一種具有抗腫瘤活性的二芳基硫脲化合物及其制備方法和應用
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種具有抗腫瘤活性的二芳基硫脲化合物及其制備方法和應用，該化合物的結構式為其中R1、R2為鹵素基團，或者R1、R2共同形成Ar為吡啶、吲唑或喹唑啉的含氮雜環(huán)。該化合物對VEGFR?2激酶有很好的抑制活性，能夠通過抑制VEGFR?2激酶的活性，阻斷其誘導的信號通路，抑制腫瘤細胞的增生和遷移，從而可應用于抗腫瘤藥物的制備。且該化合物的制備方法具有原料易得，反應條件溫和，反應過程操作簡單，所用試劑便宜的優(yōu)點。
【專利說明】
-種具有抗腫瘤活性的二芳基硫服化合物及其制備方法和 應用
技術領域
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術領域，設及一種抗腫瘤的化合物，特別設及一種具有抗 腫瘤活性的二芳基硫脈化合物及其制備方法和應用。
【背景技術】
[0002] 惡性腫瘤作為全球較大的公共衛(wèi)生問題之一，極大地危害人類的健康，并將成為 新世紀人類的第一殺手。惡性腫瘤已不再只是發(fā)達工業(yè)國家的嚴重疾病，發(fā)展中國家面臨 著更大的疾病負擔?；瘜W藥物治療作為治療腫瘤的重要手段之一，在近=十年已經有了巨 大的發(fā)展和進步，得到了一大批具有不同作用機制的臨床抗腫瘤藥物。但是抗腫瘤藥也存 在許多不良反應，比如脫發(fā)，嘔吐，產生骨髓抑制，快速產生耐藥性等等，運些都導致化學藥 物無法達到預期的治療效果。因此新的抗腫瘤藥物的研究與開發(fā)是目前藥學領域的熱點和 難點問題之一。

【發(fā)明內容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物及其制備方法 和應用，該化合物在體外體現出很好的抗腫瘤活性，能夠應用于抗腫瘤藥物的制備。
[0004] 為達到上述目的，本發(fā)明采用W下技術方案：
[0005] 一釉且有坑腫瘤活忡的^靑基硫脈化合物，其化學結構式如下：
[0006]
[0007]其中，Ri、R2為面素基團，或者Ri、R2共同形/
為化晚、嗎階或哇挫嘟的含氮 雜環(huán)。
[000引所述的面素基團為氣原子、氯原子、漠原子、=氣甲基或=氣甲氧基。
[0009] 所述的Ar另
[0010] 所述的具有抗腫瘤巧性的二芳基硫脈化合物的制備方法，包括W下步驟：
[0011 ] 1) 3-化晚棚酸與對漠苯胺通過Suzuki反應得到4-化晚-3-基苯胺；
[0012]或者先由5-漠-2-氣苯甲醒和碳酸脈反應得到7-漠哇挫嘟-2-胺，然后由7-漠哇挫 嘟-2-胺與對氨基苯棚酸鹽酸鹽通過Suz址i反應得到7-(4'-氨基聯苯-4-基)哇挫嘟-2-胺； [001引或者先由2-氣-6-艦苯甲臘和水合阱反應得到4-艦-IH-嗎階-3-胺，然后由4-艦- IH-嗎I挫-3-胺與對氨基苯棚酸鹽酸鹽通過Suzuki反應得到4-(4-氨基苯基）-lH-日引挫-3- 胺；
[0014] 2)含有雙取代基的苯胺與二硫化碳反應得到苯胺基二硫代甲酸，苯胺基二硫代甲 酸與固體光氣反應得到異硫氯酸苯醋；
[001引 3)4-郵晚-3-基苯胺、7-(4'-氨基聯苯-4-基）哇挫嘟-2-胺或4-(4-氨基苯基）-lH- 嗎I挫-3-胺與異硫氯酸苯醋反應得到具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物。
[0016]所述步驟1)的具體操作為：將3-化晚棚酸、對漠苯胺、無水碳酸鐘和催化劑d (PPh3)4溶于1,4-二氧六環(huán)和水的混合溶劑中，氮氣保護下反應，反應結束后冷卻至室溫，對 反應液進行抽濾，將濾液旋干得到粗品，用層析柱分離粗品，得到4-化晚-3-基苯胺；
[0017]或者先將5-漠-2-氣苯甲醒和碳酸脈溶于N，N-二甲基乙酷胺溶液中，回流反應，反 應結束后冷卻至室溫，向反應液中加入水至固體析出，然后抽濾，濾餅即為7-漠哇挫嘟-2- 胺;然后將7-漠哇挫嘟-2-胺、對氨基苯棚酸鹽酸鹽、無水碳酸鋼和催化劑PcKP化3)4溶于1， 4-二氧六環(huán)和水的混合溶液中，氮氣保護下反應，反應結束后冷卻至室溫，對反應液進行抽 濾，將濾液旋干得到粗品，用層析柱分離粗品，得到7-(4-氨基苯基)哇挫嘟-2-胺；
[001引或者先將2-氣-6-艦苯甲臘溶于無水乙醇中，加入水合阱及化肥化，回流反應，反 應結束后冷卻至室溫，向反應液中加入水至固體析出，然后攬拌、抽濾，濾餅即為4-艦-IH- 嗎I挫-3-胺；然后將4-艦-IH-嗎I挫-3-胺、對氨基苯棚酸鹽酸鹽、無水碳酸鋼、催化劑Pd (PPh3)4溶于1,4-二氧六環(huán)和水的混合溶液中，氮氣保護下反應，反應結束后冷卻至室溫，對 反應液進行抽濾，將濾液旋干得到粗品，用層析柱分離粗品，得到4-(4-氨基苯基)-lH-嗎I 挫-3-胺。
