一種crp/saa定量聯(lián)合檢測免疫熒光層析試紙的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實用新型涉及一種熒光層析試紙及其制備方法，具體地說，是一種CRP/SAA定量聯(lián)合檢測免疫熒光層析試紙及其制備方法；屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]C-反應(yīng)蛋白(C-react1n，CRP)是由肝臟合成的一種急性時相蛋白，痕量存在于健康人血清中，當機體受到感染或組織損傷時含量迅速升高，隨著病情改善或組織結(jié)構(gòu)功能的恢復(fù)其含量恢復(fù)到正常水平。目前CRP作為全身性炎癥反應(yīng)早期檢測的靈敏指標，已在臨床許多疾病的診斷、治療和預(yù)后中廣泛應(yīng)用。根據(jù)血清、血漿或全血中CRP的濃度水平，可以有效的判斷有無感染、疾病的危險程度及疾病是否處于活動期。
[0003]血清淀粉樣蛋白A (Serum amyloid A protein, SAA)，同樣是一種急性時相反應(yīng)蛋白，是一種炎癥或感染急性期的敏感指標，臨床意義與CRP相類似，檢測血液中SAA的濃度水平，有助于診斷非特異炎癥、評估炎癥活動程度、監(jiān)控炎癥活動及治療后效果。
[0004]研究表明血液中CRP/SAA濃度水平與許多疾病的嚴重程度呈一定的正相關(guān)性，是許多疾病輔助診斷的檢測項目，聯(lián)合檢測CRP/SAA濃度水平能更夠有效的預(yù)測疾病及其發(fā)病的危險程度，機體中CRP/SAA水平上升預(yù)示著機體存在炎癥感染或是疾病處于活動期；此外CRP/SAA聯(lián)合檢測能夠有效的鑒別、診斷細菌和病毒感染，特別是嬰幼兒感染性疾病早期，細菌和病毒是很難鑒別的，而聯(lián)合檢測血清CRP和SAA水平及SAA/CRP比值的變化有助于小兒細菌感染與病毒感染的鑒別診斷。CRP與SAA聯(lián)合檢測可提高檢測敏感性和特異性，對鑒別診斷提供更充分的依據(jù)，二者聯(lián)合檢測具有優(yōu)勢互補和臨床增值的意義，比單獨檢測一個項目更有意義。
[0005]而然，目前市場上沒有出現(xiàn)CRP/SAA同時定量聯(lián)合檢測的產(chǎn)品，臨床上對患者的CRP/SAA濃度的同時檢測只能是逐項進行檢測。一方面耗時耗力，另一方面造成試劑、耗材的浪費，增加了檢測治療的成本，而CRP與SAA在機體處于感染狀態(tài)時，均以mg/L為單位量在機體內(nèi)存在，具有同時檢測的條件。
[0006]此外，目前的大多數(shù)快速檢測試劑需要的樣本量較大，無法應(yīng)用指尖末梢血進行檢測，需要采集靜脈血進行檢測，而血液的樣本采集需要專業(yè)人員操作，這使快速檢測試紙條很難推廣普及到社區(qū)或個人在診斷、體檢等方面的運用。研究表明手指末梢血采集操作簡便、不需要專業(yè)人員操作、對機體的危害小，臨床上的一些檢測指標與靜脈血沒有差異。李騁在研究手指末梢血PCT、hs-CRP聯(lián)合檢測在兒童感染性疾病中的應(yīng)用價值中表明檢測末梢血與靜脈血PCT、CRP的含量沒有差別，手指末梢血可以用于聯(lián)合檢測血清中PCT、CRP的含量，可以診斷區(qū)別兒童感染性疾病。由此可見，實用新型一種同時適用手指末梢血CRP/SAA含量檢測的試紙對快速檢測試紙條普及到社區(qū)或個人在診斷、體檢等方面的運用具有重要的意義。
【實用新型內(nèi)容】
[0007]針對上述不足，本實用新型目的是提供一種既能定量聯(lián)合檢測人末梢血中CRP/SAA含量，也可用于定量聯(lián)合檢測靜脈血中CRP/SAA含量的CRP/SAA定量聯(lián)合快速檢測試紙條，本實用新型還提供了該試紙的制備方法。
[0008]為解決上述技術(shù)問題，本實用新型提供的技術(shù)方案是這樣的:
