專利名稱：干燥止血組合物及其制備方法
背景技術(shù)：
1.發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明一般地涉及膠原與膠原-衍生的組合物以及它們的制備方法。特別是，本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)能以更高速率吸水的干燥交聯(lián)明膠或其它膠原或膠原-衍生的組合物的方法。
本申請(qǐng)的受讓人Fusion Medical Technologies公司生產(chǎn)一種止血組合物，商品名為FloSeal。FloSeal產(chǎn)品以包括2個(gè)注射器的包裝出售。第一個(gè)注射器裝滿用一種緩沖溶液預(yù)水化的交聯(lián)牛明膠顆粒。該明膠水凝膠含約85％(重量/重量)水，其形式是一種可流動(dòng)水凝膠。在即將用于手術(shù)室之前，要將鹽水中的凝血酶與明膠水凝膠混合。凝血酶要在鹽水中制備并吸入第二注射器內(nèi)，兩個(gè)注射器互連在一起，以便凝血酶與明膠混合。
業(yè)已發(fā)現(xiàn)，所得明膠水凝膠顆粒與凝血酶的混合物涂在出血處時(shí)是一種非常有效的止血密封劑。一般，該密封劑要用它在其中已混合好的注射器施涂到出血處。血液將滲透過(guò)所形成的水凝膠顆粒床，凝血酶與血液中的血纖維蛋白原反應(yīng)，在明膠周圍形成血纖維蛋白凝塊，從而封住出血處。
現(xiàn)有的FloSeal產(chǎn)品雖然非常有效，但其儲(chǔ)存壽命有限。相信明膠的穩(wěn)定性因包裝水凝膠的水解而降低。為抑制可能的水解降解，F(xiàn)loSeal產(chǎn)品通常要在保溫包裝中運(yùn)輸。
為此，希望提供組合了膠原、明膠或其它膠原-衍生的水凝膠與含凝血酶的水溶液的這類更好的止血密封組合物。尤其希望提供抗水解降解并因此而具有更長(zhǎng)儲(chǔ)存壽命的這類組合物。特別希望提供其止血活性與現(xiàn)有FloSeal產(chǎn)品相當(dāng)而儲(chǔ)存壽命又更長(zhǎng)的改進(jìn)組合物。這類組合物如果能為隨后的使用而迅速再水化，從而使它們能通過(guò)注射器擠出，那是非常有利的。下文所述的本發(fā)明將至少部分滿足上述目的。
2.背景技術(shù)描述Fusion Medical Technologies公司出售的FloSeal產(chǎn)品在Hood等于1999年9月以Efficacy of Topical Hemostat FloSealTMinVascular Surgery為題公開(kāi)發(fā)表在Fusion Medical Techmologies公司資助的文摘中已有所述。有關(guān)FloSeal產(chǎn)品的專利包括美國(guó)專利號(hào)6,063,061和6,066,325。適合于混合并輸送FloSeal產(chǎn)品中一個(gè)膠原、明膠或其它膠原衍生的組分和一個(gè)凝血酶組分的雙注射器系統(tǒng)已描述在美國(guó)專利5,908,054中。所有上述專利的全部公開(kāi)內(nèi)容都包括于此供參考。
發(fā)明概述本發(fā)明提供改進(jìn)的止血密封組合物、制備這類改進(jìn)組合物的方法及包含這類改進(jìn)組合物的試劑盒。這些方法與組合物特別適用于包括手術(shù)出血處、外傷出血處等在內(nèi)的出血處的止血。這類組合物的典型用途可以用于密封在血管導(dǎo)管插入術(shù)形成的血管穿透之上的組織系統(tǒng)。
