一種瑞香狼毒組分粉針劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種瑞香狼毒組分粉針劑，所述組分用以下方法制備：將瑞香狼毒丙酮乙醇混合溶液提取，提取物過大孔樹脂后用制備色譜進(jìn)行梯度洗脫，流動相A為水，流動相B為乙腈，在時間段45-50分鐘收集洗脫液，濃縮干燥得到。
【專利說明】一種瑞香狼毒組分粉針劑
【技術(shù)領(lǐng)域】:
[0001]本發(fā)明涉及一種抗腫瘤中藥提取物，特別涉及從中藥瑞香狼毒中提取的抗腫瘤提取物及其提取方法與用途。
【背景技術(shù)】:
[0002]中藥材瑞香狼毒，英文名:RADIX STELLERAE CHAMAEJASMES，為瑞香科植物瑞香狼毒的干燥根。秋季采挖，除去雜質(zhì)、曬干，藥材呈紡錘形、圓錐形或長圓柱形，稍彎曲，單一或有分枝，長短不等，根頭部有地上莖殘跡，表面棕色至棕褐色，有扭曲的縱溝及橫生隆起的皮孔和側(cè)根痕，栓皮剝落處露出白色柔軟纖維。體輕，質(zhì)韌，不易折斷，斷面呈纖維狀。皮部類白色，木部白色。氣微，味微辛，毒性比狼毒略低。
[0003]其性味:辛，溫；有毒，功能主治有:清熱解毒，消腫，瀉炎癥，止?jié)?，祛腐生肌。對瑞香狼毒化學(xué)成分分析表明，瑞香狼毒的根含留醇、酚性成分、氨基酸、三萜類、蒽甙、狼毒甙及有毒高分子有機酸。含香豆素類虎耳草素(pimpinelline)、異虎耳草素(isopimpinelline),異佛手柑丙酯(isobergapten),牛防風(fēng)素(sphondin),傘形花內(nèi)酯(7-羥基香豆素，umbelliferone), daphnoritin。還分得多種雙氫雙黃酮類狼毒素(chamae jasmine)，7_甲基狼毒素(7-methoxy chamae jasmin)，狼毒素甲基衍生物(chamae jasmenin A、B、C),新狼毒素 A、B (neochamaejasmin A and B),狼毒色原麗(chamaechromone),異狼毒素(isochamejasmin)。瑞香狼毒具有以下藥物作用:
[0004]抗腫瘤作用:動物實驗表明瑞香狼毒對小鼠移植性腫瘤確有一定的抑制作用，如腹腔注射其醇提液或水提液對小鼠Lewi s肺癌抑瘤率分別為70.2%及59.9% ;水提物對小鼠肝癌抑瘤率為36.8%，對小鼠宮頸癌H(U14)的抑癌率為48.5% ;揮發(fā)物對肝癌抑瘤率為42.5 %，對U14的抑瘤率為50.5 %，其抑瘤效果與農(nóng)吉利(40.2 % )，去甲基斑蝥素(38.2%)，氟脲嘧啶(39.0%)，長春新堿(43.8%)等相當(dāng)或略高，因而認(rèn)為該藥具有顯著的抗癌作用。
[0005]抗菌作用:瑞香狼毒的有效成分狼毒素為一抗菌性物質(zhì)，能抑制真菌、金黃色葡萄球菌與鏈球菌的生長。狼毒在試管內(nèi)對大腸桿菌、宋內(nèi)氏痢疾桿菌、變形桿菌、傷寒桿菌、副傷寒桿菌、綠膿桿菌及霍亂弧菌等7種革蘭氏陽性腸內(nèi)致病菌有抑制作用。狼毒的水浸劑(I:3)在試管內(nèi)對黃色毛癬菌、同心性毛癬菌、鐵銹色小芽孢癬菌、許蘭氏黃癬菌、奧杜盎氏小芽孢菌、羊毛狀小芽孢癬菌、腹股溝表皮癬菌、星形奴卡氏菌等皮膚真菌均有不同程度的抑制作用。
