本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種抗金黃色葡萄球菌的藥物及制備方法和用途。
背景技術(shù)：
：金黃色葡萄球菌是人體皮膚和鼻腔的常見定植菌，同時也是引起臨床感染的常見致病菌，既可引起局部化膿性感染，如癰、癤、毛囊炎、甲溝炎和外科切口等局部膿性感染，也可一起肺炎、骨髓炎、腦膜炎、化膿性關(guān)節(jié)炎、心內(nèi)膜炎及膿毒癥、敗血癥等全身性感染。隨著抗生素廣泛應(yīng)用于臨床，金黃色葡萄球菌耐藥菌株不斷出現(xiàn)。金黃色葡萄球菌耐藥性的獲得，一方面可以通過細(xì)菌自身表型的改變、代謝通路的調(diào)整等，對抗生素產(chǎn)生適應(yīng)性耐藥，如金黃色葡萄球菌生物被膜的產(chǎn)生、形成小菌落、細(xì)胞壁增厚以及持留菌的產(chǎn)生都可以對抗生素產(chǎn)生較高的耐藥性；另一方面，金黃色葡萄球菌可以通過水平轉(zhuǎn)移等方式獲得耐藥基因，如金黃色葡萄球菌獲得產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶基因后即可呈現(xiàn)對β-內(nèi)酰胺酶類抗生素的耐藥性。因此，如何保持抗生素的有效性成為近年來被廣泛關(guān)注的研究熱點(diǎn)。針對上述問題，在中國專利申請CN104644755A中，發(fā)明人用野菊花提取物10g，五倍子提取物8g，金銀花提取物5g，黃芩提取物5g，連翹提取物10g以及0.1-1.0g抗生素制備得到了一種能夠有效防治養(yǎng)雞場的多種葡萄球菌且長期使用不易產(chǎn)生抗藥性的藥物。但是在該藥物中并沒有發(fā)現(xiàn)中藥組合物與抗生素具有協(xié)同增效作用，且該藥物中抗生素的用量過大，其與中藥組合物的總用量的比值高達(dá)1:(43～430)。另一方面，抗生素用量過大導(dǎo)致的人體神經(jīng)、骨髓、肝臟、腎臟等臟器產(chǎn)生較大不良反應(yīng)的事件越來越多。頭孢拉定為第一代頭孢菌素，抗菌活性類似頭孢氨芐，其對金黃色葡萄球菌及其他多種對廣譜抗生素耐藥的桿菌等有迅速而可靠的殺菌作用。但是，由攝入頭孢拉定引起的人體嚴(yán)重不良反應(yīng)的事件越來越多，在國家藥品不良反應(yīng)檢測中心發(fā)布的《藥物不良反應(yīng)信息通報》中因頭孢拉定引起的嚴(yán)重不良反應(yīng)事件為15.0％，其中，有關(guān)血尿的不良反應(yīng)事件占97.63％。因此，有必要提供一種藥物，其與抗生素聯(lián)用具有協(xié)同增效的作用，同時能有效降低抗生素的用量和不良反應(yīng)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題，本發(fā)明的目的在于提供一種抗金黃色葡萄球菌的藥物，以解決以上缺陷。本發(fā)明提供了一種抗金黃色葡萄球菌的藥物，包含中藥組合物和抗生素，所述中藥組合物由金銀花、黃芩和連翹按1:(0.1～1):(0.5～2)的重量比制備而成。優(yōu)選地，所述中藥組合物由金銀花、黃芩和連翹按1:1:2的重量比制備而成。優(yōu)選地，中藥組合物由金銀花、黃芩和連翹按1:0.1:0.5的重量比制備而成。優(yōu)選地，中藥組合物由金銀花、黃芩和連翹按1:0.5:1的重量比制備而成。優(yōu)選地，所述抗生素選自頭孢拉定、左氧氟沙星和慶大霉素中的一種。優(yōu)選地，所述抗生素選自頭孢拉定，所述藥物中頭孢拉定的含量為0.15～2.4μg/mL，所述中藥組合物的含量為0.73～23.4mg/mL。優(yōu)選地，所述抗生素選自頭孢拉定，所述藥物中頭孢拉定的含量為0.15～0.6μg/mL，所述中藥組合物的含量為1.47～23.4mg/mL。優(yōu)選地，所述藥物中頭孢拉定的含量為0.15μg/mL，所述中藥組合物的含量為1.47mg/mL。優(yōu)選地，所述抗生素選自左氧氟沙星，所述藥物中左氧氟沙星的含量為0.12～0.24μg/mL，所述中藥組合物的含量為0.73～23.4mg/mL。優(yōu)選地，所述抗生素選自左氧氟沙星，所述藥物中左氧氟沙星的含量為0.12μg/mL，所述中藥組合物的含量為0.73mg/mL。