[0019] 所述步驟2)的具體操作為:先將含有雙取代基的苯胺和=乙締二胺溶于甲苯溶液 中，向其中滴加二硫化碳，室溫下攬拌反應，反應結束后，對反應液進行抽濾，濾餅即為苯胺 基二硫代甲酸;然后用無水二氯甲燒將苯胺基二硫代甲酸溶解，在冰浴條件下，向其中滴加 固體光氣的二氯甲燒溶液，室溫下攬拌反應，反應結束后，反應液經洗涂、干燥后減壓蒸去 溶劑，得粗品，用層析柱分離粗品，得到異硫氯酸苯醋。
[0020] 所述步驟3)的具體操作為：用無水二氯甲燒將4-化晚-3-基苯胺、7-(4'-氨基聯 苯-4-基)哇挫嘟-2-胺或4-(4-氨基苯基)-lH-嗎I挫-3-胺溶解，在冰浴條件下，向其中滴加 異硫氯酸苯醋的二氯甲燒溶液，攬拌反應，反應結束后，減壓蒸去溶劑，得到具有抗腫瘤活 性的二芳基硫脈化合物。
[0021] 所述的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物在制備抑制VEGFR-2激酶活性的藥物 中的應用。
[0022] 所述的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物在制備WVEGFR-2激酶為祀點的抗腫 瘤藥物中的應用。
[0023] 與現有技術相比，本發(fā)明具有W下有益效果：
[0024] 本發(fā)明提供的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物，是一種新型的具有抗腫瘤活 性的化合物，其對VEGFR-2激酶有很好的抑制活性，可用于抗腫瘤藥物的制備。具體的，本發(fā) 明提供的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物，能夠抑制VEGFR-2激酶的活性。而血管生成 與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和遷移都有密切關系，抑制新生血管的形成可W有效的抑制腫瘤的生 長和遷移，許多生長因子調控新生血管生成，其中VEGFR-2是已知的最強的正調控因子。因 此本發(fā)明提供的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物通過抑制VEGFR-2激酶的活性，阻斷 其誘導的信號通路，抑制腫瘤細胞的增生和遷移，從而可應用于抗腫瘤藥物的制備，尤其是 WVEGFR-2激酶為祀點的抗腫瘤藥物W及抑制VEGFR-2激酶活性的藥物。
[0025] 本發(fā)明提供的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物的制備方法，先分別制備4-化 晚-3-基苯胺、7- (4 氨基聯苯-4-基)哇挫嘟-2-胺或4- (4-氨基苯基)-IH-嗎I挫-3-胺，然后 通過含有雙取代基的苯胺與二硫化碳反應得到苯胺基二硫代甲酸，再與固體光氣反應得到 異硫氯酸苯醋，將苯胺上的取代基引入到異硫氯酸苯醋的苯環(huán)上，最后通過異硫氯酸苯醋 與4-化晚-3-基苯胺、7-(4'-氨基聯苯-4-基）哇挫嘟-2-胺或4-(4-氨基苯基)-lH-嗎I挫-3- 胺反應，得到具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物，該方法具有原料易得，反應條件溫和， 反應過程操作簡單，所用試劑便宜的優(yōu)點。
【附圖說明】
[0026] 圖1為本發(fā)明提供的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物的合成路線圖；
[0027] 其中，化合物1為3-化晚棚酸，化合物2為對漠苯胺，化合物3為4-化晚-3-基苯胺， 化合物4為5-漠-2-氣苯甲醒，化合物為5為7-漠哇挫嘟-2-胺，化合物6為2-氣-6-艦苯甲臘， 化合物7為4-艦-IH-嗎I挫-3-胺，化合物8為對氨基苯棚酸鹽酸鹽，化合物9為7-(4'-氨基聯 苯-4-基)哇挫嘟-2-胺，化合物10為4-(4-氨基苯基)-lH-嗎I挫-3-胺，化合物11為含有雙取 代基的苯胺，化合物12為苯胺基二硫代甲酸，化合物13為異硫氯酸苯醋，化合物B1-B10、C4- C7和Dl-DlO為具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物。
[00%]圖中標注的具體為：
[0029] a:dioxane,Pd(PPh3)4 ,K2CO3,100°C ;b:guanidine carbonate,DMA,140°C ;C: EtOH，化HC03，N出畑2，出0; d: Pd(PPh3)4，Na2C〇3，出0，dioxane ; e : DCM，rt; f: Dabco，CS2， toluene;g:BTC,DCM。
