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一種膠原蛋白藥物磁性緩釋載體的制備方法

文檔序號(hào):10705413閱讀:864來(lái)源:國(guó)知局
一種膠原蛋白藥物磁性緩釋載體的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種膠原蛋白藥物磁性緩釋載體的制備方法,屬于藥物載體合成領(lǐng)域。本發(fā)明以廉價(jià)易得的鯽魚魚鱗為原料,洗凈風(fēng)干后用碳酸鈉和EDTA溶液浸泡除去雜質(zhì)蛋白、色素和礦物質(zhì)成分,再用乙酸配合胃蛋白酶溶解魚鱗中的膠原蛋白,經(jīng)透析純化后,在磷酸氫二鉀緩沖液中,配合超聲處理,包覆納米四氧化三鐵,經(jīng)分離干燥后,得到膠原蛋白藥物磁性緩釋載體。本發(fā)明所得緩釋載體主要成分為膠原蛋白成分,和人體生物相容性好,對(duì)人體無(wú)害,不會(huì)引起免疫排斥反應(yīng),在使用過程中,利用四氧化三鐵的磁性,可直接到達(dá)指定部位緩釋藥物有效成分,充分發(fā)揮藥效,使患者提前康復(fù)。
【專利說(shuō)明】
一種膠原蛋白藥物磁性緩釋載體的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明公開了一種膠原蛋白藥物磁性緩釋載體的制備方法,屬于藥物載體合成領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]藥物釋放系統(tǒng)又稱給藥系統(tǒng)、藥物傳輸系統(tǒng)、藥物投遞系統(tǒng),是指人們?cè)诜乐渭膊〉倪^程中所采用的各種治療藥物的不同給藥形式。傳統(tǒng)的藥物釋放體系是活性藥物成分?jǐn)U散的過程?,F(xiàn)代技術(shù)希望在規(guī)定時(shí)間內(nèi)控制或者減緩藥物釋放的速率,充分發(fā)揮活性藥物成分的作用,使機(jī)體內(nèi)血藥濃度保持恒定,避免出現(xiàn)血藥濃度過高或低的現(xiàn)象,盡可能降低藥物對(duì)機(jī)體的毒副作用,提高藥物的利用率和治療效果,減少用藥劑量,降低或防止藥物對(duì)身體器官的損害。
[0003]目前所應(yīng)用的藥物緩釋材料是一些合成的(如PEG、PVA、PCL等),合成高分子載體常常生物相容性不好,易引起機(jī)體的免疫排斥反應(yīng),有時(shí)還含有痕量引發(fā)劑等毒性雜質(zhì),如在聚乳酸的一般生產(chǎn)方法中使用有機(jī)錫催化劑,會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性。
[0004]藥物緩釋體系雖然已經(jīng)研究的相當(dāng)成熟,但是在植入生物體后釋放的藥物仍然會(huì)對(duì)正常器官造成損害,為了進(jìn)一步避免藥物傷害正常器官,必須使緩釋載體具有靶向性,直接到達(dá)指定部位,釋放藥物有效成分。