一種淫羊藿次苷Ⅱ的生產(chǎn)工藝的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種淫羊藿次苷Ⅱ的生產(chǎn)工藝，首先從淫羊藿中提取淫羊藿苷單體，然后利用高催化活性的糖基水解酶酶解淫羊藿苷單體得到淫羊藿次苷Ⅱ。本發(fā)明具有反應(yīng)高效，溫和，成本低，產(chǎn)物純度高，適合工業(yè)化生產(chǎn)的優(yōu)點。
【專利說明】
-種淫羊霍次昔n的生產(chǎn)工藝
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種藥物的生產(chǎn)工藝，特別設(shè)及一種淫羊蕾次巧n的生產(chǎn)工藝。
【背景技術(shù)】
[0002] 勃起功能障礙化D)是男性常見疾病，據(jù)世衛(wèi)組織統(tǒng)計，全球患有ED的男性約占 10%，成年男子中抓患者的比例則達到1/4W上。我國3億成年男性中，約有邸患者1億多人， 多由屯、理性或器質(zhì)性原因引起，并且在日趨年輕化，嚴重影響了夫妻身屯、健康。
[0003] 抗抓藥物可顯著改善抓患者的勃起障礙。據(jù)統(tǒng)計，2012年抗抓一線藥物全球市場 終端規(guī)模達45億美元。我國成年男性邸患者數(shù)量龐大，市場潛力容量在數(shù)百億元。運些抗抓 藥物的開發(fā)和應(yīng)用，產(chǎn)生了良好的社會和經(jīng)濟效應(yīng)。
[0004] 目前抗邸藥物主要有S大核屯、產(chǎn)品--西地那非、他達那非、伐地那非，它們都屬于 5型憐酸二醋酶(PDE5)抑制劑，可提高性刺激下CGMP濃度而增強勃起功能。但是由于運些口 服選擇性PDE5抑制劑只可一次性強烈松弛海綿體平滑肌而促進陰莖勃起，治標不治本，同 時會引起低血壓等副作用，特別是對有屯、血管疾病患者的安全性頗有爭議。因此，開發(fā)安 全、標本兼治的抗邸新藥成為一種必然的要求。
[0005] 淫羊蕾為小築科淫羊蕾屬草本植物，其作為壯陽藥應(yīng)用至今已有2000多年的歷 史。北大醫(yī)院的臨床觀察顯示淫羊蕾的有效成分淫羊蕾巧單體具有顯著的抗抓效果，同時 對血壓沒有顯著影響。動物實驗表明其毒性很低（50%淫羊蕾巧對大鼠最大耐受性〉5g/ kg)。淫羊蕾巧在體內(nèi)的代謝衍生物淫羊蕾次巧n具有更顯著的生物學功能。分子研究表 明，淫羊蕾次巧n單體不僅是PDE5的特異性抑制劑，同時具有西地那非沒有的一些生物學 效應(yīng)，如促進陰莖神經(jīng)的再生，提高陰莖海綿體神經(jīng)nNOS的表達W及內(nèi)皮細胞eNOS，促進陰 莖平滑肌細胞增殖等。因此，淫羊蕾次巧n有望成為新藥研究制備用于治療和預防勃起功 能障礙的新藥物和保健品，克服西地那非等藥物"治標不治本"的弊端，市場前景廣闊。
[0006] 目前國內(nèi)外關(guān)于淫羊蕾巧和淫羊蕾次巧n的研究主要集中在藥理和功能方面的 研究，除了在抗抓方面的作用外，在抗衰老、抗氧化等方面的功能也相繼被發(fā)現(xiàn)，但關(guān)于淫 羊蕾次巧n的生物制造方面研究較少，W國內(nèi)為主，仍然處于起步階段。國外因為缺乏中醫(yī) 藥方面的資源，研究比較有限。
[0007] 大連工業(yè)大學的金鳳變研究組率先開發(fā)了一種真菌的淫羊蕾巧酶，可將淫羊蕾巧 降解成低糖基巧或者巧元，然后利用大孔吸附樹脂SP207分離各組分，產(chǎn)品純度可達到 99%，但是由于真菌液態(tài)發(fā)酵存在攬拌等技術(shù)難點，未能實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。為克服運個難 題，該研究組從栽培人參的±壤中篩選出了能水解淫羊蕾巧糖基的細菌菌株 化odanobacter SP.GS3054，并研究了其發(fā)酵條件和酶反應(yīng)參數(shù)，水解糖基的能力較真菌酶 有所提升。