專利名稱：具有終端胺化炔醇側(cè)鏈的黃嘌呤化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新黃嘌呤衍生物，其在黃嘌呤構(gòu)架的1位或7位上具有至少一個炔醇側(cè)鏈，本發(fā)明還涉及其的制備方法以及其在藥物中作為活性成分的用途，特別是用于治療和/或預(yù)防腦血管疾病，所述疾病的特征是由于局部缺血及隨后神經(jīng)細(xì)胞壞死損傷而引起的損傷。
局部缺血后神經(jīng)細(xì)胞的死亡及由其引起的致命功能缺失，其相應(yīng)的嚴(yán)重神經(jīng)和/或精神癥候是大多數(shù)腦血管疾病的常見臨床特征。包括如中風(fēng)、短暫性局部缺血性發(fā)作(TIA)、多發(fā)梗塞性癡呆(multiinfarctdementia)、血管和退化(早老性癡呆)混合型癡呆、脊髓損傷、由于頭部受傷導(dǎo)致的大腦創(chuàng)傷、心搏停止后的神經(jīng)損傷、(新生兒)窒息和復(fù)蘇以及在腦部主要動脈區(qū)的血管外科手術(shù)(例如旁路手術(shù))。
在臨床實踐中，中風(fēng)(也稱腦血管意外、腦中風(fēng))占主流。它是15％所有死亡中的主要原因(Pschyrembel，Klinisches Worterbuch[ClinicalDictionary] Walter de Gruyter-Verlag，255thedition，1986，第105頁)，因此在死亡原因統(tǒng)計中其居第三位，僅次于心臟病和癌癥(Parmazeutische Zeitung 1994，139/312482-2483)。男性和女性同樣受到影響，在60歲后死亡率顯著上升。全世界有大約0.8％的人口患病，每年持續(xù)上升，特別是在發(fā)達(dá)國家中，因為那里的平均壽命在逐年上升。
如果幸免于中風(fēng)，其通常會留下永久損傷，例如癱瘓、語言障礙和/或抽搐，這使得必需長期護(hù)理患者，患者極大痛苦，親屬的負(fù)擔(dān)以及在健康服務(wù)方面的花費(fèi)負(fù)擔(dān)同樣很重。因此，僅在美國治療以及對中風(fēng)患者的后護(hù)理目前每年預(yù)計需要200億美元。此外，約有10％幸免于中風(fēng)的患者在此后第一年中會患上另一中腦血管意外，其預(yù)后極不好。
因此，開發(fā)并建立一種有效藥物治療，其可降低急性死亡及神經(jīng)損傷程度和復(fù)發(fā)率，從而改善中風(fēng)后生活質(zhì)量是藥物研究中社會和醫(yī)療意義的巨大挑戰(zhàn)。
中風(fēng)的起因通常是在大腦特定區(qū)域與氧缺乏有關(guān)的循環(huán)紊亂。這種跡象和癥候的特征是意識紊亂直至昏迷，常見半身不遂，各種中樞運(yùn)動原和感覺缺失癥侯以及病灶或擴(kuò)散痙攣。應(yīng)區(qū)分腦出血和腦梗塞之間的病因?qū)W，腦出血與血管破裂(主要是高血壓、動脈硬化或顱內(nèi)動脈瘤等主要疾病導(dǎo)致的striolenticular動脈)后的高死亡率有關(guān)(初期出血；約占15％；常常是大出血)；局部缺血灶軟化的腦梗塞或腦軟化(初期不出血；約占85％)，由功能性局部缺血(低血壓危象導(dǎo)致，通常為心臟起源)或主要由于進(jìn)行性或永久局部缺血(由降低或消除顱外和/或內(nèi)動脈區(qū)域特別是內(nèi)頸動脈、中腦動脈和椎骨動脈的動脈硬化、血栓形成源及栓形成源血管病變導(dǎo)致)引起。腦軟化(少見且進(jìn)展慢)的癥狀被稱為“進(jìn)行性中風(fēng)”。
致命腦血管意外的初始癥狀被認(rèn)為是反復(fù)復(fù)發(fā)的可持續(xù)2至15分鐘的短暫性缺血性發(fā)作(TIA)，其具有神經(jīng)損傷的短暫癥候，它的起源是由狹窄或微栓塞引起的血流的短暫、定位干擾，其完全恢復(fù)需要數(shù)分鐘至24小時。對這些局部缺血發(fā)作的有效治療對預(yù)防中風(fēng)非常重要。
流行病學(xué)確認(rèn)的符合腦局部缺血發(fā)展的危險因素有，例如動脈高血壓、高血脂、高尿酸、糖尿病、血液流變學(xué)疾病、心力衰竭和服用激素類避孕劑(Pschyrembel，Klinisches Worterbuch [Chemical Dictionary]，Walter de Gruyter-Verlag，255thedition，1986，第1840頁)。
目前用于腦血管疾病的治療主要限制在對腦局部缺血沒有直接作用的措施(Schweiz. med. Wochenschr. 1994，124/45；2005-2012)。該治療的唯一目的是在局部缺血灶緣的完整區(qū)域維持足夠的灌注以最大程度限制腦組織進(jìn)行性梗塞。如果是適合的適應(yīng)癥，主要可通過血管外科手術(shù)例如壁內(nèi)desobliteration或通過顱外/內(nèi)旁路連接血管狹窄，盡管這些手術(shù)的危險性都相對較高。特別地，目前可行的醫(yī)療方法不允許根本治療；相反則直接是消除癥狀和癥候。這主要包括通過給予洋地黃甙和抗心律不齊藥物確保足夠的心功能、控制血壓、消除代謝紊亂(主要是電介質(zhì)和葡萄糖平衡)以及通過用乙酰水楊酸或肝素抗血栓形成治療防止進(jìn)一步的血栓灶，但是禁用維生素K拮抗劑型抗凝劑(香豆素)，因為增加了出血的危險。此外，還認(rèn)為消除前述已知危險因素對治療很重要。
對腦局部缺血的急性藥物治療因此代表了一個尚未解決的臨床問題(Ann. Radiol. 1994，37/1-2132-135)。這也是近期發(fā)表的對目前所有主要臨床治療研究重要分析的結(jié)論(Lancet 1992，339/8792537-539)，其再次強(qiáng)調(diào)了降低死亡率并限制幸運(yùn)者神經(jīng)后遺癥是評價治療結(jié)果同等重要的標(biāo)準(zhǔn)。
臨床醫(yī)師需要為達(dá)此目的的新治療思維。通過血管和細(xì)胞水平的復(fù)雜病生理過程提供了有前景的方法，這一過程(以噁性循環(huán)形式)是基于急性腦局部缺血的進(jìn)行性過程。根據(jù)目前的知識水平，細(xì)胞局部缺血和細(xì)胞死亡的病理過程的特征是，包含許多遞質(zhì)體系的一系列生理和生化過程，該過程開始于不足的供給、高能量化合物的消耗以及能量代謝的崩潰，經(jīng)過量釋放興奮性神經(jīng)遞質(zhì)如谷氨酸和天門冬氨酸(有限的或沒有重新攝取)遞質(zhì)細(xì)胞內(nèi)鈣濃度的病理性增加，這主要導(dǎo)致細(xì)胞毒性。鈣內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的致命紊亂與其它有害過程一起導(dǎo)致破壞細(xì)胞的完整性。這包括，激活了膜磷脂酶和花生四烯酸代謝并形成游離脂肪酸，通過環(huán)氧化酶和磷氧化酶反應(yīng)將它們分解成前列腺素和白三烯(炎癥介質(zhì))、產(chǎn)生大量氧游離基(對細(xì)胞膜造成極大損害)、膜滲透性的顯著增加、血管原性及細(xì)胞毒性腦水腫以及細(xì)胞基本蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的蛋白水解(通過鈣離子激發(fā))。由于所有這些機(jī)制都依賴于時間，因此在局部缺血發(fā)作和細(xì)胞死亡期間的潛伏期為約6至最多12小時，如果可能，醫(yī)療干預(yù)僅在此時間中才可能成功(Rev.Med.Interne 1994，15/5350-356)。
對新的根本治療的嘗試目前集中在特定干預(yù)病理性反應(yīng)以盡可能終止急性腦局部缺血的進(jìn)行性過程，從而永久控制局部缺血后神經(jīng)細(xì)胞的損失。目前，基本上遵循兩種策略(Stroke 1990，21/8 Suppl. 11-130-1-131)；一方面，目的是早期疏通動脈系統(tǒng)的用纖維蛋白酶如鏈激酶、尿激酶或重組組織纖溶酶原活化劑r-tPA對血栓栓塞和動脈栓塞阻滯的栓溶；另一方面，目的為在局部缺血狀態(tài)下對神經(jīng)細(xì)胞存活的細(xì)胞保護(hù)作用。
藥理學(xué)家(某些情況下是臨床醫(yī)師)已充分研究過的神經(jīng)保護(hù)治療原則包括如用鈣拮抗劑(如尼莫地平、尼卡地平、氟苯桂嗪和levemopamil)、EAA(興奮性氨基酸)拮抗劑(例如競爭性和非競爭性NMDA(N-甲基-D-天門冬氨酸)和非-NMDA拮抗劑)或神經(jīng)節(jié)甙酯(如GM-1)抑制神經(jīng)元鈣內(nèi)流；用磷脂酶、環(huán)氧化酶和磷氧化酶抑制或PAF(血小板活化因子)、血栓烷和白三烯拮抗劑阻斷花生四烯酸級聯(lián)以及清除其有害的代謝產(chǎn)物；用氧游離基清除劑(例如超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、α-生育酚、抗壞血酸、銀杏葉、別嘌呤醇、tirilazad和褪黑激素)或重金屬螯合劑(如去鐵胺)抑制脂類的過氧化(其可損傷細(xì)胞膜)；用抗水腫活性物質(zhì)(如皮質(zhì)類固醇)限制水腫擴(kuò)散；用抗凝劑(如肝素)和血小板聚集抑制劑(如ASA、噻氯匹定、前列環(huán)素近期更穩(wěn)定的合成衍生物)降低血栓傾向；用5-羥色胺1A激動劑(例如烏拉地爾和ipsapirone)、腺苷調(diào)節(jié)劑(如propentofylline和長春西汀)或神經(jīng)營養(yǎng)生長因子(例如轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β1和來自大腦的神經(jīng)營養(yǎng)因子)及其釋放的活化劑來協(xié)助內(nèi)源性保護(hù)因子(Prog. Neuro-Psychopharmacol. Biol. Psychiatry 1993，17/121-70；Clin.Neuropharmacol. 1990，13 Suppl 3S9-S25)。最大的成功歸功于用多種因素干預(yù)病理性反應(yīng)級聯(lián)，用相互增強(qiáng)的介質(zhì)系統(tǒng)網(wǎng)(Drugs 1988，35/4468-476)通過合并不同選擇活性藥物，或者更有利的是通過一種具有最寬藥理作用譜的藥物實現(xiàn)。
除了已提到的propentofylline(3-甲基-1-(5-氧代己基)-7-丙基黃嘌呤)以外，藥理學(xué)家和臨床醫(yī)師還或多或少研究了其它黃嘌呤，例如自然界廣泛存在的甲基黃嘌呤茶堿(1，3-二甲基黃嘌呤)、可可堿(3，7-二甲基黃嘌呤)和咖啡因(1，3，7-三甲基黃嘌呤)，以及合成的1，3，7-三烷基衍生物己酮可可堿(3，7-二甲基-1-(5-氧代己基)黃嘌呤；Drugs &Aging 1995，7/6；480-503)和denbufylline(1，3-二丁基-7-(2-氧代丙基)黃嘌呤)，它們在預(yù)防和治療急性局部缺血中風(fēng)中沒有明了的治療效益。相反，天然甲基黃嘌呤在臨床上事實上可導(dǎo)致噁化(Schweiz. Runds ch.Med. Prax. 1989，78/23；663-666)，因此禁忌。只有propentofylline似乎是例外，因為它獨(dú)特的藥理作用(Gen. Pharmac. 1994，25/61053-1058；Drug. Dev. Res. 1993，28/3438-444)，盡管需要足夠多數(shù)量患者的進(jìn)一步控制性臨床研究以評價該產(chǎn)品的治療價值(J.Cereb.Blood. Flow Metab. 1993，13/3；526-530)。
已經(jīng)意外發(fā)現(xiàn)，在黃嘌呤構(gòu)架的1和/或7位引入末端氨基官能化的炔醇側(cè)鏈可得到比propentofylline更優(yōu)越的化合物(在臨床上相對的實驗?zāi)Ｐ?，因此其具有更大的預(yù)防和治療腦血管疾病的治療潛能。
本發(fā)明涉及新的通式I黃嘌呤化合物，
其中1)R1和R3是通式1a或1b的炔醇?xì)埢?
