抗N3pGlu淀粉樣蛋白BETA肽抗體及其用圖
【專利說明】抗N3pGIu淀粉樣蛋白BETA肽抗體及其用途
[0001] 本申請是申請日為2011年8月9日的中國專利申請201180039876. 1 "抗N3pGlu 淀粉樣蛋白BETA肽抗體及其用途"的分案申請。
技術(shù)領(lǐng)域
[0002] 本發(fā)明涉及能選擇性結(jié)合N3pGlu淀粉樣蛋白Beta肽的抗體以及它們在淀粉樣蛋 白Beta(AP，也稱為Abeta)肽相關(guān)疾病的治療中的用途。
【背景技術(shù)】
[0003] 循環(huán)形式的AP肽是由前體蛋白即淀粉樣蛋白前體蛋白（APP)裂解而產(chǎn)生的 38-43個氨基酸（大部分為38、40或42個氨基酸）組成。AP從可溶性形式向具有高片 層含量的不溶性形式的轉(zhuǎn)化以及這些不溶性形式作為神經(jīng)炎性斑塊和腦血管斑塊在腦部 沉積，已證明與各種疾病和病況相關(guān)，包括阿爾茨海默?。ˋlzheimer'sdisease) (AD)、唐 氏綜合癥（Down'sSyndrome)和腦淀粉樣蛋白血管?。–AA)。
[0004] 斑塊中存在的沉積物主要由A0肽的不均勻混合物組成。N3pGluA0，也稱為 N3pE或A0p3 42，是僅見于斑塊的A0肽截短形式。N3pGluA0缺乏A0N-端的頭2個氨 基酸殘基并具有源自第3個氨基酸位置的谷氨酸的焦谷氨酸。盡管N3pGluA0肽是腦 中沉積的A0的少量成分，但研究已經(jīng)證明N3pGluA0肽具有侵襲性聚集（aggressive aggregation)性質(zhì)并在沉積級聯(lián)早期積累。
[0005] 盡管先前已經(jīng)描述了靶向N3pGluAP肽的多克隆抗體和單克隆抗體（US 7，122,374和冊2〇1〇/〇〇9987)，但仍然需要高親和力抗吧口61114 0單克隆抗體，以在體內(nèi) 結(jié)合靶標(biāo)（即斑塊結(jié)合）并隨之降低斑塊水平。另外，假如氨基-端和羧基-端的抗A0 抗體導(dǎo)致腦淀粉樣蛋白血管?。–AA)相關(guān)的微出血增加，就需要不會導(dǎo)致微出血增加的抗 N3pGluAP抗體，即使慢性治療導(dǎo)致沉積斑塊明顯減少。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明范圍之內(nèi)的抗體是具有多種所需性質(zhì)的治療上有用的N3pGluA0肽拮抗 劑。本發(fā)明的抗體以高親和力結(jié)合人N3pGluA0肽并表現(xiàn)出劑量依賴性體內(nèi)斑塊減少，而 不增加腦淀粉樣蛋白血管?。–AA)相關(guān)的微出血。
【具體實施方式】
[0007] 本發(fā)明提供人工程化抗N3pGluAP抗體或其抗原-結(jié)合片段，其25°C時對于人 N3pGluAP肽的Kd小于1x109M。在一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供人工程化抗 N3pGluAf3抗體或其抗原-結(jié)合片段，其25°C時對于人N3pGluAf3肽的Kd小于9x10:° M。在另一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供人工程化抗N3pGluAP抗體或其抗原-結(jié)合片 段，其25°C時對于人N3pGluAf3肽的Kd小于7x10:°M。在另一個優(yōu)選的實施方案中，本 發(fā)明提供人工程化抗N3pGluAP抗體或其抗原-結(jié)合片段，其25°C時對于人N3pGluA0 肽的Kd介于9x10wM和1x10wM之間。在另一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供抗N3pGluAf3抗體或其抗原-結(jié)合片段，其25°C時對于人N3pGluAf3肽的Kd介于9x1〇10 M和1x10 10M之間。
[0008] 本發(fā)明還提供人工程化抗N3pGluAP抗體或其抗原-結(jié)合片段，其25°C時對于 人N3pGluA0肽的Kd小于1x10 9M，或小于9x10wM，或小于7x10wM，或介于9x 10wM和1x10wM之間，并能在體內(nèi)減少斑塊。在再一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提 供人工程化抗N3pGluAP抗體或其抗原-結(jié)合片段，其25°C時對于人N3pGluAP肽的Kd 小于1x10 9M，或小于9x10wM，或小于7x10wM，或介于9x10wM和1x10 10M 之間，并能在體內(nèi)減少斑塊，而不增加CAA相關(guān)的微出血。
[0009] 本發(fā)明也提供人工程化抗N3pGluA0抗體或其抗原-結(jié)合片段，其包含LCVR和 HCVR，其中LCDR1 是KSXASLLYSRXJTYLN(SEQIDNO: 51)，LCDR2 是AVSKLX4S(SEQID NO: 52)，LCDR3 是VQGTHYPFT(SEQIDNO: 5)，HCDR1 是GYX5FTX6YYIN(SEQIDNO: 53)， HCDR2 是WINPGSGNTKYNEKFKG(SEQIDNO: 8)，HCDR3 是EGX7TVY(SEQIDNO: 54)，其中Xi 是S或T，乂2是Q或R，X3是G或S，X4是D或G，X5是D或T，X6是R或D，X7是I、T、E或V。
