一種測定水產(chǎn)品接觸材料中芳香胺的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及水產(chǎn)品中有害化學(xué)成分分析測定技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種測定水產(chǎn)品 接觸材料中芳香胺的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 芳香胺（Aromaticamine)是一種重要的化工原料，被廣泛應(yīng)用于化學(xué)染料和包裝 材料中，是一類被人們熟知的有毒有害物質(zhì)。芳香胺及其衍生物具有誘變因子，可以通過吸 入、食入或透過皮膚吸收而導(dǎo)致中毒，能通過形成高鐵血紅蛋白，造成人體血液系統(tǒng)損害， 也可以直接作用于肝細(xì)胞，引起中毒性肝損害，其中一些芳香胺衍生物還具有致癌和致突 變的作用，即使在低濃度下，對動物和人體都具有致癌性。
[0003] 水產(chǎn)品中芳香胺的主要來源是與之接觸的材料，接觸材料中若存在芳香胺類物 質(zhì)，很容易在特定條件下遷移至水產(chǎn)品中，對消費者的身體健康帶來非常大的安全隱患。 近年來，國際上對芳香胺的污染問題越來越重視，歐盟規(guī)定使用芳香族異氰酸酯為原料和 偶氮染料的食品接觸材料不可釋放出芳香胺類物質(zhì)（以苯胺計），2007年頒布的新指令 2007/19/EC中更新其檢出限為0. 01mg/kg(以苯胺計）。目前，芳香胺遷移量的檢測技術(shù)主 要為氣相色譜法、離子交換色譜法、高效液相色譜法、色譜質(zhì)譜聯(lián)用、毛細(xì)管電泳法等。氣相 色譜和高效液相色譜法靈敏度較高，對芳香胺進行分離檢測可以實現(xiàn)自動化操作，簡便易 行，而色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)則使檢測的靈敏度更上了一個臺階。但是，由于采用上述方法對芳 香胺進行檢測時，通常需要進行衍生化，過程非常繁瑣，不易進行。毛細(xì)管電色譜檢測技術(shù) 則主要應(yīng)用電滲流或電滲流結(jié)合壓力流來推動流動相可以說是HPLC(高效液相色譜法）和 HPCE(高效毛細(xì)管電泳）的有機結(jié)合，它不僅克服了HPLC中壓力流本身流速不均勻引起的 峰擴展，而且柱內(nèi)無壓降，使峰擴展只與溶質(zhì)擴散系數(shù)有關(guān)，從而獲得了接近于HPCE水平 的高柱效，同時還具備了HPLC的選擇性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)而提供一種簡便、快速且靈敏度高的 測定水產(chǎn)品接觸材料中芳香胺的方法。
[0005] 本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為：一種測定水產(chǎn)品接觸材料中芳香 胺含量的方法，其特征在于包括以下步驟：
[0006] ( 1)水產(chǎn)品接觸材料洗凈，晾干后稱重，根據(jù)接觸材料重量，將接觸材料按照0. 5g 接觸材料/1〇〇~ll〇ml水的比例放入水中浸泡，密封后放入89°C~90°C水浴內(nèi)，lh后根據(jù) 需要取出適量浸泡液，待冷卻至室溫后備用；
[0007] (2)將上述浸泡液的pH值調(diào)至6~10,接著將浸泡液以0. 8~1. 2ml/min的流速， 勻速通過活化后的固相萃取柱，該浸泡液從固相萃取柱流出后，用超純水進行清洗，抽干后 再加入2~10ml洗脫溶劑進行洗脫，收集適量洗脫液，用氮吹儀吹至近干，定容至lml，過 0. 22iim濾U旲后，直于樣品瓶中備用；
[0008] (3)上述樣品采用加壓毛細(xì)管電色譜儀進行檢測，其中所用毛細(xì)管電色譜柱為 EP-100-20/45-3-C18,柱溫為常溫，流動相為甲醇和磷酸氫二鉀水溶液，該流動相的pH值 為4~8,流動相中磷酸氫二鉀濃度為5mmol/L~50mmol/L;
