專利名稱：一種丹酚酸b的提取方法
一種丹酚酸B的纟是耳又方法(一) 技術(shù)領(lǐng)域 本發(fā)明涉及一種中藥丹參中丹酚酸B的提取方法。(二) 背景技術(shù)中藥丹參具有活血祛瘀、涼血消癰、清心除煩的功效?，F(xiàn)代藥理學(xué)研 究表明，丹參能擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、加血流量、抗心肌缺血、改善樣i循環(huán)、降 低心肌耗氧量、改善心功能、降血壓、降血脂、抗凝血、抗血栓、保肝、 調(diào)節(jié)免疫等諸多功效。隨著對丹參研究的深入，發(fā)現(xiàn)丹參中水溶性成分才 是主要的活性成分，其中又以酚酸類成分活性最大，特別是丹酚酸A和 丹酚酸B。由于丹酚酸A在丹參水溶性成分中所占含量^[艮少，而丹酚酸B 在丹參水溶性成分中含量很高，因此最大程度地從丹參中提取出丹酚酸B的量以及提高在提取物中丹酚酸B的含量才是真正有效地利用了丹參。從目前公開的文獻(xiàn)來看，對丹參大多采用水提取的方法。對于水溶性 成分來說采用水提取是毫無疑問的，但對于丹酚酸B來說，水提取并不 是最佳的提取方法。采用 一定濃度的乙醇提取可以提取出比水提取更多的 丹酚酸B的量，原因是丹酚酸B對熱敏感，水提取時(shí)的高溫將對已經(jīng)提 取出的丹酚酸B產(chǎn)生一定的破壞，使之分解。而一定濃度的醇提時(shí)溫度 低于水提取時(shí)的溫度，因此對丹酚酸B帶來的破壞則小很多。對于大于 60°C，小于100。C的水提取則不能很好的提取出丹酚酸B。這幾種提:取情 況可見圖1~圖6。對于丹參釆用60。C以上的高濃度的乙醇提取則會(huì)帶來 過多的脂溶性成分，不利于丹酚酸B的純化。對于丹酚酸B的純化，目前大多采用柱層析的方法，上大孔樹脂或聚酰胺。對于丹參水提取還可采用調(diào)酸或醇沉的方法在上柱之前預(yù)處理， 調(diào)酸和醇沉的確有可取之處，可以使雜質(zhì)沉淀，但同時(shí)也損失了相當(dāng)一部 分丹酚酸B,因?yàn)樵诔恋淼倪^程中有一定量的丹酚酸B也沉淀了 。如果過高的追求丹酚酸B的含量而采用兩次柱層析或采用凝膠、柱色譜分離的方法制也不可取，前者大大減低了得率，后者則不適合大規(guī)模生產(chǎn)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的是針對目前技術(shù)存在的缺陷和不足,提供一種更加合理有效的丹酚酸B的提取方法。 本發(fā)明釆用的技術(shù)方案是一種丹酚酸B的提取方法，所述方法包括(1 )取丹參藥材用6 10倍質(zhì)量的30~60%乙醇溶液提取1~4次，合 并提取液，于40 70。C下回收乙醇至無醇p未、揮去乙醇的提取液 去除沉淀物，得到濾液；(2) 濾液上大孔吸附樹脂樹脂，蒸餾水洗脫至洗脫液澄清后，再用 20 50%乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫液；(3) 乙醇洗脫液于40 70。C下濃縮，干燥，得到含有丹酚酸B的4分 末。在上述步驟中，所述大孔吸附樹脂樹脂推薦D101-I大孔樹脂或D1400 大孔樹脂。步驟(1)中采用30% 60%乙醇提取2 3次，優(yōu)選40% 50%乙醇提 取，原因是40。/。 50。/o的提取出的丹B的量最多且含有脂溶性成分相對于 60%乙醇提取來說較少一點(diǎn)。更為優(yōu)選的，所述步驟(l)中以50%乙醇 溶液l是耳又。步驟(1)中在40。C 70。C減壓回收乙醇至無醇味，優(yōu)選50。C 60。C,60。C以下對丹酚酸B影響很小，在減壓回收乙醇這段時(shí)間內(nèi)基本不會(huì)被分解破壞。步驟(2)中釆用20%~50%乙醇洗脫，洗脫終點(diǎn)判斷方法洗脫液加 三氯化鐵試劑無反應(yīng)或洗脫液為3 5個(gè)柱體積，優(yōu)選30%乙醇洗脫4個(gè) 柱體積，用小于30%乙醇的洗脫需要較大的洗脫溶劑用量，大于30%乙 醇洗脫則會(huì)帶來較多的脂溶性成分，30%乙醇洗脫4個(gè)柱體積后丹酚酸B 已絕大部分被洗脫，4個(gè)柱體積是最佳溶劑用量，所采用大孔樹脂型號(hào)可 采用本領(lǐng)域常見用于丹酚酸B提純的大孔吸附樹脂型號(hào)，本發(fā)明中優(yōu)選 為D101-I， D1400。