本發(fā)明涉及用作皮膚消毒劑，特別是手部和足部消毒劑，以及空氣消毒劑和除臭劑的抗菌消毒組合物。所述消毒組合物包含結(jié)合在非離子表面活性劑載體中的三銨化合物。本發(fā)明還描述了該組合物的使用方法。

背景技術(shù)：

如今，在先進(jìn)的醫(yī)療設(shè)備技術(shù)和抗生素藥物的時(shí)代，世界面臨著醫(yī)院和公共設(shè)施，如學(xué)校和政府機(jī)構(gòu)，已經(jīng)培養(yǎng)出抗生素耐藥微生物的現(xiàn)狀。疾病控制中心(Center for Disease Control,CDC)估計(jì)，美國(guó)每年有超過(guò)二百萬(wàn)人受抗生素耐藥感染的影響，至少有23000人因此死亡。醫(yī)院感染產(chǎn)生了如下術(shù)語(yǔ)：耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methacillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)，耐萬(wàn)古霉素腸球菌(vancomycin resistant Enterococcus,VRE)、碳青霉烯類抗生素耐藥的腸桿菌科細(xì)菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)、耐多藥肺結(jié)核(multi-drug resistant tuberculosis,MRT TB)和艱難梭狀芽胞桿菌(Clostridium difficile,C Dif)，作為一個(gè)已經(jīng)突變成對(duì)常用抗生素耐藥的細(xì)菌引起的感染的名錄。當(dāng)微生物通過(guò)接觸和懸浮顆粒轉(zhuǎn)移時(shí)，洗手和有效的手部消毒是用來(lái)減少微生物，尤其是抗生素耐藥菌的傳播的常見手段。

有效的手部消毒劑是醫(yī)護(hù)人員、患者和訪客用來(lái)殺滅醫(yī)療設(shè)施上和手部皮膚表面常見細(xì)菌的所需要的一種預(yù)防措施。根據(jù)博伊斯·JM等人的《醫(yī)療保健機(jī)構(gòu)手部衛(wèi)生指南》Boyce JM,et al in Guideline for Hand Hygiene in Health-Care Settings“手部衛(wèi)生被認(rèn)為是預(yù)防保健相關(guān)感染和抗微生物病原體的傳播的最重要的措施”。

醫(yī)護(hù)人員也會(huì)因做清潔程序或接觸住院患者的整個(gè)皮膚區(qū)域被金黃色葡萄球菌(S.aureus)，腸球菌(enterococci)，或艱難梭狀芽胞桿菌(Clostridium difficile)污染雙手。有研究估算了在接觸MRSA感染患者后，醫(yī)護(hù)人員的手套被MRSA的污染頻率。醫(yī)護(hù)人員對(duì)患者護(hù)理一段時(shí)間后，隔離該醫(yī)護(hù)人員，且在洗手前，從他們帶著手套的手上取下培養(yǎng)物；17％(95％CI 9–25)的與患者、患者衣物、患者床鋪的接觸會(huì)導(dǎo)致MRSA從病人轉(zhuǎn)移至醫(yī)護(hù)人員的手套上。

含酒精的手部消毒劑在接觸上是有效的，但酒精揮發(fā)后就沒(méi)有辦法來(lái)控制微生物的生長(zhǎng)。使用了羥乙基纖維素或聚酸乙烯的膠凝酒精消毒劑可以在酒精揮發(fā)后困住皮膚表面的死細(xì)胞和細(xì)菌。含酒精的手部消毒劑還易燃，會(huì)造成火災(zāi)，造成意外和故意的恐怖行為的皮膚灼傷。病人濫用這些產(chǎn)品將它們做為酒類飲料，這在監(jiān)獄、急救室、和醫(yī)療單位里都被報(bào)道過(guò)。

此外，持續(xù)使用含乙醇的手部消毒劑會(huì)導(dǎo)致皮膚損傷，并且對(duì)于需要經(jīng)常使用含酒精的手部消毒劑的醫(yī)護(hù)人員來(lái)說(shuō)，這是一個(gè)問(wèn)題。因此需要一種不含酒精的能有效持久地抗菌的手部消毒劑。

由此，本發(fā)明提供了一種用于皮膚和空氣的無(wú)酒精的消毒組合物，它包括革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽(yáng)性菌、病毒、真菌和原生動(dòng)物在內(nèi)的各種微生物都是抗菌有效的，并且具有持久和/或長(zhǎng)效的活性。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的第一個(gè)方面，提供了一種消毒組合物，包含

i)烷氧基甲硅烷基銨成膜化合物；

ii)芐烷銨或芐索氯銨；

iii)聚合雙胍；和

iv)表面活性劑體系，包括：

a)醇乙氧基化物；和

b)烷基糖苷或烷基多苷。

本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供了一種給皮膚清潔或消毒的方法，特別是手部或足部皮膚，包括將本發(fā)明的手部消毒組合物施用于受試者的皮膚上。

在本發(fā)明的另一方面，提供了一種治療或預(yù)防皮膚真菌感染的方法，包括將本發(fā)明的所述消毒組合物施用于受試者的皮膚上。

而本發(fā)明的另一方面，提供了一種空氣除臭和/或消毒的方法，包括將本發(fā)明所述的組合物散布在空氣中。

本發(fā)明的詳細(xì)描述

消毒組合物

本發(fā)明的第一個(gè)方面，提供了一種消毒組合物，包括：

i)烷氧基甲硅烷基銨成膜化合物；

ii)芐烷銨或芐索氯銨；

iii)聚合雙胍；和

iv)表面活性劑體系，包括：

a.醇乙氧基化物；和

b.烷基糖苷或烷基多苷。

在一些實(shí)施例中，烷氧基甲硅烷基銨成膜劑是烷氧基甲硅烷基季銨膜形成劑。烷氧基甲硅烷基季銨膜形成劑在本領(lǐng)域也被稱為有機(jī)硅季銨鹽成膜化合物。

在一些實(shí)施例中，烷氧基甲硅烷基銨成膜劑是式(I)的化合物：

[(R₁O)₃Si-A-N⁺(W)(X)(Y)]M^- (I)

其中，每個(gè)R₁分別選自氫和–C_1-6烷基；

A是C_1-6亞烴基基團(tuán)；

W和X分別選自–C_1-6烷基；

Y是C_10-20烷基基團(tuán)；并且

M是陰離子的平衡離子。

在具體的實(shí)施例中，使用了如下一種或多種：R₁為氫、甲基或乙基，特別是甲基或乙基，尤其是甲基；

A是C_2-4亞烴基基團(tuán)，特別是–CH₂CH₂CH₂-；

W和X分別選自甲基和乙基，特別是甲基；

Y是C_10-19烷基；特別是C₁₀烷基或C₁₈烷基，尤其是C₁₈烷基；并且

M選自F^-,Cl^-,Br^-和I^-,特別是Cl^-。

在具體的實(shí)施例中，式(I)的烷氧基甲硅烷基銨成膜化合物選自1-十八烷胺-N,N-二甲基-N-[3-三甲氧基甲硅烷基(丙烷基)]氯化物(也稱為3-三甲氧基甲硅烷基丙烷基-N,N-二甲基-N-十八烷基氯化銨)、3-三乙氧基甲硅烷基丙烷基-N,N-二甲基-N-十八烷基氯化銨、3-三乙氧基甲硅烷基丙烷基-N,N-二甲基-N-異癸氯化銨和3-三甲氧基甲硅烷基丙烷基-N,N-二甲基-N-異癸氯化銨。