這類組合物包含一種已制成能迅速再水化的干燥交聯(lián)明膠粉。該明膠粉優(yōu)選包含較大的顆粒，也稱為碎片或次單元，如美國(guó)專利6,063,061和6,066,325所述，該專利的全部公開(kāi)內(nèi)容已包括在前面供參考。優(yōu)選的顆粒尺寸范圍為150μm-750μm，但在很多情況下也可以用該優(yōu)選范圍之外的顆粒尺寸。這類干燥組合物在暴露于再水化水性介質(zhì)中時(shí)也將表現(xiàn)出大的“平衡溶脹比”。優(yōu)選溶脹比在400％-1000％范圍內(nèi)，但也可以落在該范圍之外，如上述參考專利所述。“平衡溶脹比”可通過(guò)將明膠水凝膠粉末完全水化從而完全溶脹時(shí)的重量減去其干燥重量確定。然后將差值除以干燥重量并乘以100，以給出溶脹比值。干燥重量應(yīng)將該物質(zhì)在高溫下處理足夠長(zhǎng)時(shí)間以基本除去所有的殘留水份，例如在120℃下處理2小時(shí)后測(cè)定。實(shí)現(xiàn)物質(zhì)平衡水化的方法可以如下將干燥物質(zhì)在適當(dāng)?shù)脑偎橘|(zhì)如鹽水中浸泡足夠長(zhǎng)時(shí)間，使水含量達(dá)到恒定，一般要在室溫下浸泡18-24小時(shí)。
本發(fā)明的干燥交聯(lián)明膠粉通常含有一些殘留水份，但須足夠干燥以達(dá)到所要求的穩(wěn)定性和更長(zhǎng)的儲(chǔ)存壽命。一般干燥組合物的含濕量低于20重量％或更低，優(yōu)選含濕量在5重量％-15重量％范圍內(nèi)。為保持其干燥度，組合物一般以適合于防濕氣侵入的方式包裝，如結(jié)合本發(fā)明的試劑盒所詳述。
在本發(fā)明的一個(gè)具體方面，組合物將包含含濕量為20％(重量/重量)或更低的交聯(lián)明膠粉，其中所述粉末要在有再水化助劑存在下交聯(lián)，以使粉末的再水化率較之不用再水化助劑時(shí)所制成的類似粉末的再水化率至少高5％。這里“再水化率”定義為1g粉末(以干燥重量為基準(zhǔn)計(jì)算)在30秒內(nèi)吸收的濃度一般為0.9％(重量/重量)鹽水的量，以gm/gm表示。測(cè)定該速率的具體技術(shù)在下文實(shí)驗(yàn)部分描述。本發(fā)明優(yōu)選組合物的再水化率至少為3gm/gm，優(yōu)選至少3.5gm/gm，通常為3.75gm/gm或更高。不用再水化助劑所制成的類似粉末的再水化率一般低于3，再水化率的增加通常至少為5％，優(yōu)選至少10％，更優(yōu)選至少25％或更高。
本發(fā)明的再水化率更高的干燥交聯(lián)明膠粉優(yōu)選通過(guò)在有某種再水化助劑存在下制備粉末而獲得。這類再水化助劑將在粉末制備期間存在，但通常要從最終產(chǎn)品中除去。例如，以總固體量約20％存在的再水化助劑在最終產(chǎn)品中一般要降到1重量％以下，通常低于0.5重量％。再水化助劑的實(shí)例包括聚乙二醇(PEG)，優(yōu)選分子量約1000；聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，優(yōu)選平均分子量約50,000；和葡聚糖，一般平均分子量約40,000。在制備本發(fā)明的組合物時(shí)，優(yōu)選使用上述再水化助劑中的至少2種，更優(yōu)選使用所有這3種。
因此，本發(fā)明的方法包含提供一種未交聯(lián)明膠與再水化助劑組合的水溶液。未交聯(lián)明膠在水溶液中的存在量一般為5％(重量/重量)-15％(重量/重量)，再水化助劑的存在量一般為水溶液中明膠重量的5％-30％(重量/重量)。優(yōu)選再水化助劑包含明膠重量2.5％-20％(重量/重量)的PEG，1.25％-20％(重量/重量)的PVP和1.25％-20％(重量/重量)的葡聚糖。
