一種蝦青素的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種蝦青素的提取方法，屬于提取技術領域。本發(fā)明取硝酸鹽、鉀、胺類物質(zhì)與蒸餾水混合，再添加2,4?二氯苯氧乙酸、萘乙酸和6芐基嘌呤制得營養(yǎng)物，經(jīng)滅菌后，與無菌水混合制得培養(yǎng)液，將雨生紅球藻移入其中培養(yǎng)，用有機物對培養(yǎng)后的雨生紅球藻反復淋洗，得發(fā)霉物，取1/2發(fā)霉物萃取得雨生紅球藻酶，與剩下的1/2發(fā)霉物混合酶解后，經(jīng)過濾、離心分離、濃縮、冷凍、干燥得到蝦青素。本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明制備步驟簡單，對設備要求低，成本低于其他成本21.2%以上；所得產(chǎn)品蝦青素含量高于其他產(chǎn)品19.5%以上，純度高。
【專利說明】
一種蝦青素的提取方法
技術領域
[0001]本發(fā)明涉及一種蝦青素的提取方法，屬于提取技術領域。
【背景技術】
[0002]蝦青素是目前具有最強抗氧化活性的類胡蘿卜素，其抗氧化活性是維生素E、β_胡蘿卜素的500倍以上。蝦青素還具有抗腫瘤、降血脂、延緩衰老等功能，在食品、化妝品以及其他行業(yè)具有廣泛用途，市場前景廣闊。同時，作為脂溶性的鮮紅色色素，在食品工業(yè)中可為多種食品著色，增加食品的色澤美感;用于觀賞性魚蝦的養(yǎng)殖中，也可增加色澤，增強觀感，提高其經(jīng)濟價值。蝦青素具有水不溶性和親脂性，溶于吡啶、苯、二氯甲烷等有機溶劑，微溶于石油醚、乙醇、甲醇、乙醚等大多數(shù)有機溶劑。蝦青素為長鏈不飽和雙鍵結構體系，性質(zhì)不穩(wěn)定，易于氧化和降解，對熱、氧、自然光、紫外光敏感。因此，生物體中的蝦青素大多以單酯或雙酯的形式存在。蝦青素結構中具有羥基，可與羧基結合生成較為穩(wěn)定的蝦青素酯。目前，用于蝦青素提取的方法主要有溶劑浸提法和超臨界二氧化碳萃取法。主要應用的是超臨界二氧化碳萃取，雖可以有效地提取蝦青素并最大限度地避免其降解，但對設備的要求很高，價格昂貴，且二氧化碳用量大，提取物中蝦青素含量較低，阻礙了其大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術問題:針對超臨界二氧化碳萃取蝦青素，對設備的要求高，且二氧化碳用量大，提取物中蝦青素含量較低的弊端，提供了一種取硝酸鹽、鉀、胺類物質(zhì)與蒸餾水混合，再添加2，4_ 二氯苯氧乙酸、萘乙酸和6芐基嘌呤制得營養(yǎng)物，經(jīng)滅菌后，與無菌水混合制得培養(yǎng)液，將雨生紅球藻移入其中培養(yǎng)，用有機物對培養(yǎng)后的雨生紅球藻反復淋洗，得發(fā)霉物，取1/2發(fā)霉物萃取得雨生紅球藻酶，與剩下的1/2發(fā)霉物混合酶解后，經(jīng)過濾、離心分離、濃縮、冷凍、干燥得到蝦青素的方法。本發(fā)明制備步驟簡單，所得產(chǎn)品蝦青素含量高。
[0004]為解決上述技術問題，本發(fā)明采用如下所述的技術方案是:
(1)按重量百份比計，分別稱取5?10份硝酸鉀、5?10份硝酸銨、5?10份磷酸二氫鉀、2?3份硫酸鎂、3?5份氯化鈣、5?8份碘化鉀、3?5份七水硫酸鋅、7?14份七水合硫酸亞鐵、35?65份蒸饋水，在300r/min下攪拌混合，得混合物；
(2)將上述所得混合物置于300?500W超聲分散器中，進行超聲分散處理4?6h，隨后向其中加入混合物質(zhì)量5?7%2，4-二氯苯氧乙酸、混合物質(zhì)量3?5%萘乙酸和混合物質(zhì)量4?6%6芐基嘌呤，攪拌使其充分混合均勻，得營養(yǎng)物；
(3)將上述所得的營養(yǎng)物在壓力為97?99kPa，溫度為120?121°C下，滅菌18?20min，隨后按質(zhì)量比3:2，將無菌水添加至滅菌后的營養(yǎng)物中，制得培養(yǎng)液，再將雨生紅球藻移入培養(yǎng)液中，在25?28 °C下培養(yǎng)8?10天；
(4)待培養(yǎng)完后，將培養(yǎng)后的雨生紅球藻置于陰暗潮濕處，放置7?9天，每隔6?8h依次用30?40mL乙酸乙酯和25?35mL油酸將雨生紅球藻淋洗一次，使其自然發(fā)霉，待其霉菌長至1?15cm時，停止淋洗，得發(fā)霉物；
(5)稱取1/2上述所得的發(fā)霉物，放入萃取機中，同時向萃取機中加入發(fā)霉物質(zhì)量35?40%醋酸丁酯，逆流萃取4?6h，得丁酯萃取液，向其中加入10?12mL枸櫞酸-磷酸氫二鈉緩沖液，浸泡20?30min，再向其中加入30?40mL醋酸丁酯，逆流萃取2?3h，得雨生紅球藻酶；
(6)按質(zhì)量比3:2，將剩余1/2發(fā)霉物添加至上述所得的雨生紅球藻酶中，攪拌混合均勾，酶解2?3天，過濾得酶解液，并將酶解液置于3200r/min離心機中離心分離10?15min，得上清液；
(7)將上述所得的上清液置于旋轉蒸發(fā)器中，旋轉蒸發(fā)至原液體體積的1/3，并將其置于-5?1°C下冷凍I?2h，冷凍后將其放入密閉容器中，對其抽真空進行干燥2?3h，即得蝦青素。
[0005]本發(fā)明的應用方法:將本發(fā)明制備的蝦青素為原料制得護膚品，該護膚品抗氧化和抗紫外線性能好，可防止皮膚老化，預防皮膚癌的發(fā)生，延緩細胞衰老，減少皮膚皺紋和黑色素沉積，讓皮膚更有彈性和潤澤感。
[0006]本發(fā)明與其他方法相比，有益技術效果是:
(1)本發(fā)明制備步驟簡單，對設備要求低，成本低于其他成本21.2%以上；
(2)所得產(chǎn)品蝦青素含量高于其他產(chǎn)品19.5%以上，純度高。
【具體實施方式】
[0007]按重量百份比計，分別稱取5?10份硝酸鉀、5?10份硝酸銨、5?10份磷酸二氫鉀、2?3份硫酸鎂、3?5份氯化鈣、5?8份碘化鉀、3?5份七水硫酸鋅、7?14份七水合硫酸亞鐵、35?65份蒸饋水，在300r/min下攪拌混合，得混合物;將上述所得混合物置于300?500W超聲分散器中，進行超聲分散處理4?6h，隨后向其中加入混合物質(zhì)量5?7%2，4_二氯苯氧乙酸、混合物質(zhì)量3?5%萘乙酸和混合物質(zhì)量4?6%6芐基嘌呤，攪拌使其充分混合均勻，得營養(yǎng)物；然后將上述所得的營養(yǎng)物在壓力為97?99kPa，溫度為120?121°C下，滅菌18?20min，隨后按質(zhì)量比3:2，將無菌水添加至滅菌后的營養(yǎng)物中，制得培養(yǎng)液，再將雨生紅球藻移入培養(yǎng)液中，在25?28°C下培養(yǎng)8?10天;待培養(yǎng)完后，將培養(yǎng)后的雨生紅球藻置于陰暗潮濕處，放置7?9天，每隔6?8h依次用30?40mL乙酸乙酯和25?35mL油酸將雨生紅球藻淋洗一次，使其自然發(fā)霉，待其霉菌長至10?15cm時，停止淋洗，得發(fā)霉物;稱取1/2上述所得的發(fā)霉物，放入萃取機中，同時向萃取機中加入發(fā)霉物質(zhì)量35?40%醋酸丁酯，逆流萃取4?6h，得丁酯萃取液，向其中加入10?12mL枸櫞酸-磷酸氫二鈉緩沖液，浸泡20?30min，再向其中加入30?40mL醋酸丁酯，逆流萃取2?3h，得雨生紅球藻酶;按質(zhì)量比3:2，將剩余1/2發(fā)霉物添加至上述所得的雨生紅球藻酶中，攪拌混合均勻，酶解2?3天，過濾得酶解液，并將酶解液置于3200r/min離心機中離心分離10?15min，得上清液;最后將上述所得的上清液置于旋轉蒸發(fā)器中，旋轉蒸發(fā)至原液體體積的1/3，并將其置于-5?I °C下冷凍I?2h，冷凍后將其放入密閉容器中，對其抽真空進行干燥2?3h，即得蝦青素。
[0008]實例I
按重量百份比計，分別稱取10份硝酸鉀、10份硝酸銨、10份磷酸二氫鉀、3份硫酸鎂、5份氯化鈣、8份碘化鉀、5份七水硫酸鋅、14份七水合硫酸亞鐵、35份蒸餾水，在300r/min下攪拌混合，得混合物;將上述所得混合物置于300W超聲分散器中，進行超聲分散處理4h，隨后向其中加入混合物質(zhì)量5%2，4-二氯苯氧乙酸、混合物質(zhì)量3%萘乙酸和混合物質(zhì)量4%6芐基嘌呤，攪拌使其充分混合均勻，得營養(yǎng)物;然后將上述所得的營養(yǎng)物在壓力為97kPa，溫度為120°C下，滅菌18min，隨后按質(zhì)量比3: 2，將無菌水添加至滅菌后的營養(yǎng)物中，制得培養(yǎng)液，再將雨生紅球藻移入培養(yǎng)液中，在25°C下培養(yǎng)8天;待培養(yǎng)完后，將培養(yǎng)后的雨生紅球藻置于陰暗潮濕處，放置7天，每隔6h依次用30mL乙酸乙酯和25mL油酸將雨生紅球藻淋洗一次，使其自然發(fā)霉，待其霉菌長至1cm時，停止淋洗，得發(fā)霉物;稱取1/2上述所得的發(fā)霉物，放入萃取機中，同時向萃取機中加入發(fā)霉物質(zhì)量35%醋酸丁酯，逆流萃取4h，得丁酯萃取液，向其中加入1mL枸櫞酸-磷酸氫二鈉緩沖液，浸泡20min，再向其中加入30mL醋酸丁酯，逆流萃取2h，得雨生紅球藻酶；按質(zhì)量比3: 2，將剩余1/2發(fā)霉物添加至上述所得的雨生紅球藻酶中，攪拌混合均勻，酶解2天，過濾得酶解液，并將酶解液置于3200r/min離心機中離心分離lOmin，得上清液;最后將上述所得的上清液置于旋轉蒸發(fā)器中，旋轉蒸發(fā)至原液體體積的1/3，并將其置于_5°C下冷凍lh，冷凍后將其放入密閉容器中，對其抽真空進行干燥2h，即得蝦青素。
[0009]將本發(fā)明制備的蝦青素為原料制得護膚品，該護膚品抗氧化和抗紫外線性能好，可防止皮膚老化，預防皮膚癌的發(fā)生，延緩細胞衰老，減少皮膚皺紋和黑色素沉積，讓皮膚更有彈性和潤澤感。