R2是a)直鏈或支鏈(C1-C5)-烷基，b)(C3-C6)-環(huán)烷基或c)(C4-C8)-環(huán)烷基烷基，R4是氫原子或(C1-C3)-烷基，R5、R6和R7是互相獨(dú)立的，a)氫原子，b)(C1-C6)-烷基，c)(C3-C6)-環(huán)烷基，d)(C4-C8)-環(huán)烷基烷基，e)Ar-(C1-C2)-烷基或f)三-(C1-C4)-烷基甲硅烷基，或者R5和R6與連接其的氮原子一起形成一個4-到7-元飽和環(huán)，該環(huán)未取代或者被(C1-C4)-烷基取代1到4次，或
R5和R6與連接其的氮原子形成一個4-到7-飽和環(huán)，其中一個環(huán)-CH2-基團(tuán)被O、S、SO、SO2和NR13等某一基團(tuán)取代，R13是氫原子、(C1-C3)-烷基羰基或(C1-C4)-烷基，和該環(huán)未取代或用(C1-C4)-烷基取代1到4次，A是非支鏈或支鏈(C1-C6)-亞烷基，和Z- 是生理學(xué)上可接受的無機(jī)或有機(jī)酸的陰離子，或2)R1或R3是通式1a或1b的炔醇?xì)埢?，R3或R1的其它基團(tuán)為a)氫原子或b)R8，其中R8是直鏈或支鏈(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基或(C4-C8)-環(huán)烷基烷基，R2、R4、R5、R6、R7、A和Z-如1)所定義。
通式I的優(yōu)選化合物是其中R1和R3兩個基團(tuán)中只有一個是通式1a或1b的炔醇?xì)埢硪粋€基團(tuán)是氫原子或R8。
通式I的更優(yōu)選化合物是其中R1是通式1a或1b的炔醇?xì)埢?，并且R3是氫原子或R8。
通式I更優(yōu)選的化合物是其中R1是1a或1b的炔醇?xì)埢?，R2是直鏈(C1-C4)-烷基、環(huán)丙基或環(huán)丙基甲基，R3是a)氫原子或b)R8其中R8是直鏈或支鏈(C1-C6)-烷基、環(huán)丙基或環(huán)丙基甲基，R4是氫原子、甲基或乙基，R5、R6和R7是彼此互相獨(dú)立的氫原子、(C1-C4)-烷基、環(huán)丙基、環(huán)丙基甲基或芐基，或R5、R6與連接其的氮原子一起形成嗎啉、4-(C1-C3)-烷基羰基哌嗪、4-(C1-C2)-烷基哌嗪、哌嗪、哌啶、吡咯烷和硫嗎啉等5-到6-元飽和環(huán)。A是非支鏈(C1-C5)-亞烷基，和Z-是生理學(xué)上可接受的無機(jī)或有機(jī)酸的陰離子。
通式I更優(yōu)選的化合物是其中R1是1a或1b的炔醇?xì)埢琑2是(C1-C4)-烷基，R3是直鏈(C2-C4)-基或環(huán)丙烷基R4是氫原子或甲基，R5、R6和R7是彼此互相獨(dú)立的氫原子、(C1-C4)-烷基或芐基，或R5、R6與連接其的氮原子一起形成嗎啉、吡咯烷、哌啶、4-甲基哌嗪或4-乙酰哌嗪環(huán)，A是非支鏈(C2-C4)-亞烷基，和Z-是生理學(xué)上可接受的無機(jī)或有機(jī)酸的陰離子。
特別優(yōu)選的化合物是1-(8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基6-辛炔基)-3-甲基-，1-(5-羥基-5-甲基-8-吡咯烷-6-辛炔基)-3-甲基，3-丁基1-(5-羥基-5-甲基-8-吡咯烷-6-辛炔基)-，1-(5-二乙基氨基-2-羥基-2-甲基-3-戊炔基)-3-丙基，1-(6-二甲基氨基-3-羥基-3-甲基-4-己炔基)-3-乙基，1-(7-二乙基-4-羥基-4-甲基-5-庚炔基)-3-乙基，1-[8-(4-乙?；?1-哌嗪基)-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基]-3-甲基-7-丙基黃嘌呤及其生理學(xué)可接受的酸加成鹽和碘化N，N-二乙基-N-[4-羥基-4-甲基-8-(3-甲基-7-丙基-1-黃嘌呤基)-2-辛炔基]-N-甲基銨。
術(shù)語“(C4-C8)-環(huán)烷基烷基”的定義是被(C3-C6)-環(huán)烷基取代的烷基，碳原子的總數(shù)少于或等于8。它們包括例如，環(huán)丙基甲基至戊基，環(huán)丁基甲基至丁基，環(huán)戊基甲基至丙基及環(huán)己基甲基和乙基。“Ar”表示苯基或萘基衍生的基團(tuán)。-NR5R6的構(gòu)成成分的適宜4-到7-元飽和環(huán)是，例如，4-(C1-C4)-烷基哌嗪，氮雜環(huán)丁烷，2，5-二甲基吡咯烷，2，6-二甲基哌啶，嗎啉，全氫氮雜(azepane)，哌嗪，哌啶，吡咯烷，2，2，6，6-四甲基哌啶，硫嗎啉及其硫氧化物或砜。
適宜形成通式I生理學(xué)上可接受的酸加成鹽和季銨鹽的通式1b構(gòu)成元素是氫鹵酸如鹽酸、氫溴酸和氫碘酸、硫酸、磷酸、醋酸、乳酸、馬來酸、富馬酸、草酸、酒石酸、檸檬酸、D-葡糖酸、4-甲苯磺酸、甲磺酸、苯甲磺酸和環(huán)己基氨基磺酸或它們特有的陰離子Z-。
本發(fā)明的通式I化合物具有一個手性中心，因為通式1a或1b中炔醇?xì)埢闹俅蓟蚴宕冀Y(jié)構(gòu)，因此存在對映體形式。另外，當(dāng)R2和/或R5至R8是非對稱支鏈烷基以及/或者其中的亞烷基A是非對稱支鏈時，則存在其它非對稱碳，因此通式I化合物為非對映體形式。本發(fā)明因此不僅包括所有的立體異構(gòu)純化合物，而且也包括其混合物。
本發(fā)明另外涉及制備通式I化合物的方法。在方法A中，將通式II的3-烷基黃嘌呤或通式II化合物的鹽
其中R1如通式I所定義，在沒有縮合劑或在堿性縮合劑存在下與通式III化合物反應(yīng)，
其中X是鹵原子，優(yōu)選氯、溴或碘，或者磺酸酯或磷酸酯殘基，A、R4、R5和R6如通式I定義，得到通式Ic化合物
其中通式Ia的炔醇?xì)埢〈薘3，氫原子取代了通式I的R1，然后在沒有縮合劑或在堿性縮合劑存在下將通式Ic化合物或通式Ic化合物的鹽或者再與通式III化合物烷基化得通式Id化合物
其中通式Ia兩個相同或不同的炔醇?xì)埢〈送ㄊ絀的R1和R3，或者與通式IV化合物R8-X(IV)其中R8如通式I定義，X如通式III定義，烷基化而得通式Ie化合物
其中R8取代了R1，通式Ia的炔醇?xì)埢〈送ㄊ絀的R3，或者將通式V的1，3-二烷基黃嘌呤或通式V化合物的鹽
其中R2和R8如通式I定義，在沒有縮合劑或堿性縮合劑存在下與通式III化合物反應(yīng)而得通式Ie化合物，或者將通式VI的3，7-二烷基黃嘌呤或通式VI化合物的鹽
其中R2和R8如通式I定義，在沒有縮合劑或堿性縮合劑存在下與通式III化合物反應(yīng)而得通式If化合物
其中通式Ia化合物的炔醇?xì)埢〈薘1，R8取代了通式I的R3。
在方法B中，將通式II、V或VI化合物類似于方法A與通式VIII化合物烷基化
其中A和R4如通式I定義，X如通式III定義，得到通式IX化合物
其中R9和R10是通式IXa的兩個相同或不同基團(tuán)，
或者R9或R10是通式IXa中的一個基團(tuán)，而另一個R10或R9是氫或R8，其中，R2、A、R4和R8如通式I定義，然后將通式IX化合物在Mannich反應(yīng)條件下(ROMPP Chemie Lexikon，9th edition，Volume 4(1991)，page2632)與甲醛及通式X胺
其中R5和R6如通式I定義，在末端乙炔基上氨基甲基化為通式Ic、Id、Ie或If化合物。
在方法C中，將通式XI的1，3-或3，7-二或1，3，7-三取代的黃嘌呤
其中R11和R12是通式XIa的兩個相同或不同基團(tuán)，
或者R11或R12是通式XIa中的一個基團(tuán)，而另一個R12或R11是氫或R8，其中，R2、A、R4和R8如通式I定義，與通式XII有機(jī)金屬化合物反應(yīng)
其中R5和R6如通式I定義，M是堿金屬如鈉、鉀或優(yōu)選鋰；堿土金屬如鈣或優(yōu)選鎂，例如Grignard化合物(-Mg-鹵化物)形式；或者重金屬如銫、銅或銀；將羰基還原炔基化而得通式Ic、Id、Ie、If或Ig化合物
其中通式Ia化合物的炔醇?xì)埢〈薘1，氫原子取代代了通式I的R3。
在方法D中，將其中R11和/或R12為通式XIa的基團(tuán)的通式XI黃嘌呤與通式XIII的金屬乙炔化物進(jìn)行Nef型反應(yīng)(ROMPP Chemie Lexikon，9thedition，Volume 4(1991)，page 2954)HC≡C-M(XIII)其中M如通式XII定義，或者與末端保護(hù)的通式XIV金屬乙炔化物反應(yīng)Ra-C≡C-M (XIV)其中M如通式XII定義，Ra是隨后易于消除的離去基團(tuán)，例如三甲硅烷基(TMS)，其可通過氟化物催化消除，將羰基乙炔化而得通式IX化合物，其中R9和R10是通式IXa的基團(tuán)，然后將所得化合物IX通過Mannich反應(yīng)與甲醛和通式X胺按照類似方法B氨基甲基化而得通式Ic、Id、Ie、If或Ig化合物。
在方法E中，將方法A至D制備而得的通式Ic、Id、Ie或If化合物或者方法C或D制備而得的通式Ig化合物(其中R5和/或R6為氫原子)與(C1-C6)烷烴、(C3-C6)環(huán)烷烴、(C4-C8)環(huán)烷基烷烴或Ar-(C1-C2)烷烴的羰基衍生物(醛或酮)進(jìn)行一次或兩次還原烷基化。
在方法F中，用生理學(xué)可接受的無機(jī)酸或有機(jī)酸HZ將方法A至E制備的化合物轉(zhuǎn)化為通式I的酸加成鹽，其中R1和/或R3是通式Ib的炔醇?xì)埢?，其中R7是氫原子，R2如通式I定義。
在方法G中，用通式VII烷化劑R7-Z(VII)其中R7如除氫以外的通式I所定義，Z是通式III中的X，將方法A至E制備的化合物轉(zhuǎn)化為通式I的季銨鹽，其中R1和/或R3是通式Ib的炔醇?xì)埢琑2如通式I定義。
在方法H中，將方法A至G中制備的化合物通過色譜法或分級結(jié)晶法分離成純立體異構(gòu)體。
用作方法A至D起始物的通式II、V、VI或XI，通式III、IV、VII或VIII的烷化劑；通式XII、XIII或XIV的有機(jī)金屬化合物以及通式X的胺都是已知的或可通過已知方法制備。
因此，具有堿性取代基的通式III炔醇可通過例如有機(jī)金屬合成反應(yīng)將無空間位阻的通式鹵代-A-CO-R4的鹵代醛或鹵代酮與通式XII(R5R6N-CH2-C≡C-M)的2-丙炔胺金屬(優(yōu)選以鋰或鹵代鎂(Griganrd)化合物的形式)在標(biāo)準(zhǔn)條件下(詳見方法C和D)進(jìn)行羰基官能團(tuán)的還原炔基化反應(yīng)。類似地將鹵代醛或鹵代酮與通式XIII(HC≡C-M)或XIV(Ra-C≡C-M)反應(yīng)，消除XIV的保護(hù)基Ra后而得通式VIII的炔醇。
通式XII有機(jī)金屬化合物上的2-丙炔胺(R5R6N-CH2-C≡C-M)可從2-丙炔溴化物和通式X胺直接進(jìn)行鹵素/胺交換合成或者通過間接途徑經(jīng)如下反應(yīng)制備的中間體金屬氨基化物合成，該反應(yīng)公開在Tetrahedron 1992，48/306231-6244中
一取代或二取代的黃嘌呤衍生物II或Ic、Ig、V、VI和IX與通式III、IV或VIII相關(guān)試劑的反應(yīng)通常在分散劑或溶劑中進(jìn)行，該分散劑或溶劑對反應(yīng)物呈惰性。特別適合的有兩級惰性溶劑，例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、四甲基脲、六甲基磷酰胺或二甲基亞砜；但是，也可使用甲酰胺、乙腈、丙酮、丁酮或醇如甲醇、乙二醇及其一和二(C1-C4)烷基醚、乙醇、丙醇、異丙醇及各種丁醇；烴如苯、甲苯或二甲苯；鹵代烴如二氯甲烷或氯仿；吡啶以及所述溶劑的混合物或者其與水的混合物。
該反應(yīng)可便利地在堿性縮合劑存在下反應(yīng)。適當(dāng)?shù)目s合劑例如有堿金屬或堿土金屬的氫氧化物、羧酸鹽、氫化物、醇化物以及有機(jī)堿如三烷胺如三乙胺或三丁胺、季銨鹽或氫氧化磷翁鹽以及連接有選擇性取代銨鹽或磷翁鹽基團(tuán)的交聯(lián)樹脂。但是，黃嘌呤衍生物也可以其分離制備的鹽形式直接使用，例如堿金屬鹽、堿土金屬鹽或選擇性取代的銨鹽或磷翁鹽。另外，黃嘌呤化合物可在上述無機(jī)縮合劑存在下以及以其堿金屬鹽或堿土金屬鹽形式易于烷化，借助于相轉(zhuǎn)移催化劑如季胺、季銨鹽或磷翁鹽或者冠醚，優(yōu)選在雙相系統(tǒng)于相轉(zhuǎn)移催化的條件下進(jìn)行。適當(dāng)?shù)南噢D(zhuǎn)移催化劑(大多數(shù)可購得)有四-(C1-C4)-烷基和甲基三辛銨和磷、甲基、肉豆蔻基、苯基和芐基-三-(C1-C4)-烷基和十六烷基三甲基銨或(C1-C12)-烷基和芐基三苯基磷翁鹽，更有效的化合物是那些具有更對稱結(jié)構(gòu)的更大陽離子的化合物。反應(yīng)溫度通常在0℃以及所用反應(yīng)介質(zhì)的沸點(diǎn)之間，優(yōu)選20℃和130℃之間，可在適當(dāng)升高或降低壓力下，但是通常在大氣壓下，此時反應(yīng)時間可少于1小時至數(shù)小時。
