一種丹參酮ⅱa磺酸鈉脂質(zhì)體及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物制劑學(xué)領(lǐng)域，特別涉及一種載藥脂質(zhì)體。更具體地說，本發(fā)明涉及一種丹參酮II A磺酸鈉脂質(zhì)體及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]丹參酮II A是傳統(tǒng)活血化瘀中藥丹參的主要有效成分。丹參酮II A經(jīng)磺化成鹽形成丹參酮II A磺酸鈉(DS-201)，這是目前臨床用于冠心病、心絞痛、心肌梗塞、腦動脈和視網(wǎng)膜動脈及外周靜脈血栓形成等疾病治療的有效藥物，它具有抗動脈粥樣硬化、縮小心肌梗死面積、顯著增加冠脈血流量，減慢心率，增加心肌收縮力等作用。
[0003]有關(guān)DS-201的研宄已經(jīng)明確了它的舒血管作用與BKca通道激活相關(guān)，研宄還表明了其作用特征，包括其作用的Ca2+的相關(guān)性以及由于對L-型鈣通道的抑制而間接抑制對BKca的激活作用。采用膜片鉗靈敏的測定手段表明，內(nèi)面向外式膜片，20?150 ymol/L的DS-201可以使BIUS性增加5.4?173.2倍。因此，上述研宄表明DS-201主要在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮BK Jt活作用。
[0004]目前主要采用以下兩種方法來促進(jìn)DS-201在細(xì)胞膜離子通道內(nèi)側(cè)激活通道的作用。(I)通過增加胞外給藥濃度，但DS-201對細(xì)胞膜鈣通道有抑制作用，通過增加胞外藥物濃度的辦法只會導(dǎo)致胞內(nèi)Ca2+濃度的降低而抑制激活。(2)研宄表明DS-201的BKca作用與其磺酸鹽基團(tuán)有關(guān)，因此可以通過結(jié)構(gòu)修飾來增加DS-201進(jìn)入胞內(nèi)的量，以此增強(qiáng)BKJt活作用；但是對DS-201進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾會因?qū)撬猁}基團(tuán)的影響，一定程度上改變DS-201對BKea的激活作用，降低其藥效。若要避開藥物的其它作用選擇性獲得該藥在胞內(nèi)側(cè)的激活效應(yīng)，必須設(shè)計DS-201的藥物投遞系統(tǒng)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中所存在的上述不足，提供一種丹參酮II A磺酸鈉脂質(zhì)體。該脂質(zhì)體的主要成分包括丹參酮II A磺酸鈉(DS-201)、磷脂和膽固醇，藥物活性成分DS-201包埋在脂質(zhì)體中，可以避開藥物的其他作用，直接將DS-201原藥遞送到細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)發(fā)揮出明顯激活BKca的作用。
[0006]本發(fā)明的再一目的是提供所述丹參酮II A磺酸鈉脂質(zhì)體的制備方法。
[0007]為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供了以下技術(shù)方案:
[0008]本發(fā)明所述的丹參酮II A磺酸鈉脂質(zhì)體，它的組分主要包括丹參酮II A磺酸鈉、磷脂和膽固醇，各組分的重量份配比為丹參酮II A磺酸鈉0.20?0.35份、磷脂25?40份、膽固醇4?8份。
[0009]在所述丹參酮II A磺酸鈉脂質(zhì)體中，丹參酮II A磺酸鈉為藥物活性成分，磷脂和膽固醇為構(gòu)成脂質(zhì)體膜的基本成分。