由此，具備水解糖基能力的真菌和細菌相繼都被開發(fā)出來，但由于缺乏在分子水 平對糖基水解酶的理解，存在水解效率低等問題，無法通過基因工程大幅提高水解酶在細 菌或真菌中的表達量和活性。直接尋找高活性的糖基水解酶，并通過基因工程方法大量表 達直接用于生物催化反應(yīng)水解酶逐漸成為新的研究熱點。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的在于提供一種淫羊蕾次巧n的生產(chǎn)工藝，具有反應(yīng)高效，溫和，成本 低，產(chǎn)物純度高，適合工業(yè)化生產(chǎn)的優(yōu)點。
[0009] 本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：
[0010] -種淫羊蕾次巧n的生產(chǎn)工藝，首先從淫羊蕾中提取淫羊蕾巧單體，然后利用糖 基水解酶酶解淫羊蕾巧單體得到淫羊蕾次巧n。
[0011] 作為優(yōu)選，從淫羊蕾中提取淫羊蕾巧單體的工藝步驟如下:淫羊蕾粉碎后，加質(zhì)量 濃度45-85%乙醇加熱回流l-4h得淫羊蕾粗浸膏；淫羊蕾粗浸膏用水和乙酸乙醋溶解并分 層，水相用乙酸乙醋萃取3-5次，合并乙酸乙醋相，用飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼干燥，旋 干，得干燥物;干燥物用混合溶劑加熱回流1-地，過濾，濾渣再用混合溶劑加熱回流l-4h，過 濾，合并濾液，干燥后得淫羊蕾巧單體。
[0012] 本發(fā)明改進了淫羊蕾巧單體提取工藝，其優(yōu)點是:直接采用混合溶劑反復結(jié)晶法， 較之傳統(tǒng)的色譜柱或者大孔吸附樹脂分離方法成本更低(主要是溶劑用量少、無填料費用、 設(shè)備要求低），生產(chǎn)周期短，便于工廠大規(guī)模生產(chǎn)。
[0013] 作為優(yōu)選，淫羊蕾粉碎至20-80目，100g淫羊蕾粉碎物加300-800mL質(zhì)量濃度45- 85%乙醇。
[0014] 作為優(yōu)選，所述混合溶劑為水與甲醇按照1:2-3的體積比的混合物。
[0015] 作為優(yōu)選，所述糖基水解酶通過W下方法制備而得:先用球菌在含有葡萄糖的固 體培養(yǎng)基上培養(yǎng)W產(chǎn)生葡聚糖，再用此葡聚糖配制液體培養(yǎng)基W培養(yǎng)產(chǎn)酶菌，濾出產(chǎn)酶菌 的菌體，菌體溶于醋酸-醋酸鋼緩沖液中浸泡3-化，離屯、，取上清液，冷凍干燥后得高催化活 性的糖基水解酶。
[0016] 先用球菌在含有葡萄糖的培養(yǎng)基上培養(yǎng)W產(chǎn)生葡聚糖的具體工藝為：
[0017] 固體培養(yǎng)基配方為：葡萄糖15g，蛋白腺IOg，玉米漿35g，瓊脂15g，此0 1000 mL，憐 酸氨二鐘-憐酸二氨鐘緩沖液調(diào)節(jié)抑至5.5~7.5;溫度30°C，培養(yǎng)2地。培養(yǎng)完畢后的固體培 養(yǎng)基按照每克固體培養(yǎng)基用3~SmL水的量浸泡3~化，離屯、，棄去固體，得到葡聚糖清液。使 用的憐酸氨二鐘-憐酸二氨鐘緩沖液抑為7.8-8.0。
[0018] 葡聚糖配制液體培養(yǎng)基W培養(yǎng)產(chǎn)酶菌的具體工藝為：
[0019] 液體培養(yǎng)基配方為:葡聚糖清液15g，蛋白腺lOg，此0 1000 mL,憐酸氨二鐘-憐酸二 氨鐘緩沖液調(diào)節(jié)抑5.5~7.5;在30°C下培養(yǎng)4~5天，濾出菌體，菌體溶于pH值5.5的醋酸- 醋酸鋼緩沖液浸泡3-化，每克菌體使用3-8mLpH值5.5的醋酸-醋酸鋼緩沖液，離屯、（轉(zhuǎn)速 3000-8000rmp)，取上清液，冷凍干燥后得高催化活性的糖基水解酶(粉末狀葡聚糖酶）。