烷氧基甲硅烷基銨成膜化合物在所述組合物中的含量為重量比(w/w)0.1％至1.5％，特別是(w/w)0.3％至1.0％，尤其是(w/w)0.4至0.6％。已知烷氧基甲硅烷基季銨化合物在水中水解生成三羥基硅官能團(tuán)，因此，例如，3-三甲氧基甲硅烷基丙烷基-N,N-二甲基_N-十八烷基氯化銨可以被水解生成3-三羥基甲硅烷基丙烷基-N,N-二甲基-N-十八烷基氯化銨。

在一些實(shí)施例中，所述芐烷銨或芐索氯銨化合物是式(II)中的化合物：

其中，R₂和R₃分別選自C_1-6烷基并且

R₄是C_8-18烷基或–(CH₂CH₂O)₂[4-(1-二甲基-3-二甲基丁基)苯基]。

在具體的實(shí)施例中，使用了如下一種或多種：：

R₂和R₃分別選自甲基或乙基，特別是甲基；并且

R₄選自C₈,C₁₀,C₁₂,C₁₄,C₁₆或C₁₈烷基或它們的混合或-(CH₂CH₂O)₂[4-(1-二甲基-3-二甲基丁基)苯基]。

根據(jù)美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局美國(guó)聯(lián)邦法規(guī)21條333和369部分-保健抗菌藥物暫行最終專論(Federal Drug Administration 21CFR Parts 333and 369-Tentative Final Monograph for Health-Care Antiseptic Drug)的規(guī)定，所述芐烷銨或芐索氯銨化合物的含量是占所述化合物重量比(w/w)約0.1％至1.0％，特別是占所述化合物重量比(w/w)約0.1％至約0.5％，尤其是占所述化合物重量比(w/w)約0.1％至0.2％，更特別的是占所述化合物重量比(w/w)約0.1％至0.13％。

在一些實(shí)施例中，所述聚合雙胍是式(III)的化合物：

其中Z為缺省或是一個(gè)有機(jī)二價(jià)橋接基團(tuán)，并且每個(gè)Z在整個(gè)聚合物中可以相同也可以不同；n大于等于3，優(yōu)選為5至20，并且X³和X⁴分別選自–NH₂,–NH-C(＝NH)-NH-CN，任意取代的烷基、任意取代的環(huán)烷基、任意取代的芳基、任意取代的雜環(huán)基和任意取代的雜芳基；或其藥學(xué)上可接受的鹽。優(yōu)選地，高分子化合物的分子量為至少1,000amu，更優(yōu)選地為1,000amu至50,000amu。在單一的組合物中，在聚合雙胍類混合物存在的情況下，n可以變化。

上述聚合雙胍化合物和它們的制備方法在文獻(xiàn)中有記載，例如，美國(guó)專利(US Patent)No.3,428,576，以及East et.al.,1997。

在一些實(shí)施例中，本發(fā)明使用的所述聚合雙胍為下述式(IV)的亞烷基雙胍類聚合物：

其中n是3至500的整數(shù)，m是1至10的整數(shù)，尤其是3(聚氨丙基雙胍)或6(聚六亞甲基雙胍,PHMB)，并且X³和X⁴分別選自-NH₂,-NH-C(＝NH)-NH-CN，任意取代的烷基、任意取代的環(huán)烷基、任意取代的芳基、任意取代的雜環(huán)基和任意取代的芳基；或其藥學(xué)上可接受的鹽。在具體的實(shí)施例中，n為3-15的平均值，尤其為3-12。合適的聚合雙胍可商購(gòu)獲得，商品名為Cosmocil CQ^TM(龍沙公司Lonza)。

所述聚合雙胍在所述組合物中的含量是重量比(w/w)0.1％至1.5％，特別是重量比(w/w)約0.1％至約1.0％，尤其是占所述組合物的重量比(w/w)約0.4％至約0.6％。

所述表面活性劑體系包含醇乙氧基化物和烷基糖苷或烷基多苷。

在具體的實(shí)施例中，所述醇乙氧基化物是C_10-18醇乙氧基化物，特別是C_12-16醇乙氧基化物，尤其是C_12-15醇乙氧基化物基團(tuán)。在具體的實(shí)施例中，所述醇乙氧基化物包含6-16個(gè)乙氧基化物基團(tuán)，特別是約10-14個(gè)乙氧基化物基團(tuán)?？捎玫拇家已趸锏氖纠秊镃_12-15Pareth-12^TM。

所述醇乙氧基化物在所述組合物中的含量為重量比(w/w)0.1％至1.0％，特別是重量比(w/w)0.2至0.8％，尤其是占所述組合物重量比(w/w)約0.4至0.6％。

在具體的實(shí)施例中，所述烷基糖苷或烷基多苷是C_8-16烷基糖苷或烷基多苷，或其混合物。在一些實(shí)施例中，所述烷基糖苷或烷基多苷選自辛酰葡萄糖苷、辛/癸糖苷、辛基葡萄糖苷，癸基葡糖苷、十二烷基葡糖苷、椰油基葡糖苷、月桂基葡糖苷、辛多糖苷、辛/癸多糖苷、癸基多糖苷、十二烷基多糖苷、椰油基多糖苷和月桂基多糖苷。

所述烷基糖苷或烷基多苷在所述組合物中的含量為重量比(w/w)0.1％至0.5％，尤其是占所述組合物的重量比(w/w)約0.2至0.4％。

在一些實(shí)施例中，具體地，那些施用于皮膚，例如手部或足部的所述消毒組合物可以進(jìn)一步包括保濕、舒緩、愈合和抗菌的蘆薈提取物。

在一些實(shí)施例中，所述組合物還可以包括其他可選的組分，例如流變改性劑、pH調(diào)節(jié)劑、潤(rùn)滑劑、保濕劑、芳香劑和染料。適合的流變改性劑包括羥乙基纖維素、羥丙基纖維素和增稠劑。合適的pH調(diào)節(jié)劑包括緩沖液、酸和堿。例如，合適的酸性調(diào)節(jié)劑是乙酸，以及合適的堿性調(diào)節(jié)劑是氫氧化銨。其它合適的酸性調(diào)節(jié)劑包括山梨酸和檸檬酸。合適的潤(rùn)滑劑或保濕劑包括，例如，甘油。芳香劑包括精油和合成香料，用來(lái)提供所需的氣味。例如，合適的芳香劑是香茅醇。還可以包括染料或其它著色劑為所述組合物呈現(xiàn)合適的顏色。合適的著色劑為FD&C藍(lán)色1號(hào)(FD&C Blue No 1.i)。