[0010]實例2
按重量百份比計，分別稱取7份硝酸鉀、7份硝酸銨、7份磷酸二氫鉀、3份硫酸鎂、4份氯化鈣、6份碘化鉀、4份七水硫酸鋅、11份七水合硫酸亞鐵、51份蒸餾水，在300r/min下攪拌混合，得混合物;將上述所得混合物置于400W超聲分散器中，進行超聲分散處理5h，隨后向其中加入混合物質(zhì)量6%2，4-二氯苯氧乙酸、混合物質(zhì)量4%萘乙酸和混合物質(zhì)量5%6芐基嘌呤，攪拌使其充分混合均勻，得營養(yǎng)物;然后將上述所得的營養(yǎng)物在壓力為98kPa，溫度為121°C下，滅菌19min，隨后按質(zhì)量比3:2，將無菌水添加至滅菌后的營養(yǎng)物中，制得培養(yǎng)液，再將雨生紅球藻移入培養(yǎng)液中，在27°C下培養(yǎng)9天;待培養(yǎng)完后，將培養(yǎng)后的雨生紅球藻置于陰暗潮濕處，放置8天，每隔7h依次用35mL乙酸乙酯和30mL油酸將雨生紅球藻淋洗一次，使其自然發(fā)霉，待其霉菌長至13cm時，停止淋洗，得發(fā)霉物;稱取1/2上述所得的發(fā)霉物，放入萃取機中，同時向萃取機中加入發(fā)霉物質(zhì)量38%醋酸丁酯，逆流萃取5h，得丁酯萃取液，向其中加入I ImL枸櫞酸-磷酸氫二鈉緩沖液，浸泡25min，再向其中加入35mL醋酸丁酯，逆流萃取3h，得雨生紅球藻酶;按質(zhì)量比3:2，將剩余1/2發(fā)霉物添加至上述所得的雨生紅球藻酶中，攪拌混合均勻，酶解3天，過濾得酶解液，并將酶解液置于3200r/min離心機中離心分離13min，得上清液;最后將上述所得的上清液置于旋轉蒸發(fā)器中，旋轉蒸發(fā)至原液體體積的1/3，并將其置于-2°C下冷凍2h，冷凍后將其放入密閉容器中，對其抽真空進行干燥3h，即得蝦青素。
[0011]將本發(fā)明制備的蝦青素為原料制得護膚品，該護膚品抗氧化和抗紫外線性能好，可防止皮膚老化，預防皮膚癌的發(fā)生，延緩細胞衰老，減少皮膚皺紋和黑色素沉積，讓皮膚更有彈性和潤澤感。
[0012]實例3
按重量百份比計，分別稱取5份硝酸鉀、5份硝酸銨、5份磷酸二氫鉀、2份硫酸鎂、3份氯化鈣、5份碘化鉀、3份七水硫酸鋅、7份七水合硫酸亞鐵、65份蒸餾水，在300r/min下攪拌混合，得混合物;將上述所得混合物置于500W超聲分散器中，進行超聲分散處理6h，隨后向其中加入混合物質(zhì)量7%2，4-二氯苯氧乙酸、混合物質(zhì)量5%萘乙酸和混合物質(zhì)量6%6芐基嘌呤，攪拌使其充分混合均勻，得營養(yǎng)物;然后將上述所得的營養(yǎng)物在壓力為99kPa，溫度為121°C下，滅菌20min，隨后按質(zhì)量比3:2，將無菌水添加至滅菌后的營養(yǎng)物中，制得培養(yǎng)液，再將雨生紅球藻移入培養(yǎng)液中，在28°C下培養(yǎng)10天;待培養(yǎng)完后，將培養(yǎng)后的雨生紅球藻置于陰暗潮濕處，放置9天，每隔Sh依次用40mL乙酸乙酯和35mL油酸將雨生紅球藻淋洗一次，使其自然發(fā)霉，待其霉菌長至15cm時，停止淋洗，得發(fā)霉物;稱取1/2上述所得的發(fā)霉物，放入萃取機中，同時向萃取機中加入發(fā)霉物質(zhì)量40%醋酸丁酯，逆