[0010]本發(fā)明所述的DS-201脂質(zhì)體屬于大單室脂質(zhì)體，是以磷脂和膽固醇為膜材構(gòu)成單室的雙層脂質(zhì)膜的封閉囊泡，膽固醇分布在脂質(zhì)膜雙分子層的內(nèi)部，DS-201的葡萄糖溶液包裹于雙層脂質(zhì)膜構(gòu)成的囊泡室中。申請人經(jīng)多次實驗發(fā)現(xiàn)，當(dāng)DS-201脂質(zhì)體包括上述重量份配比的組分時，DS-201包裹于脂質(zhì)體室內(nèi)，形成的DS-201脂質(zhì)體是類似生物膜結(jié)構(gòu)的囊泡，對正常細(xì)胞無損害和抑制作用，具有細(xì)胞親和性，吸附于靶細(xì)胞周圍使藥物透過靶細(xì)胞，也可通過融合進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，經(jīng)溶酶體消化釋放藥物，將DS-201原藥遞送到細(xì)胞膜內(nèi)偵撥揮出明顯激活BlU乍用。
[0011]進(jìn)一步優(yōu)選地，所述各組分的重量份配比為丹參酮II A磺酸鈉0.25?0.29份、磷脂30?35份、膽固醇5?7份。
[0012]最佳優(yōu)選地，所述各組分的重量份配比為丹參酮II A磺酸鈉0.29份、磷脂33份、膽固醇6份。
[0013]優(yōu)選地，所述磷脂為大豆磷脂、大豆卵磷脂或卵磷脂。大豆磷脂主要含有卵磷脂(約34.2% )、腦磷脂(約19.7% )、肌醇磷脂(約16.0% )、磷酯酰絲氨酸(約15.8% )、磷脂酸(約3.6% )及其他磷脂(約10.7% )。
[0014]本發(fā)明所述丹參酮II A磺酸鈉脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于，包括如下步驟:
[0015](I)按比例分別稱取丹參酮II A磺酸鈉、磷脂、膽固醇；將磷脂溶解于氯仿中，配制成磷脂的氯仿溶液；將膽固醇溶解于氯仿中，配制成膽固醇的氯仿溶液；將葡萄糖溶解于水中，配制成等滲葡萄糖溶液，然后將丹參酮II A磺酸鈉溶解于等滲葡萄糖溶液中，配制成丹參酮II A磺酸鈉的葡萄糖溶液；
[0016](2)將磷脂的氯仿溶液和膽固醇的氯仿溶液加入到燒瓶中，水浴超聲；然后置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，水浴溫度設(shè)置為20?30°C，除去氯仿，在瓶底形成乳白色薄膜；
[0017](3)將丹參酮II A磺酸鈉的葡萄糖溶液加入到燒瓶中，在搖床上振蕩，得到脂質(zhì)體混懸液；
[0018](4)對步驟(3)得到的脂質(zhì)體混懸液進(jìn)行探頭超聲，形成橙色透明液體；過濾，收集濾液，得到丹參酮II A磺酸鈉脂質(zhì)體。
[0019]其中，葡萄糖等滲溶液的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為5 %，作為水合介質(zhì)。
[0020]優(yōu)選地，所述磷脂的氯仿溶液中磷脂的濃度為9?12mg/ml。大豆磷脂能較快溶于氯仿；但是當(dāng)磷脂的濃度小于9mg/ml，藥物的包封率低；當(dāng)磷脂的濃度大于12mg/ml，藥物的包封率不再上升且形態(tài)不好、穩(wěn)定性差。最佳優(yōu)選地，所述磷脂的氯仿溶液中磷脂的濃度為 10mg/mlo
[0021]優(yōu)選地，所述膽固醇的氯仿溶液中膽固醇的濃度為9?12mg/ml。膽固醇能較快溶于氯仿，但是當(dāng)膽固醇的濃度小于9mg/ml，會導(dǎo)致脂質(zhì)雙層的流動性降低，脂質(zhì)膜的通透性變大，影響脂質(zhì)雙分子層的穩(wěn)定性，從而降低脂質(zhì)體的包封率；當(dāng)膽固醇的濃度大于12mg/ml，膽固醇會競爭性地結(jié)合磷脂的親脂性區(qū)域，導(dǎo)致脂質(zhì)體的載藥率降低，并導(dǎo)致磷脂的脂肪酸鏈僵化，影響脂質(zhì)體膜的穩(wěn)定性，進(jìn)而降低脂質(zhì)體的包封率。最佳優(yōu)選地，所述膽固醇的氯仿溶液中膽固醇的濃度為10mg/ml。