在一些實(shí)施例中，所述組合物是水性組合物，其中所述載體包括水，尤其在所述載體是水的情況下。在具體的實(shí)施例中，本發(fā)明的所述組合物的組分不包含酒精，例如乙醇或甲醇。

所述組合物可以是液體、凝膠、奶油、漆或泡沫等方便的形式。在一些實(shí)施例中，可以將所述組合物灌注或包裹在織物上制成毛巾或抹布。在一些實(shí)施例中，可以從分配器中將所述組合物分配出來(lái)，例如泵式分配器，可以將預(yù)定量的組合物分配出來(lái)。

凝膠制劑在5℃至50℃溫度范圍內(nèi)具有粘性，粘性范圍為10,000至60,000mPa.s，特別是16,000至50,000mPa.s。環(huán)境溫度越低，粘性越大。例如，在25℃，粘性范圍為31,000至32,000mPa.s，在50℃，粘性范圍為16,000至17,000mPa.s。

定義

除另有規(guī)定外，本發(fā)明所使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的相同的含義。雖然任何與本文中所描述的類似或等同的方法和材料都能被用于實(shí)踐或檢驗(yàn)本發(fā)明，但優(yōu)選本文記載的方法和材料。為了本發(fā)明的目的，現(xiàn)將下列術(shù)語(yǔ)定義如下。

本文使用的詞語(yǔ)“一”和“一個(gè)”指該詞語(yǔ)的語(yǔ)法對(duì)象為一個(gè)或超過(guò)一個(gè)(即至少一個(gè))。舉個(gè)例子，“元素”意思是一種元素或多種元素。

如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)“約”指與參照數(shù)量、水平、數(shù)值、面積、尺寸、或含量相比上下浮動(dòng)30％,25％,20％,15％或10％的數(shù)量、水平、數(shù)值、面積、尺寸、或含量。

在本說(shuō)明書的全文中，除非上下文另有要求，詞語(yǔ)“包括”、“包含”、“含有”將被理解為意味著包含一個(gè)規(guī)定的步驟或元素，或步驟或元素的群組，但不排除任何其他步驟或元素，或步驟或元素的群組。

如本文所使用的，詞語(yǔ)“烷基”指具有1到20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和的烴基團(tuán)。在適當(dāng)?shù)那闆r下，所述烷基基團(tuán)可以包括具體數(shù)量的碳原子，例如，包含具有1,2,3,4,5或6個(gè)以直線或分支排列的碳原子的烷基基團(tuán)的C_1-6烷基。適當(dāng)?shù)耐榛鶊F(tuán)的示例包括，但不限于，甲基、乙基、n-丙基,i-丙基,n-丁基,i-丁基,t-丁基,n-戊基,2-甲基丁基,3-甲基丁基,4-甲基丁基,n-己基,2-甲基戊基,3-甲基戊基,4-甲基戊基,5-甲基戊基,2-乙基丁基,3-乙基丁基,庚基,辛基,壬基,癸基,異癸基,十一烷基,十二烷基，等等。

如本文所使用的，詞語(yǔ)“環(huán)烷基”指飽和的環(huán)烴。環(huán)烷基環(huán)可以包括特定數(shù)量的碳原子。例如，3至8元環(huán)烷基基團(tuán)包括3,4,5,6,7或8個(gè)碳原子。適當(dāng)?shù)沫h(huán)烷基基團(tuán)的示例包括，但不限于，環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基。

如本文所使用的，詞語(yǔ)“芳基”旨在表示任何穩(wěn)定的單環(huán)、雙環(huán)、或三環(huán)，每個(gè)環(huán)多達(dá)7個(gè)原子的碳環(huán)體系，其中至少一個(gè)環(huán)為芳香環(huán)。這種芳基基團(tuán)的示例包括，但不限于，苯基、萘基、四氫萘基、茚滿基、芴基、菲基、聯(lián)苯基和聯(lián)萘基。

如本文所述，詞語(yǔ)“亞烴基”指具有1至6個(gè)碳原子的二價(jià)飽和烴鏈。在適當(dāng)?shù)臈l件下，所述亞烴基基團(tuán)可以具有特定數(shù)量的碳原子，例如，C_1-6亞烴基包括具有1,2,3,4,5或6個(gè)以直線方式排列的碳原子的亞烴基基團(tuán)。合適的亞烴基基團(tuán)的示例包括，但不限于，-CH₂-,-CH₂CH₂-,-CH₂CH₂CH₂-,-CH₂CH₂CH₂CH₂-,-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂-和-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂-。

本文使用的“雜環(huán)”或“雜環(huán)基”指環(huán)烴，其中一至四個(gè)碳原子被雜原子所取代，所述雜原子分別選自由N,N(R),S,S(O),S(O)₂和O組成的群組。雜環(huán)可以是飽和的，也可以是不飽和的，但不是芳香的。雜環(huán)基還可以是包含1、2或3個(gè)環(huán)的螺環(huán)基團(tuán)的一部分，其中兩個(gè)環(huán)以“螺旋”形式排列。合適的雜環(huán)基團(tuán)的示例包括吖丁啶、四氫呋喃基、四氫苯硫基、吡咯烷基、2-氧吡咯烷基、吡咯烷基、吡喃基、二氧雜烷基、哌啶基、2-氧哌啶基、吡唑啉基、咪唑啉基、噻唑啉基、二亞硫?；?、氧硫雜環(huán)戊二烯基、二噁烷基、二氧雜芑基、二唑基、噁唑啉基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、氧代噻唑基3-氧代嗎啉基、二噻烷基、三噻烷基、噁嗪基。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“雜芳基”，代表每個(gè)環(huán)多達(dá)7個(gè)原子的穩(wěn)定的單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)，其中至少一個(gè)環(huán)是芳香的，并且至少一個(gè)環(huán)包含1至4個(gè)選自由O、N和S組成的組的雜原子。在本發(fā)明定義的范圍內(nèi)，雜芳基團(tuán)包括，但不限于，吖啶基、咔唑基、蝶啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、吡唑基、吲哚基、異吲哚基、1H,3H-1-氧代異吲哚基、苯并三唑基、呋喃基、噻吩基、苯硫基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并二氧雜環(huán)乙烷、苯并二氧雜芑、喹啉基、異喹啉基、噁唑基、異噁唑基、咪唑基、吡嗪基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、四氫喹啉基、噻唑基、異噻唑基、1,2,3-噻唑基、1,2,4-噻唑基、1,2,4-噁唑基,1,2,4-噻二唑基,1,3,5-三嗪基,1,2,4-三嗪基、1,2,4,5-四嗪基和四唑基。具體的雜芳基團(tuán)具有5元或6元環(huán)，例如吡唑基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、吲哚基、異吲哚基、1H,3H-1-氧代異吲哚基、異噁唑基、咪唑基、吡嗪基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、噻唑基、異噻唑基、1,2,3-噻唑基、1,2,4-噻唑基、1,2,4-噁唑基和1,2,4-噻二唑基。

