一種測(cè)定混合藥物中的藥物成分的含量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種測(cè)定混合藥物中的藥物成分的含量的方法，屬于太赫茲時(shí)域光譜 檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 聯(lián)合用藥是指為了達(dá)到治療目的而將兩種或兩種以上藥物同時(shí)或先后應(yīng)用的方 法。它目前已廣泛應(yīng)用于臨床治療中。聯(lián)合用藥在提高治愈效果的同時(shí)，可以避免單獨(dú)使 用時(shí)因某一藥物產(chǎn)生耐藥性。而使用聯(lián)合藥物時(shí)，根據(jù)患者不同病情，可選用不同含量比的 聯(lián)合藥物。
[0003] 以下以吡嗪酰胺和異煙肼為例進(jìn)行說(shuō)明。吡嗪酰胺和異煙肼作為臨床上得到廣泛 應(yīng)用的口服類(lèi)抗結(jié)核病一線藥物，這兩者既可以單獨(dú)使用，也可以聯(lián)合用藥。而近年來(lái)，假 冒偽劣藥物層出不窮，不良事件接連不斷，嚴(yán)重危害人民健康。且吡嗪酰胺由于毒性反應(yīng) 大，對(duì)肝臟損害較嚴(yán)重。因此，在保證吡嗪酰胺質(zhì)量安全的情況下，應(yīng)嚴(yán)格控制吡嗪酰胺用 量。因此，嚴(yán)格控制抗結(jié)核藥物的用藥安全，保證抗結(jié)核藥物的質(zhì)量具有十分重要的意義。 國(guó)家藥典（標(biāo)準(zhǔn)）中吡嗪酰胺的定量檢測(cè)方法是紫外可見(jiàn)分光光度法?，F(xiàn)有針對(duì)吡嗪酰 胺含量的檢測(cè)主要有高效液相色譜法、濁點(diǎn)萃取-反相高效液相色譜法等液相色譜法以及 表面增強(qiáng)拉曼光譜、近紅外光譜法。色譜方法普遍存在樣品制備、衍生物分析、專(zhuān)業(yè)技術(shù)要 求高、儀器昂貴的缺點(diǎn)，但表面增強(qiáng)拉曼光譜需要增強(qiáng)基底物質(zhì)，該基底可能與吡嗪酰胺相 互反應(yīng)，而近紅外波段的吡嗪酰胺振動(dòng)吸收較弱，檢出極限較低。因此需要探索一種具有無(wú) 損、快速光譜檢測(cè)方法檢測(cè)混合樣品中吡嗪酰胺的含量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有檢測(cè)方法的不足，提供一種測(cè)定混合藥物中的藥物成分 的含量的方法，以無(wú)損、快速地檢測(cè)混合藥物中的藥物成分的含量。
[0005] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案如下：
[0006] 在本發(fā)明測(cè)定混合藥物中藥物成分的含量的方法中，所述混合藥物由第一藥物與 第二藥物混合組成，包括如下步驟：
[0007] (1)配制由第一藥物、第二藥物組成的一組標(biāo)準(zhǔn)樣品，各標(biāo)準(zhǔn)樣品中的第一藥物的 質(zhì)量百分含量互不相同；其中，所述第一藥物的質(zhì)量百分含量為0~100%，所述第二藥物 的質(zhì)量百分含量為0~100% ;
[0008] (2)采集各標(biāo)準(zhǔn)樣品及相應(yīng)的空氣的太赫茲時(shí)域光譜并分別轉(zhuǎn)換為太赫茲頻域 譜，然后根據(jù)菲涅爾公式分別獲得各標(biāo)準(zhǔn)樣品在太赫茲波段的吸收系數(shù)和折射率，并將各 標(biāo)準(zhǔn)樣品所對(duì)應(yīng)的空氣的太赫茲頻域譜分別轉(zhuǎn)化為在太赫茲波段的吸收系數(shù)；
[0009] (3)確定各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品的太赫茲波段置信區(qū)間，其中，各標(biāo)準(zhǔn)樣品的太赫茲波段置 信區(qū)間的上限為該標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸收系數(shù)與對(duì)應(yīng)的空氣的吸收系數(shù)相等時(shí)所在的太赫茲頻 率；將所有標(biāo)準(zhǔn)樣品的太赫茲波段置信區(qū)間中上限的最小值作為測(cè)試模型的太赫茲波段置 信區(qū)間的上限值，將所有標(biāo)準(zhǔn)樣品的太赫茲波段置信區(qū)間中下限的最大值作為測(cè)試模型的 太赫茲波段置信區(qū)間的下限值；