優(yōu)選地，所述抗生素選自慶大霉素，所述藥物中慶大霉素的含量為0.12～0.49μg/mL，所述中藥組合物的含量為1.47～23.4mg/mL。優(yōu)選地，所述藥物中慶大霉素的含量為0.245μg/mL，所述中藥組合物的含量為5.86mg/mL。優(yōu)選地，所述藥物的劑型為液體、片劑、顆粒劑、口服液、注射劑或膠囊劑。相應(yīng)地，本發(fā)明還提供了一種制備上述的抗金黃色葡萄球菌的藥物的方法，包括以下步驟：A)中藥組合物的制備：取金銀花、黃芩和連翹，洗凈，晾干，粉碎成粗粉，加入粗粉3～6倍量的純化水浸泡10～24h，煎煮1～3次，合并煎煮液，過濾，將濾液濃縮，得濃縮液；B)往上述濃縮液中加入抗生素，混合均勻，即得。除外，本發(fā)明還提供了上述的抗金黃色葡萄球菌的藥物在制備抗菌藥物或抗菌用品中的用途。優(yōu)選地，所述藥物的受體為動物或人。優(yōu)選地，所述抗菌用品優(yōu)選為抗菌生活用品，所述生活用品優(yōu)選為牙膏或漱口水。本發(fā)明中藥組合物由連翹、金銀花和黃芩按一定的重量組成，其具有清熱、解毒的功效。經(jīng)試驗(yàn)證明，中藥組合物與抗生素聯(lián)用能有效降低抗生素的用量，且兩者具有協(xié)同增效的作用。其中，尤以中藥組合物與頭孢拉定聯(lián)用效果最佳，試驗(yàn)證明，兩者聯(lián)用時，頭孢拉定的最小抑菌濃度(MIC)可降至1/2～1/16，F(xiàn)IC為0.125，兩者為協(xié)同作用。另外，目前對于服用頭孢拉定引起的血尿反應(yīng)的機(jī)理不明，發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明中藥組合物一方面不僅能夠使頭孢拉定的有效用量降低至至原有效用量的1/16，另一方面，通過臨床觀察，服用本發(fā)明藥物后的患者均沒有出現(xiàn)血尿反應(yīng)，這一點(diǎn)是發(fā)明人意想不到的，取得了預(yù)料不到的技術(shù)效果。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)勢：本發(fā)明通過將中藥組合物和抗生素聯(lián)用，可提高金黃色葡萄球菌對抗生素的敏感性，同時可有效降低抗生素的用量(中藥組合物與頭孢拉定聯(lián)用能使頭孢拉定的有效用量降低至原有效用量的1/16)，降低藥物性血尿不良反應(yīng)的產(chǎn)生，兩者具有協(xié)同增效的作用，具有良好的應(yīng)用前景，適于大范圍推廣應(yīng)用。具體實(shí)施方式：以下通過具體實(shí)施方式的描述對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但這并非是對本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的基本思想，可以做出各種修改或改進(jìn)，但是只要不脫離本發(fā)明的基本思想，均在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。實(shí)施例1、抗金黃色葡萄球菌藥物口服液的制備金銀花7.35mg黃芩7.35mg連翹14.7mg頭孢拉定3μg制備方法：A)中藥組合物的制備：取金銀花、黃芩和連翹，洗凈，晾干，粉碎成粗粉，加入粗粉5倍量的純化水浸泡12h，煎煮2次，合并煎煮液，過濾，將濾液濃縮成20ml的濃縮液；B)往上述濃縮液中加入頭孢拉定，混合均勻，按10ml/支分裝，滅菌，即得。實(shí)施例2、抗金黃色葡萄球菌藥物口服液的制備制備方法如實(shí)施例1。實(shí)施例3、抗金黃色葡萄球菌藥物口服液的制備金銀花7.35mg黃芩7.35mg連翹14.7mg頭孢拉定12μg制備方法如實(shí)施例1。實(shí)施例4、抗金黃色葡萄球菌藥物口服液的制備金銀花3.65mg黃芩3.65mg連翹7.3mg左氧佛沙星2.4μg制備方法如實(shí)施例1。實(shí)施例5、抗金黃色葡萄球菌藥物口服液的制備金銀花7.35mg黃芩7.35mg連翹14.7mg左氧佛沙星2.4μg制備方法如實(shí)施例1。