本發(fā)明的烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜芳基和芳基基團(tuán)可以被1至5個(gè)選自O(shè)H,OC_1-6烷基,Cl,Br,F,I,NH₂,NH(C_1-6烷基),N(C_1-6烷基)₂,SH,SC_1-6烷基,CO₂H,CO₂C_1-6烷基,CONH₂,CONH(C_1-6烷基)或CON(C_1-6烷基)₂的基團(tuán)任意取代。

如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)“二價(jià)橋接基團(tuán)”指具有二價(jià)且能結(jié)合兩種其他基團(tuán)的原子團(tuán)。適當(dāng)?shù)亩r(jià)橋接基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于–(CH₂)_t-，當(dāng)t是1至10的整數(shù)時(shí)，-O-,-S-,二價(jià)飽和或芳香的碳環(huán)、或雜環(huán)、或雜芳環(huán)、或這類二價(jià)和/或環(huán)狀基團(tuán)的組合。例如，飽和的C₆環(huán)狀基團(tuán)包括–C₆H₁₀-，C₆芳香基團(tuán)包括–C₆H₄-，C₆雜環(huán)基團(tuán)包括

和C₆雜芳基包括

其它二價(jià)橋接基團(tuán)包括亞烴基基團(tuán)(-CH₂-)_t，其中一個(gè)或多個(gè)碳原子已經(jīng)被NH,S,O,取代。

在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，所述二價(jià)橋接基團(tuán)是-(CH₂)_t-，t是1至10的整數(shù)，特別是1至6的整數(shù)，尤其是3至6的整數(shù)。

本發(fā)明的化合物可以是藥學(xué)上可接受的鹽的形式。然而，非藥學(xué)上可接受的鹽同樣落入本發(fā)明的范圍，因?yàn)檫@些鹽可以在制備藥學(xué)上可接受的鹽的過(guò)程中做為有用的中間產(chǎn)物，或者在儲(chǔ)存或運(yùn)輸過(guò)程中是有用的。合適的藥學(xué)上可接受的鹽包括，但不限于，藥學(xué)上可接受的無(wú)機(jī)酸鹽，例如鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、碳酸鹽、硼酸鹽、氨基磺酸鹽、和氫溴酸鹽，或者藥學(xué)上可接受的有機(jī)酸鹽，例如醋酸鹽、丙酸鹽、酪酸鹽、酒石酸鹽、馬來(lái)酸鹽、羥基馬來(lái)酸鹽、反丁烯二酸鹽、順丁烯二酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、粘酸鹽、葡萄糖酸鹽、苯甲酸鹽、琥珀酸鹽、草酸鹽、苯乙酸鹽、甲磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、苯磺酸鹽、水楊酸鹽、磺胺酸鹽、天冬氨酸鹽、谷氨酸鹽、乙二胺四乙酸鹽、硬脂酸鹽、棕櫚酸鹽、油酸鹽、月桂酸鹽、泛酸鹽、單寧酸鹽、抗敗血酸鹽、戊酸鹽。

堿鹽包括，但不限于，那些生成的藥學(xué)上可接受的陽(yáng)離子，例如鈉、鉀、鋰、鈣、鎂、銨和烷基銨。

堿性含氮基團(tuán)可以可以被下面這類做為低級(jí)鹵烷的試劑季銨化，例如，甲基、乙基、丙基、和丁基氯化物、溴化物和碘化物；二烴硫酸鹽如二甲基和二乙基硫酸鹽；及其它。

術(shù)語(yǔ)“封閉的環(huán)境”指被至少一面墻和一個(gè)頂或天花板圍住的室內(nèi)空間或部分室內(nèi)空間。封閉的環(huán)境可以包括部分的室外空間，例如有遮擋的陽(yáng)臺(tái)和有遮擋的甲板。

本發(fā)明所述消毒組合物的使用

本發(fā)明的所述消毒組合物具有抗菌活性，可以在醫(yī)院、療養(yǎng)院、學(xué)校、兒童保育機(jī)構(gòu)，以及其他有微生物感染傳播風(fēng)險(xiǎn)的地方，尤其是有抗生素耐藥性微生物感染風(fēng)險(xiǎn)的地方，對(duì)全體人群，尤其是醫(yī)院患者、需要看護(hù)的老人和幼兒園或?qū)W校的兒童進(jìn)行有效的應(yīng)用，例如手部消毒。

本發(fā)明的所述組合物可以被方便地用作手部消毒劑，用來(lái)殺死手上的病原體并避免感染。所述手部消毒劑可以以任何適當(dāng)?shù)姆绞奖皇┯糜谑植浚?，?lái)自管子或泵式容器或手部干燥裝置的氣流。

在不被理論束縛的前提下，所述組合物被認(rèn)為可以在皮膚上形成一種保護(hù)性的抗菌屏障。因此，所述組合物不僅在施用時(shí)控制了存在的微生物，它們還進(jìn)一步保護(hù)用戶不因暴露于他們所接觸的更多微生物而遭受感染或再次感染。

所述消毒組合物對(duì)病原體廣譜有效，在施用所述組合物后所述病原體被殺死或滅活。能被本發(fā)明所述消毒組合物殺死或滅活的病原體包括：

革蘭氏陽(yáng)性菌

芽孢桿菌(營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞)(Bacillus sp.),白喉?xiàng)U菌(Corynebacterium diptheriae),艱難梭狀芽胞桿菌(Clostridium difficile),糞腸球菌(Enterococcus faecalis),希氏腸球菌(Enterococcus hirae),單核細(xì)胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes),藤黃微球菌(Micrococcus luteus),微球菌(Micrococcus sp.),結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis),恥垢分枝桿菌(Mycobacterium smegmatis),痤瘡丙酸桿菌(Propionibacterium acnes),金黃色釀膿葡萄球菌(Staphylococcus aureus),表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis),溶血性葡萄球菌(Staphylococcus haemolyticus),溶血性葡萄球菌(Staphylococus hominis),腐生性葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus),糞鏈球菌(Streptococcus faecalis),突變鏈球菌(Streptococcus mutans),肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumonia)和釀膿鏈球菌(Streptococcus pyogenes)。

革蘭氏陰性菌

鮑氏不動(dòng)桿菌(Acinetobacter baumannii),乙酸鈣不動(dòng)桿菌(Acinetobacter calcoaceticus),嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophilia),松脆桿菌(Bacterioides fragilis),伯克霍爾德菌(Burkholderia cepacia)，檸檬酸菌(Citrobacter deversus),弗氏檸檬酸桿菌(Citrobacter freundi),產(chǎn)氣腸桿菌(Enterobacter aerogenes),草生歐文氏菌(Enterobacter aglomerans),陰溝腸桿菌(Enterobacter cloacae),日溝維腸桿菌(Enterobacter gergoviae),腸球菌(Enterococcus),大腸桿菌(Escherichia coli),大腸桿菌O157:H7(Escherichia coli O157:H7),平滑正青霉(Eupenicillium levitum),流感嗜血桿菌(Haemophilus influenza),奧克西托克雷白桿菌(Klebsiella oxytoca),克雷白氏桿菌(Klebsiella pneumoniae),土生克雷伯氏桿菌(Klebsiella terriena),嗜肺軍團(tuán)菌(Legionella pneumophila),摩根氏菌(Morganella morganii),青霉素(Penicillium luteum),奇異變形桿菌(Proteus mirabilis),普通變形桿菌(Proteus vulgaris),綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa),熒光假單胞菌(Pseudomonas fluorscens),豬霍亂沙門氏菌(Salmonella cholera suis),傷寒沙門氏桿菌(Salmonella typhi),鼠傷寒沙門氏桿菌(Salmonella typhimurium),沙門氏菌(Salmonella enterica),液化沙雷菌(Serratia liquifaciens),粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcescens)和野油菜黃單胞菌(Xanthomonas campestris)。