步驟(3)中在40。C 70。C減壓濃縮，優(yōu)選50。C 60。C，因?yàn)榇藴囟?對丹酚酸B影響甚小，在減壓濃縮這段時(shí)間內(nèi)基本不會(huì)被分解破壞。通過本發(fā)明制備丹酚酸B的方法制得的提取物粉末中丹酚酸B的含 量大于60%，且得率在3%以上。優(yōu)選的，所述步驟(1)中丹參藥材用6 10倍質(zhì)量的30 60%乙醇溶 液提取2~3次，合并提取液再進(jìn)行乙醇回收。優(yōu)選的，所述方法如下 (1 )取丹參藥材用8倍質(zhì)量的50%乙醇溶液提取2~3次，合并提取液， 于50 60。C下回收乙醇至無醇味，離心或者過濾去除沉淀物，得到 濾液；(2) 濾液上大孔吸附樹脂樹脂D101-I或D1400,先用蒸餾水洗脫至洗 脫液澄清，再用3 5個(gè)柱體積的30%乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫 液；(3) 乙醇洗脫液于50 6(TC下減壓濃縮得浸膏，浸膏經(jīng)干燥得含有丹酚 酸B的粉末。按照本發(fā)明方法獲得的含丹酚酸B提取物可直接和輔料以1: 1的組 合制成固體制劑，如片劑、膠嚢劑等。輔料包括淀粉、微晶纖維素、微粉 硅膠、交聯(lián)羧曱基纖維素鈉、硬脂酸鎂。提取物和輔料以1: l的用量組合混合均勻后，可采用膠嚢填充機(jī)制 成膠嚢劑，也可采用粉末直接壓片的方法制成片劑，釆用粉末直接壓片的 方法優(yōu)于傳統(tǒng)的濕法制顆粒再壓片，體現(xiàn)在傳統(tǒng)的濕法制顆粒再壓片所 使用的輔料量較大，在保證丹酚酸B含量的情況下需要做成較大的片子 或增加服用片數(shù)，這些都不利于患者服用，且片子外觀顏色較深，色差明 顯，不利于包衣做成薄膜衣片。而粉末直接壓片不僅縮短工藝過程，降低 成本，更有利于生產(chǎn)控制，且壓出的片子外觀光潔，顏色較淡，更有利于 包衣做成薄膜衣片。本發(fā)明的有益效果主要提現(xiàn)在工藝過程簡單，工藝參數(shù)更合理，易 于操作，且成本較低，所得到粉末中丹酚酸B含量可達(dá)60。/。以上，得率 在3%以上；得率對目前其他丹酚酸B制備方法來說^支高，可以說是有效 地利用了丹參藥材。所得丹酚酸B的提取物粉末加入一些常用輔料，經(jīng) 過筒單工藝就可以制成膠嚢劑、片劑等一些固體制劑，適宜工業(yè)化大規(guī)才莫 生產(chǎn)。

圖1為丹參藥材6(TC水提取第一煎藥液中丹酚酸B的含量色譜圖； 圖2為丹參藥材60°C水提取第二煎藥液中丹酚酸B的含量色譜圖； 圖3為丹參藥材100。C水提取第一煎藥液中丹酚酸B的含量色語圖； 圖4為丹參藥材10 0 °C水提取第二煎藥液中丹酚酸B的含量色譜圖； 圖5為丹參藥材50。/。乙醇提取第一煎藥液中丹酚酸B的含量色譜圖； 圖6為丹參藥材50。/。乙醇提取第二煎藥液中丹酚酸B的含量色譜圖；圖7為實(shí)施例1中丹酚酸B含量測定色譜圖；圖8為實(shí)施例2中丹酚酸B含量測定色譜圖；圖9為實(shí)施例3中丹酚酸B含量測定色譜圖；圖10為實(shí)施例4中丹酚酸B含量測定色譜圖；圖11為實(shí)施例5中丹酚酸B含量測定色i普圖；圖12為實(shí)施例6中丹酚酸B含量測定色譜圖；圖13為丹酚酸B對照品色譜圖。 具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一 步描述,但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于此丹酚酸B含量檢測方法照高效液相色譜法測定儀器名稱agilentl 100高效液相色語儀色譜柱zorbaxSB-C18流動(dòng)相5% (v/v)醋酸溶液-乙腈(82: 18, v: v) 流速1.0ml/min 才企測波長285nm 柱溫25 C對照品溶液的制備精密稱取6(TC減壓真空干燥5小時(shí)的丹酚酸B 對照品適量，加水溶解制成11.2ug/mg的溶液，過濾。供試品溶液的制備取含丹酚酸B的提取物粉末0.1g,精密稱定，置 于50ml容量瓶中，加水至刻度，搖勻。精密吸取2ml至25ml的容量瓶 中，加水至刻度，搖勻，過濾。