[0020] 通過本發(fā)明的上述特定工藝能篩選得到一種高催化活性、反應(yīng)條件溫和的葡聚糖 酶(高催化活性的糖基水解酶）。此種葡聚糖酶針對淫羊蕾巧的選擇性很高，轉(zhuǎn)化效率接近 100%。
[0021 ]作為優(yōu)選，所述球菌為紅球菌或明串球菌。
[0022] 作為優(yōu)選，所述產(chǎn)酶菌為青霉、曲霉、輪霉、黑曲霉或雙歧乳桿菌。
[0023] 作為優(yōu)選，酶解工藝為：IOOmg淫羊蕾巧單體懸浮于抑=5.5-7.0的憐酸氨二鐘-憐 酸二氨鐘緩沖液中得總體積10-20mL反應(yīng)體系，向反應(yīng)體系中加入反應(yīng)體系體積4-6 %的增 溶劑及糖基水解酶，攬拌過夜，乙酸乙醋萃取3-5次，合并有機相，水洗，飽和食鹽水洗涂，無 水硫酸鋼干燥，濃縮后油累抽干得產(chǎn)品。
[0024] 作為優(yōu)選，所述增溶劑為吐溫80、甘油或二甲基亞諷。
[0025] 作為優(yōu)選，所述糖基水解酶用量為淫羊蕾巧單體重量的10-20%。
[0026] 本發(fā)明的有益效果是：
[0027] 當前淫羊蕾巧提取工藝存在純度較低、雜質(zhì)含量較高等問題，本發(fā)明優(yōu)化了淫羊 蕾巧的提取工藝，通過廣泛采用乙醇提取等綠色環(huán)保試劑，降低了環(huán)境污染，并通過增加重 結(jié)晶步驟，提高了產(chǎn)物的純度，達98.9%。淫羊蕾次巧n與淫羊蕾巧的差別只有一個糖基， 分離運兩種物質(zhì)存在一定的困難和成本增加的問題，本發(fā)明利用高催化的糖基水解酶，在 5kg級別的中試中，可將反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率達到99% W上，簡化了淫羊蕾次巧n的純化步驟。
【附圖說明】
[0028] 圖1是本發(fā)明產(chǎn)物淫羊蕾次巧n的液相色譜圖。
【具體實施方式】
[0029] 下面通過具體實施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步的具體說明。
[0030] 本發(fā)明中，若非特指，所采用的原料和設(shè)備等均可從市場購得或是本領(lǐng)域常用的。 下述實施例中的方法，如無特別說明，均為本領(lǐng)域的常規(guī)方法。
[0031] 總實施方案：
[0032] 一種淫羊蕾次巧n的生產(chǎn)工藝：
[0033] (1)首先從淫羊蕾中提取淫羊蕾巧單體:從淫羊蕾中提取淫羊蕾巧單體的工藝步 驟如下：淫羊蕾粉碎至20-80目，100g淫羊蕾粉碎物加300-800mL質(zhì)量濃度45-85%乙醇，加 熱回流1-地得淫羊蕾粗浸膏；淫羊蕾粗浸膏用水和乙酸乙醋溶解并分層，水相用乙酸乙醋 萃取3-5次，合并乙酸乙醋相，用飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼干燥，旋干，得干燥物;干燥物 用混合溶劑加熱回流1-地，過濾，濾渣再用混合溶劑加熱回流1-地，過濾，合并濾液，干燥后 得淫羊蕾巧單體。混合溶劑為水與甲醇按照1:2-3的體積比的混合物。
[0034] (2)然后利用高催化活性的糖基水解酶酶解淫羊蕾巧單體得到淫羊蕾次巧n : IOOmg淫羊蕾巧單體懸浮于pH = 5.5-7.0的憐酸氨二鐘-憐酸二氨鐘緩沖液中得總體積10- 20mL反應(yīng)體系，向反應(yīng)體系中加入反應(yīng)體系體積4-6 %的增溶劑（吐溫80、甘油或二甲基亞 諷)及高催化活性的糖基水解酶(所述高催化活性的糖基水解酶用量為淫羊蕾巧單體重量 的10-20%)，攬拌過夜，乙酸乙醋萃取3-5次，合并有機相，水洗，飽和食鹽水洗涂，無水硫酸 鋼干燥，濃縮后油累抽干得產(chǎn)品。