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明主要解決的技術(shù)問題:針對(duì)傳統(tǒng)藥物緩釋材料在制備和使用過程中出現(xiàn)的生物相容性不好,易引起機(jī)體的免疫排斥反應(yīng),而且靶向性差,造成藥物中有效成分的損失的問題,提供了一種膠原蛋白藥物磁性緩釋載體的制備方法,本發(fā)明以廉價(jià)易得的鯽魚魚鱗為原料,洗凈風(fēng)干后用碳酸鈉和EDTA溶液浸泡除去雜質(zhì)蛋白、色素和礦物質(zhì)成分,再用乙酸配合胃蛋白酶溶解魚鱗中的膠原蛋白,經(jīng)透析純化后,在磷酸氫二鉀緩沖液中,配合超聲處理,包覆納米四氧化三鐵,經(jīng)分離干燥后,得到膠原蛋白藥物磁性緩釋載體。本發(fā)明所得緩釋載體主要成分為膠原蛋白成分,和人體生物相容性好,對(duì)人體無(wú)害,不會(huì)引起免疫排斥反應(yīng),在使用過程中,利用四氧化三鐵的磁性,可直接到達(dá)指定部位緩釋藥物有效成分,充分發(fā)揮藥效,使患者提前康復(fù)。
[0006]為了解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:
(1)稱取新鮮鯽魚魚鱗200?300g,經(jīng)人工清洗除雜后,平鋪于菠蘿篩中,再將菠蘿篩轉(zhuǎn)至避光通風(fēng)處,風(fēng)干處理3?5天,收集風(fēng)干后的鯽魚魚鱗,將其倒入盛有200?300mL濃度為0.3?0.5mol/L碳酸鈉溶液的燒杯中,浸泡處理3?5h,取出魚鱗,用去離子水洗滌3?5次,再將鯽魚魚鱗倒入盛有180?260mL濃度為0.2?0.4mol/LEDTA溶液的燒杯中,浸泡處理I?3h,取出魚鱗,用去離子水洗滌3?5次,得預(yù)處理鯽魚魚鱗;
(2)將上述所得預(yù)處理鯽魚魚鱗用液氮冷卻處理3?5min,然后迅速鋪于石磨磨盤上,混入60?80mL濃度為0.3?0.5mol/L乙酸溶液,研磨處理3?5min,收集研磨楽液,將其置于燒杯中,再加入0.6?0.Sg胃蛋白酶,隨后將燒杯轉(zhuǎn)入數(shù)顯測(cè)速恒溫磁力攪拌器中,升溫至38?45°C,啟動(dòng)攪拌器,以600?800r/min轉(zhuǎn)速攪拌反應(yīng)30?50min,過濾,除去濾渣,得濾液;
(3)將上述所得濾液轉(zhuǎn)入透析袋中,在自來(lái)水中透析處理24?36h,隨后轉(zhuǎn)入去離子水中,透析處理36?48h,每6h更換一次去離子水,透析結(jié)束,將透析袋中溶液抽濾,得膠原蛋白溶液;
(4)稱取0.6?0.8g納米四氧化三鐵粉末,加入盛有30?50mL上述所得膠原蛋白溶液的燒杯中,隨后將燒杯轉(zhuǎn)入超聲振蕩儀中,以15?25kHz功率超聲處理8?12min,再向燒杯中加入150?250mL質(zhì)量濃度為12?16%磷酸氫二鉀溶液,繼續(xù)超聲處理6?8min,隨后將混合液轉(zhuǎn)入2?4°C冰箱中冷藏6?Sh,取出靜置,待分層后,轉(zhuǎn)入離心機(jī)離心分離,棄去上清液,得下層黑色沉淀物,用去離子水洗滌沉淀物3?5次,再將其轉(zhuǎn)入冷凍干燥機(jī)中干燥處理6?Sh,得黑色粉末,即為膠原蛋白藥物磁性緩釋載體。
