馬齒莧中新生物堿Oleracone及其提取分離方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥提取、分離領(lǐng)域，尤其涉及一種從馬齒莧藥材中提取、分離和鑒別 出的新骨架生物堿及其提取分離方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 馬齒莧（/fertoJacaoJeraceaL.)為馬齒莧科植物，2015版《中華人民共和國(guó)藥 典》中收載馬齒莧的干燥地上部分入藥，具有清熱解毒、涼血止血、止痢等功效，用于熱毒血 痢、癰腫疔瘡、濕疹、丹毒、蛇蟲(chóng)咬傷、便血、痔血、崩漏下血等?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，馬齒莧 具有抗菌抗病毒、降血壓、降血脂、抗氧化、抗癌、松弛骨骼肌和平滑肌、消炎止痛、調(diào)節(jié)免疫 功能等作用；這些藥理作用與其主要化學(xué)成分包括黃酮類、香豆素、萜類、留類、生物堿、氨 基酸、各種色素類和礦物質(zhì)類等有很大關(guān)系。其中生物堿是馬齒莧中一類主要的化學(xué)成分， 馬齒莧中含有去甲腎上腺素、多巴胺、少量多巴、腺苷、尿嘧啶、腺嘌呤、N，N-二環(huán)己基脲、尿 囊素、N-反式-阿魏?；野?；還有環(huán)二肽生物堿和酰胺類生物堿：馬齒莧酰胺A、B、C、D、 E、F、G、H(OleraceinA-Η)等。但是，對(duì)本發(fā)明中馬齒莧新骨架化合物的分離和藥理活性 研究未見(jiàn)報(bào)道。
[0003] 目前，從馬齒莧中分離出的化學(xué)成分大多數(shù)是已知的，并且是藥理活性比較弱的， 因此對(duì)馬齒莧中新化合物的開(kāi)發(fā)和分離是亟待需要的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明提供一種簡(jiǎn)便、環(huán)保、快速，純度高的馬齒莧中新生物堿 Oleracone及其提取分離方法。
[0005] 為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供一種馬齒莧中新生物堿，分子式為 C14H17N02,命名為Oleracone，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下。
[0006] 本發(fā)明還提供一種馬齒莧中新生物堿Oleracone的提取分離方法，包括以下步 驟。
[0007] 步驟1、取馬齒莧干燥藥材，采用水煎煮提取，水提液過(guò)濾，合并濾液直接濃縮，得 藥液備用。
[0008] 步驟2、將步驟1中所得藥液直接經(jīng)預(yù)處理過(guò)的大孔吸附樹(shù)脂吸附除雜，分別以水 和乙醇洗脫，對(duì)乙醇洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，得到濃縮液備用。
[0009] 步驟3、將步驟2中濃縮液用乙酸乙酯反復(fù)多次萃取，減壓回收乙酸乙酯至浸膏， 得到乙酸乙酯萃取物。
[0010] 步驟4、將步驟3中乙酸乙酯萃取物經(jīng)硅膠柱層析分離，依次用石油醚-丙酮梯度 洗脫得到130個(gè)洗脫部位，按順序記為洗脫部位1-130,經(jīng)薄層色譜進(jìn)行檢測(cè)，顯色，合并 90-130洗脫部位，將合并后的洗脫部位經(jīng)減壓濃縮至干，備用。
[0011] 步驟5、將步驟4中所得物再經(jīng)0DS柱層析分離，用甲醇-水（30/70,v/v)等度洗 脫，得到10個(gè)洗脫部位，按順序記為部位1-10,經(jīng)薄層色譜進(jìn)行檢測(cè)，顯色，將洗脫部位3減 壓濃縮至干，得濃縮物備用。
[0012] 步驟6、將步驟5中所得濃縮物經(jīng)S印hadexLH-20 (羥丙基葡聚糖凝膠)，以甲 醇-水（50/50,v/v)等度洗脫得到新骨架生物堿化合物。
[0013] 本發(fā)明馬齒莧中新生物堿01eracone在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。
[0014] 與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明的有益效果。