將炔醇側(cè)鏈為末端一級(R5和R6＝H)或二級(R5或R6＝H)氨基的通式Ic至Ig化合物的選擇性還原烷化為仲胺或叔胺可通過與文獻(xiàn)中已知的(C1-C6)烷烴、(C3-C6)環(huán)烷烴、(C4-C8)環(huán)烷基烷烴或Ar-(C1-C2)烷烴的一種氧代衍生物(醛或酮)在適當(dāng)還原劑存在下反應(yīng)而得。從氧代化合物和胺作為中間體形成的甲亞胺化合物可用如甲酸及其衍生物還原，但是，優(yōu)選用復(fù)合金屬氫化物如丙氨酸鋰、硼酸鋰或鈉，特別優(yōu)選氰硼化鈉進(jìn)行氫化反應(yīng)。這是在對反應(yīng)物呈惰性的分散劑或溶劑中進(jìn)行的，例如醚如乙醚、二噁烷或四氫呋喃；低級醇，優(yōu)選甲醇或乙醇；水或與其的混合物，反應(yīng)溫度為20℃及反應(yīng)混合物的沸點(diǎn)之間。
用HZ酸將黃嘌呤Ic至Ig轉(zhuǎn)化為生理學(xué)可接受的酸加成鹽是現(xiàn)有技術(shù)已知的。從黃嘌呤Ic至Ig通過與通式VII試劑優(yōu)選烷基鹵化物形式(R7鹵素)，特別是碘化物R7I或二烷基硫酸鹽(R72SO4)進(jìn)行烷基化而制備生理學(xué)可接受的季銨鹽可在惰性分散劑或溶劑中方便進(jìn)行，例如二(C1-C4)烷基醚、環(huán)醚、芳香烴或鹵代烴或酮(如丙酮)或者這些溶劑的混合物或者與二級惰性溶劑(如二甲基甲酰胺)在20℃至相關(guān)反應(yīng)介質(zhì)的沸點(diǎn)之間進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)完成相應(yīng)數(shù)小時。由此通常得到季鹽的晶體形式。如果需要，隨后可借助陰離子交換劑將其陰離子Z-轉(zhuǎn)化為不同形式。
對IX化合物末端乙炔基酸性CH的Mannich三元氨基甲基縮合反應(yīng)(Weygand/HilgetagOrganisch-chmische Exper imentierkunst，[Experiments in organic chemistry] 4thedition，1970，pages 990-993)可與銨、通式X的伯胺或優(yōu)選仲胺在作為羰基成分的甲醛(以水溶液或便利的多聚甲醛固態(tài)形式)存在下于堿和酸催化下進(jìn)行。但是，優(yōu)選酸催化方法，其中胺X以其鹽形式反應(yīng)，例如鹽酸鹽或乙酸鹽。通常可加入催化量的金屬鹽如鋅(II)、鐵(III)或者優(yōu)選氯化銅(I)(J.Med.Chem.1990，333182-3189)。
一般地，用低級醇、二-(C1-C4)烷基醚或者優(yōu)選環(huán)醚，特別是二噁烷作為反應(yīng)介質(zhì)。反應(yīng)溫度通常在20℃和反應(yīng)混合物的沸點(diǎn)之間，優(yōu)選30℃和70℃之間，通常反應(yīng)時間為數(shù)小時。
在方法C和D中作為有機(jī)金屬反應(yīng)起始物的通式XI的3-烷基化一或二氧代烷基黃嘌呤大多數(shù)是已知的(參見D-A 23 30742和D-A 24 02908)，或者易于從通式II和V或VI的一或二烷基黃嘌呤及通式鹵素-A-CO-R4的鹵代醛或鹵代酮(也適于以其開鏈或環(huán)縮醛或縮酮形式存在)在前述烷化條件下制備。另外，在R12位為氫原子、R11位為通式XIa氧烷基的化合物XI易于通過1-氧代烷基-3，7-二烷基黃嘌呤按照WO87/00523中所述的方法從另一途徑獲得，所述黃嘌呤的7位烷基是易于消除的離去基團(tuán)，例如芐基，其可通過還原除去，或者甲氧基甲基、乙氧基甲基、丙氧基甲基或丁氧基甲基，其可通過水解消除。
在適于羰基炔化的通式XII、XIII或XIV有機(jī)金屬化合物中，鋰和鹵代鎂(Grignard)衍生物占據(jù)優(yōu)選位置，因為其易得且易操作。因此，前述的通式R5R6N-CH2-C≡CH的2-丙炔基胺以及一端保護(hù)起來的Ra-C≡CH乙炔化物，優(yōu)選乙炔三甲硅烷可與(C1-C4)烷基鋰化合物優(yōu)選丁基鋰在一種下述溶劑中(主要為無水四氫呋喃)于-50℃和-80℃之間的低溫進(jìn)行金屬化反應(yīng)，或者與(C1-C4)烷基鹵化鎂如甲基或以及氯化鎂或溴化鎂在低沸點(diǎn)醚如乙醚中于其沸點(diǎn)定量反應(yīng)而得通式XII或XIV化合物，不必進(jìn)行中間體分離將其與羰基化合物XI反應(yīng)。可以且優(yōu)于使用通式XIII化合物(以穩(wěn)定乙二胺復(fù)合物形式的乙炔化鋰購得)作為試劑，建議加入至少化學(xué)劑量的無水氯化銫(III)以增加反應(yīng)性(Tetrahedron letters 1984，25/384233-4236)。高度親核的有機(jī)金屬化合物極易水解和氧化；因此需要安全操作，嚴(yán)格避免潮濕，在適當(dāng)情況下使用保護(hù)氣。
炔化反應(yīng)的常規(guī)溶劑或分散劑主要是那些適用于制備有機(jī)金屬化合物的溶劑或分散劑。特別適用的是具有一個或多個醚氧原子的醚，例如乙醚、二丙醚、二異丙醚或二丁醚、1，2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃、二噁烷、四氫吡喃、呋喃和茴香醚脂肪烴或芳香烴如石油醚、環(huán)己烷、苯、甲苯、二甲苯、二乙苯和四氫萘；但是，也可適用季胺如三乙胺，或者二級惰性溶劑，例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、六甲基三磷酰胺和二甲基亞砜以及所述溶劑的混合物。
炔化反應(yīng)的溫度在-40℃和+100℃之間，優(yōu)選-20℃和+70℃之間，或者在無外部冷卻的室溫下，優(yōu)選所用的有機(jī)金屬化合物稍過量。反應(yīng)時間通常為幾分鐘至數(shù)小時。所形成的醇化物優(yōu)選用水、氯化銨水溶液或稀鹽酸或乙酸降解。
乙炔基保護(hù)起來的并從羰基化合物XI通過與三甲基甲硅烷乙炔化鋰(XIV)反應(yīng)而得的通式IX中間體化合物的烷醇以及本發(fā)明的N-三烷基甲硅烷化烷醇側(cè)鏈的通式I化合物的脫甲硅基作用可通過在催化量氟化鉀存在下通過甲醇分解便利進(jìn)行，該反應(yīng)在幾小時內(nèi)于20℃和甲醇沸點(diǎn)之間的溫度定量進(jìn)行。
本發(fā)明的化合物I可從空間相同的通式III或VIII(II、IV、V、VI、VII、X和/或XI也可)的起始物和通式IX的中間體化合物開始制備成立體異構(gòu)純形式，或者在方法C和D中通過從前手性羰基化合物XI與需要對映選擇(在手性助劑存在下通過非對映誘導(dǎo))的有機(jī)金屬化合物XII、XIII或XIV形成炔醇而制備成立體異構(gòu)純形式。
但是，優(yōu)選通過已知方法隨后將立體異構(gòu)形式分離。與對映體相比，非對映體具有不同的物理和化學(xué)特性，因此分離混合物并不難，例如通過分解結(jié)晶和色譜法。相比而言，物理消旋體拆分成對映體形式(對映體)需要另外的方法；因此，分解結(jié)晶只有在與光學(xué)活性酸HZ形成非對映體鹽后才可行，色譜分離僅在使用手性穩(wěn)定相(其對對映體顯示出不同的空間親合力)時是優(yōu)選的。
通式IX的炔醇不僅是合成本發(fā)明通式I化合物的有用中間體，而且另外其與通式I的終產(chǎn)物具有相同類型的藥理作用，盡管它們更不溶于水。
由于它們有用的藥理特性，通式I化合物適用作藥物中的活性成分，特別是可有效治療和預(yù)防腦血管疾病的藥物，這些疾病由缺血如中風(fēng)、短暫性缺血性發(fā)作(TIA)、多發(fā)梗塞性癡呆(multiinfarct dementia)、血管和退化(早老性癡呆)混合型癡呆、脊髓損傷、由于頭部受傷導(dǎo)致的大腦創(chuàng)傷、心搏停止后的神經(jīng)損傷、(新生兒)窒息和復(fù)蘇以及在腦部主要動脈區(qū)的血管外科手術(shù)(例如旁路手術(shù))。通式I化合物可單獨(dú)給藥，例如以微囊形式和彼此混合物形式，或者與適當(dāng)賦形劑結(jié)合給藥。
本發(fā)明還涉及含有至少一種通式I化合物作為活性組分的藥物。
本發(fā)明另外一方面涉及在目前所有治療腦血管疾病(Schweiz. med.Wochenschr. 1994，124/452005-2012)中使用本發(fā)明藥物，所述治療方法如抑制局部缺血發(fā)作的首要防止作用、局部缺血發(fā)作后限制組織梗塞的緊急處理以及局部缺血發(fā)作后降低復(fù)發(fā)率的二級預(yù)防措施；另一方面，本發(fā)明涉及使用藥物組合物形式的藥劑，特別是非腸道和口服給藥，需要時直腸或透皮給藥。
適當(dāng)?shù)墓腆w或液體藥物形式有，例如顆粒、粉末、片劑、包衣片、(微)囊、糖漿劑、乳劑、懸浮劑、凝膠、延長釋放活性物質(zhì)的產(chǎn)品、栓劑、可釋放活性物質(zhì)的貼劑、氣霧劑、滴劑，特別是安瓿形式的注射用溶液或連續(xù)輸注的注射瓶；制備中通常使用的助劑如賦形劑、崩解劑、粘合劑、包衣劑、膨脹劑、助流劑或潤滑劑、矯味劑、甜味劑或增溶劑。常用的助劑例子有碳酸鎂、二氧化鈦、乳糖、甘露糖醇及其它糖、滑石、乳糖、明膠、淀粉、維生素、纖維素及其衍生物、動植物油、聚乙二醇和溶劑如滅菌水、生理鹽水、乙醇、甘油及其它多元醇。
優(yōu)選將藥物產(chǎn)品制備并以劑量單位形式給藥，每個單位含有特定劑量的通式I化合物作為活性成分。當(dāng)是固體劑量單位如片劑、膠囊和栓劑時，劑量可以至1000毫克，但是優(yōu)選100至600毫克；當(dāng)為安瓿內(nèi)的注射溶液時為300毫克，優(yōu)選20至200毫克。
治療成年患者的日劑量取決于通式I化合物在人體中的活性及危及生命疾病的嚴(yán)重性，口服給藥時活性成分可以是100至5000毫克，優(yōu)選300至3000毫克，靜脈內(nèi)給藥時為30至3000毫克，優(yōu)選50至2000毫克?？梢詥我粍┝繂挝恍问酵ㄟ^一次給藥完成日劑量或者作為較少劑量單位在特定時間間隔通過多次分劑量給藥。連續(xù)輸注的日劑量是100至5000毫克，優(yōu)選500至2000毫克，相應(yīng)的輸注速率為0.1至3毫克/公斤體重/小時，優(yōu)選0.3至1毫克/公斤體重/小時。但是，在某些情況下，所有給藥形式高或低一些的日劑量也是可行的。
通式I化合物也可與其它適當(dāng)活性物質(zhì)一起給藥，特別是與那些可以控制急性腦局部缺血病理反應(yīng)的藥物；例如纖維蛋白溶酶、鈣拮抗劑、EAA(興奮性氨基酸)拮抗劑、神經(jīng)節(jié)甙酯、磷脂酶、環(huán)氧化酶和脂氧化酶抑制劑、PAF(血小板活化因子)、血栓烷和白三烯拮抗劑、氧自由基清除劑、重金屬螯合劑、抗水腫活性物質(zhì)、抗凝劑、血小板應(yīng)用抑制劑、5-羥色胺1A激動劑、腺苷調(diào)節(jié)劑或神經(jīng)營養(yǎng)生長因子及其釋放激動劑；或者在生產(chǎn)藥劑時與它們配制在一起。
通過以下代表性制備實施例詳細(xì)闡明表1所列結(jié)構(gòu)特征的通式I化合物的合成。表2列出了通式IX化合物。制備而得的所有中間體及終產(chǎn)物可通過1H-NMR光譜和元素分析或質(zhì)譜確證。實施例11-(8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽按照方法D和FD1)1-(5-羥基-5-甲基-6-庚炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤排濕并于室溫攪拌下將153.2克(0.5摩爾)3-甲基-1-(5-氧代己基)-7-丙基黃嘌呤的750毫升的二噁烷溶液滴加到75.5克(0.82摩爾)乙炔化鋰與乙二胺復(fù)合物的500毫升二噁烷懸浮液中。攪拌并于70℃加熱6小時完成此期間開始的微放熱反應(yīng)。然后于室溫加入水，減壓下盡可能蒸餾掉有機(jī)溶劑，用氯仿萃取水相，用硫酸鈉干燥萃取物，然后減壓濃縮，殘余物通過硅膠柱過濾純化(氯仿為洗脫液)，得到150.4克(91％理論值)油狀產(chǎn)物(逐漸固化)，從乙酸乙酯(沸點(diǎn)加入石油醚)重結(jié)晶。
產(chǎn)率136.8克(82％理論值)；熔點(diǎn)98℃C17H24N4O3(MW＝332.41g/mol)分析計算值 C61.42％ H7.28％ N16.86％實測值 C61.48％ H7.37％ N16.68％D2)1-(8-二乙基基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基7-丙基黃嘌呤在250毫升無水二噁烷中將16.6克(50毫摩爾)步驟D1)的中間體化合物、1.8克(60毫摩爾)多聚甲醛、7.3克(0.1摩爾)二乙胺和0.8克氯化鋅(II)于回流下攪拌5小時。然后減壓蒸餾掉溶劑，將紅色油狀殘余物通過硅膠柱過濾純化，氯仿/甲醇(19∶1)作為洗脫液。產(chǎn)率12.6克(60％理論值)；淡黃色油C22H35N5O3(MW＝417.56g/mol)。F3)1-(8-二乙基基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽為了成鹽，將12.6克(30毫摩爾)步驟D2)三丁堿溶于30毫升1N鹽酸中，于減壓下蒸發(fā)至干，將固體殘余物在有泵空氣下干燥過夜，用熱乙醇回收，用活性炭將溶液脫色，趁熱過濾，在沸點(diǎn)加入二異丙醚直至混濁，冷卻下放置即結(jié)晶出鹽酸鹽。
產(chǎn)率11.5克(84％理論值)；熔點(diǎn)132℃C22H36ClN5O3(MW＝454.03g/mol)分析