[0010] 本發(fā)明提供人工程化抗N3pGluA0抗體或其抗原-結(jié)合片段，其包含輕鏈可變 區(qū)（LCVR)和重鏈可變區(qū)（HCVR)，其中所述LCVR包含IXDR1、IXDR2、IXDR3多肽，HCVR包含 HCDR1、HCDR2、HCDR3 多肽，其選自： a) LCDR1 是KSSQSLLYSRGKTYLN(SEQIDNO: 3)，LCDR2 是AVSKLDS(SEQIDN0: 4)， LCDR3 是VQGTHYPFT(SEQIDNO: 5)，HCDR1 是GYDFTRYYIN(SEQIDNO: 6)，HCDR2 是 WINPGSGNTKYNEKFKG(SEQIDNO: 8)，HCDR3 是EGITVY(SEQIDNO: 9); b) LCDR1 是KSSQSLLYSRGKTYLN(SEQIDNO: 3)，LCDR2 是AVSKLDS(SEQIDNO: 4)， LCDR3 是VQGTHYPFT(SEQIDNO: 5)，HCDR1 是GYTFTRYYIN(SEQIDNO: 7)，HCDR2 是 WINPGSGNTKYNEKFKG(SEQIDNO: 8)，HCDR3 是EGITVY(SEQIDNO: 10); c) LCDR1 是KSSQSLLYSRGKTYLN(SEQIDNO: 3)，LCDR2 是AVSKLDS(SEQIDNO: 4)， LCDR3 是VQGTHYPFT(SEQIDNO: 5)，HCDR1 是GYTFTDYYIN(SEQIDNO: 40)，HCDR2 是 WINPGSGNTKYNEKFKG(SEQIDNO: 8)，HCDR3 是EGETVY(SEQIDNO: 41); d) LCDR1 是KSSQSLLYSRGKTYLN(SEQIDNO: 3)，LCDR2是AVSKLGS(SEQIDNO: 35)， LCDR3 是VQGTHYPFT(SEQIDNO: 5)，HCDR1 是GYTFTRYYIN(SEQIDNO: 7)，HCDR2 是 WINPGSGNTKYNEKFKG(SEQIDNO: 8)，HCDR3 是EGITVY(SEQIDNO: 10);和 e) LCDR1 是KSTRSLLYSRSKTYLN(SEQIDNO: 45)，LCDR2是AVSKLDS(SEQIDNO: 4)， LCDR3 是VQGTHYPFT(SEQIDNO: 5)，HCDR1 是GYTFTDYYIN(SEQIDNO: 40)，HCDR2 是 WINPGSGNTKYNEKFKG(SEQIDNO: 8)，HCDR3 是EGVTVY(SEQIDNO: 46)。
[0011] 在一個實施方案中，本發(fā)明提供人工程化抗N3pGluA0抗體或其抗原-結(jié)合片 段，其包含LCVR和HCVR，其中LCDR1 是SEQIDNO: 3，LCDR2 是SEQIDNO: 4，LCDR3 是 SEQIDNO: 5,HCDR1 是SEQIDNO: 6,HCDR2 是SEQIDNO: 8,HCDR3 是SEQIDNO: 9。 在一個實施方案中，本發(fā)明提供人工程化抗N3pGluAP抗體或其抗原-結(jié)合片段，其包含 LCVR和HCVR，其中LCDR1 是SEQIDN0: 3,LCDR2 是SEQIDN0: 4,LCDR3 是SEQIDN0: 5，HCDR1 是SEQIDNO: 7，HCDR2 是SEQIDNO: 8，HCDR3 是SEQIDNO: 10。在一個優(yōu)選的 實施方案中，本發(fā)明提供人工程化抗N3pGluA0抗體或其抗原-結(jié)合片段，其包含LCVR和 HCVR，其中LCDR1 是SEQIDNO: 3，LCDR2 是SEQIDNO: 4，LCDR3 是SEQIDNO: 5，HCDR1 是SEQIDNO: 40，HCDR2 是SEQIDNO: 8，HCDR3 是SEQIDNO: 41。在一個優(yōu)選的實施方 案中，本發(fā)明提供人工程化抗N3pGluA0抗體或其抗原-結(jié)合片段，其包含LCVR和HCVR， 其中LCDR1 是SEQIDNO: 3,LCDR2 是SEQIDNO: 35,LCDR3 是SEQIDNO: 5,HCDR1 是 SEQIDNO: 7,HCDR2 是SEQIDNO: 8,HCDR3 是SEQIDNO: 10。在一個優(yōu)選的實施方案 中，本發(fā)明提供人工程化抗N3pGluA0抗體或其抗原-結(jié)合片段，其包含LCVR和HCVR，其 中LCDR1 是SEQIDNO: 45，LCDR2 是SEQIDNO: 4，LCDR3 是SEQIDNO: 5，HCDR1 是SEQ IDNO: 40，HCDR2 是SEQIDNO: 8，HCDR3 是SEQIDNO: 46。
[0012] 在另一個實施方案中，本發(fā)明提供人工程化抗N3pGluA0抗體或其抗原-結(jié)合片 段，其包含輕鏈可變區(qū)（LCVR)和重鏈可變區(qū)（HCVR)，其中所述LCVR和HCVR是選自以下的 多肽： a. SEQIDN0: 11 的 LCVR和 SEQIDN0: 12 的HCVR; b. SEQIDNO: 11 的 LCVR和 SEQIDNO: 13 的HCVR; c. SEQIDNO: 11 的 LCVR和 SEQIDNO: 42 的HCVR; d. SEQIDNO: 36 的 LCVR和 SEQIDNO: 37 的HCVR;和 e. SEQIDNO: 47 的 LCVR和 SEQIDNO: 48 的HCVR〇
[0013] 在一個實施方案中，本發(fā)明提供抗N3pGluA0單克隆抗體或其抗原-結(jié)合片段， 其包含SEQIDN0: 11的LCVR和SEQIDN0: 12的HCVR。在一個實施方案中，本發(fā)明提供 抗N3pGluAf3單克隆抗體或