[0015] 本發(fā)明提供的馬齒莧中新生物堿Oleracone及其提取分離方法，依次用水煎煮提 取、大孔吸附樹(shù)脂、乙酸乙酯萃取、硅膠柱層析、0DS中壓柱和S印hadexLH-20,成功的分離 出馬齒莧新骨架生物堿，這種化合物可以作為其他化合物合成先導(dǎo)物，以及新藥開(kāi)發(fā)和藥 理活性研究的原料，也可用于制備抗炎藥物。
【附圖說(shuō)明】
[0016] 圖1為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的結(jié)構(gòu)式。
[0017] 圖2為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的IR譜圖。
[0018] 圖3為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的質(zhì)譜譜圖。
[0019] 圖4為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的13C譜圖。
[0020] 圖5為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的1Η譜圖。
[0021] 圖6為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的DEPT譜圖。
[0022] 圖7為本發(fā)明X射線單晶衍射譜圖。
[0023] 圖8為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的H-HCOSY譜圖。
[0024] 圖9為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的HSQC譜圖。
[0025] 圖10為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的N0ESY譜圖。
[0026] 圖11為本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的HMBC譜圖。
[0027] 圖12為oleracone對(duì)LPS刺激RAW264. 7細(xì)胞產(chǎn)生N0的抑制作用示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。
[0029] 本實(shí)施例提供一種馬齒莧中新生物堿Oleracone，分子式為C14H17N02，命名為 Oleracone，結(jié)構(gòu)式請(qǐng)參閱圖1〇
[0030] 請(qǐng)參閱圖2-11，本發(fā)明馬齒莧中新生物堿Oleracone的結(jié)構(gòu)鑒定與推導(dǎo)。
[0031] 黃色粉末，易溶于氯仿和甲醇，不溶于水。噴稀碘化鉍鉀試液呈陽(yáng)性反應(yīng)， [a]20D+5-2(c0. 6,Me0H),UV(MeOH)λη3χ: 360,255nm,IRvNH 3425.8,v=CH3193.8, vcH 2949. 8，vc=。1700. 2，vc=c 1590. 1，^NH 1548. 4，JNH 1506. 8,ESI-MS給出M/Z: 232. 1326[M+H]+的準(zhǔn)分子離子峰，分子量為231. 1255。結(jié)合13CNMR/HNMR以及DEPT數(shù) 據(jù)，推測(cè)該化合物分子式為C14H17N02，不飽和度為7。根據(jù)13CNMR譜和DEPT譜顯示14 個(gè)碳信號(hào)，分別為4個(gè)伯碳（23. 25,29. 28,29. 28,30. 52)，一個(gè)仲碳（48. 35)和兩個(gè)叔碳 (127. 1，137. 2)，7 個(gè)季碳（171. 3, 205. 5,149. 0,158. 4,126. 5,126. 7, 59. 78)。根據(jù)分子式 計(jì)算，新生物堿的不飽和度為7。新生物堿的1H-NMR低場(chǎng)區(qū)有2個(gè)烯氫信號(hào)：7. 09(1H，s)， 6. 86 (1H，s)，結(jié)合13C-NMR譜、DEPT譜，提示具有2個(gè)-CH=C-結(jié)構(gòu)片段。1H-NMR高場(chǎng)區(qū) δ1.40(6?s)顯示磁等同的兩個(gè)甲基信號(hào)。13C-NMR中δ205. 5及171. 3為兩個(gè)羰基信號(hào)。 對(duì)化合物進(jìn)行X單晶衍射分析，確定其上述結(jié)構(gòu)。其1H-NMR及13C-NMR歸屬如表1所示，經(jīng) 文獻(xiàn)檢索，未見(jiàn)報(bào)