【具體實施方式】
[0030] 下面結合附圖和具體的實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明，所述是對本發(fā)明的 解釋而不是限定。
[0031] 本發(fā)明提供了一種具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物，該二芳基硫脈化合物在 體外具有抗腫瘤活性，可應用于抗腫瘤藥物的制備。
[0032] 本發(fā)明提供的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物的化學結構式具體如下：
[0033
[0034」 比H化、。I巧圭H王Hfl、日勺含氮雜環(huán)，扣為；氣甲基、S氣甲氧基或面素，R2 為=氣甲基、=氣甲氧基、面素或烷氧基，通過0原子連接于酷胺基團的間位和對位。
[0035] 下面結合圖1中所示的合成路線和具體的合成實施例來詳細說明本發(fā)明提供的具 有抗腫瘤活性的候選藥物二芳基硫脈化合物的制備和活性篩選方法。
[0036] 實施例1
[0037] 該具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物的結構式中，Ar為化晚，Ri、R2分別為=氣 甲基和漠，通過W下步驟制備(參見圖1):
[0038] 1)由3-化晚棚酸(化合物1)和對漠苯胺(化合物2)制備4-化晚-3-基苯胺(化合物 3)
[0039] 將 4g(32.5mmol)3-化晚棚酸、5g(29.3mmol)對漠苯胺、13.5g(97.5mmol)無水碳酸 鐘和3.8g(3.25mmol)催化劑Pd(P化3)4溶于90mL 1,4-二氧六環(huán)和30mL水的混合溶劑中，氮 氣保護下于l〇〇°C下反應過夜，反應結束后冷卻至室溫，將反應液抽濾，用1,4-二氧六環(huán)洗 涂濾餅，收集濾液，旋干得殘留物，殘留物經過層析柱分離(洗脫溶劑為石油酸:乙酸乙醋= 3:1，體積比），得到4-化晚-3-基苯胺2. Sg，產率約40% ;
[0040] 2)由5-漠-3-S氣甲基苯胺(化合物11)制備[3-漠-5-(S氣甲基)苯基]二硫代酸 (化合物12)
[0041 ]將 2.5g(10.4mmol)5-漠-3-S 氣甲基苯胺和 1.4g(12.5mmol)DABC(S 乙締二胺)溶 于40mL甲苯溶液中，再慢慢滴加1.9mL二硫化碳，室溫下攬拌反應化，反應結束后，將反應液 抽濾，濾餅即為[3-漠-5-(S氣甲基)苯基]二硫代酸1.2g，產率約為40%;
[0042] 3)由[3-漠-5-(S氣甲基)苯基]二硫代酸(化合物12)制備1-漠-3-異硫氯酸根合- 5-(=氣甲基)苯(化合物13)
[0043] 用無水二氯甲燒將0.8g(2.5mmol)[3-漠-5-(S氣甲基)苯基]二硫代酸溶解，在冰 浴條件下，將〇.88g(3mmol)BTC(固體光氣）的二氯甲燒溶液滴加至上述溶液中，滴加完畢 后，室溫下攬拌反應化，反應結束后，將反應液依次用飽和碳酸氨鋼溶液和飽和食鹽水洗 涂，無水硫酸鋼干燥，然后旋干得到殘留物，用層析柱分離殘留物，得到油狀的1-漠-3-異硫 氯酸根合-5-(=氣甲基)苯0.5g，產率30% ;
[0044] 4)由4-化晚-3-基苯胺(化合物3)和1 -漠-3-異硫氯酸根合-5- (S氣甲基)苯(化合 物13)反應得到具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物
[0045] 用無水二氯甲燒將0.48g(2.84mmo 1) 4-化晚-3-基苯胺溶解，在冰浴條件下，將 0.8g(2.84mmol)l-漠-3-異硫氯酸根合-5-(=氣甲基)苯的二氯甲燒溶液滴加到上述溶液 中，冰浴中攬拌反應化，然后室溫下反應1她，反應結束后，將=分之二的反應液減壓旋除， 即有白色固體析出，即為具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物〇.4g，產率約為50%。
[0046] 實施例1制得的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物的結構如下：
[0047]
[004引理化性質:mp:197~199°C
[0049]氨譜核磁共振數據為:1h NMR(400MHz，DMS0)S9.28(s，lH)，9.13(s，lH)，8.89(d，J = 2.0Hz，lH)，8.54(m，lH)，8.06(m，lH)，7.98(s，lH)，7.90(s，lH)，7.70(d，J = 8.7Hz，2H), 7.62(d J = 8.7Hz,2H),7.54(s,lH),7.47(m,lH).