[0007]本發(fā)明的具體應(yīng)用方法:稱取0.6?0.Sg本發(fā)明所得膠原蛋白藥物磁性緩釋載體,加入盛有100?120mL質(zhì)量濃度為15?20%磷酸二氫鉀緩沖溶液的燒杯中,再加入10?20mL濃度為0.2?0.5g/L阿霉素溶液,在室溫條件下,以600?800r/min轉(zhuǎn)速攪拌混合8?12h,離心分離,棄去上清液,將下層沉淀轉(zhuǎn)入冷凍干燥機(jī)中干燥處理6?Sh,將得到的藥品給患者服用,在患者需要治療的部位施加磁場(chǎng),使藥物到達(dá)指定位置后緩釋,患者在使用過程中未出現(xiàn)任何不良反應(yīng),用藥量減少了 50?60%,且患者康復(fù)時(shí)間提前10?15天。
[0008]本發(fā)明的有益效果:
(1)本發(fā)明以鯽魚魚鱗為原料,減少了魚鱗的隨意丟棄而造成的環(huán)境污染,同時(shí)為漁民增加了經(jīng)濟(jì)收入來(lái)源;
(2)本發(fā)明所的藥物載體可以使藥物有效成分在指定位置緩釋,避免了藥物濫用,減少了患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),使患者更快康復(fù),減少患病帶來(lái)的痛苦,值得推廣使用。
【具體實(shí)施方式】
[0009]稱取新鮮鯽魚魚鱗200?300g,經(jīng)人工清洗除雜后,平鋪于菠蘿篩中,再將菠蘿篩轉(zhuǎn)至避光通風(fēng)處,風(fēng)干處理3?5天,收集風(fēng)干后的鯽魚魚鱗,將其倒入盛有200?300mL濃度為0.3?0.5mol/L碳酸鈉溶液的燒杯中,浸泡處理3?5h,取出魚鱗,用去離子水洗滌3?5次,再將鯽魚魚鱗倒入盛有180?260mL濃度為0.2?0.4mo I/LEDTA溶液的燒杯中,浸泡處理I?3h,取出魚鱗,用去離子水洗滌3?5次,得預(yù)處理鯽魚魚鱗;將上述所得預(yù)處理鯽魚魚鱗用液氮冷卻處理3?5min,然后迅速鋪于石磨磨盤上,混入60?80mL濃度為0.3?0.5mol/L乙酸溶液,研磨處理3?5min,收集研磨楽液,將其置于燒杯中,再加入0.6?0.8g胃蛋白酶,隨后將燒杯轉(zhuǎn)入數(shù)顯測(cè)速恒溫磁力攪拌器中,升溫至38?45°C,啟動(dòng)攪拌器,以600?800r/min轉(zhuǎn)速攪拌反應(yīng)30?50min,過濾,除去濾渣,得濾液;將上述所得濾液轉(zhuǎn)入透析袋中,在自來(lái)水中透析處理24?36h,隨后轉(zhuǎn)入去離子水中,透析處理36?48h,每6h更換一次去離子水,透析結(jié)束,將透析袋中溶液抽濾,得膠原蛋白溶液;稱取0.6?0.Sg納米四氧化三鐵粉末,加入盛有30?50mL上述所得膠原蛋白溶液的燒杯中,隨后將燒杯轉(zhuǎn)入超聲振蕩儀中,以15?25kHz功率超聲處理8?12min,再向燒杯中加入150?250mL質(zhì)量濃度為12?16%磷酸氫二鉀溶液,繼續(xù)超聲處理6?Smin,隨后將混合液轉(zhuǎn)入2?4°C冰箱中冷藏6?Sh,取出靜置,待分層后,轉(zhuǎn)入離心機(jī)離心分離,棄去上清液,得下層黑色沉淀物,用去離子水洗滌沉淀物3?5次,再將其轉(zhuǎn)入冷凍干燥機(jī)中干燥處理6?Sh,得黑色粉末,即為膠原蛋白藥物磁性緩釋載體。
[0010]實(shí)例 I