然后將未交聯(lián)明膠與再水化助劑一起以任何適合于形成水凝膠的方法進(jìn)行交聯(lián)。例如，聚合物分子可以用雙-或多-官能度交聯(lián)劑進(jìn)行交聯(lián)，交聯(lián)劑以共價(jià)鍵連接在兩個(gè)或多個(gè)聚合物分子鏈上。典型的雙官能度交聯(lián)劑包括醛、環(huán)氧化物、琥珀酰亞胺、碳二亞胺、馬來(lái)酰亞胺、疊氮化物、碳酸酯、異氰酸酯、二乙烯基砜、醇、胺、亞胺酯、酸酐、鹵化物、硅烷、重氮基乙酸酯、氮丙啶等等?；蛘咭部梢杂醚趸瘎┖推渌噭┤绺叩馑猁}實(shí)現(xiàn)交聯(lián)，這類試劑能活化聚合物上的側(cè)鏈或部分，使它們與其它側(cè)鏈或部分反應(yīng)，形成交聯(lián)鍵。交聯(lián)的另一種方法包含將聚合物暴露于γ射線之類的射線中以活化聚合物鏈，以允許發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)。脫氫熱交聯(lián)法也適用。交聯(lián)明膠分子的優(yōu)選方法如下所述。
生成交聯(lián)明膠的典型方法如下。獲得明膠并將其懸浮在水溶液中，形成未交聯(lián)水凝膠，固體含量一般為1重量％-70重量％，通常為3重量％-10重量％。明膠的交聯(lián)一般是暴露在戊二醛(例如，濃度為0.01％-0.05％重量/重量，在0℃-15℃緩沖水溶液中過(guò)夜)、高碘酸鈉(例如，濃度為0.05M，在0℃-15℃保持48小時(shí))或1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺(“EDC”)中(例如，濃度為0.5％-1.5％重量/重量，在室溫下過(guò)夜)，或暴露在約0.3-3兆拉德γ或電子束輻照中?；蛘?，也可以通過(guò)將明膠顆粒懸浮在醇中，優(yōu)選甲醇或乙醇，固體含量一般為1重量％-70重量％，通常為3重量％-10重量％，然后通過(guò)暴露于交聯(lián)劑中進(jìn)行交聯(lián)，交聯(lián)劑一般是戊二醛(例如，濃度為0.01％-0.1％重量/重量，在室溫下過(guò)夜)。在戊二醛的情況下，pH值應(yīng)保持約6-11，優(yōu)選7-10。用戊二醛交聯(lián)時(shí)，交聯(lián)是通過(guò)Schiff堿形成的，然后可以通過(guò)隨后的還原如用氫硼化鈉處理而穩(wěn)定化。交聯(lián)后，所得顆?？捎盟逑矗芜x地在醇中漂洗，并烘干。然后可將所得干燥粉末裝進(jìn)本發(fā)明的涂布器，如下文更詳細(xì)的描述。
交聯(lián)后，要從所得水凝膠中除去至少50％(重量/重量)再水化助劑。通常，除去再水化助劑的方法是過(guò)濾水凝膠，接著清洗所得的濾餅。為了將產(chǎn)品清洗到所需的水平并除去至少50％，優(yōu)選至少90％(重量/重量)起始存在的再水化助劑，這樣的過(guò)濾/清洗步驟可重復(fù)一次或多次。
過(guò)濾后，明膠要烘干，典型的方法是烘干所得到的最終濾餅。烘干的濾餅隨后要經(jīng)破碎或研磨，以形成顆粒尺寸在上述所需范圍內(nèi)的交聯(lián)粉末。
按照本發(fā)明的試劑盒將包含一個(gè)容納如前所述本發(fā)明干燥交聯(lián)明膠粉末的第一容器。該試劑盒還包含一個(gè)容納再水化水性介質(zhì)的第二容器，再水化水性介質(zhì)一般是擬在明膠再水化時(shí)與明膠混合的包含凝血酶的鹽水或其它水溶液。兩個(gè)容器可具有任何形式，但優(yōu)選允許干明膠與再水化介質(zhì)混合的注射器形式。
附圖簡(jiǎn)述

圖1示意一個(gè)按照本發(fā)明原理構(gòu)成的試劑盒。
具體實(shí)施方案詳述下列實(shí)例僅為說(shuō)明而給出，無(wú)意限制本發(fā)明。