計算值 C58.20％H 7.99％ Cl7.81％ N15.43％實測值 C58.12％H 8.24％ Cl7.84％ N15.37％通過方法C和FC1)N，N-二乙基-2-丙炔胺將100毫升(0.16摩爾)的1.6M正丁基鋰的正己烷溶液和100毫升四氫呋喃混合物攪拌下冷卻至-78℃，在此溫度下滴加入11.7克(0.16摩爾)二乙胺；然后使混合物升溫至室溫，攪拌1小時，再冷卻至-20℃，滴加入9.04克(76毫摩爾)2-丙炔溴化物的50毫升四氫呋喃溶液。將反應(yīng)混合物于室溫放置過夜，然后攪拌到冷磷酸鹽緩沖液中，用氯仿萃取，將萃取物用碳酸鈉干燥并濃縮，將殘余物從柱中分部蒸餾。
產(chǎn)率6.2克(73％理論值)；沸點(diǎn)117℃(文獻(xiàn)119℃)C7H13N(MW＝111.19g/mol)C2)1-(8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤在-60℃和-65℃之間，將32.4毫升(52毫摩爾)1.6M正丁基鋰的正己烷溶液在30分鐘內(nèi)滴加到溶于40毫升四氫呋喃的步驟C1)所得的5.8克(52毫摩爾)N，N-二乙基-2-丙炔胺中。將混合物與-70℃攪拌1小時，然后升溫至室溫。經(jīng)20分鐘滴加入12.3克(40毫摩爾)3-甲基-1-(5-氧代己基)-7-丙基黃嘌呤的60毫升四氫呋喃溶液，在此期間反應(yīng)混合物的溫度升至35℃。于室溫攪拌1小時后，加入100毫升冷1N鹽酸，振搖數(shù)次用二氯甲烷萃取混合物，用碳酸鈉堿化水相，反應(yīng)產(chǎn)物用二氯甲烷萃取，用硫酸鈉干燥后減壓濃縮。將油狀殘余物通過硅膠柱過濾純化，氯仿/甲醇(19∶1)為洗脫液。
產(chǎn)率13.9克(83％理論值)；無色油C22H35N5O3(MW＝417.56g/mol)F3)1-(8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽按照方法D將步驟C2)的13.9克(33.3毫摩爾)堿轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽，在從乙醇/二異丙醚重結(jié)晶中可以不使用活性炭。
產(chǎn)率13.8克(91％理論值)；熔點(diǎn)132℃C22H36ClN5O3(MW＝454.03g/mol)計算值 C 58.20％ H 7.99％ Cl 7.81％ N 15.43％實測值 C 58.02％ H 8.26％ Cl 7.94％ N 15.27％通過方法B和FB1)1-氯-5-羥基-5-甲基-6-庚炔將200克(2.17摩爾)的乙炔化鋰的乙二胺混合物懸浮在800毫升無水二噁烷中，在劇烈攪拌并于冰中冷卻下快速滴加入269.2克(2.0摩爾)1-氯5-己酮，在此期間溫度上升至48℃。使該放熱反應(yīng)平息，在沒有外部冷卻下攪拌3小時小心加入500毫升水，過濾混合物，減壓蒸餾掉大多數(shù)二噁烷，水相用氯仿萃取，用硫酸鈉干燥萃取物，將殘余物分級蒸餾。
產(chǎn)率190.2克(59％理論值)；沸點(diǎn)(8mbar)87-88℃C8H13C10(MW＝160.65g/mol)B2)1-(5-羥基-5-甲基-6-庚炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤將6.25克(30毫摩爾)3-甲基-7-丙基黃嘌呤、4.8克(30毫摩爾)步驟B1)的氯代炔醇和4.15克(30毫摩爾)碳酸鉀的150毫升二甲基甲酰胺混合物在130℃攪拌3小時，然后趁熱過濾并減壓濃縮。用氯仿回收殘余物，先用1N氫氧化鈉溶液相對，然后用水洗至中性，用硫酸鈉干燥，減壓蒸餾掉溶劑，將產(chǎn)物從乙酸乙酯(沸點(diǎn)加入石油醚)中重結(jié)晶。
產(chǎn)率3.6克(36％理論值)；熔點(diǎn)98℃C17H24N4O3(MW＝332.41g/mol)計算值 C 61.42％ H 7.28％ N 16.86％實測值 C 61.63％ H 7.41％ N 16.87％這種中間體化合物和實施例1D1)的產(chǎn)物相同，通過Mannich反應(yīng)用多聚甲醛和二乙胺以及成鹽反應(yīng)(實施例1D2)和1F3))轉(zhuǎn)化為終產(chǎn)物。通過方法A和FA1)1-氯-8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔-78℃時將12.37毫升(19.8毫摩爾)1.6M的正丁基鋰的正己烷溶液緩慢滴加入2.0克(18毫摩爾)N，N-二乙基-2-丙炔胺(實施例1C1))的50毫升四氫呋喃溶液中。1小時后將混合物升溫至室溫，加入2.42克(18毫摩爾)1-氯-5-己酮。室溫攪拌1小時后，用2N鹽酸調(diào)節(jié)PH至7并分配在5％濃度的碳酸氫鈉溶液和二氯甲烷中。用硫酸鎂干燥有機(jī)相，減壓除去溶劑。產(chǎn)率4.38(99％理論值)；油狀產(chǎn)物C13H24CINO(MW＝245.83g/mol)；1H-NMR(DMSO-d6，200 MHz)δ＝0.97(t，6H，N(CH2CH3)2)；1.33(s，3H，CH3)；1.40-1.85(m，6H，CH2)；2.45(q，4H，N(CH2CH3)2)；3.33(s，2H，NCH2C≡C)；3.63(t，2H，CH2Cl)；5.12(s，1H，OH)可以不經(jīng)進(jìn)一步純化將該物質(zhì)直接用于步驟A2)的烷化反應(yīng)。A2)1-(8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤在60℃將2.12克(15.3毫摩爾)碳酸鉀加到2.0克(9.6毫摩爾)3-甲基-7-丙基黃嘌呤的60毫升二甲基甲酰胺溶液中，將混合物于60℃攪拌1小時。然后滴加入步驟A1)的3.07克(12.5毫摩爾)1-氯-8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔，將混合物于80℃攪拌12.5小時。然后冷卻至室溫，加入水，用叔丁基甲醚萃取三次。有機(jī)相用硫酸鎂干燥，減壓濃縮，通過閃式色譜純化，二氯甲烷/甲醇＝19/1。
產(chǎn)率2.29克(57％理論值)；黃色油C22H35N5O3(MW＝417.56g/mol)此物質(zhì)與實施例1D2)和1C2)制備的產(chǎn)物相同，將其按照類似于實施例1F3)的方法轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽。實施例1a(+)-1-(8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽實施例1b(-)-1-(8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽方法H和F通過高壓液相色譜(HPLC)柱(250×4.6mm)(手性支持物質(zhì)CSPChiralpak AD)將實施例1方法A、B、C或D制備的外消旋1-(8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽分離成對映體純堿。加有0.1％二乙胺正己烷/2-丙醇(85+15)洗脫液。
C22H35N5O3(MW＝417.56g/mol)(+)-對映體保留時間11.61分鐘；光學(xué)純100％(-)-對映體保留時間14.46分鐘；光學(xué)純100％通過實施例1F3)的方法C將對映體堿轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽。
C22H36ClN5O3(MW＝454.03g/mol)(+)-對映體1a產(chǎn)率82％；沸點(diǎn)86℃(-)-對映體1b產(chǎn)率70％；沸點(diǎn)89℃實施例2碘化N，N-二乙基-N-[4-羥基-4-甲基-8-(3-甲基-7-丙基-黃嘌呤-1-基)-2-辛炔基1-N-甲基銨(通過方法G)將1克(2.4毫摩爾)實施例1A2)、1C2)或1D2)制備得的1-(8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤引入30毫升乙醚中，加入425毫克(3.0毫摩爾)甲基碘，將混合物于室溫攪拌20小時。然后再加入212毫克(1.5毫摩爾)甲基碘，回流攪拌混合物2小時。抽吸過濾所得晶體，用乙醚洗滌并干燥。
產(chǎn)率813毫克(60％理論值)；熔點(diǎn)160℃C23H38IN5O3(MW＝559.51g/mol)；質(zhì)譜432(100％，M+)。實施例31-(6-二甲基氨基-3-羥基-3-甲基-4-己炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤富馬酸鹽通過方法C和FC1)1-(6-二甲基氨基-3-羥基-3-甲基-4-己炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤將4.32克(52毫摩爾)N，N-二甲基-2-丙炔基胺、32.4毫升(52毫摩爾)正丁基鋰的1.6M正己烷溶液和11.1克(40毫摩爾)3-甲基-1-(3-氧代丁基)-7-丙基黃嘌呤在四氫呋喃中反應(yīng)并按照類似于實施例1C2)的方法操作，但是使用氯仿代替二氯甲烷作為萃取劑。
產(chǎn)率13.2克(91％理論值)；油狀產(chǎn)物C18H27N5O3(MW＝361.45g/mol)F2)1-(6-二甲基氨基-3-羥基-3-甲基-4-己炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤富馬酸鹽為了將堿轉(zhuǎn)化為富馬酸鹽，將13.2克(36.5毫摩爾)的步驟C1)油狀物用50毫升乙醇回收，加入4.24克(36.5毫摩爾)富馬酸的100毫升乙醇熱溶液。然后將溶液濃縮至開始混濁，沸騰結(jié)晶得鹽。
產(chǎn)率14.1克(81％理論值)；熔點(diǎn)170℃C22H31N5O7(MW＝477.53g/mol)通過方法D和FD1)1-(3-羥基-3-甲基－4-戊炔基)-3-甲基－7-丙基黃嘌呤50℃時，將55.7克(0.2摩爾)3-甲基-1-(3-氧代丁基)-7-丙基黃嘌呤的200毫升二噁烷和甲苯混合物溶液在45分鐘內(nèi)滴加到攪拌下的36.8克(0.4摩爾)乙炔化鋰的乙二胺復(fù)合物和98.6克(0.4摩爾)無水氯化銫(III)的500毫升無水二噁烷和甲苯混合物懸浮液中。然后在50℃攪拌混合物7小時，冷卻，加入冷水后，用2N鹽酸酸化，用氯仿萃取，萃取物用水洗滌，以硫酸鈉干燥，減壓蒸發(fā)，殘余物通過硅膠柱過濾純化，氯仿/甲醇(50∶1)為洗脫液，得到35.0克(58％理論值)固體，將其是從乙醇中重結(jié)晶(損失很多)。
產(chǎn)率18.0克(30％理論值)；熔點(diǎn)149℃C15H20N4O3(MW＝304.36g/mol)計算值 C 59.20％ H 6.62％ N 18.41％實測值 C 58.72％ H 6.51％ N 18.33％通過Mannich反應(yīng)用多聚甲醛和鹽酸二甲胺按照類似于1D2)的方法然后按照實施例3F2)的成鹽反應(yīng)將此中間體混合物轉(zhuǎn)化為終產(chǎn)物。實施例41-(5-羥基-5-甲基-8-吡咯烷-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤富馬酸鹽(通過方法B或D和F)將實施例1D1)或如實施例1B2)制備的9.97克(30毫摩爾)中間體化合物1-(5-羥基-5-甲基-8-吡咯烷-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤、1.02克(34毫摩爾)多聚甲醛、2.05克(34毫摩爾)冰醋酸、2.42克(34毫摩爾)吡咯烷和0.6克氯化銅(I)的150毫升無水二噁烷混合物于45℃攪拌18小時，然后減壓濃縮，用二氯甲烷回收，用70毫升1N鹽酸萃取三次，每次用碳酸鈉將酸性萃取物堿化，通過與二氯甲烷振搖萃取產(chǎn)物。用硫酸鈉干燥，減壓蒸發(fā)而得Mannich堿(C22H33N5O3∶MW＝415.55g/mol)(油狀粗產(chǎn)物，基本上定量產(chǎn)出)，按照類似于實施例3F2)的方法用3.5克(30毫摩爾)富馬酸將其轉(zhuǎn)化為富馬酸鹽。
產(chǎn)率12.4克(78％理論值)；熔點(diǎn)151℃C26H37N5O7(MW＝531.62g/mol)計算值 C 58.74％ H 7.02％ N 13.17％實測值 C 58.18％ H 6.81％ N 12.68％實施例51-(9-二乙基氨基-6-羥基-6-甲基-7-壬炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽(方法D和F)D1)1-(6-羥基-6-甲基-7-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤在-60℃至-70℃于氮?dú)夥障聦?6.2毫升(26毫摩爾)1.6M正丁基鋰的正己烷溶液在45分鐘內(nèi)滴加到2.55克(26毫摩爾)乙炔基三甲基甲硅烷的25毫升四氫呋喃溶液中(排濕且攪拌)，將混合物于-70℃攪拌1小時，升溫至室溫，在20分鐘內(nèi)滴加入6.4克(20毫摩爾)3-甲基-1-(6-氧代己基)-7-丙基黃嘌呤的20毫升四氫呋喃溶液。然后在室溫下攪拌混合物4小時，加入50毫升冷1N鹽酸，用氯仿萃取后，用硫酸鈉干燥有機(jī)相，減壓蒸發(fā)，將油狀殘余物通過硅膠柱過濾純化，氯仿/甲醇(10∶1)為洗脫液，得到6.8克(81％理論值)乙炔基烷醇三甲基甲硅烷化的產(chǎn)物，C21H34N4O3Si(MW＝418.62g/mol；熔點(diǎn)91℃)。