稱取新鮮鯽魚魚鱗200g,經(jīng)人工清洗除雜后,平鋪于菠蘿篩中,再將菠蘿篩轉(zhuǎn)至避光通風(fēng)處,風(fēng)干處理3天,收集風(fēng)干后的鯽魚魚鱗,將其倒入盛有200mL濃度為0.3mol/L碳酸鈉溶液的燒杯中,浸泡處理3h,取出魚鱗,用去離子水洗滌3次,再將鯽魚魚鱗倒入盛有180mL濃度為0.2moI/LEDTA溶液的燒杯中,浸泡處理Ih,取出魚鱗,用去離子水洗滌3次,得預(yù)處理鯽魚魚鱗;將上述所得預(yù)處理鯽魚魚鱗用液氮冷卻處理3min,然后迅速鋪于石磨磨盤上,混入60mL濃度為0.3mol/L乙酸溶液,研磨處理3min,收集研磨漿液,將其置于燒杯中,再加入0.6g胃蛋白酶,隨后將燒杯轉(zhuǎn)入數(shù)顯測(cè)速恒溫磁力攪拌器中,升溫至38 V,啟動(dòng)攪拌器,以600r/min轉(zhuǎn)速攪拌反應(yīng)30min,過濾,除去濾渣,得濾液;將上述所得濾液轉(zhuǎn)入透析袋中,在自來(lái)水中透析處理24h,隨后轉(zhuǎn)入去離子水中,透析處理36h,每6h更換一次去離子水,透析結(jié)束,將透析袋中溶液抽濾,得膠原蛋白溶液;稱取0.6g納米四氧化三鐵粉末,加入盛有30mL上述所得膠原蛋白溶液的燒杯中,隨后將燒杯轉(zhuǎn)入超聲振蕩儀中,以15kHz功率超聲處理Smin,再向燒杯中加入150mL質(zhì)量濃度為12%磷酸氫二鉀溶液,繼續(xù)超聲處理6min,隨后將混合液轉(zhuǎn)入2 °C冰箱中冷藏6h,取出靜置,待分層后,轉(zhuǎn)入離心機(jī)離心分離,棄去上清液,得下層黑色沉淀物,用去離子水洗滌沉淀物3次,再將其轉(zhuǎn)入冷凍干燥機(jī)中干燥處理6h,得黑色粉末,即為膠原蛋白藥物磁性緩釋載體。
[0011 ]本發(fā)明的具體應(yīng)用方法:稱取0.6g本發(fā)明所得膠原蛋白藥物磁性緩釋載體,加入盛有10mL質(zhì)量濃度為15%磷酸二氫鉀緩沖溶液的燒杯中,再加入1mL濃度為0.2g/L阿霉素溶液,在室溫條件下,以600r/min轉(zhuǎn)速攪拌混合8h,離心分離,棄去上清液,將下層沉淀轉(zhuǎn)入冷凍干燥機(jī)中干燥處理6h,將得到的藥品給患者服用,在患者需要治療的部位施加磁場(chǎng),使藥物到達(dá)指定位置后緩釋,患者在使用過程中未出現(xiàn)任何不良反應(yīng),用藥量減少了 50%,且患者康復(fù)時(shí)間提前1天。
[0012]實(shí)例2
稱取新鮮鯽魚魚鱗260g,經(jīng)人工清洗除雜后,平鋪于菠蘿篩中,再將菠蘿篩轉(zhuǎn)至避光通風(fēng)處,風(fēng)干處理4天,收集風(fēng)干后的鯽魚魚鱗,將其倒入盛有260mL濃度為0.4mol/L碳酸鈉溶液的燒杯中,浸泡處理4h,取出魚鱗,用去離子水洗滌4次,再將鯽魚魚鱗倒入盛有240mL濃度為0.3moI/LEDTA溶液的燒杯中,浸泡處理2h,取出魚鱗,用去離子水洗滌4次,得預(yù)處理鯽魚魚鱗;將上述所得預(yù)處理鯽魚魚鱗用液氮冷卻處理4min,然后迅速鋪于石磨磨盤上,混入70mL濃度為0.4mol/L乙酸溶液,研磨處理4min,收集研磨漿液,將其置于燒杯中,再加入