[00加]實施例2
[0051 ]該具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物的結構式中，Ar為化晚，Ri、化為氯：
[0052] 1)由3-化晚棚酸(化合物1)和對漠苯胺(化合物2)制備4-化晚-3-基苯胺(化合物 3)
[0053] 將 4g(32.5mmol)3-化晚棚酸、5g(29.3mmol)對漠苯胺、13.5g(97.5mmol)無水碳酸 鐘和3.8g(3.25mmol)催化劑Pd(P化3)4溶于90mL 1,4-二氧六環(huán)和30mL水的混合溶劑中，氮 氣保護下于100°c下反應過夜，反應結束后冷卻至室溫，將反應液抽濾，用I，4-二氧六環(huán)洗 涂濾餅，收集濾液，旋干得殘留物，殘留物經過層析柱分離(洗脫溶劑為石油酸:乙酸乙醋= 3:1，體積比），得到4-化晚-3-基苯胺2. Sg，產率約40% ;
[0054] 2)由3，4-二氯苯胺(化合物11)制備[3，4-二氯苯基]二硫代酸(化合物12)
[0055] 將8邑(49.4臟〇1)3,4-二氯苯胺和6.64邑（59111111〇1)046(：(^乙締二胺）溶于40血甲苯 溶液中，再慢慢滴加15mL二硫化碳，室溫下攬拌反應化，反應結束后，將反應液抽濾，濾餅即 為[3,4-二氯苯基]二硫代酸4g，產率約為30% ;
[0056] 3)由[3,4-二氯苯基]二硫代酸(化合物12)制備1,2-二氯-4-異硫氯酸(化合物13)
[0057] 用無水二氯甲燒將3g(12.6mmol)[3,4-二氯苯基]二硫代酸溶解，在冰浴條件下， 將4.4g(15mmol)BTC(固體光氣）的二氯甲燒溶液滴加至上述溶液中，滴加完畢后，室溫下攬 拌反應化，反應結束后，將反應液依次用飽和碳酸氨鋼溶液和飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼 干燥，然后旋干得到殘留物，用層析柱分離殘留物，得到油狀的1，2-二氯-4-異硫氯酸0. Sg， 產率20%;
[0058] 4)由4-化晚-3-基苯胺(化合物3)和1,2-二氯-4-異硫氯酸(化合物13)反應得到具 有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物
[0059] 用無水二氯甲燒將0.3g( 1.76mmol )4-化晚-3-基苯胺溶解，在冰浴條件下，將 0.33g(1.6mmol)l，2-二氯-4-異硫氯酸的二氯甲燒溶液滴加到上述溶液中，冰浴中攬拌反 應化，然后室溫下反應18h，反應結束后，將S分之二的反應液減壓旋除，即有白色固體析 出，即為具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物0.2g，產率約為40%。
[0060] 實施例2制得的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物的結構如下：
[0061]
[0062] 理化性質:mp:173 ~175°C
[0063] 氨譜核磁共振數據為：1h 醒R(400MHz，DMS0)Sl0.21(s，lH)，10.10(s，lH)，8.91 (d，J=1.9Hz，lH)，8.57(m，lH)，8.12-8.07(m，lH)，7.91(d，J = 2.4Hz，lH)，7.74(d，J = 8.6Hz，2H)，7.62(d，J = 4.1Hz，2H)，7.60(d，J = 4.2Hz，lH)，7.52-7.49(m，lH)，7.47(m，lH).
[0064] 實施例3
[0065] 該具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物的結構式中，Ar為哇挫嘟，Ri、R2分別為= 氣甲氧基和漠，通過W下步驟制備(參見圖1):
[0066] 1)由5-漠-2-氣苯甲醒(化合物4)制備7-漠哇挫嘟-2-胺(化合物5)
[0067] 將1 Og (49.2mmo 1) 2-氣-5-漠苯甲醒和13.3g(74mmo 1)碳酸脈溶于N, N-二甲基乙酷 胺溶液中，140°C下回流反應化，反應結束后，待反應液冷卻至室溫，向其中加入120mL水，有 大量固體析出，抽濾，所得的濾餅即為7-漠哇挫嘟-2-胺5g，產率60% ;
[0068] 2)由7-漠哇挫嘟-2-胺(化合物5)和對氨基苯棚酸鹽酸鹽通過Suzuki偶聯反應制 備7-( 4-氨基苯基)哇挫嘟-2-胺(化合物9)
[0069] 將2旨（8.9111111〇1)7-漠哇挫嘟-2-胺、1.54旨（8.9111111〇1)對氨基苯棚酸鹽酸鹽、2.8邑 (26.7mmol)無水碳酸鋼和1.03g(0.89mmol)催化劑Pd(PF*h3)4溶于120mL 1,4-二氧六環(huán)和 40mL水的混合溶劑中，氮氣保護下于100°C反應過夜，反應結束后冷卻至室溫，對反應液進 行抽濾，用1，4-二氧六環(huán)洗涂濾餅，收集濾液，旋干得殘留物，殘留物經過層析柱分離(洗脫 溶劑為石油酸：乙酸乙醋= 3:1，體積比），得到7-(4-氨基苯基）哇挫嘟-2-胺0.8g，產率約 28% ；
