張中殘留的2，4-二硝基苯酚進行研究。

發(fā)明內容
發(fā)明目的:針對現有技術中存在的不足，本發(fā)明的目的是提供一種干性食品包裝紙中2，4-二硝基苯酚的測定方法，該方法采用液相色譜法(使用二極管陣列檢測器)測定干性食品包裝紙中2，4-二硝基苯酚，能快速、準確檢測干性食品包裝紙中2，4-二硝基苯酚的含量，具有結果準確、干擾少等特點。技術方案:為了實現上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術方案如下:
一種干性食品包裝紙中2，4- 二硝基苯酚的測定方法，包括以下步驟:
(I)標準工作溶液的制備:以2，4-二硝基苯酚為標準品，用甲醇作溶劑，經逐級稀釋配置成標準工作溶液；(2)樣品溶液的制備:稱取干性食品包裝紙樣品，粉碎，用溶劑振蕩提取，將萃取液過有機濾膜，得樣品溶液；
(3)高效液相色譜分析:用帶有二極管陣列檢測器高效液相色譜儀(HPLC)對標準工作溶液和樣品溶液進行檢測分析；
(4)標準曲線繪制及結果計算。步驟(I)中，具體包括以下步驟:
(1)標準儲備液:準確稱取0.1 0.3g標準物2，4- 二硝基苯酚，用乙醇分散、溶解，再用甲醇作溶劑定容至IOOmL的容量瓶中，得到濃度為1000 3000mg/L的標準儲備液；
(2)標準工作溶液:分別準確移取5μ 、25μ 、100μ 、250μ 、500μ 和ΙΟΟΟμ 標準儲備液，用甲醇作溶劑定容至IOOmL的容量瓶中。步驟(2)中,樣品溶液的制備具體包括以下步驟:稱取0.5g試樣(精確至0.1mg),將其剪成5mmX 5mm以下的碎片，置于50mL具塞三角瓶中，準確移取IOmL萃取溶劑甲醇，在轉速為120轉/分鐘的條件下振蕩萃取20min，取適量萃取液于離心試管中離心5min，取上層清液，經0.45 μ m有機系濾膜過濾后，得樣品溶液。步驟(3)中，色譜分析條件為:色譜柱為C18色譜柱，規(guī)格為150 mm (長度)X4.6mm (內徑)X5.0 Mm (填料粒度)；柱溫為30°C ;流速為1.0 mL/min ;進樣量為10 μ L ;流動相A為甲醇，流動相B為 1%的醋酸溶液，采用等度洗脫(其中體積比V/V為35%/65% 65%/35%) ；DAD檢測器的檢測波長為258nm ;分析時間約為10 min。步驟(4)中，所述的標準曲線繪制及結果計算如下:以工作溶液中2，4-二硝基苯酚的濃度為橫坐標，以色譜圖中2，4-二硝基苯酚的峰面積為縱坐標，進行回歸分析，得到標準曲線；將相同條件下測得的樣品溶液中2，4-二硝基苯酚的色譜峰面積，代入工作曲線，求得樣品中2，4-二硝基苯酚的含量。有益效果:與現有技術相比，本發(fā)明的干性食品包裝紙中2，4- 二硝基苯酚的測定方法，從干性食品包裝紙中萃取得到2，4- 二硝基苯酚，利用DAD檢測器對其進行定性確認及定量檢測，具有快速、準確、靈敏度高等特點，特別適合于測定干性食品包裝紙中2，4-二硝基苯酚的含量。


圖1是標準工作溶液的色譜 圖2是加標樣品的色譜 圖3是2，4- 二硝基苯酚的光譜圖。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發(fā)明作更進一步的說明。實施例1
一種干性食品包裝紙中2，4-二硝基苯酚的測定方法，具體過程如下:
(I)標準工作溶液的制備
稱取0.2g標準物2，4- 二硝基苯酚，先用10 mL乙醇分散、溶解，再用甲醇作溶劑定容至IOOmL的容量瓶中，得到濃度為2000mg/L的標準儲備液。再分別準確移取5μ 、25μ 、100μ 、250μ 、500μ 和ΙΟΟΟμ 標準儲備液，用甲醇溶劑定容至IOOmL的容量瓶中。該系列標準工作溶液濃度分別為0.1mg/L、0.5mg/L、2.0mg/L、5.0mg/L、10mg/L和20mg/L。標準工作溶液需現用現配。(2)樣品溶液的制備
稱取0.5g紙張樣品(精確至0.1 mg),將其剪成5mmX5mm以下的碎片，置于50mL具塞三角瓶中，準確移取IOmL萃取溶劑甲醇，在轉速為120轉/分鐘的條件下振蕩萃取20min，取適量萃取液于離心試管中離心5min，取上層清液，經0.45 μ m有機系濾膜過濾后，得樣品溶液。(3)高效液相色譜分析