病毒

II型和IV型腺病毒、I型和IV型牛腺病毒、小鼠病毒1、貓肺炎病毒、I型單純皰疹病毒、II型單純皰疹病毒、HIV-1(艾滋病)、流感病毒A2(愛(ài)知)(Aichi)、流感病毒A2(亞洲)(Asian)、流感病毒B、流感病毒(H1N1)、腮腺炎病毒、副流感病毒(仙臺(tái))(Sendai),、勞斯肉瘤病毒、I型呼腸孤病毒(Reovirus Type I)、猴病毒40(Simian Virus 40)、牛痘病毒、MS2(噬菌體)、PRD1(噬菌體)、鼻病毒和腸道病毒71。

真菌、藻類、霉菌、酵母、孢子

煙草赤星病菌(Alterania alternata),束絲藻屬(Aphanizomenon sp.),黃曲霉(Aspergillus flavus),黑曲霉(Aspergillus flavus),聚多曲霉(Aspergillus sydowi),土曲霉(Aspergillus terreus),花斑曲霉(Aspergillus versicolor),曲霉疣(Aspergillus verrucaria),出芽短梗霉菌(Aureobasidium pullans),白色念珠菌(Candida albicans),偽熱帶念珠菌(Candida pseudotropocalis),毛殼菌(Chaetomium globsum),支孢樣支孢霉(Cladosporium cladosporioides),小球藻(Chlorella vulgaris),澳洲德氏霉(Dreschslera australiensis),表皮癬菌屬(Epidermophyton sp.),絮狀麥皮癬菌(Epidermophyton floccosum),粘鞭霉病菌(Gliomastix cerealis),密黏褶菌(Gloeophyllum trabeum),小孢癬菌屬(Microsporum sp.),奧杜盎小孢子菌(Microsporum audouinii),念珠菌(Monilia grisea),顫藻屬(Oscillatoria),產(chǎn)黃青霉菌(Penicillium chrysogenum),普通青霉菌(Pencillium commune),繩狀青霉菌(Penicillium funiculosum),嗜松青霉(Penicillium pinophilium),可變青霉菌(Penicillium variable),莖點(diǎn)霉(Phoma fimeti),紙皮思霉(Pithomyces chartarum),臥孔菌(Poria placenta),柵藻(Scenedesmus),啤酒酵母(Saccharonyces cerevisiae),人類線狀擔(dān)子菌(Scolecobasidium humicola),月牙藻屬(Selenastrum sp.),綠色木霉(Trichoderma viride),指間毛癬菌(Trichophyton interdigitale),麥迪遜毛癬菌(Trichophyton maidson),須癬毛癬菌(Trichophyton mentogrophytes),紅色毛癬菌(Trichophyton rubrum)和毛癬菌屬(Trichophyton sp.)。

原生動(dòng)物寄生蟲

小球隱孢子蟲(卵囊)。

根據(jù)它們的抗菌活性，本發(fā)明的組合物在治療或預(yù)防皮膚真菌感染方面也是有用的，尤其是那些白色念珠菌例如擦爛性念珠菌或癬引起的感染，包括足癬(Tinea pedis)，頭皮癬(Tinea capitis),手癬(Tinea manuum),須癬(Tinea barbae),股癬(Tinea cruris)和體癬(Tinea corporis)。在具體的實(shí)施例中，本方法用到的組合物還包括用于輔助緩解瘙癢的蘆薈。在這些實(shí)施例中，將所述組合物有規(guī)律地施用至被感染的皮膚，例如，一天多次，或一天一次。

本發(fā)明的組合物不僅具有立即消毒的效果，還發(fā)現(xiàn)它能夠在皮膚上持久提供持續(xù)的保護(hù)效果。該保護(hù)效果可以持續(xù)3小時(shí)、6小時(shí)、或12小時(shí)或更久，或者如果手被手套保護(hù)起來(lái)的話，保護(hù)效果可以持續(xù)至洗手時(shí)間。顯示出使用后能立即達(dá)到菌群減少超過(guò)5.8log10的快速抗菌活性。觀察到處理后同一數(shù)量級(jí)上3小時(shí)和6小時(shí)的持久活性。當(dāng)把組合物施用至戴手套的手部時(shí)，持久活性甚至持續(xù)到處理后12小時(shí)，并且只觀察到抗菌活性最低限度的降低(降低4log₁₀,99.99％)。

而在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施例中，所述組合物可以用于封閉環(huán)境中的空氣消毒，例如房間或建筑的消毒。在這些實(shí)施例中，所述組合物可以是用噴霧或噴霧器施用的液體組合物。在一些實(shí)施例中，所述組合物可以用霧化或形成霧的裝置或以氣流的方式施用。適宜的裝置記載于WO 2013/149285中。在具體的實(shí)施例中，所述建筑是醫(yī)院。在一些實(shí)施例中，所述房間是醫(yī)院的病房。在一些實(shí)施例中，所述消毒組合物進(jìn)一步包括芳香劑，用來(lái)輔助空氣除臭。在不被理論束縛的前提下，人們認(rèn)為本發(fā)明的組合物的帶正電荷的氣溶膠液滴與空氣中帶負(fù)電荷的灰塵和細(xì)菌顆粒反應(yīng)。發(fā)生顆粒結(jié)塊，并且從空氣中掉落。

本發(fā)明將用下述實(shí)施例進(jìn)行進(jìn)一步描述，這些實(shí)施例闡明了本發(fā)明一些優(yōu)選的方面和實(shí)施方式。然而，應(yīng)當(dāng)理解的是，下列描述的本發(fā)明的特殊性并不取代前面描述的本發(fā)明的共性。

