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免疫微陣列傳感芯片以及致病微生物痕量檢測裝置的制作方法

文檔序號:11560541閱讀:372來源:國知局
免疫微陣列傳感芯片以及致病微生物痕量檢測裝置的制造方法

本實用新型涉及生物檢測技術領域,具體涉及一種免疫微陣列傳感芯片、以及使用該免疫微陣列傳感芯片的致病微生物痕量檢測裝置。



背景技術:

現(xiàn)有包括臨床檢驗以及食品安全領域肝炎檢測、病毒檢測、抗生素檢測、毒素檢測等ELISA原理方法,需要使用的檢測芯片成本較高。



技術實現(xiàn)要素:

為解決上述問題,本實用新型的目的在于提供一種免疫微陣列傳感芯片,可以運用傳統(tǒng)的雙抗夾心酶聯(lián)免疫反應體系,并結(jié)合堿性磷酸酶的催化銀單質(zhì)特性實現(xiàn)對目標物的檢測。

本實用新型的另一目的在于提供一種,致病微生物痕量檢測裝置,制作取材方便、成本較低,比較適合實驗室。

本實用新型采取的詳細技術方案為:一種免疫微陣列傳感芯片,其包括傳感芯片;傳感芯片包括基礎電極以及芯片基底;基礎電極設置在芯片基底上;基礎電極包括設置在芯片基底邊緣的接線插片、以及至少一個的整體呈圓形的PAD;PAD包括第一極端、與第一極端電性連接的第一極插指、以及第二極端、與第二極端電性連接的第二極插指;第一極端、第二極端分別與接線插片電性連接;第一極插指與第二極插指交叉地布置。

優(yōu)選地,基礎電極為金制成。

優(yōu)選地,第一極插指的寬度以及第二極插指的寬度均為100μm,且第一極插指與第二極插指之間的間距為20μm。

一種致病微生物痕量檢測裝置,其包括孔板、以及上述的傳感芯片;孔板整體呈盒狀;孔板的頂端面設置有與PAD相匹配的凹孔;傳感芯片鋪設在孔板的底部且與孔板固定連接。

進一步地,傳感芯片之間的間距為0.2mm。傳感芯片與孔板裝配時,傳感芯片可以微調(diào),從而使各凹孔與各PAD配合,比較方便。

優(yōu)選地,芯片基底為77 mm X17.8 mm X1 mm的玻璃片;每個芯片基底上陣列地設置有四組基礎電極;孔板為九十六孔的孔板。

優(yōu)選地,孔板為酶聯(lián)免疫九十六孔板通過物理方法打磨掉底板的孔板。酶聯(lián)免疫九十六孔板為比較常用的孔板,成本較低,對于通常實驗室,采用酶聯(lián)免疫九十六孔板作為孔板,可以使本實施例的一種致病微生物痕量檢測裝置的制作取材方便、成本較低。

與現(xiàn)有技術相比,本實用新型具有如下有益效果:1、可以運用傳統(tǒng)的雙抗夾心酶聯(lián)免疫反應體系,并結(jié)合堿性磷酸酶的催化銀單質(zhì)特性實現(xiàn)對目標物的檢測;2、致病微生物痕量檢測裝置的制作取材方便、成本較低。

附圖說明

圖1是實施例一的一種免疫微陣列傳感芯片的俯視的示意圖。圖1中,粗實線表示基礎電極的一部分。

圖2是PAD的示意圖。

圖3是實施例一的一種免疫微陣列傳感芯片的制作流程示意圖。圖3中,點狀填充表示基礎電極(即金層),網(wǎng)狀填充表示正光刻膠,斜線填充表示芯片基底(即玻璃片);箭頭表示進入下一步制作流程。

圖4是實施例二的一種致病微生物痕量檢測裝置的示意圖。

圖5是實施例一的一種免疫微陣列傳感芯片的工作原理的示意圖。

傳感芯片1;基礎電極11;PAD111;第一極端1111;第一極插指1112;第二極端1113;第二極插指1114;接線插片112;芯片基底12;孔板2;凹孔21。

具體實施方式

實施例一。

請參閱圖1、圖2,本實施例為一種免疫微陣列傳感芯片,其包括傳感芯片1;傳感芯片1包括基礎電極11以及芯片基底12;基礎電極11設置在芯片基底12上。優(yōu)選地,基礎電極11為金制成。

基礎電極11包括設置在芯片基底12邊緣的接線插片112、以及至少一個的整體呈圓形(俯視時)的PAD111。

PAD111包括第一極端1111、與第一極端1111電性連接的第一極插指1112、以及第二極端1113、與第二極端1113電性連接的第二極插指1114;第一極端1111、

第二極端1113分別與接線插片112電性連接。

第一極插指1112與第二極插指1114交叉地布置。優(yōu)選地,第一極插指1112的寬度以及第二極插指1114的寬度均為100μm,且第一極插指1112與第二極插指1114之間的間距為20μm。

本實施例的免疫微陣列傳感芯片的制作流程如下:首先將潔凈商品化的玻璃片(即芯片基底12成形前的原料)徹底洗凈并烘干;用濺射鍍膜機在玻璃片上濺射300nm厚度的金層(即基礎電極11的原材料);再在金層的表面上用正光刻膠AZ4330對玻璃片進行旋涂形成正光刻膠層;再將已旋涂的玻璃片在90℃烘箱中進行30min固化,以保障正光刻膠層層的固化效果;通過紫外曝光60s在正光刻膠層上形成電極的圖形;再顯影2min除去無圖形覆蓋的正光膠部分,并清洗、吹洗、放入130℃烘箱中堅膜30min;然后用反應離子刻蝕機進行干法刻蝕;利用丙酮、酒精超聲去除剩余的正光刻膠,將圖形化后未覆蓋正膠部分的金層完全去除;最后利用數(shù)控切割機將玻璃片切割成所需要的形狀;清洗、烘干后得到本實施例的免疫微陣列傳感芯片。

本實施例的免疫微陣列傳感芯片的工作原理如下:本實施例以檢測大腸埃希氏菌O157:H7為例進行說明。

使用前,將接線插片112與多功能伏安儀電性連接(請參閱圖1,免疫微陣列傳感芯片的左上角的五個接線插片112中,從上往下數(shù)第四個接線插片112與四個PAD111的第一極端1111/第二極端1113電性連接,其他的四個接線插片112分別與四個PAD111的第二極端1113/第一極端1111電性連接;將接線插片112與多功能伏安儀電性連接時,可以將第四個接線插片112與多功能伏安儀的正極輸出端電性連接、其他四個接線插片112均與多功能伏安儀的負極輸出端電性連接;或者將第四個接線插片112與多功能伏安儀的負極輸出端電性連接、其他四個接線插片112均與多功能伏安儀的正極輸出端電性連接;對于其他整列方式的免疫微陣列傳感芯片也可以依次類推)。請參閱圖5。本實施例以檢測大腸埃希氏菌O157:H7為例進行說明。使用本實用新型的免疫微陣列傳感芯片時,將大腸埃希氏菌O157:H7單克隆抗體作為捕獲抗體、通過與PAD111表面發(fā)生共價交聯(lián)反應固定到第一極插指1112與第二極插指1114之間的間隙里。

當有目標檢測物(大腸埃希氏菌O157:H7)和標記堿性磷酸酶的(大腸埃希氏菌O157:H7)兩種單克隆抗體滴入時,在PAD111表面和捕獲抗體(大腸埃希氏菌O157:H7單克隆抗體)一起通過特異性免疫反應形成夾心復合物(一個大腸埃希氏菌O157:H7抗體、目標分析物大腸埃希氏菌O157:H7、以及另一種大腸埃希氏菌O157:H7抗體【堿性磷酸酶】的夾心復合物);而吸附到PAD111表面的大腸埃希氏菌O157:H7抗體(堿性磷酸酶)催化其底物AAP水解并生成相應的還原劑抗壞血酸(AA),還原劑抗壞血酸(AA)使銀增強溶液中的銀離子還原成銀單質(zhì)并沉積到PAD111表面,導致PAD111上相鄰的第一極端1111與第二極端1113導通。

根據(jù)歐姆定律,通過PAD111的電流和施加到PAD111上的電壓成線性關系,其斜率就代表電導率;根據(jù)線性掃描方法(通過多功能伏安儀讀取數(shù)據(jù))得到的伏安曲線計算出PAD111的電導率,從而可以計算出大腸埃希氏菌O157:H7的含量。

實施例二。

請參看圖3,本實施例為一種致病微生物痕量檢測裝置,包括孔板2、以及實施例一中的傳感芯片1。

孔板2整體呈盒狀;孔板2的頂端面設置有與PAD111相匹配的凹孔21(即PAD111與凹孔21的數(shù)量、位置均相同,且PAD111的直徑與凹孔21的內(nèi)徑相等)。

傳感芯片1鋪設在孔板2的底部且與孔板2固定連接。

優(yōu)選地,傳感芯片1之間的間距為0.2mm。傳感芯片1與孔板2裝配時,傳感芯片1可以微調(diào),從而使各凹孔21與各PAD111配合,比較方便。

優(yōu)選地,芯片基底12為77 mm X17.8 mm X1 mm(長X寬X厚)的玻璃片;每個芯片基底12上陣列地(平移陣列、鏡像列陣、翻轉(zhuǎn)列陣或者上述陣列方式的組合)設置有四組(四個PAD111以及與其相應的接線插片112為一組基礎電極11)基礎電極11;孔板2為九十六孔的孔板。另外,根據(jù)需要,芯片基底12也可以采用其他規(guī)格的玻璃片,也可以為其他規(guī)格的孔板。

進一步地,孔板2為酶聯(lián)免疫九十六孔板通過物理方法(比如通過磨床等)打磨掉底板的孔板。酶聯(lián)免疫九十六孔板為比較常用的孔板,成本較低,對于通常實驗室,采用酶聯(lián)免疫九十六孔板作為孔板,可以使本實施例的一種致病微生物痕量檢測裝置的制作取材方便、成本較低。

將各種試劑加入凹孔21中,并將接線插片112與多功能伏安儀電性連接,即可對致病微生物痕量進行檢測。

需要理解的是,術語“中心”、“縱向”、“橫向”、“前”、“后”、“左”、“右”、“豎直”、“水平”、“頂”、“底”、“內(nèi)”、“外”等指示的方位或位置關系為基于附圖所示的方位或位置關系,僅是為便于描述本發(fā)明和簡化描述,而不是指示或暗指所指的裝置或元件必須具有特定的方位、為特定的方位構(gòu)造和操作,因而不能理解為對本發(fā)明保護內(nèi)容的限制。

以上的具體實施方式僅為本創(chuàng)作的較佳實施例,并不用以限制本創(chuàng)作,凡在本創(chuàng)作的精神及原則之內(nèi)所做的任何修改、等同替換、改進等,均應包含在本創(chuàng)作的保護范圍之內(nèi)。

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