阿掏比克酸三唑基與1h?四氮唑基衍生物的組合物用于制備抗心衰藥物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種阿掏比克酸即Artalbic acid的O?(三唑基)乙基與O?(1H?四氮唑基)乙基衍生物的組合物在抗心衰藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及阿掏比克酸即Artalbic acid的O?(三唑基)乙基與O?(1H?四氮唑基)乙基衍生物的組合物及其在制備抗心衰藥物上的用途。本發(fā)明公開了一種阿掏比克酸即Artalbic acid的O?(三唑基)乙基與O?(1H?四氮唑基)乙基衍生物的組合物及其制備方法。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的阿掏比克酸即Artalbic acid的O?(三唑基)乙基與O?(1H?四氮唑基)乙基衍生物的組合物具有抗心衰作用，具有開發(fā)抗心衰藥物的價(jià)值。
【專利說明】
阿掏比克酸三唑基與1H-四氮唑基衍生物的組合物用于制備 抗心衰藥物
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 心衰(hear failure，HF)是指心臟功能異常導(dǎo)致心臟栗血量不能滿足組織代謝需 要的一種病理生理狀態(tài)。病因是心臟負(fù)荷過重、心肌本身舒張受限，及任何原因?qū)е碌某跏?心肌損傷;而感染、貧血、妊娠、分娩、心律紊亂、肺栓塞、甲亢、糖尿病、抑制心臟藥誘發(fā)加重 HF。發(fā)病機(jī)理過去認(rèn)為HF發(fā)生發(fā)展的機(jī)制是血流動(dòng)力學(xué)異常；20世紀(jì)80年代后期認(rèn)識到神 經(jīng)-內(nèi)分泌激素的激活起重要作用（交感丨NE丨RAS丨等激活）；90年代以后逐漸明確了"心肌重 塑"（remodelling)是導(dǎo)致心衰的發(fā)生發(fā)展的基本機(jī)制。心衰又分為急性心衰和慢性心衰。
[0003] 目前對于心衰的治療，臨床上沒有特效藥物，大部分藥物在緩解心衰癥狀的同時(shí) 具有不可避免的毒副作用，從天然產(chǎn)物中尋找化合物或先導(dǎo)化合物并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾獲得其 衍生物，從而得到高效低毒的潛在藥物最有重要價(jià)值。
[0004] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個(gè)2011年發(fā)表（Antonella Maggio et al ·， 2011.Artalbic acid,a sesquiterpene with an unusual skeleton from Artemisia alba(Asteraceae)from Sicily·Tetrahedron Letters,52(2011 )4543-4545)的化合物，我 們對化合物I進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾，獲得了兩個(gè)新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合 物III和化合物IV制備了組合物并對該組合物抗抗心衰活性進(jìn)行了評價(jià)，其具有抗心衰活 性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明公開了一個(gè)新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物 中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為65%和35%。
[0006]
[0007] 本發(fā)明公開的組合物可以制成藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的載體。
[0008] 藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的組合物具有較好的抗心衰作用。本發(fā)明的藥學(xué)上可接 受的鹽具有同樣的藥效。
[0009] 以下通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實(shí)施方式】
[00?0] 實(shí)施例1化合物Artalbic acid的制備
[0011] 化合物Artalbic acid(I)的制備方法參照Antonella Maggio等人發(fā)表的文獻(xiàn) (Antonella Maggio et al.,2011.Artalbic acid,a sesquiterpene with an unusual skeleton from Artemisia alba(Asteraceae)from Sicily. Tetrahedron Letters ,52 (2011 )4543-4545)的方法。
[0012]
[0013] 實(shí)施例2Artalbic acid的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0014] 將化合物I(266mg，l .OOmmol)溶于IOmL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（TBAB) (0.088)，1，2-二溴乙燒(3.76(^，20.00_〇1)和61]1]^的50%氫氧化鈉溶液?；旌衔镌?0攝氏 度攪拌Iehieh之后將反應(yīng)液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機(jī)相溶液。然 后對有機(jī)相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌5次，再用無水硫酸鈉干燥，最后減壓濃縮去除 溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮= 100:1.0，v/V)， 收集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末(272mg，73% )。
[0015] 1H NMR(500MHz,DMS0-d6)5ll.41(s,lH),6.06(s,lH),5.76(s,lH),4.99(s,lH), 4.71(s,1H),4.56(s,1H),3.86(s,2H),3.54(s,2H),2.65(s,1H),2.43(s,2H),2.33(s,2H), 2.10(s,lH),1.64(s,3H),1.54(s,lH),1.44(s,2H),0.95(s,3H).
[0016] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)S201.95(s),175.93(s),149.13(s),148.15(s),117.05 (s),109.43(s),81.86(s),70.27(s),57.68(s),41.26(s),39.07(s),38.86(s),35.69(s), 33.36(s),30.72(s),20.44(s),18.42(s).