為了脫甲硅烷化，將4.19克(10毫摩爾)該產(chǎn)物的50毫升甲醇溶液在加入58.1毫克(1毫摩爾)氟化鉀后于回流下攪拌2小時。然后減壓濃縮，用氯仿回收，用水洗滌，以硫酸鈉干燥，減壓除去溶劑。長期放置后油狀殘余物完全結(jié)晶，通過與石油醚攪拌萃取。
產(chǎn)率3.2克(92％理論值)；熔點(diǎn)79℃C18H26N4O3(MW＝346.44g/mol)計算值 C 62.41％ H 7.56％ N 16.17％實測值 C 62.23％ H 7.41％ N 16.41％也可按照類似于實施例1D1)和實施例3D1)通過氯化銫(III)協(xié)助的反應(yīng)通過將氧代烷基黃嘌呤與乙炔化鋰反應(yīng)而制備此中間體化合物，產(chǎn)率明顯低30至50％，因為在這種特殊情況下，乙炔分子特別易于在兩端與酮反應(yīng)形成副產(chǎn)物炔二醇C34H50N8O6(MW＝666.84g/mol；熔點(diǎn)129℃)，對所需單取代產(chǎn)物的分離必定會導(dǎo)致很大損失。D2)1-(9-二乙基氮基-6-羥基-6-甲基-7-壬炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤按照類似于實施例4用2.49克(34毫摩爾)二乙胺代替吡咯烷使10.4克(30毫摩爾)步驟D1)制備的中間體化合物進(jìn)行Mannich反應(yīng)。將所得油狀粗產(chǎn)物通過硅膠柱過濾純化，氯仿/甲醇(10∶1)為洗脫液。
產(chǎn)率8.3克(64％理論值)；油狀產(chǎn)物C23H37N5O3(MW＝431.59g/mol)F3)1-(9-二乙基氮基-6-羥基-6-甲基-7-壬炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽將8.3克(19.2毫摩爾)步驟D2)的Mannich堿溶于甲醇，加入化學(xué)劑量的甲醇鹽酸溶液。減壓蒸餾除去溶劑，高度真空下干燥殘余物，用無水乙醚消化抽吸濾除固體。
產(chǎn)率8.8克(98％理論值)；熔點(diǎn)約100℃(吸濕)C23H38ClN5O3(MW＝468.05g/mol)實施例61-(6-二丁基氨基-3-羥基-3-甲基-4-己炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽(通過方法C和F)C1)1-(6-二丁基氨基-3-羥基-3-甲基-4-己炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤-65℃時，將6.73毫升(10.77毫摩爾)15％濃度的丁基鋰的正己烷溶液緩慢滴加到2.09毫升(10.77毫摩爾)N，N-二丁基-2-丙炔基胺的20毫升四氫呋喃溶液中。在-60℃至-65℃將混合物攪拌1小時，升溫至室溫，加入2.0克(7.18毫摩爾)3-甲基-1-(3-氧代丁基)-7-丙基黃嘌呤的30毫升四氫呋喃溶液。30分鐘后完成該微放熱反應(yīng)。用1N鹽酸將混合物PH值調(diào)節(jié)至5-6，分配在二氯甲烷和水之間。有機(jī)相用水洗滌，用硫酸鎂干燥，減壓濃縮。通過閃式色譜純化油狀粗產(chǎn)物，二氯甲烷/甲醇＝19/0.75為洗脫液。
產(chǎn)率2.37克(74％理論值)；熔點(diǎn)73℃C24H38N5O3(MW＝44 5.61g/mol)F2)1-(6-二丁基氨基-3-羥基-3-甲基-4-己炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽將597毫克(1.34毫摩爾)步驟C1)制備的黃嘌呤溶于1.34毫升1N鹽酸中，在高真空下濃縮，與乙醚攪拌2天萃取，過濾。
產(chǎn)率591毫克(91％理論值)；熔點(diǎn)179℃C24H40ClN5O3(MW＝482.07g/mol)質(zhì)譜446.5(100％，M+H)；428.5(32％)實施例71-(6-N-芐基-N-甲基氨基-3-羥基-3-甲基-4-己炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤富馬酸鹽(通過方法C和F)C1)1-(6-N-芐基-N-甲基氨基-3-羥基-3-甲基-4-己炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤按照實施例6C1)用3-甲基-1-(3-氧代丁基)-7-丙基黃嘌呤和N-芐基-N-甲基-2-丙炔胺制備1-(6-N-芐基-N-甲基氨基-3-羥基-3-甲基-4-己炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤，油狀物，86％產(chǎn)率。C24H31N5O3(MW＝437.55g/mol)F2)1-(6-N-芐基-N-甲基氨基-3-羥基-3-甲基-4-己炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤富馬酸鹽將540毫克(1.23毫摩爾)步驟C1)制備的黃嘌呤溶于乙醇，加入146毫克(1.23毫摩爾)富馬酸的乙醇熱溶液，在50℃攪拌該混合物30分鐘。高真空下濃縮，與乙醚攪拌萃取，過濾。
產(chǎn)率570毫克(83％理論值)；熔點(diǎn)104℃C28H35N5O7(MW＝553.62g/mol)質(zhì)譜438.4(100％，M+H)；420.4(87％)實施例81-(4-羥基-4-甲基7-[4-甲基-1-哌嗪基]-5-庚炔基)-3-甲基7-丙基黃嘌呤富馬酸鹽通過方法C和FC1)4-甲基-1(2-丙炔基)-哌嗪將11.1毫升(0.10摩爾)80％取代的2-丙炔基溴的甲苯溶液在冰冷卻下加到22.2毫升(0.20摩爾)N-甲基-哌嗪的100毫升甲苯溶液中。回流30分鐘后，抽吸濾除所得N-甲基哌嗪氫溴酸鹽，用甲苯洗滌，用15％濃度的氫氧化鈉溶液和飽和氯化鈉溶液洗滌兩次，真空濃縮并蒸餾。產(chǎn)率4.19克(30％理論值)；沸點(diǎn)100℃/47mbar(GC98.6％)C8H14N2(MW＝138.21g/mol)質(zhì)譜139.2(100％，M+H)；138.2(22％)；101.1(24％)；1H-NMR(DMSO-d6，300 MHz)δ＝2.10-2.54(m，8H，CH2)；2.13(s，3H，NCH3)；3.12(t，1H，C≡CH)；3.23(d，2H，NCH2C≡C)C2)1-(4-羥基-4-甲基-7-[4-甲基-1-哌嗪基]-5-庚炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤富馬酸鹽按照實施例6C1)用3-甲基-1-(4-氧代戊基)-7-丙基黃嘌呤和步驟C1)的4-甲基-1-(2-丙炔基)-哌嗪制備1-(4-羥基-4-甲基-7-[4-甲基哌嗪并]-5-庚炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤，油狀物，82％產(chǎn)率。按照實施例7F2)用富馬酸進(jìn)行成鹽反應(yīng)，產(chǎn)率55％。熔點(diǎn)168℃C26H38N6O7(MW＝546.63g/mol)，堿C22H34N6O3(MW＝430.56g/mol)質(zhì)譜431.4(100％，M+H)；413.4(7％)方法DD1)1-(4-羥基-4-甲基-5-己炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤從3-甲基-1-(4-氧代戊基)-7-丙基黃嘌呤按照類似于實施例3D1)用乙炔化鋰通過氯化銫(III)協(xié)助乙炔化反應(yīng)合成通式IX中間體混合物，產(chǎn)率67％，與氧化鋰乙炔基單甲基甲硅烷反應(yīng)然后按照類似于實施例5D1)脫甲硅烷化，總產(chǎn)率69％。
C16H22N4O3(MW＝318.38g/mol)；熔點(diǎn)108℃計算值 C 60.36％ H 6.97％ N 17.60％實測值 C 60.09％ H 7.10％ N 17.39％將該產(chǎn)物與N-甲基哌嗪和多聚甲醛在實施例4所述的反應(yīng)條件下進(jìn)行Mannich反應(yīng)，得到本實施例標(biāo)題化合物的堿形式。實施例91-(5-二乙基-2-羥基-2-甲基-3-戊炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤富馬酸鹽(通過方法C和F)按照實施例6C1)用3-甲基-1-(2-氧代丙基)-7-丙基黃嘌呤和N，N-二乙基-2-丙炔胺制備1-(5-二乙基-2-羥基-2-甲基-3-戊炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤。如實施例7F2)用富馬酸進(jìn)行成鹽反應(yīng)。熔點(diǎn)109℃。C23H33N5O7(MW＝491.56g/mol)，堿C19H29N5O3(MW＝375.48g/mol)質(zhì)譜376.2(30％，M+H)；358.2(66％)；285.1(100％)；150.2(48％)實施例101-(7-二丙基氨基-4-羥基-4-甲基-5-庚炔基)-3-乙基-7-丙基黃嘌呤半富馬酸鹽(通過方法C和F)C1)1-(7-二丙基氨基-4-羥基-4-甲基-5-庚炔基)-3-乙基-7-丙基黃嘌呤-78℃將5.3毫升(8.45毫摩爾)15％濃度正丁基鋰的正己烷溶液緩慢滴加到1.36毫升(7.8毫摩爾)的N，N-2-丙炔胺的6毫升四氫呋喃溶液中，在-78℃攪拌混合物1小時。升溫至室溫后，加入2.0克(6.5毫摩爾)3-乙基-1-(4-氧代戊基)-7-丙基黃嘌呤的8毫升四氫呋喃中。室溫下7小時后，用4N鹽酸將混合物的PH值調(diào)節(jié)至6-7，并分配在5％濃度的碳酸氫鈉溶液和二氯甲烷中。有機(jī)相用硫酸鎂干燥，減壓濃縮，通過閃式色譜純化，二氯甲烷/甲醇＝19/1為洗脫液。
產(chǎn)率0.71克(24％理論值)，油狀產(chǎn)物C24H39N5O3(MW＝445.62g/mol)F2)1-(7-二丙基氨基-4-羥基-4-甲基-5-庚炔基)-3-乙基-7-丙基黃嘌呤半富馬酸鹽用1當(dāng)量富馬酸按照實施例7F2)的方法成鹽反應(yīng)而得產(chǎn)率為86％的半富馬酸鹽。熔點(diǎn)117℃。
C26H41N5O5(MW＝503.65g/mol)質(zhì)譜446.2(100％，M+H)；329.2(50％)；307.1(56％)；100.1(83％)；1H-NMR(DMSO-d6，200 MHz)δ＝0.79(t，6H，N((CH2)2CH3)2)；0.83(t，3H，N7(CH2)2-CH3)；1.23(t，3H，N3CH2CH3)；1.33(s，3H，CH3)；1.26-1.89(m，10H，CH2)；2.32(t，4H，N(CH2CH2CH3)2)；3.31(s，2H，NCH2C≡C)；3.88(t，2H，N1-CH2)；4.03(q，2H，N3-CH2)；4.20(t，2H，N7-CH2)；5.12(s，1H，OH)；6.61(s，1H，C＝CH-COOH)；8.10(s，1H，N＝CH)實施例111-(8-二甲基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛基)-3-乙基-7-丙基黃嘌呤富馬酸(方法C和F)按照實施例6C1)用3-乙基-1-(5-氧代己基)-7-丙基黃嘌呤和N，N-二甲基-2-丙炔胺制備1-(8-二甲基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-乙基-7-丙基黃嘌呤，57％產(chǎn)率的油狀物。如實施例7F2)用富馬酸進(jìn)行成鹽反應(yīng)，51％產(chǎn)率。熔點(diǎn)117℃。C25H37N5O7(MW＝519.60g/mol)；堿C21H33N5O3(MW＝403.54g/mol)質(zhì)譜404.2(100％，M+H)；386.2(44％)；321.2(49％)實施例123-乙基-1-(3-羥基-3-甲基-6-吡咯烷-4-己炔基)-7-丙基黃嘌呤富馬酸鹽(方法C和F)按照實施例6C1)用3-乙基-1-(3-氧代丁基)-7-丙基黃嘌呤和N-(2-丙炔基)吡咯烷制備3-乙基-1-(3-羥基-3-甲基-6-吡咯烷-4-己炔基)-7-丙基黃嘌呤。如實施例7F2)用富馬酸進(jìn)行成鹽反應(yīng)，90％產(chǎn)率。熔點(diǎn)133℃。C25H35N5O7(MW＝517.59g/mol)；堿C21H31N5O3(MW＝401.52g/mol)質(zhì)譜402.2(100％，M+H)；116.9(65％)實施例133，7-二丙基1-(5-羥基-5-甲基-8-[4-甲基-1-哌嗪基]-6-辛炔基)-黃嘌呤富馬酸鹽(方法C和F)按照實施例6C1)用3，7-二丙基-1-(5-氧代庚基)黃嘌呤和實施例8C1)的4-甲基1-(2-丙炔基)哌嗪制備3，7-二丙基1-(5-羥基-5-甲基-8-[4-甲基哌嗪并]-6-辛炔基)-黃嘌呤，71％產(chǎn)率的油狀物。如實施例7F2)用富馬酸進(jìn)行成鹽反應(yīng)，95％產(chǎn)率。熔點(diǎn)98℃。