實(shí)施例

實(shí)施例1:含蘆薈(香茅香味)的抗菌凝膠配方

芳香凝膠的抗菌配方由下列組分制成：

A部分中:水被加熱至40℃，并且調(diào)節(jié)pH值至pH8。將羥乙基纖維素加入水中并溶解。

B部分中:將C₁₂-C₁₅Pareth-12^TM、辛酰葡萄糖苷、聚合雙胍加入已預(yù)熱至40℃的水中，并將該混合物攪拌。

將A部分和B部分混合，并加入其它成分，保持混合物的溫度在40℃。用醋酸將pH值調(diào)至pH5.5。然后冷卻配方。

實(shí)施例2.含蘆薈無(wú)香抗菌凝膠配方

無(wú)香凝膠的抗菌配方由下列組分制成：

A部分中:水被加熱至40℃，并且調(diào)節(jié)pH值至pH 8。將羥乙基纖維素加入水中并溶解。

B部分中:將C₁₂-C₁₅Pareth-12^TM、辛酰葡萄糖苷、聚合雙胍加入已預(yù)熱至40℃的水中，并攪拌該混合物。

將A部分和B部分混合，并加入其它成分，保持混合物的溫度在40℃。用醋酸將pH值調(diào)至pH5.5。然后冷卻配方。

實(shí)施例3:含蘆薈的無(wú)香抗菌液或抗菌泡沫配方

配方由下列組分制成：

上述組分混合形成液體。可通過(guò)泡沫噴頭制出泡沫。

實(shí)施例4:含蘆薈(香茅味)的香味抗菌液或抗菌泡沫

配方由下列組分制成：

上述組分混合形成液體。可通過(guò)泡沫噴頭制出泡沫。

實(shí)施例5:抗菌凝膠配方(香茅味)

芳香凝膠的抗菌配方由下列組分制成：

A部分中:水被加熱至40℃，并且調(diào)節(jié)pH值至pH 8。將羥乙基纖維素加入水中并溶解。

B部分中:將C₁₂-C₁₅Pareth-12^TM、辛酰葡萄糖苷和聚合雙胍加入已預(yù)熱至40℃的水中，并攪拌該混合物。

將A部分和B部分混合，并加入其它成分，保持混合物的溫度在40℃。用醋酸將pH值調(diào)至pH5.5，然后冷卻配方。

實(shí)施例6:無(wú)香抗菌凝膠配方

無(wú)香凝膠的抗菌配方由下列組分制成：

A部分中:水被加熱至40℃，并且調(diào)節(jié)pH值至pH 8。將羥乙基纖維素加入水中并溶解。

B部分中將C₁₂-C₁₅Pareth-12^TM、辛酰葡萄糖苷和聚合雙胍加入已預(yù)熱至40℃的水中，并攪拌該混合物。

將A部分和B部分混合，并加入其它成分，保持混合物的溫度在40℃。用醋酸將pH值調(diào)至pH5.5。然后冷卻配方。

實(shí)施例7.無(wú)香抗菌液或抗菌泡沫配方

配方由下列組分制成：

上述組分混合形成液體?？赏ㄟ^(guò)泡沫噴頭制出泡沫。

實(shí)施例8:芳香抗菌液或抗菌泡沫配方

配方由下列組分制成：

上述組分混合形成液體?？赏ㄟ^(guò)泡沫噴頭制出泡沫。

實(shí)施例9.配方2和配方3的抗菌效果

用非處方(OTC)抗菌藥物專著[FDA 1994,ASTM 2315,EN1276,EN1040(細(xì)菌)和EN1275(真菌)](Over the Counter(OTC)Antimicrobial Drug Monograph[FDA 1994,ASTM 2315,EN1276,EN1040(bacteria)and EN1275(fungi)])中的25種微生物對(duì)實(shí)施例2和3的配方進(jìn)行了抗菌藥物的時(shí)間-殺菌試驗(yàn)。用體積比70％(v/v)的酒精手部消毒劑做為參照標(biāo)準(zhǔn)，來(lái)對(duì)比實(shí)施例2和3的配方。

簡(jiǎn)略地說(shuō)，在本方法中，每個(gè)配方的樣品都與待測(cè)微生物的懸浮液孵育。經(jīng)過(guò)一系列預(yù)定的暴露時(shí)間，去除懸浮液樣品，中和并定量測(cè)定幸存的試驗(yàn)微生物。孵育后，對(duì)幸存的微生物計(jì)數(shù)，并確定各時(shí)間點(diǎn)相對(duì)于不含配方的對(duì)照樣品的百分比及l(fā)og₁₀減少量。

結(jié)果如表1所示:

表1：表現(xiàn)廣譜抗菌和高效殺菌的時(shí)間-殺菌試驗(yàn)總結(jié)表

實(shí)施例10.消毒組合物的抗病毒效果

本實(shí)施例檢測(cè)了實(shí)施例6的消毒配方對(duì)諾瓦克病毒(Norwalk Virus)的活性，在新鮮、水洗、剃光和消毒的豬皮膚模擬人體皮膚接觸。病毒懸液采用下列原材料制備。以RAW 264.7小鼠細(xì)胞,ATCC T1B71為宿主的諾瓦克病毒(Norwalk Virus)(MNV-1)動(dòng)物CW1，ATCC PTA-5935。一旦細(xì)胞匯合，用病毒懸液在一套豬皮膚上檢測(cè)，M121015D，用不加消毒劑的墊子(3"x 6"的墊子)(對(duì)照)來(lái)確保這可以被用來(lái)作為一個(gè)消毒產(chǎn)品檢測(cè)用的合適的基質(zhì)。在全部三套豬皮膚墊子上，施加諾瓦克病毒(Norwalk virus)，干燥并用所述消毒組合物處理。對(duì)所述墊子取樣并評(píng)估諾瓦克病毒(Norwalk virus)的活力。第二和第三套墊子用溫和的非抗菌肥皂反復(fù)沖洗以模擬洗手。第二套墊子沖洗五遍，第三套墊子沖洗九遍。對(duì)每套墊子取樣并評(píng)估諾瓦卡病毒的活力。經(jīng)過(guò)五遍和九遍的沖洗之后，又用諾瓦克病毒(Norwalk virus)再次污染每套墊子，干燥并取樣來(lái)測(cè)定消毒產(chǎn)品首次施用的長(zhǎng)效保護(hù)效果。加入另一個(gè)對(duì)照以確保豬皮膚墊子的處理過(guò)程中溫和的非抗菌肥皂的沖洗不帶來(lái)干擾。

結(jié)果如表2所示。

表2：

實(shí)施例11：抗菌效率

采用I ASTM方法E2315-03列出的程序?qū)ο铝芯N和菌株進(jìn)行了時(shí)間-殺菌試驗(yàn)來(lái)評(píng)測(cè)實(shí)施例6的消毒產(chǎn)品的效率：大腸桿菌(Escherichia coli)(ATCC 11229),沙門氏菌(Salmonella enterica)(ATCC 10306),金黃色釀膿葡萄球菌(Staphylococcus aureus)(ATCC 6538),釀膿鏈球菌(Streptococcus pyrogenes)(ATCC 19615)和綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)(ATCC 15442)。相互獨(dú)立地檢測(cè)和評(píng)估每個(gè)微生物，以確保配方產(chǎn)品對(duì)所述微生物的直接效果并消除一種細(xì)菌對(duì)另一種細(xì)菌的任何影響。所有的培養(yǎng)基針對(duì)每種微生物特定制備。吸取和裝載每份樣品都進(jìn)行重復(fù)。結(jié)果以重復(fù)樣品的平均值報(bào)告。所有測(cè)試都在室溫下進(jìn)行。釀膿鏈球菌(Streptococcus pyrogenes)在5％的二氧化碳環(huán)境中培養(yǎng)使其順利生長(zhǎng)。所述微生物接種在采用用于中和所述消毒組合物的LB培養(yǎng)液中，以確保它對(duì)微生物的生長(zhǎng)不產(chǎn)生任何有問(wèn)題的影響。