實(shí)施例1明膠粉的制備將牛皮條懸浮在濃度為1M-2M的氫氧化鈉溶液中，在室溫下保持1小時(shí)，用磷酸中和之，然后清洗之。然后將處理過(guò)的條再懸浮在去離子水中，將pH值調(diào)到7-8，并加熱到70℃。用均化器進(jìn)一步減小條的尺寸。在70℃放置1小時(shí)后，皮大多溶解成明膠。皮量的選擇要使所得明膠溶液中的固體含量為約3-10％(重量/重量)，典型值為7-10％。然后將溶液在涂有Teflon的金屬盤(pán)上澆鑄成薄層，經(jīng)干燥并研磨成明膠粉末。
實(shí)施例2“改性明膠粉”的制備將再水化助劑(表1)溶解在500mL 50℃去離子水中，然后在該溶液中加入一定量如實(shí)施例1那樣制備的牛皮衍生明膠粉。明膠在溶液中的最終濃度要選為約8％(重量/重量，以本體明膠粉為基準(zhǔn))，再水化助劑在溶液中的總量要如實(shí)施例9-44(表1和2)所選。在明膠溶解之后，將溶液倒進(jìn)帶Teflon涂層的金屬盤(pán)內(nèi)并干燥之。將干燥的明膠片研磨成“改性明膠粉”。
或者也可以將牛皮條懸浮在濃度為1M-2M的氫氧化鈉溶液中，在室溫下保持1小時(shí)，用磷酸中和之，然后清洗之。然后將處理過(guò)的條再懸浮在去離子水中，將pH值調(diào)到7-8，并加熱到70℃。用均化器進(jìn)一步減小條的尺寸。在70℃放置1小時(shí)后，皮大多溶解成明膠。皮量的選擇要使所得明膠溶液中的固體含量約為3-10％(重量/重量)，典型值為7-10％。再水化助劑的用量要如實(shí)施例9-44那樣選擇(表1和2)并以固體形式或溶于少量水的形式加進(jìn)明膠溶液。然后將溶液在帶Teflon涂層的金屬盤(pán)上澆鑄成薄層，經(jīng)干燥并研磨成“改性明膠粉”。改性明膠粉的一些配方實(shí)施例列在表1與2中。
實(shí)施例3從“改性明膠粉”制備交聯(lián)明膠粉將600mL 0.2M磷酸鹽緩沖液(pH值9.2±0.2)冷卻到低于12℃的溫度。在該緩沖液中加入0.32mL戊二醛(25％)，然后再加入20g改性明膠粉，使戊二醛的濃度為4000ppm(戊二醛與改性明膠本體重量之比)。用攪拌棒使明膠懸浮在戊二醛溶液中。將各懸浮液的pH值調(diào)到9.2±0.2范圍內(nèi)，然后在9-12℃的溫度和9.2±0.2的pH值下保持19小時(shí)。
過(guò)濾該懸浮液并用去離子水清洗濾餅3次，方法是用去離子水完全浸沒(méi)濾餅，然后使用真空將清洗水吸過(guò)濾餅。每次清洗期間，濾餅留在漏斗內(nèi)。
在燒杯內(nèi)將0.2g NaBH4溶于600mL濃度為25mM的磷酸鹽緩沖液中，pH值為7.4±0.2。在室溫(約22℃)下將上述濾餅懸浮在NaBH4溶液中3小時(shí)，然后過(guò)濾去除液體。
然后在室溫(約22℃)下將濾餅懸浮在600mL緩沖液中30min，再過(guò)濾。緩沖液由磷酸鈉(二元酸酐和一元一水合物)和抗壞血酸鈉組成。重復(fù)上述步驟2次，以確保鹽與明膠以適當(dāng)比例存在，從而在重構(gòu)時(shí)形成所需的緩沖組合物。干燥該濾餅，然后用Waring Blender研磨成“交聯(lián)明膠粉”。
本方法也用來(lái)從未改性明膠粉制備交聯(lián)明膠粉；即在制備期間不加再水化助劑的明膠。
實(shí)施例4從交聯(lián)明膠粉制備輻照產(chǎn)品在幾支5ml注射器的每一支內(nèi)放進(jìn)約800mg(本體重量)如實(shí)施例2那樣制備的交聯(lián)明膠粉。在室溫下用γ射線消毒含粉末注射器。