[0022]優(yōu)選地，所述丹參酮II A磺酸鈉的葡萄糖溶液中丹參酮II A磺酸鈉的濃度為150?240 ymol/L。當(dāng)DS-201的濃度小于150 μ mol/L，藥物的包封率不高；iDS_201的濃度大于240 μ mol/L，脂質(zhì)體的包封率下降。最佳優(yōu)選地，所述丹參酮II A磺酸鈉的葡萄糖溶液中丹參酮II A磺酸鈉的濃度為200 μ mol/L。
[0023]優(yōu)選地，所述水浴超聲為在20?30°C水浴中超聲3?5min ;超聲功率為120?200ffo水浴超聲起到混合溶解的作用。水浴超聲的溫度高于30°C，會使脂質(zhì)氧化，低于25°C會降低溶解的效果。當(dāng)超聲時間短于3min，會導(dǎo)致混合不均勻；當(dāng)超聲時間長于5min，會使脂質(zhì)氧化。最佳優(yōu)選地，所述水浴超聲為在25°C水浴中超聲3min ;超聲功率為150W。
[0024]優(yōu)選地，所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的旋轉(zhuǎn)速度為4?8轉(zhuǎn)/min (rpm)，旋轉(zhuǎn)時間為1.5?3h。當(dāng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的旋轉(zhuǎn)速度低于4rpm，形成的脂質(zhì)膜較厚；當(dāng)旋轉(zhuǎn)速度高于8rpm，形成的脂質(zhì)膜不均勾。最佳優(yōu)選地，所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的旋轉(zhuǎn)速度為6rpm，旋轉(zhuǎn)時間為2h。
[0025]優(yōu)選地，所述步驟(3)中的振蕩時間為25?40min，可以使薄膜充分溶脹水合。脂質(zhì)發(fā)生溶脹并被一層層洗脫，大多數(shù)形成了多層脂質(zhì)體。最佳優(yōu)選地，所述震蕩時間為30mino
[0026]優(yōu)選地，所述步驟(4)探頭超聲的方法為:設(shè)置功率為80?120W;采用循環(huán)超聲，每次超聲18?22s，間隔8?13s，循環(huán)40?60次。本發(fā)明采用低功率短時間的間隔循環(huán)超聲，將粒徑較大的多層脂質(zhì)體進(jìn)一步分散為粒徑較小的單層脂質(zhì)體，不僅使得到的脂質(zhì)體粒徑較小且較均一，同時可防止探頭超聲過程中的物質(zhì)變性問題。最佳優(yōu)選地，所述探頭超聲的方法為:設(shè)置功率為100W ;采用循環(huán)超聲，每次超聲20s，間隔10s，循環(huán)50次。
[0027]優(yōu)選地，所述步驟(4)中采用0.22 μm—次性針式過濾器過濾。既可以控制粒徑又可以得到無菌的效果。
[0028]優(yōu)選地，所述步驟(4)中得到的丹參酮II A磺酸鈉脂質(zhì)體在3?5°C下避光貯存。
[0029]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明所述脂質(zhì)體采用丹參酮II A磺酸鈉(DS-201)、磷脂、膽固醇為原料，并調(diào)節(jié)各原料的重量份配比，將藥物活性成分丹參酮II A磺酸鈉包埋在脂質(zhì)體中，藥物產(chǎn)品質(zhì)量高，粒徑均勻，穩(wěn)定性好，包封率高，溶出性好，可以避開藥物的其他作用，對正常細(xì)胞無損害和抑制作用，具有細(xì)胞親和性，吸附于靶細(xì)胞周圍使藥物透過靶細(xì)胞，也可通過融合進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，經(jīng)溶酶體消化釋放藥物，將DS-201原藥直接遞送到細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)發(fā)揮出明顯激活BKca作用，提高了藥物的生物利用度，療效顯著。
[0030]本發(fā)明所述丹參酮II A磺酸