0.7g胃蛋白酶,隨后將燒杯轉(zhuǎn)入數(shù)顯測(cè)速恒溫磁力攪拌器中,升溫至40 V,啟動(dòng)攪拌器,以700r/min轉(zhuǎn)速攪拌反應(yīng)40min,過濾,除去濾渣,得濾液;將上述所得濾液轉(zhuǎn)入透析袋中,在自來(lái)水中透析處理28h,隨后轉(zhuǎn)入去離子水中,透析處理42h,每6h更換一次去離子水,透析結(jié)束,將透析袋中溶液抽濾,得膠原蛋白溶液;稱取0.7g納米四氧化三鐵粉末,加入盛有40mL上述所得膠原蛋白溶液的燒杯中,隨后將燒杯轉(zhuǎn)入超聲振蕩儀中,以20kHz功率超聲處理lOmin,再向燒杯中加入180mL質(zhì)量濃度為14%磷酸氫二鉀溶液,繼續(xù)超聲處理7min,隨后將混合液轉(zhuǎn)入3 °C冰箱中冷藏7h,取出靜置,待分層后,轉(zhuǎn)入離心機(jī)離心分離,棄去上清液,得下層黑色沉淀物,用去離子水洗滌沉淀物4次,再將其轉(zhuǎn)入冷凍干燥機(jī)中干燥處理7h,得黑色粉末,即為膠原蛋白藥物磁性緩釋載體。
[0013]本發(fā)明的具體應(yīng)用方法:稱取0.7g本發(fā)明所得膠原蛋白藥物磁性緩釋載體,加入盛有I1mL質(zhì)量濃度為18%磷酸二氫鉀緩沖溶液的燒杯中,再加入15mL濃度為0.4g/L阿霉素溶液,在室溫條件下,以700r/min轉(zhuǎn)速攪拌混合1h,離心分離,棄去上清液,將下層沉淀轉(zhuǎn)入冷凍干燥機(jī)中干燥處理7h,將得到的藥品給患者服用,在患者需要治療的部位施加磁場(chǎng),使藥物到達(dá)指定位置后緩釋,患者在使用過程中未出現(xiàn)任何不良反應(yīng),用藥量減少了 55%,且患者康復(fù)時(shí)間提前12天。
[0014]實(shí)例3
稱取新鮮鯽魚魚鱗300g,經(jīng)人工清洗除雜后,平鋪于菠蘿篩中,再將菠蘿篩轉(zhuǎn)至避光通風(fēng)處,風(fēng)干處理5天,收集風(fēng)干后的鯽魚魚鱗,將其倒入盛有300mL濃度為0.5mol/L碳酸鈉溶液的燒杯中,浸泡處理5h,取出魚鱗,用去離子水洗滌5次,再將鯽魚魚鱗倒入盛有260mL濃度為0.4moI/LEDTA溶液的燒杯中,浸泡處理3h,取出魚鱗,用去離子水洗滌5次,得預(yù)處理鯽魚魚鱗;將上述所得預(yù)處理鯽魚魚鱗用液氮冷卻處理5min,然后迅速鋪于石磨磨盤上,混入SOmL濃度為0.5mol/L乙酸溶液,研磨處理5min,收集研磨漿液,將其置于燒杯中,再加入
0.Sg胃蛋白酶,隨后將燒杯轉(zhuǎn)入數(shù)顯測(cè)速恒溫磁力攪拌器中,升溫至45 V,啟動(dòng)攪拌器,以800r/min轉(zhuǎn)速攪拌反應(yīng)50min,過濾,除去濾渣,得濾液;將上述所得濾液轉(zhuǎn)入透析袋中,在自來(lái)水中透析處理36h,隨后轉(zhuǎn)入去離子水中,透析處理48h,每6h更換一次去離子水,透析結(jié)束,將透析袋中溶液抽濾,得膠原蛋白溶液;稱取0.Sg納米四氧化三鐵粉末,加入盛有50mL上述所得膠原蛋白溶液的燒杯中,隨后將燒杯轉(zhuǎn)入超聲振蕩儀中,以25kHz功率超聲處理12min,再向燒杯中加入250mL質(zhì)量濃度為16%磷酸氫二鉀溶液,繼續(xù)超聲處理8min,隨后將混合液轉(zhuǎn)入4 °C冰箱中冷藏Sh,取出靜置,待分層后,轉(zhuǎn)入離心機(jī)離心分離,棄去上清液,得下層黑色沉淀物,用去離子水洗滌沉淀物5次,再將其轉(zhuǎn)入冷凍干燥機(jī)中干燥處理Sh,得黑色粉末,即為膠原蛋白藥物磁性緩釋載體。
