專利名稱：一種假虎刺酮的制備方法
一種假虎刺酮的制備方法技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及一種假虎刺酮的制備方法。
背景技術(shù)：
假虎刺酮(Carissone)，CAS號(hào) 473_10_9，mp.78_79 °C，分子式 C15H24O2，分子量236.36，結(jié)構(gòu)式為 CH3 ο I η Γ η CH3CH3
假虎刺酮來(lái)源于夾竹桃科(Apocynaceae)埃及假虎刺Carissa edulis Vahl的根。研究表明，假虎刺酮具有抗真菌作用。在lmg/ml劑量瓊脂培養(yǎng)42天后，對(duì)黑曲霉UA —172 -1和煙曲霉ATCC的抑制率分別為60%和100% 通過(guò)文獻(xiàn)檢索，國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)從埃及假虎刺的根中制備假虎刺酮的方法。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種假虎刺酮的制備方法，工藝簡(jiǎn)單、提取率高，整個(gè)過(guò)程具有安全、無(wú)毒等優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的: (1)取枝花阿克尼茄樹(shù)葉粉碎，加入超臨界萃取釜中，95%-100%乙醇溶液為夾帶劑，通入液態(tài)CO2萃取，解析得萃取物； (2)上述萃取物用甲醇溶解，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物； (3 )上述粗提物采用高速逆流色譜分離，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)成分，冷藏結(jié)晶，得假虎刺酮。
步驟(I)中所述萃取壓力25-35MPa、溫度40-55°C，萃取時(shí)間為50_90min，解析壓力 7.5-9MPa、溫度 32-40 °C。
步驟(I)中所述CO2流量為2.5-5ml/g生藥/min。
步驟(I)中所述夾帶劑用量為總萃取溶劑的12-18%。
步驟(2)中 所述中性氧化鎂粒徑為200-300目。
步驟(2)中所述石油醚-丙酮體積比為23-2:3。
步驟(3)中所述高速逆流色譜的溶劑系統(tǒng)為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水組合，比例為5-7:5-8:6-8:4-7，下相為流動(dòng)相，上相為固定相。
本發(fā)明的積極效果是:1.采用超臨界CO2萃取，高效無(wú)溶劑殘留，對(duì)環(huán)境無(wú)污染； 2.采用柱層析純化，操作簡(jiǎn)單，處理量大； 3.采用高速逆流色譜分離，分離速度快，樣品無(wú)損失，溶劑可以循環(huán)使用，適合連續(xù)制備。
具體實(shí)施方式
下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)施例1: 枝花阿克尼茄樹(shù)葉粉碎，取Ikg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2,設(shè)置萃取壓力25MPa、溫度40°C， 達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為4ml/g生藥/min，95%乙醇溶液為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的15%，動(dòng)態(tài)萃取50min，在壓力7.5MPa、溫度40°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-丙酮23:3、15:3、5:3、2:3混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水按6:8:7:5混合，混合充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜柱，同時(shí)開(kāi)轉(zhuǎn)主機(jī)850rpm,泵入下相做流動(dòng)相,待系統(tǒng)平衡后，流速調(diào)節(jié)為3.5ml/min,同時(shí)用固定相溶解粗提物，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)流分，連續(xù)制備，冷藏流分，得結(jié)晶物，經(jīng)HPLC檢測(cè)，純度98.2%。
實(shí)施例2: 枝花阿克尼茄樹(shù)葉粉碎，取2kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2,設(shè)置萃取壓力35MPa、溫度50°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為5ml/g生藥/min，99%乙醇溶液為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的18%，動(dòng)態(tài)萃取70min，在壓力9MPa、溫度32°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-丙酮21:3、12:3、5:3、2:3混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水按7:5:6:4混合，混合充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜柱，同時(shí)開(kāi)轉(zhuǎn)主機(jī)950rpm,泵入下相做流動(dòng)相，待系統(tǒng)平衡后，流速調(diào)節(jié)為3ml/min,同時(shí)用固定相溶解粗提物，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)流分，連續(xù)制備，冷藏流分，得結(jié)晶物，經(jīng)HPLC檢測(cè)，純度97.1%。
實(shí)施例3: 枝花阿克尼茄樹(shù)葉粉碎，取2kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2,設(shè)置萃取壓力30MPa、溫度55°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為2.5ml/g生藥/min，100%乙醇溶液為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的12%，動(dòng)態(tài)萃取90min，在壓力8MPa、溫度35°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-丙酮18:3、9:3、2:3混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水按5:7:8:7混合，混合充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜柱，同時(shí)開(kāi)轉(zhuǎn)主機(jī)900rpm,泵入下相做流動(dòng)相，待系統(tǒng)平衡后，流速調(diào)節(jié)為3ml/min,同時(shí)用固定相溶解粗提物，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)流分，連續(xù)制備，冷藏流分，得結(jié)晶物，經(jīng)HPLC檢測(cè)，純度97.4%。
權(quán)利要求
1.一種假虎刺酮的制備方法，其特征在于以下步驟: (1)取枝花阿克尼茄樹(shù)葉粉碎，加入超臨界萃取釜中，95%-100%乙醇溶液為夾帶劑，通入液態(tài)CO2萃取，解析得萃取物； (2)上述萃取物用甲醇溶解，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物； (3 )上述粗提物采用高速逆流色譜分離，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)成分，冷藏結(jié)晶，得假虎刺酮。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述假虎刺酮的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述萃取壓力25-35MPa、溫度 40_55°C，萃取時(shí)間為 50_90min，解析壓力 7.5_9MPa、溫度 32_40°C。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述假虎刺酮的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述CO2流量為2.5_5ml/g 生藥 /min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述假虎刺酮的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述夾帶劑用量為總萃取溶劑的12-18%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述假虎刺酮的制備方法，其特征在于步驟(2)中所述中性氧化鎂粒徑為200-300目。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述假虎刺酮的制備方法，其特征在于步驟(2)中所述石油醚-丙酮體積比為23-2:3。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述假虎刺酮的制備方法，其特征在于步驟(3)中所述高速逆流色譜的溶劑系統(tǒng)為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水組合，比例為5-7:5-8:6-8:4-7，下相為流動(dòng)相，上相為固定相?！?br> 全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種假虎刺酮的制備方法。方法步驟如下a.取枝花阿克尼茄樹(shù)葉粉碎，加入超臨界萃取釜中，乙醇為夾帶劑進(jìn)行超臨界CO2萃??；b.萃取物采用中性氧化鎂柱層析進(jìn)行純化，石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物；c.粗提物采用高速逆流色譜分離，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)成分，冷藏結(jié)晶，得假虎刺酮無(wú)色結(jié)晶。采用本發(fā)明制備假虎刺酮，工藝簡(jiǎn)單、效率高，所得產(chǎn)品含量高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07C45/79GK103232335SQ20131019602
公開(kāi)日2013年8月7日 申請(qǐng)日期2013年5月24日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月24日
發(fā)明者蘇劉花, 萬(wàn)冬梅 申請(qǐng)人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司