[0070] 3)由4-漠-2-S氣甲氧基苯胺(化合物11)制備[4-漠-2-S氣甲氧基苯基]二硫代 酸(化合物12)
[0071] 將 8g(31mmol)4-漠-2-S 氣甲氧基苯胺和 4.2g(37.5mmol)DABC(S 乙締二胺)溶于 40mL甲苯溶液中，再慢慢滴加7mL二硫化碳，室溫下攬拌反應化，反應結束后，對反應液進行 抽濾，濾餅即為[4-漠-2-;氣甲氧基苯基]二硫代酸3g，產率約為28%;
[0072] 4)由[4-漠-2-S氣甲氧基苯基]二硫代酸(化合物12)制備4-漠-1-異硫氯基-2- (=氣甲基)苯(化合物13)
[0073] 用無水二氯甲燒將2g(6mmol)[4-漠-2-S氣甲氧基苯基]二硫代酸溶解，在冰浴條 件下，將2.1g(7.2mmol)BTC的二氯甲燒溶液滴加至上述溶液中，滴加完畢后，室溫攬拌反應 2h，反應結束后，將反應液依次用飽和碳酸氨鋼溶液和飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼干燥， 然后旋干得到殘留物，殘留物用層析柱分離，得到油狀的4-漠-1-異硫氯基-2-(S氣甲基） 苯1.Og,產率25%;
[0074] 5)由7-(4 氨基聯苯-4-基)哇挫嘟-2-胺(化合物9)和4-漠-1 -異硫氯基-2-(S氣 甲基)苯(化合物13)反應得到具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物
[0075] 用無水二氯甲燒將0.2g(0.85mmol)7-(4 ' -氨基聯苯-4-基)哇挫嘟-2-胺溶解，在 冰浴條件下，將〇.23g(0.77mmol)4-漠-1-異硫氯基-2-(S氣甲基)苯的二氯甲燒溶液滴加 到上述溶液中，冰浴中攬拌反應化，然后室溫下反應1她，反應結束后，將反應液依次用飽和 碳酸氨鋼溶液和飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼干燥，然后旋干得到殘留物，殘留物用層析柱 分離，得到具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物0.12g，產率30% ;
[0076] 實施例3制得的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物的結構如下：
[0077]
[0078] 巧'1 心工 …y.丄 3 ~ 丄 34 L
[00巧]氨譜核磁共振數據為:1h NMR(400MHz，DMS0)Sl0.24(s，lH)，9.62(s，lH)，9.18(s, lH)，8.12(s，lH)，8.06(d，J = 8.Wz，lH)，7.75(t，J = 6.0Hz，3H)，7.70(s，lH)，7.63(d，J = 8.5Hz，3H)，7.51(d，J = 8.8Hz，lH)，6.98(s，2H).
[0080] 實施例4
[0081] 該具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物的結構式中，Ar為哇挫嘟，Ri、化為氯：
[0082] 1)由5-漠-2-氣苯甲醒(化合物4)制備7-漠哇挫嘟-2-胺(化合物5)
[0083] 將1 Og (49.2mmo 1) 2-氣-5-漠苯甲醒和13.3g(74mmo 1)碳酸脈溶于N, N-二甲基乙酷 胺溶液中，140°C下回流反應化，反應結束后，待反應液冷卻至室溫，向其中加入120mL水，有 大量固體析出，抽濾，所得的濾餅即為7-漠哇挫嘟-2-胺5g，產率60% ;
[0084] 2)由7-漠哇挫嘟-2-胺(化合物5)和對氨基苯棚酸鹽酸鹽通過Suzuki偶聯反應制 備7-( 4-氨基苯基)哇挫嘟-2-胺(化合物9)
[00化]將2肖（8.9111111〇1)7-漠哇挫嘟-2-胺、1.54肖（8.9111111〇1)對氨基苯棚酸鹽酸鹽、2.8邑 (26.7mmol)無水碳酸鋼和1.03g(0.89mmol)催化劑Pd(PI%3)4溶于120mL 1,4-二氧六環(huán)和 40mL水的混合溶劑中，氮氣保護下于100°C反應過夜，反應結束后冷卻至室溫，對反應液進 行抽濾，用1，4-二氧六環(huán)洗涂濾餅，收集濾液，旋干得殘留物，殘留物經過層析柱分離(洗脫 溶劑為石油酸：乙酸乙醋= 3:1，體積比），得到7-(4-氨基苯基）哇挫嘟-2-胺0.8g，產率約 28% ；
[0086] 3)由3，4-二氯苯胺(化合物11)制備[3，4-二氯苯基]二硫代酸(化合物12)
[0087] 將8邑(49.4臟〇1)3,4-二氯苯胺和6.64邑（59111111〇1)046(：(^乙締二胺）溶于40血甲苯 溶液中，再慢慢滴加15mL二硫化碳，室溫下攬拌反應化，反應結束后，將反應液抽濾，濾餅即 為[3,4-二氯苯基]二硫代酸4g，產率約為30% ;