實(shí)施例6、抗金黃色葡萄球菌藥物口服液的制備對比例1、抗金黃色葡萄球菌藥物口服液的制備對比例1與實(shí)施例1的區(qū)別在于：所述中藥組合物由金銀花7.35mg，黃芩7.35mg、連翹14.7mg、野菊花10mg和五倍子8mg組成，其余參數(shù)與操作如實(shí)施例1。對比例2、一種抗金黃色葡萄球菌的藥物對比例2與實(shí)施例1的區(qū)別在于：去掉黃芩，金銀花的用量增加至15mg。試驗(yàn)例一、不同抗生素與中藥組合物聯(lián)用抗金黃色葡萄球菌的效果試驗(yàn)1.材料1.1藥物中藥組合物(金銀花7.35mg，黃芩7.35mg和連翹14.7mg)、頭孢拉定(廣州白云山醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司，批號：2160005)、左氧氟沙星(第一三共和制藥有限公司，產(chǎn)品批號BP009A1)、阿莫西林(廣州白云山醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司，產(chǎn)品批號：4150095)、慶大霉素(廣州白云山天心制藥股份有限公司，產(chǎn)品批號：1640401)。1.2儀器SW-CJ-1F超凈臺(蘇州蘇潔凈化設(shè)備有限公司)；SPS-150-Z生化培養(yǎng)箱(上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)；TG16MW離心機(jī)(湖南赫西儀器裝備有限公司)；QYC-200全溫培養(yǎng)搖床(上海?，攲?shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)；UV-1800紫外可見分光光度計(日本島津)；BG-Pwer電泳儀(北京白晶生物科技有限公司)。1.3菌株金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus，S.a，菌株號:ATCC25923)。2.方法2.1菌液制備將金黃色葡萄球菌接種于MH肉湯培養(yǎng)基，制備單菌落。擴(kuò)大培養(yǎng)后，用無菌生理鹽水洗脫并稀釋至2×107CFU/ml，備用。2.2抗生素供試藥液制備用無菌水將4種抗生素分別配制成7.16mmol/L的溶液，備用。2.3最小抑菌濃度的測定采用二倍稀釋法測定最小抑菌濃度(Minimuminhibitoryconcentration，MIC)。96孔板中A、B、C行第1～9孔內(nèi)先加培養(yǎng)基100μl，然后第1孔中再一次加入中藥組合物(濃度為1.5g/ml)100μl，混勻后取出100μl移至第2孔中，依次進(jìn)行倍比稀釋至第7孔，混勻后棄掉100μl，然后每孔依次加菌液100μl(C1～C9不加菌液，作為自身對照)，藥物最終濃度為375、187.5、93.40、46.88、23.44、11.72、5.86mg/ml。其中各孔菌液的最終濃度為1×105CFU/ml，以A8、B8孔內(nèi)菌液和培養(yǎng)基作為陽性對照，A9、B9孔內(nèi)培養(yǎng)基作為陰性對照；同理，各抗生素采用倍比稀釋法，藥液最終濃度為1.79、0.895、0.448、0.224、0.111、0.056、0.028、0.014、0.007、0.0035μmol/L，依次每孔加菌100μl，在37℃中培養(yǎng)18h觀察結(jié)果。2.4FIC的測定采用棋盤法測定抑菌濃度指數(shù)(fractionalinhibitoryconcentrationindex，F(xiàn)IC)。依據(jù)上述測定的不同藥物單用時對供試菌株的MIC，將不同藥各自以不同的MIC濃度分別組合，將藥物按照對應(yīng)濃度加入相應(yīng)的孔內(nèi)，每孔為50μl。所以，每孔中可得到不同濃度組合的兩種抗菌藥物混合液。菌液以每孔100μl加入孔內(nèi)(最終藥液的濃度縮小4倍)，最終每孔接種量為1×105CFU/ml。置37℃培養(yǎng)18h后觀察結(jié)果。