[0035] 所述高催化活性的糖基水解酶通過W下方法制備而得:先用球菌(紅球菌或明串 球菌)在含有葡萄糖的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)W產(chǎn)生葡聚糖，再用此葡聚糖配制液體培養(yǎng)基W 培養(yǎng)產(chǎn)酶菌(青霉、曲霉、輪霉、黑曲霉或雙歧乳桿菌），濾出產(chǎn)酶菌的菌體，菌體溶于醋酸- 醋酸鋼緩沖液中浸泡3-化，離屯、，取上清液，冷凍干燥后得高催化活性的糖基水解酶。
[0036] 本發(fā)明中采用的球菌、產(chǎn)酶菌均為市售產(chǎn)品。
[0037] 具體實施工藝：
[0038] 從淫羊蕾中制備淫羊蕾巧單體
[0039] 實施例1:
[0040] 淫羊蕾草（40-60目）100g，75%乙醇400ml加熱回流化，得15.5g淫羊蕾粗浸膏 (HPLC淫羊蕾巧含量10%)，用150ml水和150ml乙酸乙醋溶解并分層，水相每次用150ml乙酸 乙醋萃取3次，合并乙酸乙醋相，用飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼干燥，旋干得8.5g黃褐色固 體。用水：甲醇=1: 2的混合溶劑100mL加熱回流化，過濾，濾渣再用IOOmr混合溶劑回流化， 合并兩次的母液，旋干，烘干得1.49g淺黃色固體化PLC淫羊蕾巧含量98.5 % )，收率96.1 %。 [0041 ] 實施例2:
[0042] 淫羊蕾草（20-40目）100g，75%乙醇500ml加熱回流化，得14.5g淫羊蕾粗浸膏 (HPLC淫羊蕾巧含量10%)，用150ml水和150ml乙酸乙醋溶解并分層，水相每次用150ml乙酸 乙醋萃取3次，合并乙酸乙醋相，用飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼干燥，旋干得8.2g黃褐色固 體。用水：甲醇=1: 2的混合溶劑100mL加熱回流化，過濾，濾渣再用IOOmr混合溶劑回流化， 合并兩次的母液，旋干，烘干得1.35g淺黃色固體化PLC淫羊蕾巧含量98.3 % )，收率93.1 %。
[0043] 實施例3:
[0044] 淫羊蕾草（60-80目）100g，75%乙醇600ml加熱回流化，得15.2g淫羊蕾粗浸膏 (HPLC淫羊蕾巧含量10%)，用150ml水和150ml乙酸乙醋溶解并分層，水相每次用150ml乙酸 乙醋萃取3次，合并乙酸乙醋相，用飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼干燥，旋干得8.3g黃褐色固 體。用水：甲醇=1: 2的混合溶劑100mL加熱回流化，過濾，濾渣再用IOOmr混合溶劑回流化， 合并兩次的母液，旋干，烘干得1. Mg淺黃色固體化PLC淫羊蕾巧含量98.5 % )，收率94.7 %。
[0045] 高催化活性的糖基水解酶篩選：
[0046] 實施例4:
[0047] 先用紅平紅球菌(市售，可購自中國微生物菌種查詢網(wǎng)）在含有葡萄糖的固體培養(yǎng) 基上培養(yǎng)W產(chǎn)生葡聚糖，固體培養(yǎng)基配方為:葡萄糖15g，蛋白腺lOg，玉米漿35g，瓊脂15g， 此0 lOOOmL，憐酸氨二鐘-憐酸二氨鐘緩沖液調(diào)節(jié)pH 6.0。培養(yǎng)箱30°C，培養(yǎng)2地。培養(yǎng)完畢 后的固體培養(yǎng)基按照每克固體培養(yǎng)基用5mL水的量浸泡3~化，用離屯、機離屯、，棄去固體，得 到葡聚糖清液。再用此葡聚糖配制液體培養(yǎng)基W培養(yǎng)灰黃青霉(市售，可購自中國微生物菌 種查詢網(wǎng)），液體培養(yǎng)基配方為:葡聚糖清液15g，蛋白腺lOg，出0 1000 mL,憐酸氨二鐘-憐酸 二氨鐘緩沖液調(diào)節(jié)抑6.0;在30°C下培養(yǎng)4~5天，濾出菌體，菌體溶于pH值5.5的醋酸-醋酸 鋼緩沖液浸泡3-化，每克菌體使用SmLpH值5.5的醋酸-醋酸鋼緩沖液，離屯、（轉(zhuǎn)速3000- SOOOrmp)，取上清液，冷凍干燥后得高催化活性的糖基水解酶(粉末狀葡聚糖酶）。