結(jié)果如表3所示。

表3:

實(shí)施例12：抗菌效率

采用I ASTM方法E2315-03列出程序?qū)ο铝芯N和菌株進(jìn)行了時(shí)間-殺菌試驗(yàn)來(lái)評(píng)測(cè)實(shí)施例2的消毒產(chǎn)品的殺菌效率：大腸桿菌(Escherichia coli)(ATCC 11229),沙門氏菌(Salmonella enterica)(ATCC 10306),金黃色釀膿葡萄球菌(Staphylococcus aureus)(ATCC 6538),釀膿鏈球菌(Streptococcus pyrogenes)(ATCC 19615)和綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)(ATCC 15442)。相互獨(dú)立地檢測(cè)和評(píng)估每個(gè)微生物，以確保配方產(chǎn)品對(duì)所述微生物的直接效果并消除一種細(xì)菌對(duì)另一種細(xì)菌的任何影響。所有的培養(yǎng)基針對(duì)每種微生物特定制備。吸取和裝載每份樣品都進(jìn)行重復(fù)。結(jié)果以重復(fù)樣品的平均值報(bào)告。所有測(cè)試均在室溫下進(jìn)行。釀膿鏈球菌(Streptococcus pyrogenes)在5％的二氧化碳環(huán)境中培養(yǎng)使其順利生長(zhǎng)。所述微生物接種在采用用于中和所述消毒組合物的LB培養(yǎng)液中，以確保它對(duì)微生物的生長(zhǎng)不產(chǎn)生任何有問(wèn)題的影響。

結(jié)果如表4所示。

表4:

實(shí)施例13：抗菌效率

采用ASTM方法E2315-03列出的程序?qū)ο铝芯N和菌株進(jìn)行了時(shí)間-殺菌試驗(yàn)來(lái)評(píng)測(cè)實(shí)施例2的消毒產(chǎn)品的殺菌效率：大腸桿菌(Escherichia coli)(ATCC 25922),克雷白氏桿菌(Klebsiella pneumoniae)(ATCC 51504),綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)(ATCC 27853),金黃色釀膿葡萄球菌(Staphylococcus aureus)(ATCC 29213)和溶血性葡萄球菌(Staphylococcus haemolyticus)(ATCC 43253)。相互獨(dú)立地檢測(cè)和評(píng)估每個(gè)微生物，以確保配方產(chǎn)品對(duì)所述微生物的直接效果并消除一種細(xì)菌對(duì)另一種細(xì)菌的任何影響。所有的培養(yǎng)基針對(duì)每種微生物特定制備。吸取和裝載每份樣品都進(jìn)行重復(fù)。結(jié)果以重復(fù)樣品的平均值報(bào)告。所有測(cè)試均在室溫下進(jìn)行。

結(jié)果如表5所示。

表5:

實(shí)施例14.持續(xù)的抗菌效果

豬皮樣品被裁剪成3x6英寸的墊子并用70％的乙醇(2mL)消毒。測(cè)試組用實(shí)施例2的組合物處理并置于室溫下4小時(shí)。在預(yù)定的間隔時(shí)間，接種MRSA(ATCC #33592),VRE(ATCC#51575)和CRE(Klebsiella pneumoniae,ATCC#BAA-1705)。沖洗并處理墊子，以獲得任何存活的細(xì)菌，并將樣品裝載、孵育，并計(jì)數(shù)，以確定活著的細(xì)菌數(shù)量。所述樣品與以相同方式但不用皮膚消毒劑處理的樣品相比較。分別在施加所述消毒組合物后2分鐘、1小時(shí)和5小時(shí)進(jìn)行接種。

與那些沒(méi)有被消毒組合物處理的樣品相比，在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的所有樣品都具有99.9999％(>5.8log₁₀減少量)的細(xì)菌生長(zhǎng)減少量。

實(shí)施例15.持續(xù)的抗菌效果

用金黃色釀膿葡萄球菌(Staphylococcus aureus)(ATCC#12600)重復(fù)實(shí)施例14的操作，孵育時(shí)間點(diǎn)分別是2分鐘、1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)、16小時(shí)和24小時(shí)。

結(jié)果顯示，處理開始時(shí)細(xì)菌生長(zhǎng)有3log₁₀的減少，接著在處理1小時(shí)時(shí)抑制達(dá)到99％，2小時(shí)時(shí)98％的抑制，4小時(shí)時(shí)97％的抑制，8小時(shí)時(shí)85％的抑制，16小時(shí)時(shí)80％的抑制，24小時(shí)時(shí)54％的抑制。

實(shí)施例16.實(shí)施例2用來(lái)擦手的效果

為了符合歐洲標(biāo)準(zhǔn)BS EN 1500:2013化學(xué)消毒劑和防腐劑–手部衛(wèi)生消毒–試驗(yàn)方法和要求中規(guī)定的化學(xué)消毒劑和防腐劑的要求，對(duì)實(shí)施例2的組合物進(jìn)行了檢測(cè)。檢測(cè)微生物使用了大腸桿菌(Escherichia coli)K12 NCTC 10538，該菌株可通過(guò)凍干針劑獲得，并用胰蛋白胨大豆肉湯復(fù)蘇并孵育至濃度2x10⁹Cfu/mL。用60％v/v的異丙醇溶于無(wú)菌水中做為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照。標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法中不存在偏差。

用稀釋的肥皂(5mL)將人類志愿者的手清洗1分鐘，用自來(lái)水沖洗后并用紙巾干燥至少30秒。將手浸入掌中5秒，并在允許空氣干燥三分鐘之前，允許讓液體回流至容器中最多30秒。

施用標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照(3.0mL)并擦干30秒。用第二部分的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照(3.0mL)進(jìn)行重復(fù)并進(jìn)一步擦干30秒。20名志愿者重復(fù)進(jìn)行了該過(guò)程。

使用實(shí)施例2的組合物在20名志愿者該過(guò)程中進(jìn)行重復(fù)。

分析結(jié)果表明，標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照的平均對(duì)數(shù)縮減因子為3.89，而實(shí)施例2的組合物的平均對(duì)數(shù)縮減因子為4.22。檢測(cè)結(jié)果的平均對(duì)數(shù)縮減因子大于標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照的，因此實(shí)施例2的組合物比異丙醇標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照更有效，符合EN 1500關(guān)于手部衛(wèi)生消毒的要求。

實(shí)施例17.實(shí)施例4用來(lái)擦手的效果

用實(shí)施例4的組合物重復(fù)實(shí)施例16的過(guò)程。

分析結(jié)果表明，標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照的平均對(duì)數(shù)縮減因子為3.90，而實(shí)施例2的組合物的平均對(duì)數(shù)縮減因子為4.23。檢測(cè)結(jié)果的平均對(duì)數(shù)縮減因子大于標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照的，因此實(shí)施例4的組合物比對(duì)照更有效，符合EN 1500關(guān)于手部衛(wèi)生消毒的要求。