[0017] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcd for Ci7H26BrO4:373.1014；found 373.1017.
[0018]
[0019] 實(shí)施例3Artalbic acid的0_(三挫基）乙基衍生物（III)的合成 [0020] 將化合物II(187mg，0.5mmo 1)溶于25mL乙腈當(dāng)中，向其中加入無水碳酸鉀(345mg， 2 · 5mmol)，鵬化鉀（84mg，0 · 5mmol)和 1，2，3-三氮挫（2760mg，40mmol)，混合物加熱回流3h。 反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取三次，合并有機(jī)相。依次用水和飽和 食鹽水洗滌合并之后的有機(jī)相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn) 物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮= 100: ι.ο，v/v)，收集淡黃色集中洗脫 帶即得到化合物III的淡黃色膠狀固體(124.5mg，69% )。
[0021] 1H NMR(500MHz,DMS0-d6)5l6.23(s,lH) ,7.99(d,J = 29.4Hz,2H) ,6.11(s,lH), 5.82(s,lH),4.76(d J=17.3Hz,2H),4.62(s,1H),4.24(s,1H),4.18(s,1H),3.84(s,2H), 2.70(s,lH),2.52(d J=16.3Hz,4H),2.02(s,lH),1.69(s,3H),1.62(s,2H),1.51(s,lH), 1.02(s,3H).
[0022] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)S201.95(s),175.95(s),149.17(s),148.18(s),136.99 (s),120.76(s),117.09(s),109.44(s),81.89(s),65.54(s),57.72(s),46.43(s),41.30 (s),39.08(s),38.89(s),35.71(s),30.77(s),20.46(s),18.43(s).
[0023] HRMS(ESI) :m/z[M+H].calcd for Ci9H28N3〇4:362.2080;found:362.2085〇
[0024]
[0029] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for Ci8H27N4〇4:363.2032;found:363.2029〇
[0030]
[0031] 實(shí)施例7組合物抗心衰活性
[0032] (一)實(shí)驗(yàn)例:組合物對犬急性心力衰竭的治療作用
[0033] 1材料：動(dòng)物--健康成年犬體重12 · 5~13 · 5kg。戊巴比妥鈉（Sigma，進(jìn)口分裝，規(guī) 格:25g);儀器美國BIC16導(dǎo)生理記錄儀(美國BIC公司生產(chǎn)）；電磁流量計(jì)(MFV-3200型）：日 本光電公司生產(chǎn)。
[0034] 組合物的制備：將研磨之后過200目網(wǎng)的65mg化合物III的粉末和研磨之后過200 目網(wǎng)的35mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到IOOmg組合物， 使用時(shí)用水溶解這IOOmg的組合物即得到組合物的溶液。
[0035] 2試驗(yàn)方法與結(jié)果
[0036]將犬隨機(jī)分為NS組（等容量溶劑），灌胃給藥組合物1.0mg/kg組、化合物III 1.0mg/kg組和化合物IV 1.0mg/kg組，每組6只。禁食12小時(shí)后，靜脈注射戊巴比妥鈉40mg/ kg麻醉，氣管插管，人工呼吸，監(jiān)測主動(dòng)脈壓(AP)與心電圖。左側(cè)開胸，從心尖插導(dǎo)管至左室 壓及其壓力變化速度（± dp/dtmax)。將Waltan-Brodie應(yīng)變弓植入左心室前壁，測定心肌收 縮力。用電磁流量計(jì)測定升主動(dòng)脈血流量。以升主動(dòng)脈流量作為心輸出量(CO)，計(jì)算心臟指 數(shù)(Cl)，每搏指數(shù)(SI)，每搏作功(SW)，左心作功(LVW)。各項(xiàng)參數(shù)記錄與BIC生理記錄儀。術(shù) 后半小時(shí)，各項(xiàng)參數(shù)達(dá)到穩(wěn)定。從股靜脈恒速輸注戊巴比妥鈉（0.5mL/kg · min)，以土dp/ dtmaxT降到約1000mHg/S為主要指標(biāo)形成急性心力衰竭。待急性心衰模型穩(wěn)定后，各組動(dòng)物 十二指腸給予相應(yīng)藥物。組間T檢驗(yàn)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
[0037] 表1組合物對心力衰竭犬dp/dt的影響(n = 6)
[0039] 與 NS 組比較，?ρ〈0·05
[0040] 表2組合物對心力衰竭犬心臟作功的影響(η = 6)
[0042] 與給藥前比較*p〈0.05;與NS組比較?p〈0.05