取樣品溶液、加標樣品溶液、6個不同濃度的工作標準溶液分別進行液相色譜分析，其色譜分析條件為:色譜柱為C18色譜柱,規(guī)格為150mm (長度)X 4.6mm (內徑)X 5.0Mm (填料粒度);柱溫為30°C;流速為1.0mL/min ;進樣量為10 μ L ;流動相A為甲醇，流動相B為1%的醋酸溶液，采用等度洗脫(其中體積比V/V為45%/55%);DAD檢測器的檢測波長為258nm ；分析時間約為10 min。標準工作溶液的色譜圖如圖1所示，加標樣品的色譜圖如圖2所示。(4)標準曲線繪制及結果計算
首先以標準工作溶液中2，4- 二硝基苯酚的濃度為橫坐標，以色譜圖中2，4- 二硝基苯酚的峰面積為縱坐標，進行回歸分析，得到標準曲線，取最低濃度的標準工作溶液，做10次平行檢測分析，計算其標準偏差，以3倍的標準偏差對應的濃度為檢出限。與標準工作曲線相對應的回歸方程、相關系數等數據結果如下:
2，4- 二硝基苯酚的回歸方程:Y=34.20Χ+1.223，相關系數為0.99994，線性范圍0.1 20 mg/L,檢測限 0.438 mg/kg。然后將相同條件下測得的樣品溶液中2，4-二硝基苯酚的色譜峰面積，代入工作曲線，求得樣品中2，4-二硝基苯酚的含量，計算公式如下:
權利要求
1.一種干性食品包裝紙中2，4- 二硝基苯酚的測定方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)以2，4-二硝基苯酚為標準品，用甲醇作溶劑，經逐級稀釋配置成標準工作溶液； (2)稱取干性食品包裝紙樣品，粉碎，用溶劑振蕩提取，將萃取液過有機濾膜，得樣品溶液； (3)用帶有二極管陣列檢測器高效液相色譜儀對標準工作溶液和樣品溶液進行檢測分析； (4)標準曲線繪制及結果計算。
2.根據權利要求1所述的干性食品包裝紙中2，4-二硝基苯酚的測定方法，其特征在于，步驟(I)中，具體操作如下: (1)標準儲備液:準確稱取0.1 0.3g標準物2，4- 二硝基苯酚，用乙醇分散、溶解，再用甲醇作溶劑定容至IOOmL的容量瓶中，得到濃度為1000 3000mg/L的標準儲備液； (2)標準工作溶液:分別準確移取5μ 、25μ 、100μ 、250μ 、500μ 和ΙΟΟΟμ 標準儲備液，用甲醇作溶劑定容至IOOmL的容量瓶中。
3.根據權利要求1所述的干性食品包裝紙中2，4-二硝基苯酚的測定方法，其特征在于，步驟(2)中，具體操作如下:稱取0.5g試樣，將其剪成5mmX5mm以下的碎片，置于50mL具塞三角瓶中，準確移取IOmL萃取溶劑甲醇，在轉速為120轉/分鐘的條件下振蕩萃取20min,取萃取液于離心試管中離心5min,取上層清液,經0.45 μ m有機系濾膜過濾后,得樣品溶液。
4.根據權利要求1所述的干性食品包裝紙中2，4-二硝基苯酚的測定方法，其特征在于，步驟(3)中，色譜分析條件為:色譜柱為C18色譜柱，規(guī)格為150mmX4.6mmX5.0Mm ;柱溫為30°C ;流速為1.0mL/min ;進樣量為10 μ L ;流動相A為甲醇，流動相B為1%的醋酸溶液，A與B的體積比為35%/65% 65%/35%，采用等度洗脫；DAD檢測器的檢測波長為258nm。
5.根據權利要求1所述的干性食品包裝紙中2，4-二硝基苯酚的測定方法，其特征在于，步驟(4)中，所述的標準曲線繪制及結果計算如下:以工作溶液中2，4-二硝基苯酚的濃度為橫坐標，以色譜圖中2，4-二硝基苯酚的峰面積為縱坐標，進行回歸分析，得到標準曲線；將相同條件下測得的樣品溶液中2，4-二硝基苯酚的色譜峰面積，代入工作曲線，求得樣品中2，4- 二硝基苯酚的含量。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種干性食品包裝紙中2,4-二硝基苯酚的測定方法，包括標準工作溶液的制備、樣品溶液的制備、高效液相色譜分析和標準曲線繪制及結果計算。該干性食品包裝紙中2,4-二硝基苯酚的測定方法，從干性食品包裝紙中萃取得到2,4-二硝基苯酚，利用DAD檢測器對其進行定性確認及定量檢測，操作簡單準確，所采用的色譜條件使得目標物與樣品基質帶來的其它雜質色譜峰能很好地分離，并且具有較好的線性相關性，檢出限為0.44mg/kg，平均相對標準偏差為1.6%，加標回收率在93.20%～116.62%之間，具有快速、準確、靈敏度、重復性好，回收率高高等特點，特別適合于測定干性食品包裝紙中2,4-二硝基苯酚的含量。
文檔編號G01N30/02GK103235052SQ20131013172
公開日2013年8月7日 申請日期2013年4月17日 優(yōu)先權日2013年4月17日
發(fā)明者廖惠云, 朱龍杰, 莊亞東, 張映, 熊曉敏, 曹毅, 韓開冬, 張媛 申請人:江蘇中煙工業(yè)有限責任公司