[004引實施例5:
[0049]本實施例與實施例4不同之處在于:先用赤紅球菌（市售，可購自中國微生物菌種 查詢網(wǎng)）在含有葡萄糖的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)W產(chǎn)生葡聚糖。再用此葡聚糖配制液體培養(yǎng)基 W培養(yǎng)黃曲霉菌(市售，可購自中國微生物菌種查詢網(wǎng)）。
[(K)加]其它同實施例4。
[0化1] 實施例6:
[0052] 本實施例與實施例4不同之處在于:先用帶化紅球菌（市售，可購自中國微生物菌 種查詢網(wǎng)）在含有葡萄糖的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)W產(chǎn)生葡聚糖。再用此葡聚糖配制液體培養(yǎng) 基W培養(yǎng)青霉菌(市售，可購自中國微生物菌種查詢網(wǎng)）。
[0053] 利用高催化活性的糖基水解酶酶解淫羊蕾巧單體得到淫羊蕾次巧n:
[0化4]
[0化5] 實施例7:
[0056] IOOmg淫羊蕾巧懸浮于抑=6.8的憐酸氨二鐘-憐酸二氨鐘緩沖液中得總體積IOmL 反應(yīng)體系，向反應(yīng)體系中加入反應(yīng)體系體積5%的吐溫80，10mg葡聚糖酶(高催化活性的糖 基水解酶，即實施例4-6篩選的酶），攬拌過夜。乙酸乙醋3〇1111分；次萃取，合并有機相，IOmL 水洗，飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼干燥，濃縮后油累抽干得固體75.3mg，產(chǎn)率99.1 % dHPLC 純度為99.4%。
[0化7] 實施例8:
[005引IOOmg淫羊蕾巧懸浮于抑= 7.0的憐酸氨二鐘-憐酸二氨鐘緩沖液中得總體積IOmL 反應(yīng)體系，向反應(yīng)體系中加入反應(yīng)體系體積5 %的甘油，IOmg葡聚糖酶(高催化活性的糖基 水解酶，即實施例4-6篩選的酶），攬拌過夜。乙酸乙醋301111分立次萃取，合并有機相，IOmL水 洗，飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼干燥，濃縮后油累抽干得固體73. Smg，產(chǎn)率97.1 % dHPLC純 度為98.5%。
[0化9] 實施例9:
[0060] IOOmg淫羊蕾巧懸浮于抑=6.5的憐酸氨二鐘-憐酸二氨鐘緩沖液中得總體積IOmL 反應(yīng)體系，向反應(yīng)體系中加入反應(yīng)體系體積5%的二甲基亞諷，IOmg葡聚糖酶(高催化活性 的糖基水解酶，即實施例4-6篩選的酶），攬拌過夜。乙酸乙醋30mL分S次萃取，合并有機相， IOmL水洗，飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼干燥，濃縮后油累抽干得固體74.5mg，產(chǎn)率98.0 %。 HPLC 純度為 98.5%。
[0061] 本發(fā)明的產(chǎn)物經(jīng)液相色譜(圖1)檢測與標準品對比后確認為淫羊蕾次巧n。
[0062] W上所述的實施例只是本發(fā)明的一種較佳的方案，并非對本發(fā)明作任何形式上的 限制，在不超出權(quán)利要求所記載的技術(shù)方案的前提下還有其它的變體及改型。
【主權(quán)項】