流萃取6h，得丁酯萃取液，向其中加入12mL枸櫞酸-磷酸氫二鈉緩沖液，浸泡30min，再向其中加入40mL醋酸丁酯，逆流萃取3h，得雨生紅球藻酶;按質(zhì)量比3:2，將剩余1/2發(fā)霉物添加至上述所得的雨生紅球藻酶中，攪拌混合均勻，酶解3天，過濾得酶解液，并將酶解液置于3200r/min離心機中離心分離15min，得上清液;最后將上述所得的上清液置于旋轉蒸發(fā)器中，旋轉蒸發(fā)至原液體體積的1/3，并將其置于1°C下冷凍2h，冷凍后將其放入密閉容器中，對其抽真空進行干燥3h，即得蝦青素。
[0013]將本發(fā)明制備的蝦青素為原料制得護膚品，該護膚品抗氧化和抗紫外線性能好，可防止皮膚老化，預防皮膚癌的發(fā)生，延緩細胞衰老，減少皮膚皺紋和黑色素沉積，讓皮膚更有彈性和潤澤感。
【主權項】
1.一種蝦青素的提取方法，其特征在于具體提取步驟為: (1)按重量百份比計，分別稱取5?10份硝酸鉀、5?10份硝酸銨、5?10份磷酸二氫鉀、2?3份硫酸鎂、3?5份氯化鈣、5?8份碘化鉀、3?5份七水硫酸鋅、7?14份七水合硫酸亞鐵、35?65份蒸饋水，在300r/min下攪拌混合，得混合物； (2)將上述所得混合物置于300?500W超聲分散器中，進行超聲分散處理4?6h，隨后向其中加入混合物質(zhì)量5?7%2，4-二氯苯氧乙酸、混合物質(zhì)量3?5%萘乙酸和混合物質(zhì)量4?6%6芐基嘌呤，攪拌使其充分混合均勻，得營養(yǎng)物； (3)將上述所得的營養(yǎng)物在壓力為97?99kPa，溫度為120?121°C下，滅菌18?20min，隨后按質(zhì)量比3:2，將無菌水添加至滅菌后的營養(yǎng)物中，制得培養(yǎng)液，再將雨生紅球藻移入培養(yǎng)液中，在25?28 °C下培養(yǎng)8?10天； (4)待培養(yǎng)完后，將培養(yǎng)后的雨生紅球藻置于陰暗潮濕處，放置7?9天，每隔6?8h依次用30?40mL乙酸乙酯和25?35mL油酸將雨生紅球藻淋洗一次，使其自然發(fā)霉，待其霉菌長至1?15cm時，停止淋洗，得發(fā)霉物； (5)稱取1/2上述所得的發(fā)霉物，放入萃取機中，同時向萃取機中加入發(fā)霉物質(zhì)量35?40%醋酸丁酯，逆流萃取4?6h，得丁酯萃取液，向其中加入10?12mL枸櫞酸-磷酸氫二鈉緩沖液，浸泡20?30min，再向其中加入30?40mL醋酸丁酯，逆流萃取2?3h，得雨生紅球藻酶； (6)按質(zhì)量比3:2，將剩余1/2發(fā)霉物添加至上述所得的雨生紅球藻酶中，攪拌混合均勾，酶解2?3天，過濾得酶解液，并將酶解液置于3200r/min離心機中離心分離10?15min，得上清液； (7)將上述所得的上清液置于旋轉蒸發(fā)器中，旋轉蒸發(fā)至原液體體積的1/3，并將其置于-5?1°C下冷凍I?2h，冷凍后將其放入密閉容器中，對其抽真空進行干燥2?3h，即得蝦青素。
【文檔編號】C12P23/00GK105838769SQ201610242639
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年4月19日
【發(fā)明人】汪巍, 盛海豐
【申請人】常州市藍勖化工有限公司