[0088] 4)由[3,4-二氯苯基]二硫代酸(化合物12)制備1,2-二氯-4-異硫氯酸(化合物13)
[0089] 用無水二氯甲燒將3g(12.6mmol)[3,4-二氯苯基]二硫代酸溶解，在冰浴條件下， 將4.4g(15mmol)BTC(固體光氣）的二氯甲燒溶液滴加至上述溶液中，滴加完畢后，室溫下攬 拌反應化，反應結束后，將反應液依次用飽和碳酸氨鋼溶液和飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼 干燥，然后旋干得到殘留物，用層析柱分離殘留物，得到油狀的1，2-二氯-4-異硫氯酸0. Sg， 產率20%;
[0090] 5)由7-(4 氨基聯苯-4-基)哇挫嘟-2-胺(化合物9)和1，2-二氯-4-異硫氯酸(化 合物13)反應得到具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物
[0091] 用無水二氯甲燒將0.2g(0.85mmol)7-(4 ' -氨基聯苯-4-基)哇挫嘟-2-胺溶解，在 冰浴條件下，將0.16旨(0.77111111〇1)1，2-二氯-4-異硫氯酸的二氯甲燒溶液滴加到上述溶液 中，冰浴中攬拌反應化，然后室溫下反應1她，反應結束后，將反應液依次用飽和碳酸氨鋼溶 液和飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼干燥，然后旋干得到殘留物，殘留物用層析柱分離，得到 具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物0.1 g,產率30% ;
[0092] 連脯例4制得的且有杭腫賴活忡的二巧其硫脈化合物的結構如下：
[0093
[0094」 理化性質：mp:200~20rC
[00巧]氨譜核磁共振數據為：1h 醒R(400MHz，DMS0)Sl0.62(s，lH)，9.44(d，J = 6.4Hz， lH)，8.30(s，lH)，8.23(d，J=8.5Hz，2H)，8.03(s，lH)，7.75(s，lH)，7.73-7.68(m，2H)，7.64 (d J = 8.7Hz,2H),7.59(s,lH),7.55(s,lH).
[0096] 實施例5
[0097] 該化合物的結構式中，Ar為含有嗎I挫的含氮雜環(huán)，Ri、R2分別是S氣甲氧基和漠，通 過W下步驟制備：
[0098] 1)由2-氣-6-艦苯甲臘(化合物6)制備4-艦-IH-日引挫-3-胺(化合物7)
[0099] 將IOg 2-氣-6-艦苯甲臘溶于70mL無水乙醇中，加入12.5mL水合阱和5.2g 化肥化，90°C回流反應化，反應結束后，待反應液冷卻至室溫，加入120mL水，有大量固體析 出，室溫下攬拌化，抽濾，所得濾餅即為4-艦-IH-日引挫-3-胺Sg，產率77% ;
[0100] 2)由4-艦-IH-嗎I挫-3-胺(化合物7)和對氨基苯棚酸鹽酸鹽通過Suzuki偶聯反應 制備4-( 4-氨基苯基)-IH-嗎I挫-3-胺(化合物10)
[0101] 將7.5g (28.9mmo 1) 4-艦-IH-嗎階-3-胺、5g (28.9mmo 1)對氨基苯棚酸鹽酸鹽、9.2g (86.7mmol)無水碳酸鋼和3.3g(2.89mmol)催化劑Pd(PPh3)4溶于150mL 1,4-二氧六環(huán)和 50mL水的混合溶液中，氮氣保護下于100°C反應過夜，反應結束后冷卻至室溫，抽濾，用1,4- 二氧六環(huán)洗涂濾餅，收集濾液，旋干得殘留物，殘留物經過層析柱分離，得到4-(4-氨基苯 基)-IH-嗎階-3-胺3.2g，產率約45% ;
[0102] 3)由4-漠-2-S氣甲氧基苯胺(化合物11)制備[4-漠-2-S氣甲氧基苯基]二硫代 酸(化合物12)
[0103] 將 8g(31mmol)4-漠-2-S 氣甲氧基苯胺和 4.2g(37.5mmol)DABC(S 乙締二胺)溶于 40mL甲苯溶液中，再慢慢滴加7mL二硫化碳，室溫下攬拌反應化，反應結束后，抽濾，濾餅即 為[4-漠-2-=氣甲氧基苯基]二硫代酸3g，產率約為28% ;
[0104] 4)由[4-漠-2-S氣甲氧基苯基]二硫代酸(化合物12)制備4-漠-1-異硫氯基-2- (=氣甲基)苯(化合物13)
[0105] 用無水二氯甲燒將2g(6mmol)[4-漠-2-S氣甲氧基苯基]二硫代酸溶解，在冰浴條 件下，將2.1g(7.2mmol)BTC的二氯甲燒溶液滴加至上述溶液中，滴加完畢后，室溫下攬拌反 應化。反應結束后，將反應液依次用飽和碳酸氨鋼溶液和飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼干 燥，然后旋干得到殘留物，用層析柱分離殘留物，得到油狀的4-漠-1-異硫氯基-2-(S氣甲 基)苯1.Og,產率25%;