實(shí)施例18.懸液定量殺菌試驗(yàn)

按照歐洲標(biāo)準(zhǔn)BS EN 14476:2005人類藥物中使用的化學(xué)消毒劑和防腐劑(倫敦奇西克高路389號(hào)，英國(guó)標(biāo)準(zhǔn)研究所)(British Standards Institution,389Chiswick High Road,London)，對(duì)實(shí)施例2的組合物進(jìn)行化學(xué)消毒劑和防腐劑的懸液定量殺菌試驗(yàn)，以評(píng)測(cè)它的病毒滅活性能。

用鼻病毒(普通感冒；ATCC VR-482),流感病毒(ATCC VR-1741)和腸道病毒71(手足口病毒；ATCC VR-1775)做為測(cè)試病毒，以80％的濃度，接觸時(shí)間為1、5、15、30和60分鐘，來(lái)進(jìn)行此次的抗病毒研究。

測(cè)試病毒懸液根據(jù)測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)條款6.3進(jìn)行制備。BGM細(xì)胞用DMEM培養(yǎng)基(Dulbecco's Modified Eagles Medium)加10％胎牛血清培養(yǎng)。加入鼻病毒(普通感冒；ATCC VR-482),流感病毒和腸道病毒71(手足口病毒；ATCC VR-1775)，于37℃下孵育1小時(shí)，使細(xì)胞生長(zhǎng)至單層。將細(xì)胞進(jìn)行三重的冷凍/解凍過(guò)程。通過(guò)低速離心去除細(xì)胞碎片，并將上清液做為測(cè)試病毒懸液置于-80℃保存。

根據(jù)測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)條款6.5.1從終點(diǎn)確定感染性。將0.1mL的每種稀釋液轉(zhuǎn)移至96孔微孔板的八孔中，接著加入0.1mL的被胰蛋白酶消化的新鮮BGM細(xì)胞。將微孔板置于5％CO₂的空氣中在37℃下孵育。7天后用倒置顯微鏡確定細(xì)胞病理效應(yīng)。用標(biāo)準(zhǔn)偏差估計(jì)法( method)(BS EN 14476條款1.1)計(jì)算估測(cè)的病毒濃度。

根據(jù)測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)條款6.6測(cè)定殺病毒活性。樣品以80％的硬水溶液被仔細(xì)檢查(條款5.2.2.2)。接觸時(shí)間為1、5、15、30和60分鐘。測(cè)試病毒懸液的體積為0.1mL，干擾物質(zhì)(0.1mL)以及測(cè)試產(chǎn)品(0.8mL)。在所需的接觸時(shí)間結(jié)束時(shí)通過(guò)立即稀釋10^-8來(lái)終止消毒劑的活性。病毒對(duì)照滴定在接觸時(shí)間0分鐘和60分鐘時(shí)進(jìn)行(條款6.6.8)。

根據(jù)測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)條款6.6.4.1用硬水(200μL)和測(cè)試產(chǎn)品(800μL)進(jìn)行細(xì)胞毒性測(cè)定。通過(guò)比較有消毒劑或無(wú)消毒劑存在的條件下在細(xì)胞上進(jìn)行病毒滴定來(lái)確定細(xì)胞對(duì)病毒的敏感性(條款6.6.4.2b)。用福爾馬林溶液(0.7％)做為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照(條款6.6.7.1)。根據(jù)測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)條款6.6.7.2用10^-5稀釋液測(cè)定福爾馬林溶液的細(xì)胞毒性。接觸時(shí)間為5、15、30和60分鐘。

實(shí)施例2的組合物以80％的溶液對(duì)抗鼻病毒、流感病毒和腸道病毒71型，在接觸時(shí)間60分鐘之后顯示出了效果。減少超過(guò)了4log₁₀級(jí)別。由此得出的結(jié)論是，實(shí)施例2的組合物可以抗殺鼻病毒(普通感冒)、流感病毒和腸道病毒71型(手足口病病毒)。

實(shí)施例19.懸液定量殺菌試驗(yàn)

用實(shí)施例4的組合物重復(fù)實(shí)施例18的過(guò)程，以評(píng)估它的病毒滅活性能。

實(shí)驗(yàn)表明實(shí)施例4的組合物可以在接觸時(shí)間60分鐘之后滅活鼻病毒、流感病毒和腸道病毒71型。減少超過(guò)了4log₁₀級(jí)別(4log₁₀-steps)。由此得出的結(jié)論是，實(shí)施例4的組合物可以抗殺鼻病毒(普通感冒)、流感病毒和腸道病毒71型(手足口病病毒)。

實(shí)施例20.活性、持續(xù)活性和累積活性

對(duì)實(shí)施例2的組合物進(jìn)行了檢測(cè)，以評(píng)估它的測(cè)試配方在單獨(dú)使用后降低手部細(xì)菌群落方面的活性，以及測(cè)定它三小時(shí)和六小時(shí)后的持續(xù)活性(抑制生長(zhǎng))。在五天周期里進(jìn)行了累積活性測(cè)定。按照ASTM E115-11—用于評(píng)價(jià)外科手部消毒制劑的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)方法(Standard Test Method for Evaluation of Surgical Hand Scrub Formulations)(美國(guó)賓夕法尼亞州西康舍霍肯巴爾海港大道100號(hào)，美國(guó)國(guó)際材料與試驗(yàn)協(xié)會(huì))(ASTM International,100Barr Harbor Drive,West Conshohocken,PA,USA)測(cè)試了該組合物。

用志愿者手部的平均基線log₁₀值減去處理后的這只手的log₁₀值來(lái)計(jì)算即時(shí)活性(log₁₀減少量)。在使用后實(shí)施例2的組合物表現(xiàn)出100％的細(xì)菌減少。戴手套3、6和12小時(shí)后從log₁₀減少量的方差計(jì)算出持續(xù)活性。結(jié)果顯示，3小時(shí)(σ²_3h＝0)和6小時(shí)(σ²_6h＝0)后細(xì)菌減少量為100％。12小時(shí)后的細(xì)菌減少量最低為99.5％(σ²_12h＝6.25x10^-6)。

第1天(兩次施用組合物)和第5天(12次施用組合物)的累積活性結(jié)果均顯示100％的細(xì)菌減少量。綜上所述，實(shí)施例2的組合物具有顯著的消毒效果。

實(shí)施例21.活性、持續(xù)活性和累積活性

按照實(shí)施例20的過(guò)程測(cè)定實(shí)施例4的組合物。

當(dāng)依照ASTM E1115-11進(jìn)行測(cè)定時(shí)，實(shí)施例4的組合物在使用所述配方后表現(xiàn)出100％的細(xì)菌減少。持續(xù)活性結(jié)果顯示3小時(shí)和6小時(shí)后細(xì)菌減少為100％。12小時(shí)后細(xì)菌減少為最低99.5％。第1天(兩次施用組合物)和第5天(12次施用組合物)的累積活性結(jié)果均顯示100％的細(xì)菌減少量。綜上所述，實(shí)施例4的組合物具有顯著的消毒效果。