蒙藥瞿麥中總生物堿超聲提取方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于化學成分提取領域，特別地，設及總生物堿提取領域。
【背景技術】
[0002] 生物堿是生物體內的堿性含氮有機化合物，廣泛分布于動、植物中，大多數(shù)為較復 雜環(huán)狀結構的生物堿，對動、植物的生命至關重要。大量的藥理和臨床研究表明，生物堿具 有廣泛的藥理及生物活性，如抗菌、消炎、鎮(zhèn)痛等，且作為藥物不良反應極少，在食品、衛(wèi)生、 醫(yī)藥等方面有著巨大的應用潛力，近年來已成為研究熱點。
[0003]蒙藥崔麥為石竹科植物崔麥DianthussuperbusL.的帶花地上部分，表面呈淡綠 色或黃綠色，光滑無毛，無節(jié)間，斷面中空。分布于內蒙古、山東、江蘇、浙江、江西、河南、貴 少H、新疆等地。有利尿通淋、破血通經(jīng)等功效，蒙醫(yī)用于治療熱淋、血淋、石淋等病癥，多配方 用，味苦。
[0004]對于蒙藥崔麥中總生物堿的提取方法，根據(jù)傳統(tǒng)的正交設計方法是一種用線性數(shù) 學模型進行設計的設計方法，可W找出多個因素水平的最佳組合，但只能分析離散型數(shù)據(jù)， 具有精度不高、預測性不佳等缺點。并不能獲得最佳的蒙藥崔麥中總生物堿提取方法。同 時，目前尚無對蒙藥崔麥中總生物堿提取工藝進行研究的相關報導

【發(fā)明內容】

[0005]本發(fā)明的目的是為了提供一種最優(yōu)的蒙藥崔麥中總生物堿超聲提取方法：
[0006]提取條件為超聲溫度53°C、料液比31 (g/mL)、超聲時間41miη、超聲功率140W。
[0007]根據(jù)該提取工藝條件進行蒙藥崔麥中總生物堿超聲提取，總生物堿提取率可W到 達到 3. 085mg/g。
[0008]本發(fā)明通過單因素考察與響應面優(yōu)化相結合對蒙藥崔麥中總生物堿提取工藝進 行優(yōu)化，提取的總生物堿含量高，節(jié)省了大量的時間和溶劑，為開發(fā)新藥、合理利用資源提 供了新途徑、新方法。
[000引附圖概要說明
[0010] 圖1超聲溫度和料液比及其交互作用對總生物堿提取率影響的Ξ維曲面和等高 線圖
[0011] 圖2超聲溫度和超聲時間及其交互作用對總生物堿提取率影響的Ξ維曲面和等 高線圖
[0012] 圖3超聲溫度和超聲功率及其交互作用對總生物堿提取率影響的Ξ維曲面和等 高線圖
[0013]圖4料液比和超聲時間及其交互作用對總生物堿提取率影響的Ξ維曲面和等高 線圖
[0014] 圖5料液比和超聲功率及其交互作用對總生物堿提取率影響的Ξ維曲面和等高 線圖
[0015] 圖6超聲時間和超聲功率及其交互作用對總生物堿提取率影響的Ξ維曲面和等 高線圖
【具體實施方式】[001引實施例1
[0017] 提取工藝參數(shù)優(yōu)化過程
[0018] 1 準備
[0019] 1.1材料與試劑
[0020] 崔麥[內蒙古天立藥業(yè)，經(jīng)內蒙古醫(yī)科大學藥學院藥用植物學教研室喬俊纏教授 鑒定為石竹科植物崔麥Dianthus superbus L.的帶花地上部分]。鹽酸小築堿對照品（中 國食品藥品檢定研究院，批號：110713-201212，供含量測定使用）、鹽酸、95%乙醇、Ξ氯甲 燒、石油酸、巧樣酸、巧樣酸鋼、漠甲酪綠、鄰苯二甲酸氨鐘，其他試劑均為國產(chǎn)分析純。
[0021] 1.2 儀器
[0022] TU-1901型雙光束紫外分光光度計（北京普析通用有限責任公司）；皿S-4S型電 子恒溫不誘鋼水浴鍋（上海宜昌儀器紗篩廠）；畑G-9030A型電熱鼓風干燥箱（上海一恒科 學儀器有限公司）；S皿-B95T型循環(huán)水式多用真空累（鄭州長城科工貿有限公司）；LX-07A 多功能粉碎機（上海江信科技有限公司）；Κ冊200DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山禾創(chuàng)超聲 儀器有限公司）；AB135-S分析天平（Made in Switzerland) ;BSA124S型電子天平（北京賽 多利斯科學儀器有限公司）巧-220型恒溫水浴鍋（上海亞榮生化儀器廠）；RE52CS型旋轉 蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）。