C29H44N6O7(MW＝588.71g/mol)；堿C25H40N6O3(MW＝472.64g/mol)質(zhì)譜473.2(98％，M+H)；335.1(95％)；138.9(100％)；85.1(67％)實施例143-丁基-1-(5-羥基-5-甲基-8-哌啶子基-6-辛炔基)-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽(方法C和F)C1)3-丁基-1-(5-羥基-5-甲基-8-哌啶子基-6-辛炔基)-7-丙基黃嘌呤按照實施例6C1)用3-丁基-1-(5-氧代己基)黃嘌呤和N-(2-丙炔基)哌啶制備3-丁基-1-(5-羥基-5-甲基-8-哌啶子基-6-辛炔基)-7-丙基黃嘌呤，58％產(chǎn)率的油狀物。C26H41N5O3(MW＝471.65g/mol)F2)3-丁基-1-(5-羥基-5-甲基-8-哌啶子基-6-辛炔基)-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽將470毫克(1毫摩爾)步驟C1)制備的黃嘌呤溶于甲醇中，加入1毫升1N鹽酸，在高真空下濃縮混合物，與丙酮攪拌萃取，過濾。C26H42ClN5O3(MW＝508.11g/mol)質(zhì)譜472.5(100％，M+H)；454.4(12％)實施例153-丁基-1-(6-二丙基氨基-3-羥基-3-甲基-4-乙炔基)-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽(方法C)按照實施例6C1)用3-丁基-1-(3-氧代丁基)-7-丙基黃嘌呤和N，N-二丙基-2-丙炔胺制備3-丁基-1-(6-二丙基氨基-3-羥基-3-甲基-4-乙炔基)-7-丙基黃嘌呤，28％產(chǎn)率。熔點(diǎn)101℃；C25H41N5O3(MW＝459.64g/mol)；質(zhì)譜460.2(100％，M+H)；442.2(15％)實施例163-丁基-1-(5-羥基-5-甲基-8-嗎啉代-6-辛炔基)-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽(通過方法C和F)按照實施例6C1)用3-丁基-1-(5-氧代己基)-7-丙基黃嘌呤和N-(2-丙炔基)嗎啉制備3-丁基-1-(5-羥基-5-甲基-8-嗎啉代-6-辛炔基)-7-丙基黃嘌呤，76％產(chǎn)率。按照實施例12F2)進(jìn)行成鹽反應(yīng)而得產(chǎn)率為86％的鹽酸鹽。熔點(diǎn)126℃。C25H40ClN5O4(MW＝510.08g/mol)；堿C25H39N5O4(MW＝473.63g/mol)質(zhì)譜474.3(100％，M+H)；456.4(83％)實施例177-(8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-1-丙基黃嘌呤鹽酸鹽方法C和F按照實施例6C1)用3-甲基-7-(5-氧代己基)-1-丙基黃嘌呤和N，N-二丙基-2-丙炔胺制備7-(8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-1-丙基黃嘌呤，64％產(chǎn)率。熔點(diǎn)127℃；C22H36ClN5O3(MW＝454.01g/mol)；堿C22H35N5O3(MW＝417.55g/mol)質(zhì)譜418.3(100％，M+H)；400.3(15％)方法B和FB1)7-(5-羥基-5-甲基-6-庚炔基)-3-甲基黃嘌呤將33.2克(0.2摩爾)3-甲基黃嘌呤的350毫升二甲基亞砜溶液與實施例1B1)的32.1克(0.2摩爾)1-氯-5-羥基-5-甲基-6-庚炔在13.8克(0.1摩爾)碳酸鉀存在下于120℃下攪拌6小時。然后過濾熱混合物，減壓蒸發(fā)至干，用乙醇回收，在沸點(diǎn)加入二異丙醚至混濁，冷卻下將混合物放置至結(jié)晶。
產(chǎn)率38.8克(67％理論值)；沸點(diǎn)173℃C14H18N4O3(MW＝290.33g/mol)計算值 C 57.92％ H 6.25％ N 19.30％實測值 C 57.62％ H 6.27％ N 19.20％B2)7-(5-羥基-5-甲基-6-庚炔基)-3-甲基-1-丙基黃嘌呤將19.5克(67毫摩爾)的步驟B1)中間體化合物、9.3克(67毫摩爾)碳酸鉀和8.24克(67％)丙基溴按照步驟B1)在200毫升二甲基甲酰胺中反應(yīng)。通過硅膠柱過濾油狀粗產(chǎn)物純化，乙酸乙酯作為洗脫液，然后從二異丙醚中結(jié)晶，在沸點(diǎn)加入乙酸乙酯直至溶液澄清。
產(chǎn)率15.1克(68％理論值)；沸點(diǎn)97℃C17H24N4O3(MW＝332.41g/mol)計算值 C 61.42％ H 7.28％ N 16.86％實測值 C 61.20％ H 7.39％ N 16.74％步驟B1)和B2)的產(chǎn)物和通式IX化合物一樣可進(jìn)行Mannich反應(yīng)。因此，將步驟B2)的炔醇與二乙胺和多聚甲醛按照類似于實施例4反應(yīng)并按照實施例1F3)的成鹽反應(yīng)即得本實施例的標(biāo)題化合物。實施例181，7-二-(8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基黃嘌呤(方法C)按照實施例6C1)用1，7-二-(5-氧代己基)-3-己基黃嘌呤和N，N-二乙基-2-丙炔胺制備而得30％產(chǎn)率的油狀化合物。C32H52N6O4(MW＝584.82g/mol)1H-NMR(DMSO-d6，300 MHz)δ＝0.93 and0.94(2t，12H，N(CH2CH3)2)；1.20-1.62 and 1.71-1.85(m，12H，CH2)；1.31(s，6H，CH3)；2.32-2.48(m，8H，N(CH2CH3)2)；3.35(2s，4H，NCH2C≡C)；3.42(s，3H，N3CH3)；3.80-3.90(m，2H，N7CH2)；4.24(t，2H，N1CH2)；5.10 and 5.11(2s，2H，OH)；8.08(s，1H，N＝CH)實施例191-(7-二丙基氨基-4-羥基-4-甲基-5-庚炔基)-3-甲基黃嘌呤方法C按照實施例6C1)從3-甲基-1-(4-氧代戊基)黃嘌呤和N，N-二丙基-2-丙炔胺制備而得51％產(chǎn)率的油狀化合物。C20H31N5O3(MW＝389.51g/mol)質(zhì)譜 390.2(100％，M+H)；372.2(47％)1H-NMR(DMSO-d6，300 MHz)δ＝0.80(t，6H，N(CH2)2-CH3)；1.32-1.88(m，8H，CH2)；1.32(s，3H，C(OH)CH3)；2.32(m br.，4H，NCH2-C2H5)；3.33(s，2H，NCH2-C≡C)；3.45(s，3H，N3-CH3)；3.90(t，2H，N1-CH2)；5.12(s，1H，OH)；8.04(s，1H，N＝CH)；13.53(s br.，1H，N7-H)通過方法BB1)7-乙氧基甲基-1-(5-羥基-5-甲基-6-庚炔基)-3-甲基黃嘌呤將44.84克(0.2摩爾)7-乙氧基甲基-3-甲基黃嘌呤與32.13克(0.2m摩爾)實施例1B1)的1-氯-5-羥基-5-甲基-6-庚炔反應(yīng)，按照類似于實施例1B2)操作。
產(chǎn)率52.3克(75％理論值)；沸點(diǎn)106℃C17H24N4O4(MW＝348.41g/mol)計算值 C 58.61％ H 6.94％ N 16.08％實測值 C 58.41％ H 7.08％ N 15.97％B2)1-(5-羥基-5-甲基-6-庚炔基)-3-甲基黃嘌呤在60℃將41.8克(0.12摩爾)步驟B1)的炔醇攪拌在600毫升1N鹽酸和冰醋酸中4小時。然后減壓濃縮混合物，用1N氫氧化鈉溶液中和，產(chǎn)物用氯仿萃取，用硫酸鈉干燥萃取物，于減壓下蒸發(fā)，通過閃式色譜將殘余物純化，氯仿作為流動相，然后從乙醇/石油醚中重結(jié)晶。
產(chǎn)率23.6克(68％理論值)；沸點(diǎn)172℃C14H18N4O3(MW＝290.33g/mol)計算值C 57.92％ H 6.25％ N 19.30％實測值C 57.651％ H 6.25％ N 19.33％將此中間體化合物與二乙胺和多聚甲醛按照類似于實施例4反應(yīng)即得本實施例的標(biāo)題化合物。實施例203-環(huán)丙基-1-(8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-丙基黃嘌呤鹽酸鹽(通過方法C和F)按照實施例6C1)從3-環(huán)丙基-1-(5-氧代己基)-7-丙基黃嘌呤和N，N-二乙基-2-丙炔胺制備3-環(huán)丙基-1-(8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-丙基黃嘌呤，89％產(chǎn)率。按照實施例6F2)的成鹽反應(yīng)而得產(chǎn)率為93％的鹽酸鹽。熔點(diǎn)146℃；C24H38ClN5O3(MW＝480.06g/mol)；堿C24H37N5O3(MW＝443.60g/mol)質(zhì)譜444.3(100％，M+H)；426.3(41％)；253.1(21％)實施例211-(8-二乙基氨基-5-羥基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽(通過方法C和F)C1)1-(8-二乙基氨基-5-羥基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤在-78℃氬氣下將2.93毫升(4.68毫摩爾)15％濃度的丁基鋰的正己烷溶液緩慢滴加到攪拌著的676微升(4.9毫摩爾)N，N-二乙基-2-丙炔胺的4毫升四氫呋喃溶液中。在此溫度攪拌混合物1小時，升溫至室溫后，緩慢加入1.05克(3.6毫摩爾)3-甲基-1-(5-氧代戊基)-7-丙基黃嘌呤的5毫升四氫呋喃溶液。1.5小時后完成反應(yīng)。用4N鹽酸中和，真空中氣提掉四氫呋喃，將殘余物回收在二氯甲烷中，用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌溶液并用硫酸鎂干燥，濾除干燥劑，減壓除去溶劑。通過閃式色譜純化粗產(chǎn)物，二氯甲烷/甲醇/飽和氨水＝19/1/0.05混合物為流動相。產(chǎn)率1.1克(76％理論值)；黃色油C21H33N5O3(MW＝403.53g/mol)F2)1-(8-二乙基氨基-5-羥基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽將430毫克(1.07毫摩爾)步驟C1)制備的黃嘌呤溶于1.07毫升1N鹽酸，高真空濃縮后，加入戊烷并攪拌混合物3天。氣提掉戊烷后，加入乙醚，繼續(xù)攪拌混合物4周直至完成結(jié)晶。氣提掉乙醚，將殘余物再與戊烷攪拌10分鐘。氣提掉戊烷后，用戊烷再次處理殘余物，隨后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器和高真空下上徹底去除戊烷。所得產(chǎn)物為白色固體。產(chǎn)率460毫克(98％理論值)；熔點(diǎn)65℃C21H34ClN5O3(MW＝439.99g/mol)質(zhì)譜404.3(100％，M+H)實施例221-(8-氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽(通過方法C和F)C1)N，N-二-(三甲基甲硅烷基)-2-丙炔胺-78℃氬氣下將32毫升(154毫摩爾)六甲基二甲硅氮烷緩慢滴加到攪拌下的95毫升醚和95毫升(152毫摩爾)15％濃度丁基鋰的正己烷溶液中。使混合物升溫至室溫，攪拌鈉小時并冷卻至-20℃，然后緩慢滴加入8.24毫升(73毫摩爾)80％濃度的2-丙炔溴的甲苯溶液。加完后，除去冷卻浴，于室溫甲苯混合物5小時。然后將反應(yīng)混合物加到200毫升由7.36克磷酸二氫鉀、5.81克磷酸氫二鈉和200毫升水組成的磷酸鹽緩沖液中。抽吸濾除沉淀物，分離各相，有機(jī)相用水洗滌并用碳酸鈉干燥，濾除干燥劑，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去溶劑，真空蒸餾兩次殘余物。產(chǎn)率9.26克(63％理論值)；熔點(diǎn)50℃/4mbarC9H21Nsi2(MW＝199.45g/mol)1H-NMR(DMSO-d6，250 MHz)δ＝0.11(s，18H，C[Si(CH3)3]2)；3.00(t，1H，C≡CH)；3.50(d，2H，NCH2C≡C)C2)1-(8-氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤-40℃氬氣下將29毫升(46.5毫摩爾)15％濃度丁基鋰的正己烷溶液緩慢滴加到攪拌下的9.26克(46.5毫摩爾)步驟C1的N，N-二-(三甲基甲硅烷基)-2-丙炔胺的50毫升四氫呋喃溶液中。然后將混合物升溫至室溫并再冷卻至-40℃，緩慢加入14.25克(46.5毫摩爾)3-甲基-1-(5-氧代己基)-7-丙基黃嘌呤的40毫升四氫呋喃溶液。除去冷卻浴后，于室溫攪拌混合物6小時。然后在0℃將反應(yīng)混合物加到飽和氯化銨溶液中，水相用乙醚萃取，有機(jī)相用硫酸鈉干燥，濾除干燥劑，減壓除去溶劑。將粗產(chǎn)物繼續(xù)閃式色譜，流動相為二氯甲烷/甲醇/飽和氨水＝19/1.5/2.5和9/1/2.5的混合物。產(chǎn)率9.79克(58％理論值)；黃色油C18H27N5O3(MW＝361.45g/mol)該化合物也可通過與2-丙炔胺直接反應(yīng)而得0℃氬氣下將5.3毫升(8.49毫摩爾)15％濃度丁基鋰的正己烷溶液緩慢滴加到攪拌下的630微升(9.1毫摩爾)2-丙炔胺的20毫升四氫呋喃溶液中。