[0043] 結(jié)果如表1、2所示，組合物可顯著增加心衰犬的SW、LVW、+dp/dt(與模型組對照組 比較，口〈〇.〇5)。化合物111和化合物1￥不可顯著增加心衰犬的31、1^1、+(1?/扣。
[0044]表3組合物對心力衰竭犬心輸出量的影響(n = 6)
[0046] 與給藥前比較*p〈0 · 05;與NS組比較?p〈0 · 05
[0047] 結(jié)果如表3所示，組合物可顯著增加心衰犬的心輸出量（與模型對照組比較，p〈 〇. 05)?；衔颕II和化合物IV不可顯著增加心衰犬的心輸出量。
[0048] 結(jié)論:組合物能夠顯著改善急性心衰，可以用來制備治療或預(yù)防急性心衰的藥物。 化合物III和化合物IV不能顯著改善急性心衰，不可用來制備治療或預(yù)防急性心衰的藥物。 [0049 ](二)實(shí)驗(yàn)例組合物對慢性心衰大鼠的影響
[0050] 試驗(yàn)方法與結(jié)果
[0051] 大鼠50只，雌雄各半。10只作為正常對照組。40只腹腔注射鹽酸阿霉素2mg/kg，每 周1次，共6周，第5周時(shí)隨機(jī)分為4組，即正常NS組和3個(gè)灌胃給藥2.5mg/kg組。灌胃給藥組合 物2.5mg/kg組、化合物III 2.5mg/kg組和化合物IV 2.5mg/kg組在第5周起每日分別給予組 合物、化合物III和化合物IV灌胃各組，給藥21天。20%烏拉坦I. Ig/kg腹腔注射麻醉，手術(shù) 剝離氣管并插管，同時(shí)游離出右側(cè)總動(dòng)脈，經(jīng)其插入自制的心室插管(直徑1mm，充滿1%肝 素），描記血壓曲線;再繼續(xù)插入，使其通過左側(cè)動(dòng)脈瓣進(jìn)入左心室，描記室內(nèi)壓曲線，自動(dòng) 分析處理左室收縮壓(LVSP)，心室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dt max)，心室內(nèi)壓最大下降速度 (_dp/dtmax)和實(shí)測心肌最大收縮速度(Vpm)等數(shù)據(jù)。另取10只大鼠作為正常對照組，不給予 鹽酸阿霉素，其余操作同上述，組間T檢驗(yàn)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
[0052]表4組合物對慢性心衰大鼠心功能的影響(n = 10)
[0054] 與 NS 組比較，Λ:ρ〈0·05
[0055] 表4試驗(yàn)結(jié)果表明組合物2.5mg/kg能顯著升高由鹽酸阿霉素導(dǎo)致的心衰大鼠的 LVSP，+dp/dtmax，-dp/dtmax和Vpm的降低（與NS組比較，P〈0 ·05);化合物III 2· 5mg/kg和化合 物IV 2.5mg/kg不能顯著升高由鹽酸阿霉素導(dǎo)致的心衰大鼠的LVSP，+dp/dtmax，-dp/dtmax和 Vpm的降低。
[0056]結(jié)論:組合物具有顯著的治療或預(yù)防慢性心衰的作用，可以用來制備治療或預(yù)防 慢性心衰的藥物?；衔颕II和化合物IV不具有顯著的治療或預(yù)防慢性心衰的作用，不可以 用來制備治療或預(yù)防慢性心衰的藥物。
[0057]實(shí)施例6本發(fā)明所涉及組合物片劑的制備
[0058]取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機(jī)制成100片。
[0059] 實(shí)施例7本發(fā)明所涉及組合物膠囊的制備
[0060] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物HI和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為65%和35%，2. 如權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為:將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為65%和35%充分混合。3. 如權(quán)利要求1所述的一種組合物在抗屯、衰藥物中的應(yīng)用。4. 如權(quán)利要求3所述的組合物在抗屯、衰藥物中的應(yīng)用，其特征在于:所述屯、衰為急性屯、 衰。5. 如權(quán)利要求4所述的組合物在抗屯、衰藥物中的應(yīng)用，其特征在于:所述組合物可W增 加急性屯、衰的屯、臟做功。6. 如權(quán)利要求4所述的一種組合物在抗屯、衰藥物中的應(yīng)用，其特征在于:所述組合物可 W增加急性屯、衰的屯、輸出量。7. 如權(quán)利要求3所述的組合物在抗屯、衰藥物中的應(yīng)用，其特征在于:所述屯、衰為慢性屯、 衰。8. 如權(quán)利要求7所述的組合物在抗屯、衰藥物中的應(yīng)用，其特征在于:所述組合物可W增 加慢性屯、衰的左室收縮壓。9. 如權(quán)利要求7所述的組合物在抗屯、衰藥物中的應(yīng)用，其特征在于:所述組合物可W增 加慢性屯、衰的屯、室內(nèi)壓最大上升速率。10. 如權(quán)利要求7所述的組合物在抗屯、衰藥物中的應(yīng)用，其特征在于:所述組合物可W 增加慢性屯、衰的屯、肌最大收縮速度。
【文檔編號】A61P9/04GK106074509SQ201610347901
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年5月24日
【發(fā)明人】丁秋菊
【申請人】南京海澳斯生物醫(yī)藥科技有限公司