對照品溶液和供試品溶液各進(jìn)樣20ul，測定。實(shí)施例1:取丹參藥材50kg,力卩8倍質(zhì)量50%乙醇提取2次，每次2小時(shí)，合 并才是耳又液。在60。C下減壓回收乙醇至無醇口未。用離心才幾離心去除沉淀， 上D101-I大孔樹脂，用水洗脫至水洗液無糖反應(yīng)后，用30%乙醇洗脫4 個(gè)柱體積，收集洗脫液在60。C以下減壓濃縮至浸膏，噴霧干燥，得1.94kg 黃色粉末，其中丹酚酸B含量64.9。/。(圖7),得率為3.88%。實(shí)施例2:取丹參藥材50kg，力。8倍質(zhì)量40%乙醇提取2次，每次2小時(shí)，合 并換_耳又液。在60。C下減壓回收乙醇至無醇味。用離心才幾離心去除沉淀， 上D1400大孔樹脂，用水洗脫至水洗液無糖反應(yīng)后，用30%乙醇洗脫4 個(gè)柱體積，收集洗脫液在60。C以下減壓濃縮至浸膏，噴霧干燥，得2.01kg 黃色粉末，其中丹酚酸B含量64.2。/。(圖8),得率為4%。實(shí)施例3:取丹參藥材50kg，力。8倍質(zhì)量50%乙醇^是取2次，每次2小時(shí)，合 并提取液。在60。C下減壓回收乙醇至無醇味。用離心機(jī)離心去除沉淀， 上D1400大孔樹脂，用水洗脫至水洗液無糖反應(yīng)后，用30%乙醇洗脫4 個(gè)柱體積，收集洗脫液在60。C以下減壓濃縮至浸膏，噴霧干燥，得1.6kg 黃色粉末，其中丹酚酸B含量67.50/。(圖9),得率為3.2%。實(shí)施例4:取丹參藥材50kg,力口8倍質(zhì)量50%乙醇提取2次，每次2小時(shí)，合 并才是耳又液。在60。C下減壓回收乙醇至無醇p木。用離心才幾離心去除沉淀， 上D1400大孔樹脂，用水洗脫至水洗液無糖反應(yīng)后，用40%乙醇洗脫4 個(gè)柱體積，收集洗脫液在60。C以下減壓濃縮至浸膏，噴霧干燥，得1.82kg 黃色粉末，其中丹酚酸B含量63.8。/。(圖10),得率為3.88%。實(shí)施例5:取丹參藥材50kg,加8倍質(zhì)量60%乙醇^是取2次，每次2小時(shí)，合 并4是耳又液。在6(TC下減壓回收乙醇至無醇p木。用離心才幾離心去除沉淀， 上D101-I大孔樹脂，用水洗脫至水洗液無糖反應(yīng)后，用30%乙醇洗脫4 個(gè)柱體積，收集洗脫液在60。C以下減壓濃縮至浸膏，噴霧干燥，得1.54kg 黃色粉末，其中丹酚酸B含量64。/。(圖11),得率為3.08%。實(shí)施例6:取丹參藥材50kg，加8倍質(zhì)量60%乙醇提取2次，每次2小時(shí)，合 并才是取液。在6(TC下減壓回收乙醇至無醇p未。用離心才幾離心去除沉淀， 上D1400大孔樹脂，用水洗脫至水洗液無糖反應(yīng)后，用40%乙醇洗脫4 個(gè)柱體積，收集洗脫液在60。C以下減壓濃縮至浸膏，噴霧干燥，得1.66kg 黃色粉末，其中丹酚酸B含量60.5。/。(圖12)，得率為3.32%。實(shí)施例7 (對比例)取丹參藥材50kg,加8倍質(zhì)量水60。C下提取2次，每次2小時(shí)，分 別取第一煎藥液和第二煎藥液測定丹酚酸B,第一煎藥液中含有丹酚酸 B0.769kg (圖1 )，第二煎藥液中含有丹酚酸B0.662kg (圖2 )。取丹參藥材50kg,力。8倍質(zhì)量水100。C下提取2次，每次2小時(shí)，分 別取第一煎藥液和第二煎藥液測定丹酚酸B，第一煎藥液中含有丹酚酸 B1.17kg (圖3),第二煎藥液中含有丹酚酸B0.462kg (圖4 )。取丹參藥材50kg,力。8倍質(zhì)量50%乙醇提取2次，每次2小時(shí)，分 別取第一煎藥液和第二煎藥液測定丹酚酸B,第一煎藥液中含有丹酚酸 B1.454kg (圖5)，第二煎藥液中含有丹酚酸B0.704kg (圖6 )。實(shí)施例8:含丹酚酸B提取物的片劑制備取實(shí)施例1丹酚酸B提取物1000g，加入淀粉400g,微晶纖維素400g， 交聯(lián)羧曱基纖維素鈉100g，微粉硅膠90g,硬脂酸鎂10g，充分混勻后壓 片，壓出每片重0.2g的片子10000片，外觀光潔，顏色較淡，有利于包衣做成薄膜衣片o實(shí)施例9:含丹酚酸B提取物的片劑制備取實(shí)施例2丹酚酸B提取物1000g，加入淀4分450g,纟鼓晶纖維素450g, 微粉硅膠90g，硬脂酸鎂10g,充分混勻后壓片，壓出每片重0.2g的片子 10000片，外觀光潔，顏色較淡，有利于包衣做成薄膜衣片。實(shí)施例10:含丹酚酸B提取物的膠嚢劑的制備取實(shí)施例3丹酚酸B提耳又物1000g,加入淀粉450g,孩史晶纖維素450g, 微粉硅膠100g,充分混勻后灌膠嚢，制成每粒重0.2g的膠嚢10000粒。