在此溫度攪拌混合物1小時并升溫至室溫，將2.0克(6.53毫摩爾)3-甲基-1-(5-氧代己基)-7-丙基黃嘌呤的5毫升四氫呋喃溶液緩慢加到該懸浮液中(已成黃色)。3小時反應(yīng)停止。用2N鹽酸和5％濃度的碳酸氫鈉中和混合物，用二氯甲烷萃取，硫酸鎂干燥后，濾除干燥劑，減壓除去溶劑。通過閃式色譜純化粗產(chǎn)物，流動相為二氯甲烷/甲醇/飽和氨水＝19/1/0.02混合物。由于所得1.4克產(chǎn)物仍有些不純，因此將其進(jìn)行更新的閃式色譜(流動相為二氯甲烷/甲醇/飽和氨水＝9/1.5/0.02混合物)。產(chǎn)率1.01克(43％)；黃色油F3)1-(8-氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤鹽酸鹽將940毫克(2.6毫摩爾)步驟C2)制備的黃嘌呤溶于2.6毫升1N鹽酸，高真空濃縮后，加入戊烷并攪拌混合物3天。抽吸濾除所得固體。將已液化的部分(吸濕)放回?zé)?，溶于少量水，真空干燥，再加入戊烷后，攪拌?天后，氣提掉戊烷，從未結(jié)晶產(chǎn)物中分離出殘余粉狀固體。產(chǎn)率587毫克(57理論值)的白色固體；熔點(diǎn)80℃345毫克(33％理論值)的未結(jié)晶產(chǎn)物C18H28ClN5O3(MW＝397.91g/mol)；堿C18H27N5O3(MW＝361.45g/mol)質(zhì)譜362.3(7％，M+H)；344.2(59％)；209.0(100％)實施例231-(8-乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤(通過方法C)C1)N-乙基-2-丙炔胺在-78℃的燒瓶(已漂白并用氬氣灌沖)中將33毫升(0.5摩爾)乙胺濃縮。升溫至0℃后，經(jīng)45分鐘緩慢滴加入5.57毫升(50毫摩爾)80％濃度的2-丙炔溴的甲苯溶液。1小時后的氣相色譜表明反應(yīng)完全。除去冰浴后用氮?dú)廒s出過量乙胺，殘余物用乙醚和水的混合物回收，用乙醚將水相萃取數(shù)次，合并的醚相用碳酸鉀干燥，濾除干燥劑，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中濃縮濾液。隨后分部蒸餾而得937毫克(18％理論值)83％N-乙基-2-丙炔胺和17％甲苯的混合物，其立即進(jìn)行反應(yīng)。
C5H9N(MW＝83.15g/mol)1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δ＝1.12(t，3H，CH2CH3)；1.30(s br，NH)；2.20(t，1H，C≡CH)；2.74(q，2H，CH2CH3)；3.42(d，2H，NCH2C≡C)C2)1-(8-乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤-78℃氬氣下將5.43毫升(8.69毫摩爾)15％濃度丁基鋰的正己烷溶液緩慢滴加到攪拌下的937毫克(9.35毫摩爾)步驟C1)的N-乙基-2-丙炔胺(85％濃度甲苯溶液)的30毫升四氫呋喃溶液中。在該溫度攪拌混合物1小時并升溫至室溫，將2.05克(6.68毫摩爾)3-甲基-1-(5-氧代己基)-7-丙基黃嘌呤的12毫升四氫呋喃溶液緩慢加到該懸浮液(已變白)中。1小時后，用2N鹽酸和5％濃度的碳酸氫鈉中和混合物，用二氯甲烷萃取，硫酸鎂干燥后，濾除干燥劑，減壓除去溶劑。粗產(chǎn)物通過閃式色譜純化，流動相為二氯甲烷/甲醇/飽和氨水＝9/1.5/0.02混合物。產(chǎn)率2.35克(90％)；油將仍含有二氯甲烷的1.3克產(chǎn)物溶于丙酮和水的混合物中，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中及高真空下再除去溶劑。得到1.3克粘稠的不含溶劑的油。C20H31N5O3(MW＝389.56 g/mol)Mass spectrum390.2(100％，M+H)；372.2(28％)；209.1(47％)；1H-NMR(DMSO-d6，200 MHz)δ＝0.85(t，3H，N7(CH2)2CH3)；0.98(t，3H，NCH2CH3)；1.30-1.65(m，6H，CH2)；1.30(s，3H，C(OH)CH3)；1.79(sex，2H，N7CH2CH2CH3)；2.56(q，2H，NCH2CH3)；3.30(s，2H，NCH2C≡C)；3.44(s，3H，N3CH3)；3.77-3.95(m，2H，N1CH2)；4.21(t，2H，N7CH2)；5.07(s，1H，OH)；8.10(s，1H，N＝CH)實施例241-(8-乙基丙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤(通過方法E)將實施例23的650毫克(1.67毫摩爾)1-(8-乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-7-丙基黃嘌呤溶于30毫升乙醇。冷卻至-78℃后，加入602微升(8.34毫摩爾)丙醛，升溫至0℃后，加入105毫克(1.67毫摩爾)氰硼化鈉。為了完成反應(yīng)，2小時后加入一小鏟氰硼化鈉，3小時后再加入602微升(8.34毫摩爾)丙醛和105毫克(1.67毫摩爾)氰硼化鈉。完成反應(yīng)后，在減壓下的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中濃縮反應(yīng)混合物，將碳酸氫鈉溶液加到殘余物中，水相用二氯甲烷萃取物，合并的萃取物用硫酸鎂干燥，濾除干燥劑，在減壓下的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中濃縮濾液。粗產(chǎn)物通過閃式色譜純化，流動相為二氯甲烷/甲醇/飽和氨水＝19/1/0.02混合物。產(chǎn)率503毫克(70％)；油C23H37N5O3(MW＝431.65g/mol)；mass spectrum432.4(100％，M+H)；414.3(44％)；1H-NMR(DMSO-d6，200 MHz)δ＝0.75-0.88(2t，6H，N(CH2)2CH3，N7(CH2)2CH3)；0.94(t，3H，NCH2CH3)；1.30-1.68(m，8H，CH2)；1.30(s，3H，C(OH)CH3)；1.79(sex，2H，N7CH2-CH2CH3)；2.24-2.45(m，4H，NCH2CH2CH3，NCH2CH3)；3.32(s，2H，NCH2C≡C)；3.43(s，3H，N3CH3)；3.76-3.95(m，2H，N1CH2)；4.21(t，2H，N7CH2)；5.06(s，1H，OH)；8.10(s，1H，N＝CH)
表1
通式I化合物
m.p.表示熔點(diǎn)hygr.表示吸濕
藥理實驗和結(jié)果可以在臨床相關(guān)的動物實驗性適當(dāng)模型中證明通式I化合物明顯的神經(jīng)保護(hù)作用，包括黃嘌呤衍生物propentofylline(3-甲基-1-(5-氧代己基)-7-丙基黃嘌呤)作為研究的對照產(chǎn)品。實驗結(jié)果表明，本發(fā)明化合物明顯優(yōu)于對照產(chǎn)品，因此具有更好的治療和預(yù)防腦血管疾病的治療潛能。
1.在沙土鼠短暫性缺血模型中的神經(jīng)保護(hù)作用將30只體重在60和70克之間的雄性蒙古沙土鼠隨機(jī)分成兩組，每組15只，進(jìn)行該實驗(按照German Animal Protection Act進(jìn)行)。第一組動物在缺血期后30分鐘通過腹膜內(nèi)注射給予特定測試物，作為對照的第二組動物只接受相同量的相關(guān)賦形劑。
為了制造暫時性前腦缺血，用氟烷麻醉動物并仰臥固定在加熱后的手術(shù)臺上，仔細(xì)暴露兩側(cè)的頸動脈，用小動脈瘤夾閉合3分鐘(J.Cereb. BloodFlow Metab.1987，7/174-81)。3分鐘缺血期7天后，用氟烷麻醉動物，斷頭處死，迅速并小心除去大腦，先浸漬固定在Carnoys溶液(乙醇/氯仿/乙酸6∶3∶1)中，然后包埋到石蠟中，接著從海馬制備4至6微米厚度的冠段(在大約前囟水平)，并用蘇木紫和曙紅染色。然后，在盲目實驗中，用半定量組織病理數(shù)值(0＝無；1＝輕微；2＝中度；3＝嚴(yán)重；4＝完全壞死)在光學(xué)顯微鏡下測定海馬CA1區(qū)域的錐體細(xì)胞的噬酸性壞死程度。用于評價神經(jīng)保護(hù)作用的數(shù)量是與未處理對照組相比，產(chǎn)物組平均組織病理數(shù)值的百分?jǐn)?shù)變化。實驗結(jié)果如表3所示。
表3對蒙古沙土鼠缺血神經(jīng)細(xì)胞損傷的抑制作用
也可在如下所述的實驗方案中證明本發(fā)明通式I化合物的意外好的神經(jīng)保護(hù)活性，只是該方法包括更細(xì)致的方法技術(shù)。
2.對大鼠永久病灶腦缺血模型的神經(jīng)癥狀的抑制作用實驗動物是成年雄性Sprague-Dawley大鼠，體重300至400克，通過永久閉合中腦動脈(MCA)實驗室制備病灶腦梗塞(J.Cereb.Blood FlowMetab.1981，153-60)。
外科準(zhǔn)備需要20至30分鐘，用含有1至1.2％鹵代烷(halothane)的一氧化氮(并通過防毒面罩自主呼吸與吸入的空氣混合)麻醉下進(jìn)行。右股動脈和靜脈(為了測量血壓)插管，取血樣，然后給予測試物后，通過外科顯微鏡放大閉合左MCA，經(jīng)顳下在不除去顴弓和顳肌肉的情況下通過電凝法隨后分離血管，手術(shù)過程通過連續(xù)記錄平均動脈壓(通過電力機(jī)械壓力傳感器-Model 7E Polygraph；Grass，USA)監(jiān)測。手術(shù)后，使動物從麻醉狀態(tài)蘇醒，用恒溫加熱布(Homeothermic Blanket System；Harvard Apparatus，UK)使體溫維持在約37℃的正常范圍。
閉合血管15分鐘后，產(chǎn)品組(n＝8)動物接受測試物，其以腹膜內(nèi)濃縮丸形式注射給予，初始劑量是10mg/kg，用特定的不旋轉(zhuǎn)螺絲扣體系(Harvard Apparatus，UK)經(jīng)靜脈導(dǎo)管24小時連續(xù)輸注0.1mg/kg/min繼續(xù)處理；未處理對照組(n＝7)的動物以相同途徑僅接受載體(生理鹽水)。閉合血管15分鐘前以及即后，開始連續(xù)輸注測試物或載體不久檢測動脈血?dú)怏w和pH(178 pH/血液氣體分析儀；Corning，USA)以及血細(xì)胞比容及血糖水平以探測生理不規(guī)則度；然后除去動脈插管。此外，從開始連續(xù)輸注后10分鐘手術(shù)開始到實驗結(jié)束前數(shù)分鐘測量兩側(cè)顳肌的溫度(Therm 2250-1；Anlborn MeB-und Regeltechnik，F(xiàn)RG)和直腸體溫。血管閉合24小時后，停止連續(xù)輸注，用Bederson等的四點(diǎn)癥狀數(shù)值確定由于局部缺血引起的神經(jīng)缺失程度(Stroke 1986，17422-476)，以下為評價標(biāo)準(zhǔn)0＝?jīng)]有神經(jīng)缺失跡象；1＝前肢彎曲；2＝對側(cè)推降抵制，但沒有繞圈；
3＝與2相同癥狀，但是繞圈。
為了生物統(tǒng)計學(xué)分析實驗數(shù)據(jù)，用學(xué)生t檢測比較產(chǎn)物和對照組中神經(jīng)數(shù)值的頻率分布(顯著水平p＜0.5)。其中，與未處理對照動物(2.3±0.5；平均±SD)相比，實施例1化合物對神經(jīng)缺失(1.1±0.4；平均±SD)引起顯著降低(p＜0.01)，相應(yīng)于改善了52％神經(jīng)狀態(tài)而沒有副作用(研究的生理參數(shù))。
3. 對大鼠永久病灶腦缺血模型的神經(jīng)保護(hù)作用本實驗基本上類似于實驗2所述的方法。產(chǎn)品組合和對照組每組包含6只動物。但是省去了對清醒動物的復(fù)雜連續(xù)靜脈內(nèi)輸注，完全通過腹膜內(nèi)給予測試物，具體講，外科MCA閉合后以15分鐘、3及6小時的間隔三次給藥10mg/ml。實驗進(jìn)行24小時后，麻醉下斷頭處死動物，迅速并小心摘除大腦并在-10℃冷凍10分鐘，然后將前腦切成8個確定平面的冠部分，通過甲苯染色技術(shù)染色。然后，在盲目實驗中，將未被染色的冠部分梗塞區(qū)轉(zhuǎn)化到圖表上并通過求積法測量，通過面積積分確定局部缺血引起的左腦半球梗塞體積(Neurosci. Lett. 1992，14741-44)。用學(xué)生t檢測評價未處理對照組和產(chǎn)品組之間的顯著差異(＜0.05)。
將本發(fā)明化合物直接與propentofylline(制備實施例1產(chǎn)物)比較(腹膜內(nèi)給予3×10mg/kg，相當(dāng)于3×22μmol/kg后)得到統(tǒng)計學(xué)顯著性差異(p＜0.05)，與未處理對照組(222±43ul；平均±SD)相比減少了56％梗塞體積(99±17μl，平均±SD)，而同樣給予3×10mg/kg(相當(dāng)于3×33umol/kg)對照產(chǎn)品propentofylline則降低43％(127±28ul；平均±SD)。
4.對小鼠永久病灶腦缺血模型的神經(jīng)保護(hù)作用在本實驗設(shè)計中，作為代表梗塞體積的可靠測量方法，研究了通式化合物與參考物propentofylline相比，在右MCA永久閉合后對腦皮質(zhì)表面的壞死損傷中的作用(J.Pharmacol. Methods 1992，2727-32)。