[0009]—種CRP/SAA定量聯(lián)合檢測免疫熒光層析試紙，包括帶蓋的盒體，盒體內(nèi)設(shè)有檢測試紙條，盒體內(nèi)還設(shè)裝有血液稀釋液的血液稀釋液瓶；所述的檢測試紙條包括底襯，底襯上設(shè)有硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜的一端銜接有熒光微球標記抗體結(jié)合墊，熒光微球標記抗體結(jié)合墊上銜接有樣品墊，硝酸纖維素膜的另一端銜接有吸收墊；所述的熒光微球標記抗體結(jié)合墊包被有CRP單克隆抗體，SAA單克隆抗體；所述的硝酸纖維素膜上平行設(shè)有一條包被有CRP單克隆抗體的CRP檢測線、一條包被有SAA單克隆抗體的SAA檢測線和一條包被有羊抗鼠IgG多克隆抗體的質(zhì)控線。
[0010]進一步的，上述的CRP/SAA定量聯(lián)合檢測免疫熒光層析試紙，所述的盒體的盒蓋上設(shè)有加樣孔和結(jié)果觀察窗口。
[0011]進一步的，上述的CRP/SAA定量聯(lián)合檢測免疫熒光層析試紙，，所述的血液稀釋液為含0.05-0.15wt%#血溶性表面活性劑、0.01% -0.03界七％抗凝劑、0.03-0.07界七％防腐劑的等滲溶液。
[0012]進一步的，上述的CRP/SAA定量聯(lián)合檢測免疫熒光層析試紙，所述樣品墊為全血過濾膜樣品墊。
[0013]進一步的，上述的CRP/SAA定量聯(lián)合檢測免疫熒光層析試紙，所述的熒光微球標記抗體結(jié)合墊包裹有Eu3+的聚苯乙烯乳膠微球標記的CRP/SAA單克隆抗體。
[0014]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實用新型提供的技術(shù)方案具有如下優(yōu)點:
[0015]1、本實用新型應(yīng)用熒光層析技術(shù)，通過在試紙上同時設(shè)有包被CRP單克隆抗體的檢測線、包被有SAA單克隆抗體的檢測線和羊抗鼠IgG的質(zhì)控線，能夠同時準確的檢測血液中CRP和SAA濃度，并且兩種抗原互不干擾，結(jié)果通過儀器讀取，具有快速、簡便，無需專業(yè)人員操作等優(yōu)點，可以推廣應(yīng)用于醫(yī)院、個人、社區(qū)的疾病預(yù)測、診斷和監(jiān)測中。
[0016]2、本實用新型提供的技術(shù)方案將CRP檢測和SAA檢測整合在同一試紙，不僅可以定量聯(lián)合檢測人末梢血中CRP/SAA含量，也可用于定量聯(lián)合檢測靜脈血中CRP/SAA含量，可以解決現(xiàn)有技術(shù)不能于同一試紙中同時定量檢測CRP/SAA的問題；此外本實用新型還解決了使用手指末梢血作為樣本檢測CRP/SAA含量的問題，簡化了操作難度，推動檢測試紙條在社區(qū)或個人在疾病預(yù)測、診斷、體檢等方面的運用。
【附圖說明】
[0017]圖1是本實用新型提供的CRP/SAA定量聯(lián)合檢測免疫熒光層析試紙立體結(jié)構(gòu)示意圖；
[0018]圖2是本實用新型提供的CRP/SAA定量聯(lián)合檢測免疫熒光層析試紙條結(jié)構(gòu)示意圖。
[0019]其中:盒體1，血液稀釋液瓶2，盒蓋3，加樣孔31，結(jié)果觀察窗口 32，底襯4，硝酸纖維素膜5，CRP檢測線51，SAA檢測線52，質(zhì)控線53，熒光微球標記抗體結(jié)合墊6，樣品墊7，吸收墊8。
【具體實施方式】
[0020]下面結(jié)合具體實施例的方式對本實用新型的權(quán)利要求做進一步的詳細說明，但并不構(gòu)成對本實用新型的任何限制，任何人在本實用新型權(quán)利要求范圍內(nèi)所做的有限次的修改，仍在本實用新型的權(quán)利要求范圍之內(nèi)。
[0021]實施例1
[0022]本實用新型提供的一種CRP/SAA定量聯(lián)合檢測免疫熒光層析試紙，參閱圖1、圖2，包括帶蓋的盒體1，所述的盒體1的盒蓋3上設(shè)有加樣孔31和結(jié)果觀察窗口 32。
[0023]盒體內(nèi)設(shè)有檢測試紙條，盒體內(nèi)還設(shè)有含0.05-0.15wt%#血溶性表面活性劑、0.01% -0.03被％抗凝劑、0.03-0.07wt%防腐劑的等滲溶液的血液稀釋液瓶2 ;所述的檢測試紙條包括底襯4，底襯4上設(shè)有硝酸纖維素膜5，硝酸纖維素膜5的一端銜接有熒光微球標記抗體結(jié)合墊6，所述的焚光微球標記抗體結(jié)合墊6包裹有Eu3+的聚苯乙稀乳膠微球標記的CRP/SAA單克隆抗體。熒光微球標記抗體結(jié)合墊6上銜接有樣品墊7，所述的樣品墊7為全血過濾膜樣品墊；硝酸纖維素膜