權(quán)利要求
1. 一種丹酚酸B的提取方法，所述方法包括(1)取丹參藥材用6～10倍質(zhì)量的30～60％乙醇溶液提取1～4次，合并提取液，于40～70℃下回收乙醇至無醇味、揮去乙醇的提取液去除沉淀物，得到濾液；(2)濾液上大孔吸附樹脂樹脂，蒸餾水洗脫至洗脫液澄清后，再用20～50％乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫液；(3)乙醇洗脫液于40～70℃下濃縮，干燥，得到含有丹酚酸B的粉末。
2. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂樹脂為 D101-I大孔樹脂或D1400大孔樹脂。
3. 如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于所述步驟(l)中以50%乙醇 溶液提取。
4. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述步驟(1 )中于50~60°C 下回收乙醇。
5. 如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于所述步驟(2)中30%乙醇洗脫。
6. 如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于所述步驟(3)中乙醇洗脫液 于50 60。C下減壓濃縮。
7. 如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中丹參藥材用 6 10倍質(zhì)量的30 60%乙醇溶液提取2 3次，合并提取液再進(jìn)行乙醇回 收。
8. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述方法如下(1 )取丹參藥材用8倍質(zhì)量的50%乙醇溶液提取2 3次，合并提取液， 于50 60。C下回收乙醇至無醇味，離心或者過濾去除沉淀物，得 到濾液；(2 )濾液上大孔吸附樹脂樹脂D101- I或D1400，先用蒸餾水洗脫至 洗脫液澄清，再用3 5個(gè)柱體積的30%乙醇溶液洗脫，收集乙醇 洗脫液；(3)乙醇洗脫液于50 60。C下減壓濃縮得浸膏，浸膏經(jīng)干燥得含有丹 酚酸B的4分末。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種丹酚酸B的提取方法，所述方法包括(1)取丹參藥材用30～60％乙醇溶液提取1～4次，合并提取液，回收乙醇至無醇味、揮去乙醇的提取液去除沉淀物，得到濾液；(2)濾液上大孔吸附樹脂樹脂，蒸餾水洗脫至洗脫液澄清后，再用20～50％乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫液；(3)乙醇洗脫液于40～70℃下濃縮，干燥，得到含有丹酚酸B的粉末。本發(fā)明的有益效果主要提現(xiàn)在工藝過程簡單，工藝參數(shù)更合理，易于操作，且成本較低，所得到粉末中丹酚酸B含量可達(dá)60％以上，得率在3％以上，有效地利用了丹參藥材；所得丹酚酸B的提取物粉末加入一些常用輔料，經(jīng)過簡單工藝就可以制成膠囊劑、片劑等一些固體制劑，適宜工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07D307/00GK101270103SQ20081006146
公開日2008年9月24日 申請日期2008年5月4日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月4日
發(fā)明者鶴 馮, 林徐劍, 柴建國, 王木蘭 申請人:正大青春寶藥業(yè)有限公司