[0006]抗驚厥、抗癲癇作用:瑞香狼毒發(fā)現(xiàn)具有抗癲癇活性，其六種粗提物對多種動物驚厥模型均有不同程度的抗驚厥 作用，其中丙酮提取物抗癲癇作用更強，毒副作用更小。實驗結(jié)果表明瑞香狼毒能有效對抗最大電休克驚厥發(fā)作，延長戊四唑誘發(fā)的驚厥發(fā)作潛伏期，提高驚厥閾值，同時能延長驚厥小鼠的存活時間，降低死亡率；對聲源性驚厥發(fā)作也有較好的對抗作用；亦能明顯提高刺激大鼠皮層運動區(qū)誘發(fā)驚厥閾值，進(jìn)一步肯定該藥具有抗驚厥作用。其抗驚厥作用機制與動物腦內(nèi)氨基酸神經(jīng)遞質(zhì)比例失衡有關(guān)，也可能與細(xì)胞凋亡等有關(guān)。
[0007]對免疫系統(tǒng)的作用:狼毒對Raji細(xì)胞內(nèi)EB病毒有非常明顯的誘導(dǎo)作用，藥物濃度為I~100 μ g，EB病毒EA細(xì)胞陽性率為31.8%~52.0并能顯著地促進(jìn)EB病毒對淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化作用。還報道對EB病毒有激活作用的瑞香狼毒與促癌物TPA —樣，能促進(jìn)腺病毒5型轉(zhuǎn)化鼠胚細(xì)胞。從而證明狼毒不僅對EB病毒有激活作用，而且對腺病毒轉(zhuǎn)化細(xì)胞也有促進(jìn)作用。
[0008]臨床研究
[0009]治療腫瘤:用瑞香狼毒揮發(fā)液、醇提物、水提物治療惡性腫瘤54例，其中肝癌43例(I1、III期占94%)，肺癌6例，宮頸癌I例，宮體癌I例，卵巢癌I例，胰腺癌I例，腦膠質(zhì)癌I例。結(jié)果完全緩解3例，部分緩解9例，有效8例，改善14例，其客觀有效率為63%。治療結(jié)核病:用狼毒棗、狼毒膏治療結(jié)核效果良好，除對肺結(jié)核未大力試用外，其他腺、骨、皮膚、副睪等結(jié)核患者，如無嚴(yán)重并發(fā)癥及體力尚未過衰時，能堅持長期治療，都能得到滿意的痊愈或減輕的效果，對皮膚結(jié)核用狼毒膏療法，更能加速收效。
[0010]治療坐骨神經(jīng)痛:狼毒藥酒內(nèi)服治療坐骨神經(jīng)痛50例，大部分患者用藥2d后疼痛減輕，有效率90%。
[0011]現(xiàn)有的瑞香狼毒提取物，提取方法有多種，主要包括，水提，醇提，乙酸乙酯提，丙酮提，石油醚提，甲醇提等，還包括提取后用各種方法進(jìn)一步的分離提取物如:用不同的色譜柱分離不同的活性物質(zhì)。
[0012]現(xiàn)有瑞香狼毒制劑包括狼毒注射液，狼毒溶液(外用)，狼毒軟膏等，主要活性成分是乙醇提取物或水提取物，由于提取工藝簡單，其中含有大量混合成分，造成制劑副作用大，制劑穩(wěn)定性差，毒性高同時療效不佳。
[0013]采用純度高的提取物，有些難以制成合適的制劑，有些穩(wěn)定性差，有些難溶于水，生物利用度不聞等。
[0014]本發(fā)明對瑞香狼毒提取物進(jìn)行了研究，找到一種合適的提取物，并意外的發(fā)現(xiàn)其兼具抗腫瘤作用和抗炎作用，具有治療風(fēng)濕性或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的前景，為此，本發(fā)明將該提取物制備成藥物制劑，同時將其和其他抗腫瘤藥物以及抗炎藥物聯(lián)合使用，具有顯著增加現(xiàn)有藥物療效的作用，起到協(xié)同增效作用。本發(fā)明還對本發(fā)明的提取物進(jìn)行了制劑方面的研究，找到了多種可以使用的制劑形式包括適合局部服用，胃腸道服用，非胃腸道服用的劑型，為中藥的現(xiàn)代化提供了一種前景良好的產(chǎn)品。