[0106] 5)由4-(4-氨基苯基)-lH-嗎I挫-3-胺(化合物10)和4-漠-1-異硫氯基-2-(S氣甲 基)苯(化合物13)反應得到具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物
[0107] 用無水二氯甲燒將0.3旨（1.34111111〇1)4-(4-氨基苯基)-1護嗎|挫-3-胺溶解，在冰浴 條件下，將0.4g(1.34mmol)4-漠-1-異硫氯基-2-(S氣甲基)苯的二氯甲燒溶液滴加到上述 溶液中，冰浴中攬拌反應化，然后室溫下反應1她。反應結束后，將反應液依次用飽和碳酸氨 鋼溶液和飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼干燥，然后旋干得到殘留物，用層析柱分離殘留物， 得到具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物0.15g，產率30%。
[0108] 實施例5制得的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物的結構如下：
[0109]
[0110] 理化性質:~112°C
[0111] 氨譜核磁共振數據為：Ih NMR(400MHz，DMSO)S11.79(S，1H)，10.34(S，1H)，9.65 (s，lH)，8.03(d，J = 2.4Hz，lH)，7.64(d J = 8.4Hz，2H)，7.56(m，lH)，7.48(d，J = 8.5Hz， 2H)，7.42(m，lH)，7.30(d，J=2.0Hz，lH)，7.29(s，lH)，6.82(m，lH)，4.40(s，2H).
[0112] 下面對本發(fā)明制得的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物進行VEGFR-2激酶的抑 制活性篩選。
[0113] 激酶VEGFR-2和底物Abltide購自Signal-畑em公司，選用Promega公司的ADP- GlobTM Kinase Assays檢測試劑盒檢測本發(fā)明提供的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合 物的抑酶活性，操作方法按照試劑盒說明進行。將ATP(1 OmM)用buffer(2 X )(IYiS SOmM， MgCb 20mM，BSA0.2mg/mL，DTT 2mM)稀釋40倍配制成ATP(250yM)的buffer(2X )溶液；將 250咖的ATP溶液和Abltide溶液體積1:1混合配制成ATP(125iiM)-Abltide(0. SiigAU)的混 合溶液備用；VEGFR-2激酶溶液用bufferU X Khis 40mM,MgCb 10mM，BSA O.lmg/mL,DTT lmM)稀釋66倍配制成VEGFR-2( I. SngAil)的buffer( I X )溶液備用;將目標化合物和陽性對 照藥（Sorafinib)用bufferU X )分別配制成6 X l〇-5mol/L，6X l〇-6mol/L，6X l〇-7mol/L，6 X l〇-Vol/L，6X l〇-9mol/L，6X l〇-iVol/L濃度梯度的樣品溶液，于384孔板上每孔依次加 入化L ATP-Abltide的混合溶液，1化樣品溶液，2化酶溶液;空白孔加化L緩沖液和化LATP- Abltide的混合溶液;對照孔加化L ATP-Abltide的混合溶液，1化緩沖液，2化酶溶液，加畢， 30°C下解育60min;加入ADP-Glo試劑扣L，在25°C下解育40min;加入Kinase detection試劑 1化L，在25°C下解育30min。采用化rki址Imer多功能酶標儀的化學發(fā)光模塊測定每孔的發(fā) 光值，計算本發(fā)明提供的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物對VEGFR-2的抑制率和IC50。
[0114] 本發(fā)明提供的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物對VEGFR-2激酶的抑制活性結 果如表1所示：
[0115] 表1二芳基硫脈化合物對VEGFR激酶的ICso
[0116]

[011 引
[0119] 由表1可W看出，本發(fā)明制備的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物對VEGFR-2激 酶具有抑制活性，可用于制備抑制VEGFR-2激酶活性的藥物W及制備WVEGFR-2激酶為祀點 的抗腫瘤藥物。
[0120] 上述具有抗腫瘤活性的二芳基硫脈化合物的具體結構如表2所示。
[0121] 表2二芳基硫脈化合物的結構式
[0122]


【主權項】