聯(lián)合用藥效果判定方法：計算抑菌濃度指數(shù)判斷標(biāo)準(zhǔn)為FIC≤0.5為協(xié)同作用；0.5＜FIC≤1時為相加作用；1＜FIC≤2時，藥物的相互作用結(jié)果為無關(guān)；FIC＞2時，聯(lián)合用藥相互作用結(jié)果為拮抗。3.結(jié)果3.1最小抑菌濃度(MIC)確定試驗(yàn)表明中藥組合物對金黃色葡萄球菌ATCC25923的MIC為23.4mg/ml，頭孢拉定對金黃色葡萄球菌ATCC25923的MIC為2.4μg/mL，左氧氟沙星對金黃色葡萄球菌ATCC25923的MIC為0.24μg/mL，阿莫西林對金黃色葡萄球菌的MIC為0.12μg/mL，慶大霉素對金黃色葡萄球菌ATCC25923的MIC為0.98μg/mL。3.2FIC指數(shù)的測定測定結(jié)果見表1～4可知，通過計算頭孢拉定聯(lián)用中藥組合物的抑菌濃度指數(shù)FIC，F(xiàn)IC＝1/16+1/16＝0.125，該結(jié)果表明中藥組合物與頭孢拉定聯(lián)用具有良好的協(xié)同抗菌作用；中藥組合物與左氧氟沙星聯(lián)用對金黃色葡萄球菌的FIC＝0.531，該結(jié)果表示中藥組合物與左氧氟沙星聯(lián)用對金黃葡萄球菌作用表現(xiàn)為相加作用；中藥組合物與阿莫西林聯(lián)用對金黃色葡萄球菌的FIC＝1,該結(jié)果表示中藥組合物與阿莫西林聯(lián)用對金黃色葡萄球菌表現(xiàn)為無關(guān)；中藥組合物與慶大霉素聯(lián)用對金黃色葡萄球菌的FIC＝0.5,該結(jié)果表示中藥組合物與阿莫西林聯(lián)用對金黃色葡萄球菌表現(xiàn)為相加作用。表1中藥組合物對頭孢拉定抑制金黃色葡萄球菌的作用注：A為抗生素，B為中藥復(fù)方；“+”代表渾濁，“-”代表澄清。表2中藥組合物對左氧氟沙星抑制金黃色葡萄球菌的作用注：A為抗生素，B為中藥復(fù)方；“+”代表渾濁，“-”代表澄清。表3中藥組合物對阿莫西林抑制金黃色葡萄球菌的作用表4中藥組合物對慶大霉素抑制金黃色葡萄球菌的作用試驗(yàn)例二、臨床應(yīng)用1.病例選擇選擇250例因金黃色葡萄球菌引起的呼吸系感染患者志愿者，男135例，女115例，年齡18～45歲，平均年齡26±2.1歲，隨機(jī)分成5組，分別是實(shí)施例1組、實(shí)施例4組、實(shí)施例6組和對比例1～2組。1.2治療方法實(shí)施例1組：給予本發(fā)明實(shí)施例1所述口服液1支/d，服用3d；實(shí)施例4組：給予本發(fā)明實(shí)施例4所述口服液1支/d，服用3d；實(shí)施例6組：給予本發(fā)明實(shí)施例6所述口服液1支/d，服用3d；對比例1組：給予本發(fā)明對比例1所述口服液1支/d，服用3d；對比例2組：給予本發(fā)明對比例2所述口服液1支/d，服用3d。1.3療效評定標(biāo)準(zhǔn)顯效：用藥后24～38小時，體溫恢復(fù)正常，并且不再回升，其他癥狀好轉(zhuǎn)或消失；有效：用藥后48～72小時，體溫恢復(fù)正常，其他癥狀好轉(zhuǎn)；無效：用藥后72小時以上體溫仍未恢復(fù)正常，其他癥狀為減輕或減輕后又很快復(fù)發(fā)者。2.結(jié)果如表5所示。表5臨床療效結(jié)果由上表可知，250例呼吸系感染患者中，有92.0～98.0％的患者服用本發(fā)明藥物后24～38小時，體溫恢復(fù)正常，并且不再回升，其他癥狀好轉(zhuǎn)或消失，其中，以頭孢拉定和中藥組合物聯(lián)用效果最佳，總有效率達(dá)到100.0％，對服用實(shí)施例1所述藥物的各患者后觀察，各患者均無血尿不良反應(yīng)產(chǎn)生。這說明，本發(fā)明中藥組合物與頭孢拉定聯(lián)用不僅能明顯降低頭孢拉定的有效用量，并且能降低血尿不良反應(yīng)的產(chǎn)生。需要提出的是，對比例1組在原有中藥組合物的基礎(chǔ)上增加了五倍子和野菊花，其總有效率與實(shí)施例1組比下降了22％，這一點(diǎn)是發(fā)明人意想不到的；對比例2組去掉了黃芩，其總有效率與實(shí)施例1組比下降了28％，且在50例患者中，有5例患者出現(xiàn)了血尿反應(yīng)。當(dāng)前第1頁1 2 3