實(shí)施例5用產(chǎn)品作為止血?jiǎng)母男悦髂z粉末制備一支注射器內(nèi)含約0.8g輻照交聯(lián)明膠粉末的產(chǎn)品。改性明膠粉如實(shí)施例2那樣制備。改性明膠粉經(jīng)進(jìn)一步交聯(lián)并輻照，如實(shí)施例3和4那樣。將產(chǎn)品與4mL鹽水溶液混合，每ml鹽水溶液含約1000單位牛血清凝血酶?；旌鲜峭ㄟ^(guò)在由陰-陰直通Luer連接器連接的兩個(gè)注射器之間往返通過(guò)而實(shí)現(xiàn)的。當(dāng)注射器中的粉末與凝血酶溶液混合時(shí)粉末就被水化了，形成水凝膠顆粒。
在農(nóng)莊級(jí)豬的肝上產(chǎn)生一片約1cm×1cm×0.2cm深的傷口。該頭豬已用肝素抗凝過(guò)，因此其活化血凝時(shí)間(ACT)是其基礎(chǔ)值的3-5倍，該傷口在處理以前不斷流血。從混合開(kāi)始約30秒鐘后，將約2mL水化粉末從注射器中擠到傷口上并壓住2分鐘。除去壓力后，分別在涂抹后3min、10min和50min觀察處理傷口的流血情況。3min和10min觀察，未見(jiàn)處理傷口流血。10min后用鹽水溶液沖洗處理過(guò)的傷口。除去過(guò)量物質(zhì)后，仍未見(jiàn)再流血。在涂抹后50min時(shí)，再觀察傷口，也未見(jiàn)流血。
實(shí)施例6測(cè)定粉末的再水化率粉末的“再水化率”測(cè)定如下。裝在5mL注射器中的粉末與含一定體積水溶液的第二注射器通過(guò)在兩個(gè)注射器之間由Luer接頭連接的通道混合30秒鐘。選擇的水溶液體積要超過(guò)預(yù)期在30秒鐘內(nèi)吸收的量。一般是將0.8g(本體重量)粉末與3mL 0.9％氯化鈉水溶液混合。然后立即過(guò)濾所得混合物，以除去所有未被吸收的液體。稱重濕過(guò)濾物，然后在120℃烘箱內(nèi)烘2小時(shí)，再稱重。這一測(cè)量給出從濕物質(zhì)中除去的總水量以及干粉重量。然后在對(duì)原來(lái)殘留在粉末中的水份作過(guò)微小校正后計(jì)算出被粉末吸收的水量?！霸偎省币悦靠烁煞勰┰?0秒間隔內(nèi)吸收的鹽水質(zhì)量給出。
在下面的計(jì)算中，本體粉末的固體分?jǐn)?shù)(“S”)是獨(dú)立地通過(guò)將本體粉末在120℃烘2小時(shí)并對(duì)干燥前后的粉末稱重測(cè)得的。S值由下式計(jì)算 再水化率計(jì)算A盤(pán)和濾紙的起始重量B盤(pán)、濾紙和水化粉末的重量C盤(pán)、濾紙和樣品在烘箱內(nèi)烘干后的重量S注射器內(nèi)起始本體粉末的固體分?jǐn)?shù)M混合期間每克粉末(干重)吸收的鹽水克數(shù)(“吸收率”)M=(B-A)-(C-A)/S(C-A)]]>實(shí)施例7對(duì)幾批粉末產(chǎn)品測(cè)定的再水化率與物理性能表1和2示意了對(duì)幾批粉末產(chǎn)品(實(shí)施例9-23)中每批測(cè)定的再水化率結(jié)果。這些批次的粉末分別如實(shí)施例1、2、3和4那樣的方法制備。除實(shí)施例9與17之外，都從改性明膠按不同比例的明膠與下列再水化助劑制備平均分子量為1000的聚乙二醇(PEG)；牌號(hào)為“k-30”對(duì)應(yīng)于平均分子量約50,000的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)；和平均分子量40,000的葡聚糖。
可以看到，使用不同比例組合的明膠和再水化助劑，能使粉末產(chǎn)品的每克粉末在30秒內(nèi)吸收的鹽水溶液多于用無(wú)再水化助劑的明膠制成的粉末產(chǎn)品。還可以看到，用明膠、PEG、PVP和葡聚糖以本體重量比為80∶10∶5∶5的組合(實(shí)施例10)的改性明膠所生成的粉末產(chǎn)品，每克在30秒內(nèi)吸收的鹽水溶液比從未改性明膠制成的粉末多約33％。
