專利名稱：一種高純度白鶴靈芝素c的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種高純度白鶴靈芝素C的制備方法，尤其是涉及一種采用高速逆流色譜法制備高純度白鶴靈芝素C的方法。
背景技術(shù)：
白鶴靈芝素C (Rhinacanthin C)為萘醌類物質(zhì)，黃色油狀物，無明顯熔點(diǎn)，分子式C25H3tlO5,分子量410. 51?，F(xiàn)代藥理研究表明其具有以下藥理作用(1)細(xì)胞毒活性，對(duì)下述細(xì)胞株的 ED50 (微克 / 毫升)分別為 KB (6. 26), P388 (0. 26), A-549 (0. 35)、HT-29 (0.68)、HL-60 (0.68); (2)抗血小板聚集作用，本品100微克/毫升時(shí)100%抑制花生四烯酸(100 μ Μ)誘導(dǎo)的兔血小板聚集；75. 2%抑制膠原(10微克/毫升)誘導(dǎo)的兔血小板聚集；顯著抑制人型和鼠型巨細(xì)胞病毒(CMV)，ECm(微克/毫升)為0.02 (人型)和0.57 (鼠型)，選擇指數(shù)為28和4. 6。仏tm RhinacanthUS nasutus (L. ) Lindau，為爵床科白鶴靈芝屬植物白鶴靈芝，多以干燥地上部分、枝葉入藥。主產(chǎn)于廣西、廣東、云南等地深山，是苗疆秘傳的珍貴藥材，因其功效有如靈芝，又花白色，唇型，生在葉腋或枝頂，形成群展飛翔的白鶴，故名“白鶴靈芝”。其味甘，性溫，具有潤肺止咳、平喘祛痰、清熱疏肝、利濕止癢、收斂止血等功效，用于治療肺熱燥咳、肺結(jié)核及受到風(fēng)寒時(shí)所產(chǎn)生的咳嗽等癥。現(xiàn)代臨床研究顯示，白鶴靈芝可治療冠心病、高血壓、糖尿病，還可對(duì)抗心絞痛，在改善心電圖、血脂、改善甲皺微循環(huán)和眼底動(dòng)脈硬化性改變等方面均有一定的療效，且無明顯副作用。目前對(duì)白鶴靈芝的研究主要集中在規(guī)范化種植(GAP)與質(zhì)量控制技術(shù)方面，但對(duì)白鶴靈芝的有效成分和指標(biāo)性成分方面的研究比較欠缺。經(jīng)檢索尚未見采用高速逆流色譜法純化白鶴靈芝素C的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種高純度白鶴靈芝素C的高效、 快速制備方法。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的
取白鶴靈芝藥材粉碎，加6-10倍80-90%甲醇超聲提取2-3次，提取液回收試劑加硅藻土干燥，裝柱，先用乙醇沖洗雜質(zhì)，再加入至乙酸乙酯中回流提取，提取液濃縮后再用高速逆流色譜分離，根據(jù)圖譜收集成分，濃縮干燥即得高純度白鶴靈芝素C。所述高純度白鶴靈芝素C的制備方法，其特征在于所述的高速逆流色譜分離的溶劑系統(tǒng)為石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，混合比例為2-5:3-7:4-6:3，取上相上相做流動(dòng)相，下相做固定相。本發(fā)明的積極效果在于采用高速逆流色譜法分離，是一種液液分配色譜，對(duì)分離的樣品不產(chǎn)生死吸附，試劑用量少，而且可以回收再使用，單次制備量大，周期短，可連續(xù)制備。
下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施例。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
將白鶴靈芝藥材粉碎，取^ig,加10倍90%甲醇超聲提取2次，每次1小時(shí)，提取液回收試劑加200g硅藻土拌勻，烘干，裝柱，先用乙醇沖洗雜質(zhì)至無黃酮成分，再將硅藻土倒入 500ml乙酸乙酯中回流提取2次，收集提取液減壓濃縮，得浸膏。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、 水，按2:3:4:3在分液漏斗中混合，充分分層后，取下相注滿高速逆流色譜螺旋管，轉(zhuǎn)動(dòng)主機(jī)，轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)為700rpm，泵入上相做流動(dòng)相，待動(dòng)態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為2ml/min，用流動(dòng)相溶解浸膏，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，根據(jù)圖譜收集成分，回收試劑，濃縮干燥，得1. 4g白鶴靈芝素C， 經(jīng)HPLC檢測(cè)，含量95. 4%。實(shí)施例2:
將白鶴靈芝藥材粉碎，取^ig,加6倍80%甲醇超聲提取3次，每次1小時(shí)，提取液回收試劑加250g硅藻土拌勻，烘干，裝柱，先用乙醇沖洗雜質(zhì)至無黃酮成分，再將硅藻土倒入 500ml乙酸乙酯中回流提取2次，收集提取液減壓濃縮，得浸膏。取乙酸乙酯、正丁醇、7jC，按 5:7:6:3在分液漏斗中混合，充分分層后，取下相注滿高速逆流色譜螺旋管，轉(zhuǎn)動(dòng)主機(jī)，轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)為900rpm，泵入上相做流動(dòng)相，待動(dòng)態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為2ml/min，同時(shí)用流動(dòng)相溶解浸膏，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，根據(jù)圖譜收集成分，回收試劑，濃縮干燥，得1. 6g白鶴靈芝素C，經(jīng) HPLC檢測(cè)，含量98. 1%。
權(quán)利要求
1.一種高純度白鶴靈芝素C的制備方法，其特征在于取白鶴靈芝藥材粉碎，加6-10 倍80-90%甲醇超聲提取2-3次，提取液回收試劑加硅藻土干燥，裝柱，先用乙醇沖洗雜質(zhì)， 再加入至乙酸乙酯中回流提取，提取液濃縮后再用高速逆流色譜分離，根據(jù)圖譜收集成分， 濃縮干燥即得高純度白鶴靈芝素C。
2.如權(quán)利要求1所述高純度白鶴靈芝素C的制備方法，其特征在于所述的高速逆流色譜分離的溶劑系統(tǒng)為石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，混合比例為2-5:3-7:4-6:3，取上相上相做流動(dòng)相，下相做固定相。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種高純度白鶴靈芝素C的制備方法。方法是取白鶴靈芝藥材粉碎，加6-10倍80-90%甲醇超聲提取2-3次，提取液回收試劑加硅藻土干燥，裝柱，先用乙醇沖洗雜質(zhì)，再加入至乙酸乙酯中回流提取，提取液濃縮后再用高速逆流色譜分離，根據(jù)圖譜收集成分，真空干燥即得高純度白鶴靈芝素C。采用本方法制備白鶴靈芝素C，效率高，周期短，收率高，產(chǎn)品純度不低于95%。
文檔編號(hào)C07D493/04GK102391277SQ20111030467
公開日2012年3月28日 申請(qǐng)日期2011年10月10日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月10日
發(fā)明者劉東鋒, 吳艷波 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司