【發(fā)明內(nèi)容】
:
[0015]本發(fā)明提供一種瑞香狼毒組分，所述組分由以下方法制備得到:
[0016]步驟1、將瑞香狼毒用丙酮和乙醇的混合溶液提取，得提取液；
[0017]步驟2、回收溶劑，濃縮干燥得到干浸膏，取大孔樹脂與干浸膏混勻拌樣；先用乙醇和乙酸乙酯的混合溶液作為流動相洗脫，然后改換乙醇作為流動相，洗脫得洗脫液，將該洗脫液回收乙醇后，濃縮干燥；
[0018]步驟3、將樣品用制備液相色譜進(jìn)一步進(jìn)行梯度洗脫分離，收集不同時間流出的洗脫液，得到。
[0019]優(yōu)選的，本發(fā)明的瑞香狼毒組分，其制備方法如下，[0020]步驟1、將Ikg瑞香狼毒藥材粉碎后加入IOL丙酮:乙醇=2:1 (V:v)的混合溶液，加熱回流I小時，濾出提取液，再次加入IOL丙酮:乙醇=2:l(v:v)的混合溶液，加熱回流I小時，濾出提取液，合并濾液得提取液；
[0021]步驟2、將合并后的提取液減壓回收溶劑，濃縮干燥得到干浸膏85g，取HPD100型大孔樹脂2kg，與干浸膏混勻拌樣；首先，采用乙醇:乙酸乙酯=1:l(v:v)5L作為流動相洗脫，然后改換95%乙醇(V:v)5L作為流動相，洗脫得洗脫液，將該洗脫液回收乙醇后，濃縮干燥得到15g樣品；
[0022]步驟3、將步驟2得到的樣品用制備液相色譜進(jìn)一步進(jìn)行梯度洗脫分離，收集不同時間流出的洗脫液，得到提取物；其中，梯度洗脫的色譜洗脫條件為:色譜柱為制備柱YMC-Pack Pro C18 ;30mmX 250mm,流動相A為水,流動相B為乙腈,梯度洗脫程序如下:
[0023]
【權(quán)利要求】
1.一種瑞香狼毒組分粉針劑，其特征在于，由瑞香狼毒組分和藥物載體制備而成，所述瑞香狼毒組分，是由以下方法制備得到: 步驟1、將Ikg瑞香狼毒藥材粉碎后加入IOL丙酮:乙醇=2:1的混合溶液，加熱回流I小時，濾出提取液，再次加入IOL丙酮:乙醇=2:1的混合溶液，加熱回流I小時，濾出提取液，合并濾液得提取液； 步驟2、將合并后的提取液減壓回收溶劑，濃縮干燥得到干浸膏85g，取HPD100型大孔樹脂2kg，與干浸膏混勻拌樣；首先，采用乙醇:乙酸乙酯=1:15L作為流動相洗脫，然后改換95%乙醇5L作為流動相，洗脫得洗脫液，將該洗脫液回收乙醇后，濃縮干燥得到15g樣品; 步驟3、將步驟2得到的樣品用制備液相色譜進(jìn)一步進(jìn)行梯度洗脫分離，收集不同時間流出的洗脫液，得到提取物；其中，梯度洗脫的色譜洗脫條件為:色譜柱為制備柱YMC-PackPro C18 ;30mmX 250mm，流動相A為水，流動相B為乙腈，梯度洗脫程序如下:
【文檔編號】A61K36/83GK103877266SQ201410127319
【公開日】2014年6月25日 申請日期:2014年3月31日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月31日
【發(fā)明者】陸建軍, 錢國棟 申請人:南通市康橋油脂有限公司