1. 一種淫羊藿次苷π的生產(chǎn)工藝，其特征在于:首先從淫羊藿中提取淫羊藿苷單體，然 后利用糖基水解酶酶解淫羊藿苷單體得到淫羊藿次苷Π 。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種淫羊藿次苷Π 的生產(chǎn)工藝，其特征在于:從淫羊藿中提取 淫羊藿苷單體的工藝步驟如下:淫羊藿粉碎后，加質(zhì)量濃度45-85 %乙醇加熱回流l-4h得淫 羊藿粗浸膏；淫羊藿粗浸膏用水和乙酸乙酯溶解并分層，水相用乙酸乙酯萃取3-5次，合并 乙酸乙酯相，用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋干，得干燥物;干燥物用混合溶劑加熱 回流l-4h，過濾，濾渣再用混合溶劑加熱回流l-4h，過濾，合并濾液，干燥后得淫羊藿苷單 體。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種淫羊藿次苷Π 的生產(chǎn)工藝，其特征在于：淫羊藿粉碎至 20-80目，100g淫羊藿粉碎物加300-800mL質(zhì)量濃度45-85%乙醇。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種淫羊藿次苷Π 的生產(chǎn)工藝，其特征在于:所述混合溶劑為 水與甲醇按照1:2-3的體積比的混合物。5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種淫羊藿次苷Π 的生產(chǎn)工藝，其特征在于:所述糖基水 解酶通過以下方法制備而得:先用球菌在含有葡萄糖的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)以產(chǎn)生葡聚糖， 再用此葡聚糖配制液體培養(yǎng)基以培養(yǎng)產(chǎn)酶菌，濾出產(chǎn)酶菌的菌體，菌體溶于醋酸-醋酸鈉緩 沖液中浸泡3_5h，離心，取上清液，冷凍干燥后得高催化活性的糖基水解酶。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種淫羊藿次苷Π 的生產(chǎn)工藝，其特征在于:所述球菌為紅球 菌或明串球菌。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種淫羊藿次苷Π 的生產(chǎn)工藝，其特征在于:所述產(chǎn)酶菌為青 霉、曲霉、輪霉、黑曲霉或雙歧乳桿菌。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種淫羊藿次苷Π 的生產(chǎn)工藝，其特征在于：酶解工藝為： 10〇mg淫羊藿苷單體懸浮于PH = 5.5-7.0的磷酸氫二鉀-磷酸二氫鉀緩沖液中得總體積10-20mL反應(yīng)體系，向反應(yīng)體系中加入反應(yīng)體系體積4-6 %的增溶劑及糖基水解酶，攪拌過夜， 乙酸乙酯萃取3-5次，合并有機相，水洗，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，濃縮后油栗抽 干得產(chǎn)品。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種淫羊藿次苷Π 的生產(chǎn)工藝，其特征在于:所述增溶劑為吐 溫80、甘油或二甲基亞砜。10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種淫羊藿次苷Π 的生產(chǎn)工藝，其特征在于:所述糖基水解 酶用量為淫羊藿苷單體重量的10-20%。
【文檔編號】C12P17/16GK105925635SQ201610289040
【公開日】2016年9月7日
【申請日】2016年5月4日
【發(fā)明人】吳濤, 吳志革, 高坤, 陳佳, 高章華
【申請人】寧波旋光醫(yī)藥科技有限公司, 浙江大學寧波理工學院