[0010] (4)選取各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品在測(cè)試模型的太赫茲波段置信區(qū)間內(nèi)的一組光學(xué)參數(shù)作為 有效光學(xué)參數(shù)并構(gòu)成相應(yīng)的有效光學(xué)參數(shù)矩陣；所述光學(xué)參數(shù)為吸收系數(shù)或折射率；
[0011] (5)利用各標(biāo)準(zhǔn)樣品中的第一藥物的質(zhì)量百分含量和各標(biāo)準(zhǔn)樣品的有效光學(xué)參數(shù) 矩陣，建立標(biāo)準(zhǔn)樣品的第一藥物的質(zhì)量百分含量與有效光學(xué)參數(shù)之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系的測(cè)試模 型；
[0012] (6)采集待測(cè)混合藥物樣品及相應(yīng)的空氣的太赫茲時(shí)域光譜并分別轉(zhuǎn)換為太赫茲 頻域譜，然后根據(jù)菲涅爾公式獲得待測(cè)混合藥物樣品在太赫茲波段的光學(xué)參數(shù)；選取待測(cè) 混合藥物樣品在測(cè)試模型的太赫茲波段置信區(qū)間內(nèi)的一組光學(xué)參數(shù)而形成有效光學(xué)參數(shù) 矩陣；將待測(cè)混合藥物樣品的有效光學(xué)參數(shù)矩陣輸入到所述測(cè)試模型中而得到所述待測(cè)混 合藥物樣品中的第一藥物的含量。
[0013] 需要說(shuō)明的是，如果步驟（4)中的光學(xué)參數(shù)為吸收系數(shù)，那么，在步驟（5)中建立 的測(cè)試模型則是標(biāo)準(zhǔn)樣品中第一藥物的含量與標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸收系數(shù)之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系的測(cè) 試模型，并且，在步驟(6)中所獲取的待測(cè)混合藥物樣品的有效光學(xué)參數(shù)矩陣亦是指吸收 系數(shù)矩陣。如果步驟（4)中的光學(xué)參數(shù)為折射率，那么，在步驟（5)中建立的測(cè)試模型則是 標(biāo)準(zhǔn)樣品中第一藥物的含量與標(biāo)準(zhǔn)樣品的折射率之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系的測(cè)試模型，并且，在步 驟（6)中所獲取的待測(cè)混合藥物樣品的有效光學(xué)參數(shù)矩陣亦是指吸折射率矩陣。
[0014] 進(jìn)一步地，本發(fā)明所述第一藥物為吡嗪酰胺，第二藥物為異煙肼。
[0015] 進(jìn)一步地，本發(fā)明所述太赫茲時(shí)域光譜采用透射方法采集。
[0016] 進(jìn)一步地，本發(fā)明采集標(biāo)準(zhǔn)樣品和/或待測(cè)混合藥物樣品的太赫茲時(shí)域光譜時(shí)， 光譜掃描范圍為0. 10~3. OOTHz，優(yōu)選0. 20~3. OOTHz。
[0017] 進(jìn)一步地，本發(fā)明將標(biāo)準(zhǔn)樣品在其太赫茲波段置信區(qū)間的下限值所在的頻率進(jìn)行 太赫茲時(shí)域光譜掃描時(shí)不存在FP干涉效應(yīng)（法布里-珀羅干涉效應(yīng)（Fabry - P6rot))。
[0018] 進(jìn)一步地，本發(fā)明所述各標(biāo)準(zhǔn)樣品的太赫茲波段置信區(qū)間的下限值為0. 20THz。