表1還給出了對(duì)這些粉末產(chǎn)品批次測(cè)定的其它物理性能值?！肮腆w百分含量”由稱取粉末在120℃烘2小時(shí)以除去殘余水份前后的重量測(cè)定?！癉SC峰溫”是指從1℃-70℃進(jìn)行的差示掃描量熱法測(cè)定的溫度譜上出現(xiàn)峰的溫度?！捌胶馊苊洷取钡臏y(cè)定方法如下在室溫下讓粉末懸浮在過(guò)量鹽水溶液中至少18小時(shí)。對(duì)該水化粉末稱重以確定其“平衡濕重”，然后在120℃烘2小時(shí)，再稱重，以確定其“干重”。平衡溶脹比計(jì)算如下 “平均顆粒尺寸”值用光散射法在Coulter LS顆粒尺寸分析儀上測(cè)定。
從表1給出的數(shù)據(jù)中顯然可看到，適當(dāng)使用再水化助劑能改變粉末產(chǎn)品的再水化率而不會(huì)明顯改變其它物理性能。
實(shí)施例8測(cè)定聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮和葡聚糖在改性明膠粉末和交聯(lián)粉末中的含量將約50mg改性明膠或250mg交聯(lián)輻照粉末產(chǎn)品懸浮在10mL去離子水中并在65℃加熱3小時(shí)。然后將樣品以2000rpm離心處理15min。將所得懸浮液濾過(guò)一個(gè)0.45μm Gelman Acrodisc漏斗，棄去第一mL。所得樣品然后用3種不同的高效液相色譜法(HPLC)進(jìn)行評(píng)估，以定量給出樣品中聚乙二醇(PEG)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和葡聚糖的含量。對(duì)于PEG，將100μl樣品注射到Waters Ultrahydrogel 120柱上，柱子尺寸7.8×300mm，帶保護(hù)柱和預(yù)過(guò)濾漏斗，用去離子水作為移動(dòng)相。用折光指數(shù)測(cè)定儀監(jiān)測(cè)流出物。對(duì)于PVP，將100μl樣品注射到Phenomenex Kingsorb C18 5μm柱上，柱子尺寸4.6×150mm，帶保護(hù)柱和預(yù)過(guò)濾漏斗，用梯度甲醇與磷酸鈉水溶液作為移動(dòng)相。用紫外吸收測(cè)定儀監(jiān)測(cè)流出物。對(duì)于葡聚糖，將100μl樣品注射到WatersUltrahydrogel線柱上，柱子尺寸7.8×300mm，帶保護(hù)柱和預(yù)過(guò)濾漏斗，用0.1M pH7磷酸鈉與乙腈按90∶10作為移動(dòng)相。用折光指數(shù)測(cè)定儀監(jiān)測(cè)流出物。為進(jìn)行分析，所有柱子都加熱到40℃。定量極限對(duì)PEG和PVP約為0.1％(重量/重量樣品)，對(duì)于葡聚糖，為0.2％(重量/重量樣品)。
改性明膠如實(shí)施例2那樣制備。按上述方法分析改性明膠的PEG、PVP和葡聚糖。結(jié)果表明，PEG、PVP和葡聚糖的存在量分別為16％、8％和3％(重量/重量本體)。讓改性明膠依次經(jīng)交聯(lián)、氫硼化物處理和清洗，如實(shí)施例3那樣，以形成交聯(lián)改性明膠粉。當(dāng)以上述方法用HPLC分析這種粉末的PEG、PVP和葡聚糖時(shí)，發(fā)現(xiàn)這三種再水化助劑中每一種的含量都低于定量極限。
實(shí)施例9不加再水化助劑制成的粉末產(chǎn)品按實(shí)施例1那樣從牛皮條制備未改性明膠-即不加加工助劑的明膠并按實(shí)施例3那樣進(jìn)行交聯(lián)。如實(shí)施例4那樣將交聯(lián)未改性明膠裝入注射器并進(jìn)行γ輻照。如實(shí)施例6和7那樣測(cè)定所得產(chǎn)物的物理性能，結(jié)果示于表1。