實驗動物是雄性Swiss CD1小鼠，體重在33和40克之間，通過類似于實驗2在水合氯醛麻醉下(400mg/kg腹膜內(nèi))外科手術(shù)閉合右MCA。四只小鼠進(jìn)行假手術(shù)，其中MCA以相同方式暴露但沒有被閉合；這些動物組成對照組以定量手術(shù)過程中對神經(jīng)細(xì)胞的損傷。由于麻醉和局部缺血都可誘導(dǎo)低溫(其可導(dǎo)致梗塞面積的降低，Brain Res. 1992，58766-72)，因此用鹵素加熱燈在手術(shù)操作過程中時顳肌保持在約37℃的正常范圍，通過適當(dāng)調(diào)節(jié)環(huán)境溫度保持實驗過程中的體溫。閉合MCA后5分鐘、3和6小時，將溶于蒸餾水的特定測試物通過腹膜內(nèi)注射(10mg/kg)給予產(chǎn)品組動物(n＝12)，安慰劑組動物(n＝12)僅接受載體，對照組小鼠(n＝4)既不接受產(chǎn)品也不接受載體。血管閉合24小時后，在異氟烷麻醉下斷頭處死動物，摘除大腦，在30至40分鐘內(nèi)于37℃用2％濃度的2，3，5-三苯基四唑化氯(TTC)溶液染色。然后從右半球分離大腦皮質(zhì)，通過成像分析(BI0COM)測定梗塞區(qū)(其通過TTC不能染色)。用Kruskal-Wallis andMann-Whitney非參數(shù)檢測對實驗結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果表明，在假手術(shù)的對照組小鼠皮質(zhì)中基本上沒有發(fā)生壞死，而安慰劑組中用載體處理的動物表現(xiàn)出明顯的神經(jīng)損傷(源于病灶局部缺血)，梗塞區(qū)為31.3±1.7mm2(平均±SD；p＝0.0002)。
用實施例1化合物可顯著降低(38％)該損傷至19.3±1.5mm2(平均±SD；p＝0.0001)，用propentofylline作為對照產(chǎn)品時只降低(20％)至25.2±2.1mm2(平均±SD；p＝0.0153)。由于兩個產(chǎn)品組的差異也是統(tǒng)計學(xué)顯著性的(p＜0.05)，證明本發(fā)明化合物比對照組產(chǎn)品具有更好的神經(jīng)保護(hù)作用。
權(quán)利要求
1.立體異構(gòu)純形式或立體異構(gòu)混合物的通式I化合物，
其中1)R1和R3是通式1a或1b的炔醇?xì)埢?br> R2是a)直鏈或支鏈(C1-C5)-烷基，b)(C3-C6)-環(huán)烷基或c)(C4-C8)-環(huán)烷基，R4是氫原子或(C1-C3)-烷基，R5、R6和R7是互相獨(dú)立的，a)氫原子，b)(C1-C6)-烷基，c)(C3-C6)-環(huán)烷基，d)(C4-C8)-環(huán)烷基烷基，e)Ar-(C1-C2)-烷基或f)三-(C1-C4)-烷基甲硅烷基，或者R5和R6與連接其的氮原子一起形成一個4-到7-元飽和環(huán)，該環(huán)未取代或者被(C1-C4)-烷基取代1到4次，或R5和R6與連接其的氮原子形成一個4-到7-飽和環(huán)，其中一個環(huán)-CH2-基團(tuán)被O、S、SO、SO2和NR13等某一基團(tuán)取代，R13是氫原子、(C1-C3)-烷基羰基或(C1-C4)-烷基，和該環(huán)未取代或用(C1-C4)-烷基取代1到4次，A是非支鏈或支鏈(C1-C6)-亞烷基，和Z- 是生理學(xué)上可接受的無機(jī)或有機(jī)酸的陰離子，或2)R1或R3是通式1a或1b的炔醇?xì)埢琑3或R1的其它基團(tuán)為a)氫原子或b)R8，其中R8是直鏈或支鏈(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環(huán)烷基或(C4-C8)-環(huán)烷基烷基，R2、R4、R5、R6、R7、A和Z-如1)所定義。
2.權(quán)利要求1的通式I化合物，其中R1或R3兩個基團(tuán)中只有一個是通式1a或1b的炔醇?xì)埢?，而另一個基團(tuán)是氫原子或R8。
3.權(quán)利要求1或2的通式I化合物，其中R1是通式1a或1b的炔醇?xì)埢?，并且R3是氫原子或R8。
4.權(quán)利要求1至3任一權(quán)利要求的通式I化合物，其中R1是1a或1b的炔醇?xì)埢?，R2是直鏈(C1-C4)-烷基、環(huán)丙基或環(huán)丙基甲基，R3是a)氫原子或b)R8其中R8是直鏈或支鏈(C1-C6)-烷基、環(huán)丙基或環(huán)丙基甲基，R4是氫原子、甲基或乙基，R5、R6和R7是彼此互相獨(dú)立的氫原子、(C1-C4)-烷基、環(huán)丙基、環(huán)丙基甲基或芐基，或R5、R6與連接其的氮原子一起形成嗎啉、4-(C1-C3)-烷基羰基哌嗪、4-(C1-C2)-烷基哌嗪、哌嗪、哌啶、吡咯烷和硫嗎啉等5-到6-元飽和環(huán)，A是非支鏈(C1-C5)-亞烷基，和Z-是生理學(xué)上可接受的無機(jī)或有機(jī)酸的陰離子。
5.權(quán)利要求4的通式I化合物，其中R1是1a或1b的炔醇?xì)埢?，R2是(C1-C4)-烷基，R3是直鏈(C2-C4)-烷基或環(huán)丙基，R4是氫原子或甲基，R5、R6和R7是彼此互相獨(dú)立的氫原子、(C1-C4)-烷基或芐基，或R5、R6與連接其的氮原子一起形成嗎啉、吡咯烷、哌啶、4-甲基哌嗪或4-乙酰哌嗪環(huán)，A是非支鏈(C2-C4)-亞烷基，和Z-是生理學(xué)上可接受的無機(jī)或有機(jī)酸的陰離子。
6.權(quán)利要求5的通式I化合物，其是1-(8-二乙基氨基-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基)-3-甲基-，1-(5-羥基-5-甲基-8-吡咯烷-6-辛炔基)-3-甲基，3-丁基-1-(5-羥基-5-甲基-8-吡咯烷-6-辛炔基)-，1-(5-二乙基氨基-2-羥基-2-甲基-3-戊炔基)-3-丙基，1-(6-二甲基氨基-3-羥基-3-甲基-4-己炔基)-3-乙基，1-(7-二乙基氨基-4-羥基-4-甲基-5-庚炔基)-3-乙基，1-[8-(4-乙酰基-1-哌嗪基)-5-羥基-5-甲基-6-辛炔基]-3-甲基-7-丙基黃嘌呤及其生理學(xué)可接受的酸加成鹽和碘化N，N-二乙基-N-[4-羥基-4-甲基-8-(3-甲基-7-丙基-1-黃嘌呤基)-2-辛炔基]-N-甲基銨。
7.一種制備權(quán)利要求1至6任一權(quán)利要求通式I化合物的方法，該方法包括，在方法A中，將通式II的3-烷基黃嘌呤或通式II化合物的鹽
其中R2如通式I所定義，在沒有縮合劑或在堿性縮合劑存在下與通式III化合物反應(yīng)，
其中X是氯、溴、碘或者磺酸酯或磷酸酯殘基，A、R4、R5和R6如通式I定義，得到通式Ic化合物
其中通式Ia的炔醇?xì)埢〈薘3，氫原子取代了通式I的R1，然后在沒有縮合劑或在堿性縮合劑存在下將通式Ic化合物或通式Ic化合物的鹽或者再與通式III化合物烷基化得通式Id化合物
其中通式Ia兩個相同或不同的炔醇?xì)埢〈送ㄊ絀的R1和R3，或者與通式IV化合物R8-X(IV)其中R8如通式I定義，X如通式III定義，烷基化而得通式Ie化合物
其中R8取代了R1，通式Ia的炔醇?xì)埢〈送ㄊ絀的R3，或者將通式V的1，3-二烷基黃嘌呤或通式V化合物的鹽
其中R2和R8如通式I定義，在沒有縮合劑或堿性縮合劑存在下與通式III化合物反應(yīng)而得通式Ie化合物，或者將通式VI的3，7-二烷基黃嘌呤或通式VI化合物的鹽
其中R2和R8如通式I定義，在沒有縮合劑或堿性縮合劑存在下與通式III化合物反應(yīng)而得通式If化合物
其中通式Ia化合物的炔醇?xì)埢〈薘1，R8取代了通式I的R3；或者在方法B中，將通式II、V或VI化合物類似于方法A與通式VIII化合物烷基化
其中A和R4如通式I定義，X如通式III定義，得到通式IX化合物
其中R9和R10是通式IXa的兩個相同或不同基團(tuán)，
或者R9或R10是通式IXa中的一個基團(tuán)，而另一個R10或R9是氫或R8，其中，R2、A、R4和R8如通式I定義，然后將通式IX化合物在Mannich反應(yīng)條件下與甲醛及通式X胺
其中R5和R6如通式I定義，在末端乙炔基上氨基甲基化為通式Ic、Id、Ie或If化合物；或者在方法C中，將通式XI的1，3-或3，7-二或1，3，7-三取代的黃嘌呤
其中R11和R12是通式XIa的兩個相同或不同基團(tuán)，
或者R11或R12是通式XIa中的一個基團(tuán)，而另一個R12或R11是氫或R8，其中，R2、A、R4和R8如通式I定義，與通式XII有機(jī)金屬化合物反應(yīng)
其中R5和R6如通式I定義，M是堿金屬、堿土金屬或者重金屬，將羰基還原炔基化而得通式Ic、Id、Ie、If或Ig化合物
其中通式Ia化合物的炔醇?xì)埢〈薘1，氫原子取代代了通式I的R3；或者在方法D中，將其中R11和/或R12為通式XIa的基團(tuán)的通式XI黃嘌呤與通式XIII的金屬乙炔化物進(jìn)行Nef型反應(yīng)HC≡C-M(XIII)其中M如通式XII定義，或者與末端保護(hù)的通式XIV金屬乙炔化物反應(yīng)Ra-C≡C-M (XIV)其中M如通式XII定義，Ra是隨后易于消除的離去基團(tuán)，將羰基乙炔化而得通式IX化合物，其中R9和R10是通式IXa的基團(tuán)，然后將所得化合物IX通過Mannich反應(yīng)與甲醛和通式X胺按照類似方法B氨基甲基化而得通式Ic、Id、Ie、If或Ig化合物；或者在方法E中，將方法A至D制備而得的通式Ic、Id、Ie或If化合物或者方法C或D制備而得的通式Ig化合物，其中R5和/或R6為氫原子，與(C1-C6)烷烴、(C3-C6)環(huán)烷烴、(C4-C8)環(huán)烷基烷烴或Ar-(C1-C2)烷烴的羰基衍生物(醛或酮)進(jìn)行一次或兩次還原烷基化；或者在方法F中，用生理學(xué)可接受的無機(jī)酸或有機(jī)酸HZ將方法A至E制備的化合物轉(zhuǎn)化為通式I的酸加成鹽，其中R1和/或R3是通式Ib的炔醇?xì)埢渲蠷7是氫原子，R2如通式I定義；或者在方法G中，用通式VII烷化劑R7-Z (VII)其中R7如除氫以外的通式I所定義，Z是通式III中的X，將方法A至E制備的化合物轉(zhuǎn)化為通式I的季銨鹽，其中R1和/或R3是通式Ib的炔醇?xì)埢?，R2如通式I定義；或者在方法H中，將方法A至G中制備的化合物通過色譜法或分級結(jié)晶法分離成純立體異構(gòu)體。
8.一種藥物，含有權(quán)利要求1至6任一權(quán)利要求或按照權(quán)利要求7制備的至少一種治療有效量的立體異構(gòu)純或立體異構(gòu)混合物的通式I化合物。
9.權(quán)利要求8的藥物，另外含有有效量的至少一種以下活性物質(zhì)纖維蛋白溶酶、鈣拮抗劑、興奮性氨基酸拮抗劑、神經(jīng)節(jié)甙酯、磷脂酶、環(huán)氧化酶和脂氧化酶抑制劑、PAF(血小板活化因子)、血栓烷和白三烯拮抗劑、氧自由基清除劑、重金屬螯合劑、抗水腫活性物質(zhì)、抗凝劑、血小板應(yīng)用抑制劑、5-羥色胺1A激動劑、腺苷調(diào)節(jié)劑或神經(jīng)營養(yǎng)生長因子及其釋放激動劑。
10.權(quán)利要求1至6任一權(quán)利要求或按照權(quán)利要求7制備的通式I化合物在制備用于治療或預(yù)防腦血管疾病藥物中的用途。
11.權(quán)利要求10的用途，用于治療和預(yù)防中風(fēng)、短暫性局部缺血性發(fā)作、多發(fā)梗塞性癡呆、血管和退化(早老性癡呆)混合型癡呆、脊髓損傷和由于頭部受傷導(dǎo)致的大腦創(chuàng)傷。
12.權(quán)利要求10的用途，用于治療和預(yù)防心搏停止、窒息、新生兒窒息、復(fù)蘇或在腦部主要動脈區(qū)的血管外科手術(shù)后的神經(jīng)損傷。
13.權(quán)利要求10至12任一權(quán)利要求的用途，用于腦血管疾病的首要防止、緊急處理以及二級預(yù)防措施。
14.權(quán)利要求10至13任一權(quán)利要求的用途，用于非腸道、口服、直腸或透皮給藥。
15.制備權(quán)利要求8或9藥物的方法，包括將權(quán)利要求1至6任一權(quán)利要求的至少一種通式I化合物和可藥用及生理學(xué)可接受的賦形劑和添加劑、稀釋劑和/或其它活性成分及助劑轉(zhuǎn)化為適當(dāng)劑型。
16.立體異構(gòu)純或異構(gòu)體混合物的通式IX化合物，
其中R9和R10是通式IXa的兩個相同或不同基團(tuán)，
或者R9或R10是通式IXa中的一個基團(tuán)，而另一個R10或R9是氫或R8，其中，R2、A、R4和R8如權(quán)利要求1的通式I所定義。
17.一種藥物，包括至少一種治療有效量的權(quán)利要求16的通式IX化合物。
全文摘要
通式Ⅰ化合物適用于制備具有神經(jīng)保護(hù)作用的藥物:其中R
文檔編號A61P9/02GK1169994SQ97112930
公開日1998年1月14日 申請日期1997年6月4日 優(yōu)先權(quán)日1996年6月7日
發(fā)明者U·格伯特, E·德福薩, U·海內(nèi)爾特, K·魯多菲, J·J·格魯姆 申請人:赫徹斯特股份公司