[0019] 進(jìn)一步地，本發(fā)明采集得到的各所述標(biāo)準(zhǔn)樣品的太赫茲時(shí)域光譜是對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn) 行多次掃描測(cè)量而得到的太赫茲時(shí)域信號(hào)的算術(shù)平均值，采集得到的空氣的太赫茲時(shí)域光 譜是對(duì)空氣進(jìn)行多次掃描測(cè)量而得到的太赫茲時(shí)域信號(hào)的算術(shù)平均值，采集得到的所述待 測(cè)混合藥物樣品的太赫茲時(shí)域光譜為是對(duì)待測(cè)混合藥物樣品進(jìn)行多次掃描測(cè)量而得到的 太赫茲時(shí)域信號(hào)的算術(shù)平均值。
[0020] 進(jìn)一步地，本發(fā)明所述質(zhì)量百分含量替換為摩爾百分含量。
[0021] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明方法使用太赫茲時(shí)域光譜技術(shù)能夠快速、無(wú)損、簡(jiǎn)單、準(zhǔn) 確的檢測(cè)混合藥物中吡嗪酰胺的含量。具體如下：
[0022] (1)指紋峰：太赫茲（THz)波段的頻率位于0· 1~IOTHz (ITHz = IO12Hz)，其光子 能量與大部分有機(jī)分子及分子團(tuán)的振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)之間躍迀的能量大致相當(dāng)，因此，物質(zhì) 的THz譜包含了豐富的物理和化學(xué)信息，例如實(shí)施例1和實(shí)施例2中的吡嗪酰胺和異煙肼 在太赫茲波段有明顯不同的指紋峰，且指紋峰都位于太赫茲波段置信區(qū)間內(nèi)，因此在太赫 茲波段中可以明顯區(qū)分兩者。
[0023] (2)折射率：太赫茲時(shí)域光譜檢測(cè)技術(shù)不僅能夠得到被檢測(cè)對(duì)象的吸收系數(shù)，還 同時(shí)能夠獲得被檢測(cè)對(duì)象的折射率，為定量分析提供更多的數(shù)據(jù)及準(zhǔn)確性。
[0024] (3)無(wú)損：THz波的光子能量很小（只有毫電子伏特量級(jí)），可以避免測(cè)試過(guò)程中 對(duì)樣品造成有害電離，對(duì)物質(zhì)進(jìn)行無(wú)損檢測(cè)。
[0025] (4)快速：太赫茲時(shí)域光譜檢測(cè)技術(shù)是光譜檢測(cè)的一種，具有光譜檢測(cè)快速的優(yōu) 點(diǎn)。
[0026] (5)多成分同時(shí)測(cè)量：吡嗪酰胺與異煙肼在太赫茲波段的吸收系數(shù)和折射率都差 異明顯，可以利用折射率或吸收系數(shù)測(cè)量混合樣品中的吡嗪酰胺的含量。
【附圖說(shuō)明】
[0027] 圖1是實(shí)施例1和實(shí)施例2中，吡嗪酰胺的質(zhì)量百分含量為50. 11%的標(biāo)準(zhǔn)樣品的 太赫茲波段置信區(qū)間的選?。?br>[0028] 圖2是實(shí)施例1和實(shí)施例2中，吡嗪酰胺的質(zhì)量百分含量為100%的標(biāo)準(zhǔn)樣品的太 赫茲波段置信區(qū)間的選?。?br>[0029] 圖3是實(shí)施例1和實(shí)施例2中，啦嗪酰胺的質(zhì)量百分含量為0%的標(biāo)準(zhǔn)樣品的太赫 茲波段置信區(qū)間的選??；
[0030] 圖4是實(shí)施例1和實(shí)施例2中，吡嗪酰胺的質(zhì)量百分含量為50. 11%的標(biāo)準(zhǔn)樣品在 測(cè)試模型的太赫茲波段置信區(qū)間的太赫茲波段吸收譜和折射率譜；
[0031] 圖5是實(shí)施例1和實(shí)施例2中，吡嗪酰胺的質(zhì)量百分含量為100%的標(biāo)準(zhǔn)樣品在測(cè) 試模型的太赫茲波段置信區(qū)間的太赫茲波段吸收譜和折射率譜；
[0032] 圖6是實(shí)施例1和實(shí)施例2中，吡嗪酰胺的質(zhì)量百分含量為0%的標(biāo)準(zhǔn)樣品在測(cè)試 模型的太赫茲波段置信區(qū)間的太赫茲波段吸收譜和折射率譜；