[0015]本發(fā)明的具體應(yīng)用方法:稱取0.Sg本發(fā)明所得膠原蛋白藥物磁性緩釋載體,加入盛有120mL質(zhì)量濃度為20%磷酸二氫鉀緩沖溶液的燒杯中,再加入20mL濃度為0.5g/L阿霉素溶液,在室溫條件下,以800r/min轉(zhuǎn)速攪拌混合12h,離心分離,棄去上清液,將下層沉淀轉(zhuǎn)入冷凍干燥機(jī)中干燥處理8h,將得到的藥品給患者服用,在患者需要治療的部位施加磁場(chǎng),使藥物到達(dá)指定位置后緩釋,患者在使用過程中未出現(xiàn)任何不良反應(yīng),用藥量減少了 60%,且患者康復(fù)時(shí)間提前15天。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種膠原蛋白藥物磁性緩釋載體的制備方法,其特征在于具體制備步驟為: (1)稱取新鮮鯽魚魚鱗200?300g,經(jīng)人工清洗除雜后,平鋪于菠蘿篩中,再將菠蘿篩轉(zhuǎn)至避光通風(fēng)處,風(fēng)干處理3?5天,收集風(fēng)干后的鯽魚魚鱗,將其倒入盛有200?300mL濃度為.0.3?0.5mol/L碳酸鈉溶液的燒杯中,浸泡處理3?5h,取出魚鱗,用去離子水洗滌3?5次,再將鯽魚魚鱗倒入盛有180?260mL濃度為0.2?0.4mol/LEDTA溶液的燒杯中,浸泡處理I?3h,取出魚鱗,用去離子水洗滌3?5次,得預(yù)處理鯽魚魚鱗; (2)將上述所得預(yù)處理鯽魚魚鱗用液氮冷卻處理3?5min,然后迅速鋪于石磨磨盤上,混入60?80mL濃度為0.3?0.5mol/L乙酸溶液,研磨處理3?5min,收集研磨楽液,將其置于燒杯中,再加入0.6?0.Sg胃蛋白酶,隨后將燒杯轉(zhuǎn)入數(shù)顯測(cè)速恒溫磁力攪拌器中,升溫至38?45°C,啟動(dòng)攪拌器,以600?800r/min轉(zhuǎn)速攪拌反應(yīng)30?50min,過濾,除去濾渣,得濾液; (3)將上述所得濾液轉(zhuǎn)入透析袋中,在自來(lái)水中透析處理24?36h,隨后轉(zhuǎn)入去離子水中,透析處理36?48h,每6h更換一次去離子水,透析結(jié)束,將透析袋中溶液抽濾,得膠原蛋白溶液; (4)稱取0.6?0.8g納米四氧化三鐵粉末,加入盛有30?50mL上述所得膠原蛋白溶液的燒杯中,隨后將燒杯轉(zhuǎn)入超聲振蕩儀中,以15?25kHz功率超聲處理8?12min,再向燒杯中加入150?250mL質(zhì)量濃度為12?16%磷酸氫二鉀溶液,繼續(xù)超聲處理6?8min,隨后將混合液轉(zhuǎn)入2?4°C冰箱中冷藏6?Sh,取出靜置,待分層后,轉(zhuǎn)入離心機(jī)離心分離,棄去上清液,得下層黑色沉淀物,用去離子水洗滌沉淀物3?5次,再將其轉(zhuǎn)入冷凍干燥機(jī)中干燥處理6?Sh,得黑色粉末,即得膠原蛋白藥物磁性緩釋載體。
【文檔編號(hào)】C07K14/78GK106075463SQ201610462046
【公開日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年6月23日
【發(fā)明人】袁春華, 許博偉
【申請(qǐng)人】袁春華
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