實(shí)施例10-23用再水化助劑制成的粉末產(chǎn)品如實(shí)施例2那樣從明膠粉或皮條和1、2或3種再水化助劑制備改性明膠批料。表1給出了所用本體明膠與再水化助劑的比例。然后如實(shí)施例3那樣交聯(lián)該改性明膠。除實(shí)施例17之外，所用的再水化助劑如下所示平均分子量約1000的聚乙二醇(PEG)；牌號(hào)為“k-30”、平均分子量約50,000的聚乙烯吡咯烷酮；和平均分子量約40,000的葡聚糖。在實(shí)施例17中，用平均分子量約400的PEG。然后如實(shí)施例4那樣將該交聯(lián)改性明膠裝進(jìn)注射器并進(jìn)行γ輻照。如實(shí)施例6和7那樣測(cè)定從每一種制備方法得到的粉末產(chǎn)品的物理性能，結(jié)果示于表1。用實(shí)施例10的配方得到的數(shù)據(jù)是按照該配方制備的9批樣品的平均值與標(biāo)準(zhǔn)偏差。
實(shí)施例24-44用各種再水化助劑制成的粉末產(chǎn)品如實(shí)施例2那樣從明膠粉或皮條和幾種再水化助劑之一制備幾批改性明膠。表2給出了每批所用再水化助劑的名稱與濃度，濃度以本體明膠與再水化助劑的重量比和制備改性明膠所用的本體溶質(zhì)的總百分?jǐn)?shù)表示。然后如實(shí)施例3那樣交聯(lián)該改性明膠。然后如實(shí)施例4那樣將交聯(lián)改性明膠裝進(jìn)注射器并進(jìn)行γ輻照。如實(shí)施例6和7那樣測(cè)定從每一種制備方法得到的粉末產(chǎn)品的物理性能，結(jié)果示于表2。表2中給出了實(shí)施例9的配方的結(jié)果作為比較。
表1
表2
nr＝未報(bào)告*-再水化率定義為每克粉末產(chǎn)品(干重)在30秒內(nèi)吸收的鹽水克數(shù)雖然以上是本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方案的完整描述，但可以用各種變化、改變和等代體。因此不應(yīng)將以上的描述當(dāng)作限制由所附權(quán)利要求規(guī)定的本發(fā)明范圍。
權(quán)利要求
1.一種制造基本干燥的交聯(lián)明膠粉的方法，所述方法包含提供一種包含交聯(lián)明膠與至少一種再水化助劑組合的水溶液；烘干該明膠與再水化助劑的溶液以形成固體；研磨該固體以形成粉末；交聯(lián)該粉末；除去至少50％(重量/重量)再水化助劑；以及烘干該交聯(lián)明膠以形成一種含濕量低于20％(重量/重量)的粉末。
2.如權(quán)利要求1的方法，其中再水化助劑包含1、2或3種選自下列一組的物質(zhì)聚乙二醇(PEG)、聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)和葡聚糖。
3.如權(quán)利要求1或2的方法，其中再水化助劑以水溶液中所存在明膠重量的5％-30％的濃度存在。
4.如權(quán)利要求3的方法，其中再水化助劑包含的PEG濃度為2.5重量％-20重量％，PVP濃度為1.25重量％-20重量％，以及葡聚糖濃度為1.25重量％-20重量％。
5.如前述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的方法，其中交聯(lián)包括在明膠溶液中加入一種交聯(lián)劑。
6.如權(quán)利要求5的方法，其中交聯(lián)劑包含戊二醛。
7.如前述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的方法，其中除去至少50％再水化助劑包括過(guò)濾交聯(lián)粉末在溶劑中的懸浮液，接著過(guò)濾明膠以形成濾餅，然后清洗濾餅以除去再水化助劑。