1. 一種具有抗腫瘤活性的二芳基硫脲化合物，其特征在于，其化學結構式如下：其中，Ri、R2為鹵素基團，或者Ri、R2共同Ar為吡啶、吲唑或喹唑啉的含氮雜環(huán)。2. 如權利要求1所述的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脲化合物，其特征在于，所述的鹵素 基團為氟原子、氯原子、溴原子、三氟甲基或三氟甲氧基。3. 如權利要求1所述的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脲化合物，其特征在于，所述的Ar為4. 權利要求1-3中任意一項所述的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脲化合物的制備方法， 其特征在于，包括以下步驟： 1 )3_吡啶硼酸與對溴苯胺通過Suzuki反應得到4-吡啶-3-基苯胺； 或者先由5-溴-2-氟苯甲醛和碳酸胍反應得到7-溴喹唑啉-2-胺，然后由7-溴喹唑啉-2_胺與對氨基苯硼酸鹽酸鹽通過Suzuki反應得到7-(4'_氨基聯苯-4-基)喹唑啉-2-胺； 或者先由2-氟-6-碘苯甲腈和水合肼反應得到4-碘-1H-吲唑-3-胺，然后由4-碘-1H-吲 唑-3-胺與對氨基苯硼酸鹽酸鹽通過Suzuki反應得到4-(4-氨基苯基)-1Η-吲唑-3-胺； 2) 含有雙取代基的苯胺與二硫化碳反應得到苯胺基二硫代甲酸，苯胺基二硫代甲酸與 固體光氣反應得到異硫氰酸苯酯； 3) 4-吡啶-3-基苯胺、7-(4'_氨基聯苯-4-基）喹唑啉-2-胺或4-(4-氨基苯基)-1Η-吲 唑-3-胺與異硫氰酸苯酯反應得到具有抗腫瘤活性的二芳基硫脲化合物。5. 根據權利要求4所述的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脲化合物的制備方法，其特征在 于:所述步驟1)的具體操作為:將3-吡啶硼酸、對溴苯胺、無水碳酸鉀和催化劑d(PPh 3)4溶于 1，4_二氧六環(huán)和水的混合溶劑中，氮氣保護下反應，反應結束后冷卻至室溫，對反應液進行 抽濾，將濾液旋干得到粗品，用層析柱分離粗品，得到4-吡啶-3-基苯胺； 或者先將5-溴-2-氟苯甲醛和碳酸胍溶于N，N-二甲基乙酰胺溶液中，回流反應，反應結 束后冷卻至室溫，向反應液中加入水至固體析出，然后抽濾，濾餅即為7-溴喹唑啉-2-胺;然 后將7-溴喹唑啉-2-胺、對氨基苯硼酸鹽酸鹽、無水碳酸鈉和催化劑Pd(PPh 3)4溶于1，4_二氧 六環(huán)和水的混合溶液中，氮氣保護下反應，反應結束后冷卻至室溫，對反應液進行抽濾，將 濾液旋干得到粗品，用層析柱分離粗品，得到7-(4-氨基苯基)喹唑啉-2-胺； 或者先將2-氟-6-碘苯甲腈溶于無水乙醇中，加入水合肼及NaHC03，回流反應，反應結束 后冷卻至室溫，向反應液中加入水至固體析出，然后攪拌、抽濾，濾餅即為4-碘-1H-吲唑-3-胺;然后將4-碘-1H-吲唑-3-胺、對氨基苯硼酸鹽酸鹽、無水碳酸鈉、催化劑Pd(PPh 3)4溶于1， 4_二氧六環(huán)和水的混合溶液中，氮氣保護下反應，反應結束后冷卻至室溫，對反應液進行抽 濾，將濾液旋干得到粗品，用層析柱分離粗品，得到4-(4-氨基苯基)-1Η-吲唑-3-胺。6. 根據權利要求4所述的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脲化合物的制備方法，其特征在 于:所述步驟2)的具體操作為:先將含有雙取代基的苯胺和三乙烯二胺溶于甲苯溶液中，向 其中滴加二硫化碳，室溫下攪拌反應，反應結束后，對反應液進行抽濾，濾餅即為苯胺基二 硫代甲酸;然后用無水二氯甲烷將苯胺基二硫代甲酸溶解，在冰浴條件下，向其中滴加固體 光氣的二氯甲烷溶液，室溫下攪拌反應，反應結束后，反應液經洗滌、干燥后減壓蒸去溶劑， 得粗品，用層析柱分離粗品，得到異硫氰酸苯酯。7. 根據權利要求4所述的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脲化合物的制備方法，其特征在 于:所述步驟3)的具體操作為：用無水二氯甲烷將4-吡啶-3-基苯胺、7-(4'_氨基聯苯-4-基)喹唑啉-2-胺或4-(4-氨基苯基)-1H-吲唑-3-胺溶解，在冰浴條件下，向其中滴加異硫氰 酸苯酯的二氯甲烷溶液，攪拌反應，反應結束后，減壓蒸去溶劑，得到具有抗腫瘤活性的二 芳基硫脲化合物。8. 權利要求1-3中任意一項所述的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脲化合物在制備抑制 VEGFR-2激酶活性的藥物中的應用。9. 權利要求1-3中任意一項所述的具有抗腫瘤活性的二芳基硫脲化合物在制備以 VEGFR-2激酶為靶點的抗腫瘤藥物中的應用。
【文檔編號】C07D231/56GK105924385SQ201610280874
【公開日】2016年9月7日
【申請日】2016年4月28日
【發(fā)明人】賀浪沖, 張 杰, 潘曉艷, 王金鳳, 蘇萍, 盧聞, 王嗣岑
【申請人】西安交通大學