[0033] 圖7是實(shí)施例1中，利用THz-TDS系統(tǒng)透射測(cè)得作為校正集的11個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品在測(cè) 試模型的太赫茲波段置信區(qū)間的不同太赫茲波段的吸收譜；其中，圖7(1)的太赫茲波段為 0· 20-0. 90THz，圖 7 (2)的太赫茲波段為 0· 90-1. 40THz ;
[0034] 圖8是實(shí)施例1中，利用THz-TDS系統(tǒng)透射測(cè)得的作為驗(yàn)證集的5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品在 測(cè)試模型的太赫茲波段置信區(qū)間的不同太赫茲波段的吸收譜；其中圖8(1)的太赫茲波段 為 0. 20-0. 90THz，圖 8 (2)的太赫茲波段為 0. 90-1. 40THz ;
[0035] 圖9是實(shí)施例1中，以吸收系數(shù)為光學(xué)參數(shù)的測(cè)試模型檢測(cè)得到的標(biāo)準(zhǔn)樣品中的 吡嗪酰胺的質(zhì)量百分含量的測(cè)試值與實(shí)際值的對(duì)比圖；
[0036] 圖10是實(shí)施例2中，利用THz-TDS系統(tǒng)透射測(cè)得的作為校正集的12個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品 在測(cè)試模型的太赫茲波段置信區(qū)間的折射率譜；
[0037] 圖11是實(shí)施例2中，利用THz-TDS系統(tǒng)透射測(cè)得的作為驗(yàn)證集的4個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品在 測(cè)試模型的太赫茲波段置信區(qū)間的折射率譜；
[0038] 圖12是實(shí)施例2中，以折射率為光學(xué)參數(shù)的測(cè)試模型檢測(cè)得到的標(biāo)準(zhǔn)樣品中的吡 嗪酰胺的質(zhì)量百分含量的測(cè)試值與實(shí)際值的對(duì)比圖。
【具體實(shí)施方式】
[0039] 以下結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的方法作進(jìn)一步的說(shuō)明。
[0040] -、本發(fā)明測(cè)定兩種藥物混合的樣品中的藥物成分的含量的方法的步驟如下：
[0041] (1)建立測(cè)試模型
[0042] 采用數(shù)學(xué)方法建立混合藥物中的第一藥物的含量與混合藥物的光學(xué)參數(shù)之間的 對(duì)應(yīng)關(guān)系的測(cè)試模型。采用的數(shù)學(xué)方法可以為偏最小二乘回歸、線性回歸、多元線性回歸、 人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)、人工智能等。
[0043] 本發(fā)明中，所述測(cè)試模型通過(guò)以下方法建立：
[0044] a.配制標(biāo)準(zhǔn)樣品
[0045] 將已知質(zhì)量配比關(guān)系的第一藥物和第二藥物混合均勻，制成第一藥物的含量不等 的多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品。各標(biāo)準(zhǔn)樣品中的第一藥物占混合藥物的含量均為已知，亦是標(biāo)準(zhǔn)樣品中 的第一藥物的含量的實(shí)際值。需要說(shuō)明的是，標(biāo)準(zhǔn)樣品和待測(cè)混合藥物中的第一藥物的含 量除了可采用第一藥物在混合樣品中的質(zhì)量百分含量外，還可以采用第一藥物在混合樣品 中的摩爾百分含量等。
[0046] b.采集各標(biāo)準(zhǔn)樣品及相應(yīng)的空氣的太赫茲時(shí)域光譜
[0047] 采集各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品及相應(yīng)的空氣的太赫茲時(shí)域光譜，光譜的掃描范圍可為 0. 10~3. OOTHz。