8.如權(quán)利要求7的方法，其中清洗濾餅除去至少90％(重量/重量)起始存在于明膠中的再水化助劑。
9.如前述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的方法，其中烘干包括烘干清洗后的濾餅，其中該方法還包含烘干經(jīng)研磨的濾餅，以形成干燥研磨明膠粉。
10.一種包含含濕量為20％(重量/重量)或更低的交聯(lián)明膠粉的組合物，其中所述粉末是在再水化助劑存在下進(jìn)行交聯(lián)的，以使該粉末的再水化率比不用再水化助劑時(shí)所制備的類似粉末的再水化率高至少5％。
11.如權(quán)利要求10中的組合物，其中所述粉末的再水化率比不用再水化助劑時(shí)所制備的類似粉末的再水化率高至少10％，任選地，高至少25％。
12.如權(quán)利要求10或11的組合物，其中再水化助劑包含1、2或3種選自下列一組的物質(zhì)聚乙二醇(PEG)、聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)和葡聚糖。
13.如前述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的組合物，其中所述粉末的平均顆粒尺寸為150μm-750μm。
14.如前述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的組合物，其中所述粉末的平衡溶脹比為400％-1000％。
15.一種包含下列部分的試劑盒一個(gè)容納權(quán)利要求12-19任何一項(xiàng)的交聯(lián)明膠粉的第一容器；和一個(gè)容納再水化水性介質(zhì)的第二容器。
16.如權(quán)利要求15的試劑盒，其中第一容器是一個(gè)注射器。
17.如權(quán)利要求16的試劑盒，其中第二容器是一個(gè)注射器。
18.如前述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的試劑盒，其中再水化水性介質(zhì)包含凝血酶。
19.如前述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的試劑盒，還包含使用說(shuō)明書(shū)，指出組合交聯(lián)明膠粉與再水化介質(zhì)以形成含凝血酶的明膠水凝膠碎片和在傷口上涂布該水凝膠的方法。
20.如前述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的試劑盒，還包含一個(gè)容納第一容器與第二容器的包裝。
全文摘要
制備干燥交聯(lián)明膠組合物，這種組合物能迅速再水化以生成宜作止血密封劑用的明膠水凝膠。明膠要在某種再水化助劑如聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮和葡聚糖存在下進(jìn)行交聯(lián)，目的是形成一種干燥的交聯(lián)明膠粉。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，使用再水化助劑能在再水化水性介質(zhì)，典型的是含凝血酶的鹽水存在下，大幅度提高再水化率。
文檔編號(hào)A61L15/16GK1555249SQ02818207
公開(kāi)日2004年12月15日 申請(qǐng)日期2002年6月21日 優(yōu)先權(quán)日2001年7月17日
發(fā)明者Z·錢(qián), Z 錢(qián), E·A·奧薩瓦, 奧薩瓦, C·J·賴克, 賴克 申請(qǐng)人:巴克斯特國(guó)際有限公司, 巴克斯特健康護(hù)理股份有限公司