[002引2實驗方法
[0024] 2. 1緩沖溶液與顯色劑的制備
[002引巧樣酸-巧樣酸鋼緩沖溶液：取40血0.1mol/L的巧樣酸溶液和85血0.1mol/L的巧樣酸鋼溶液置于250M^容量瓶中，用蒸饋水定容至刻度，得pH= 5. 4的緩沖溶液。
[0026] 漠甲酪綠指示液：稱取漠甲酪綠0. 125g，用25血0.Imol/L化0H溶液溶解后，加 鄰苯二甲酸氨鐘2. 55g，用水溶解，轉移至250M^容量瓶中，用蒸饋水定容即得。
[0027] 2. 2對照品溶液的制備
[0028] 精密稱取鹽酸小築堿3.OOmg，用1 %酸乙醇溶解后定容至lOmL容量瓶中，搖勻，得 濃度為0. 327mg/mL的鹽酸小築堿對照品溶液。
[0029] 2. 3供試品溶液的制備
[0030] 精密稱取崔麥粉末1.Og，按1:10的比例加入石油酸，60°C下水浴回流2.化，取藥 渣，加入一定比例1 %酸乙醇，靜置30min，在一定超聲溫度及超聲功率下超聲提取一定時 間后，抽濾，濾液濃縮至25血。
[0031] 2. 4測定波長的確定
[0032] 精密量取對照品溶液0. 4mL，加1 %酸乙醇至1血，置分液漏斗中，加入抑=5. 4緩 沖溶液5血，漠甲酪綠指示液2血，振搖Imin，加10血Ξ氯甲燒，振搖Imin，靜置30min。另 取供試品溶液ImU同法操作。在200~800nm進行波長掃描，吸收光譜顯示對照品和供試 品溶液均在419nm處有最大吸收，故選擇419nm作為測定波長。
[0033] 2. 5標準曲線的繪制
[0034] 精密量取對照品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8血置分液漏斗中，力日1%酸乙醇至 1血，加抑=5. 4緩沖溶液5血，漠甲酪綠指示液2血，振搖Imin，加10血Ξ氯甲燒，振搖 Imin，靜置30min。W相應的試劑為空白，在419nm波長處測定吸光度。W吸光度（Α)為縱 坐標，溶液濃度（C)為橫坐標，得回歸方程為A= 0. 0535C-0. 0325(r= 0. 9999,η= 5)，線 性范圍為3. 27~26. 16μg/血。
[0035] 表1鹽酸小築堿標準曲線實驗數(shù)據(jù)
[0036]
[0037] 3實驗設計
[0038] 3. 1單因素實驗
[0039] 按供試品溶液的制備方法，選取不同超聲溫度、料液比、超聲時間、超聲功率進行 單因素實驗，得出總生物堿提取率與各因素的關系。
[0040] 3. 1. 1超聲溫度對蒙藥崔麥總生物堿提取率的影響
[0041] 精密稱取蒙藥崔麥粉末l.Og，按料液比l:30(g/mL)，超聲時間30min，超聲功率 200W，超聲溫度分別為20°C、30°C、40°C、50°C、60°C進行提取，按"2. 4"項下的方法處理 后測定吸光度。結果見圖3,當溫度在40°C、5(rC、6(rC時總生物堿的提取率較高，故選擇 40°C、50°C、60°C作為響應面法的考察范圍。
[0042] 表2超聲溫度對蒙藥崔麥總生物堿提取率的實驗結果
[0043]
[0044] 3. 1. 2料液比對蒙藥崔麥總生物堿提取率的影響
[004引精密稱取蒙藥崔麥粉末1.Og，按超聲溫度50°C，超聲時間30min，超聲功率200W， 料液比分別為1:20、1:25、1:30、1:35、1:40 (g/mL)進行提取，按"2. 4"項下的方法處理后 測定吸光度。結果見圖4,當料液比為1:25、1:30、1:35時提取率較高，故選擇1:25、1:30、 l:35(g/mL)作為響應面法的考察范圍。
[0046]表3料液比對蒙藥崔麥總生物堿提取率的實驗結果
[0047]
[0048] 3. 1. 3超聲時間對蒙藥崔麥總生物堿提取率的影響
[0049] 稱取蒙藥崔麥粉末1.Og，按超聲溫度50°C，料液比1:30 (g/mL)，超聲功率200W，超 聲時間分別為20min、30min、40min、50min、60min進行提取，按"2. 4"項下的方法處理后測 定吸光度。結果見圖5,當時間為30min、40min、50min時提取率較