[0009] 梯度洗脫條件為：0~6min，流動相中甲醇含量65%~70%，6~30min，流動相中 甲醇含量70%~90%，流動相的流速均為0. 04ml/min;
[0010] 其他檢測條件：同時紫外檢測波長為240nm，外加分離電壓范圍為2~10kv。
[0011] 上述芳香胺為苯胺（Aniline)、2, 6-二甲基苯胺（2, 6-Dimethylaniline)、鄰甲 氧基苯胺（〇-Methoxyaniline)、對氯苯胺（p-Chloroaniline)以及3,3'-二甲基聯(lián)苯胺 (3, 3' -DimethvlbenzidineF)〇
[0012] 由于芳香胺中帶有氨基，因此浸泡液的pH值會對固相萃取中芳香胺的吸附效果 產(chǎn)生影響，本發(fā)明中浸泡液的pH值為9。
[0013] 所述固相萃取柱為EnviTM-ChromP柱，由于EnviTM-ChromP柱采用苯乙烯二乙 烯基苯作為填料，有較大數(shù)量的比表面積和較低的表面活性，能夠提供一種理想的液液分 配的支撐表面，使得芳香胺類物質(zhì)有最大程度的回收率。
[0014] 固相萃取中浸泡液的流速大小會對芳香胺的吸附和回收產(chǎn)生影響，作為優(yōu)選，浸 泡液在固相萃取柱中的流速為lml/min。
[0015] 固相萃取中洗脫溶劑的選擇關(guān)系到能否將吸附在固相萃取柱上的芳香胺完全洗 脫下來，所以洗脫溶劑的選擇十分重要，本發(fā)明中洗脫溶劑為甲醇，且甲醇的用量為6ml，甲 醇不僅能將上述5種芳香胺很好地洗脫下來，而且為第三步加壓毛細(xì)管電色譜中的流動相 之一，因此固相萃取中選用甲醇作為洗脫溶劑，進一步，選用的洗脫溶劑的用量為6ml，6ml 的甲醇不僅能使5種芳香胺較好地洗脫下來，且在氮吹過程中損失較小。
[0016] 所述流動相pH值為8,該流動相中磷酸氫二鉀的濃度為20mmol/L，由于芳香胺為 弱堿性物質(zhì)，所以流動相的pH值對芳香胺的帶電情況和電滲流有很大影響，pH值為8時，5 種芳香胺均能較好地分離；緩沖鹽對于毛細(xì)管電色譜系統(tǒng)的穩(wěn)定以及目標(biāo)化合物的分離起 著重要作用，因此本發(fā)明中流動相中磷酸氫二鉀的濃度選為20mmol/L。
[0017] 分離電壓產(chǎn)生的電滲流推動力是加壓毛細(xì)管電色譜中目標(biāo)分析物分離的主要動 力之一，分離電壓增大使得電滲流增大，目標(biāo)分析物的保留時間減少，但分離電壓過大，5中 芳香胺的分離與基線的穩(wěn)定情況受到影響，毛細(xì)管電色譜柱內(nèi)焦耳熱效應(yīng)增加，使得分離 效率降低，綜上，本發(fā)明中外加分離電壓為6kv。
[0018] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于：本發(fā)明中利用固相萃取-加壓毛細(xì)管電色 譜相結(jié)合的方法測定水產(chǎn)品接觸材料中5種芳香胺類化合物的含量，其中，固相萃取能對 五種芳香胺進行較好地回收和吸附，而加壓毛細(xì)管電色譜中由于結(jié)合了HPLC的分離選擇 性和電滲流的推動力，5種芳香胺能夠較好地分離，該方法線性關(guān)系良好，R2>0. 99, 5種芳香 胺的檢出限在1. 0-4. 0mg/L之間，方法的回收率大于70. 1%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD)〈5. 7%，因 此該方法簡便、快速且靈敏度高，可用于水產(chǎn)品接觸材料中芳香胺含量的快速檢測。
【附圖說明】
[0019] 圖1為實施例2中不同固相萃取小柱對五種芳香胺回收率的影響；
[0020] 圖2為實施例2中不同固相萃取洗脫溶劑的體積對五種芳香胺回收率的影響；
[0021] 圖3為實施例3中磷酸氫二鉀pH值變化與